人教版选修三动物细胞融合与单克隆抗体p省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

22.2动动物物细细胞融合与胞融合与单单克隆抗体克隆抗体第1页学习导航学习导航1.掌握掌握动动物物细细胞融合技胞融合技术术2.了解了解单单克隆抗体技克隆抗体技术术。重、重、难难点点3.了解了解动动物物细细胞融合和胞融合和单单克隆抗体技克隆抗体技术应术应用。用。重点重点第2页新知初探思维开启新知初探思维开启一、一、动动物物细细胞融合胞融合概念概念_动物细胞结合形成一个细胞过程，也称为细胞杂交条件条件需要聚乙二醇(PEG)、_或电激等诱导原因原理原理细胞膜流动性两个或多个两个或多个灭灭活病毒活病毒第3页结结果果形成含有原来两个或多个细胞遗传信息单核细胞，称为_意意义义突破了_方法局限，使远缘杂交成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等主要伎俩，为制备_开辟了新路径杂杂交交细细胞胞有性有性杂杂交交单单克隆抗体克隆抗体第4页想一想想一想1动动物物细细胞融合完成胞融合完成标标志是什么？志是什么？【提醒提醒】细细胞核融合。胞核融合。第5页二、二、单单克隆抗体克隆抗体1.制制备备原理原理(1)B淋淋巴巴细细胞胞特特点点：一一个个B淋淋巴巴细细胞胞产产生生一一个个特特异异性性抗抗体体，B淋淋巴巴细细胞胞在在体体外外_(能能/不能不能)无限增殖。无限增殖。(2)骨髓瘤骨髓瘤细细胞特点：能无限增殖。胞特点：能无限增殖。不能不能第6页(3)杂杂交瘤交瘤细细胞特点：胞特点：B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合得到胞融合得到杂杂交瘤交瘤细细胞，既能无限增殖，又胞，既能无限增殖，又能能产产生特异性抗体。生特异性抗体。2.制制备过备过程程第7页3.单单克克隆隆抗抗体体优优点点：_、并可大量制并可大量制备备。4.单单克隆抗体克隆抗体应应用用(1)作作为为诊诊疗疗试试剂剂，含含有有准准确确、_、简简易易、_优优点。点。(2)用于治用于治疗疗疾病和疾病和_。特异性特异性强强、灵敏度高、灵敏度高高效高效快速快速运运载药载药品品第8页想一想想一想2什什么么是是单单克克隆隆抗抗体体？鼠鼠单单克克隆隆抗抗体体能能否否用于人体疾病治用于人体疾病治疗疗？为为何？何？【提醒提醒】单单克隆抗体是由克隆抗体是由单单一一杂杂交瘤交瘤细细胞胞增殖增殖产产生高度生高度专专一抗体。不能。因一抗体。不能。因为为鼠鼠B淋淋巴巴细细胞所胞所产产生抗体与人体生抗体与人体B淋巴淋巴细细胞胞产产生抗生抗体是不一体是不一样样。第9页关键点突破讲练互关键点突破讲练互动动关关键键点一点一动动物物细细胞融合胞融合1.动动物物细细胞融合操作步胞融合操作步骤骤第10页2.动动物物细细胞融合胞融合过过程程细细胞胞膜膜融融合合细细胞胞质质融融合合细细胞胞核核融融合合(标标志着志着细细胞融合完成胞融合完成)。3.重重组细组细胞特点胞特点融合形成融合形成杂杂交瘤交瘤细细胞含有两个胞含有两个细细胞胞遗传遗传信息，信息，经过动经过动物物细细胞培养，胞培养，杂杂交瘤交瘤细细胞表胞表现现出两个出两个亲亲本特点。本特点。第11页4.植物体植物体细细胞胞杂杂交和交和动动物物细细胞融合区分胞融合区分植物体植物体细细胞胞杂杂交交动动物物细细胞融合胞融合原理原理细细胞膜流胞膜流动动性和植性和植物物细细胞全能性胞全能性细细胞膜流胞膜流动动性性步步骤骤酶酶解法去掉解法去掉细细胞壁胞壁后后,诱导诱导原生原生质质体融体融合合,形成形成杂杂种体种体细细胞胞,再再经过经过植物植物组织组织培培养形成养形成杂杂种植株种植株分散成分散成单单个个细细胞胞后后诱导细诱导细胞融合胞融合诱导诱导方法方法物理方法、化学方物理方法、化学方法法物理方法、化学物理方法、化学方法、方法、灭灭活病毒活病毒结结果果形成形成杂杂种植株种植株形成形成杂杂种种细细胞胞第12页尤其提醒尤其提醒二者区分除表中所列外，二者区分除表中所列外，还还有培有培养基养基类类型和成份，所用型和成份，所用酶酶等不一等不一样样，但二者，但二者均需在无菌条件下均需在无菌条件下进进行。行。第13页 (太原五中高二太原五中高二检测检测)利用利用动动物体物体细细胞胞杂杂交技交技术术可可实现实现基因定位。研究基因定位。研究发觉发觉：用：用人人细细胞与小鼠体胞与小鼠体细细胞胞进进行行杂杂交得到交得到杂杂种种细细胞胞含有双方染色体。含有双方染色体。杂杂种种细细胞在胞在连续连续分裂分裂过过程程中中仅仅保留鼠染色体而人保留鼠染色体而人类类染色体逐步染色体逐步丢丢失，失，只剩一条或几条。如只剩一条或几条。如图图是人缺乏是人缺乏HGPRT酶酶突突变细变细胞株胞株(HGPRT)和小鼠缺乏和小鼠缺乏TK酶酶细细胞株胞株(TK)融合后并在融合后并在HAT培养培养例例1第14页液中培养液中培养过过程，程，结结果表明最果表明最终终人染色体在融人染色体在融合合细细胞中胞中仅仅有有3号染色体或号染色体或17号染色体或二号染色体或二者都有。已知只有同者都有。已知只有同时时含有含有HGPRT酶酶和和TK酶酶融合融合细细胞才可在胞才可在HAT培养液中培养液中长长久存活与久存活与繁殖。繁殖。第15页(1)体体细细胞胞杂杂交交突突破破了了_，过过程程惯惯用生物方法是用生物方法是_。(2)过过程程中中，为为了了预预防防细细菌菌污污染染，所所用用培培养养液液应应该该添添加加一一定定量量_。另另外外还还要要定定时时用用_处处理理细细胞胞，使使贴贴壁壁生生长长细细胞脱落形成胞脱落形成细细胞胞悬悬液。液。(3)从培养从培养过过程看，程看，HAT培养液不但能提供养培养液不但能提供养料，料，还还起起_作用。作用。第16页(4)从从图图示示结结果看，能果看，能够够确定人确定人_基因位于基因位于_号号染色体；染色体；该该方法能方法能够对够对鼠基因定位鼠基因定位吗吗？_。【解析解析】(1)体体细细胞胞杂杂交含有突破有性交含有突破有性杂杂交交方法局限方法局限优优点点,过过程程是是细细胞融合胞融合过过程程,对对于于动动物物细细胞常采取胞常采取灭灭活病毒活病毒诱导诱导融合。融合。第17页(2)为预为预防防杂杂菌菌污污染，在培养液中可加入一定染，在培养液中可加入一定量抗生素；使量抗生素；使贴贴壁壁细细胞脱落形成胞脱落形成细细胞胞悬悬液方液方法是用胰蛋白法是用胰蛋白酶酶定定时处时处理。理。(3)图图中中过过程程是是一个一个筛选过筛选过程，程，HAT培养液不但能提供养料培养液不但能提供养料,还还起特殊起特殊选择选择作用，即只有同作用，即只有同时时含有含有HGPRT酶酶和和TK酶酶融合融合细细胞才能存活。胞才能存活。第18页(4)该该方法不能方法不能对对鼠基因鼠基因进进行定位，因行定位，因为为利用利用此方法定位基因有一个前提，即要确保此方法定位基因有一个前提，即要确保杂杂种种细细胞在胞在连续连续分裂分裂过过程中程中仅仅保留鼠染色体而人保留鼠染色体而人类类染色体逐步染色体逐步丢丢失，或只剩一条或几条。鼠失，或只剩一条或几条。鼠染色体是全部，即使知道存在某基因染色体是全部，即使知道存在某基因,也无法也无法认认定定该该基因位于哪条染色体上。基因位于哪条染色体上。第19页【答答案案】(1)有有性性杂杂交交方方法法局局限限灭灭活活病病毒毒诱导诱导(2)抗生素胰蛋白抗生素胰蛋白酶酶(3)选择选择(4)TK酶酶17不能不能第20页互互动动探究探究(1)本本题题中中细细胞胞融融合合伎伎俩俩不不一一样样于于植植物物体体细细胞胞杂杂交是什么？交是什么？(2)本本题题中中培培养养液液中中融融合合处处理理后后细细胞胞类类型型最最多多有几个？分有几个？分别别是什么是什么细细胞？胞？第21页【提提醒醒】(1)动动物物细细胞胞融融合合伎伎俩俩与与植植物物体体细细胞胞杂杂交交区区分分是是前前者者通通常常采采取取灭灭活活病病毒毒作作为为诱诱导剂导剂。(2)细细胞胞类类型通常有型通常有5种，即鼠种，即鼠鼠、人鼠、人人、人、人人鼠、人、鼠鼠、人、鼠单单独独细细胞。胞。第22页【易易误误警警示示】(1)惯惯用用病病毒毒诱诱导导剂剂有有仙仙台台病病毒毒、新新城城鸡鸡瘟瘟病病毒毒、疱疱疹疹病病毒毒等等，其其中中仙仙台台病毒最病毒最惯惯用。用。(2)用做用做诱导剂诱导剂病毒必病毒必须须事先事先灭灭活，使病毒感活，使病毒感染活性、增殖能力染活性、增殖能力丧丧失但不破坏病毒抗原失但不破坏病毒抗原结结构。构。第23页关关键键点二点二单单克隆抗体制克隆抗体制备备1.单单克隆抗体制克隆抗体制备备关关键键思思绪绪及操作依据及操作依据(1)关关键键思思绪绪：克隆克隆单单一一B淋巴淋巴细细胞，形成胞，形成细细胞群；胞群；将将B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合，取得胞融合，取得杂杂交交瘤瘤细细胞。胞。第24页(2)用用B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合原因：胞融合原因：每每一一个个B淋淋巴巴细细胞胞只只能能分分泌泌一一个个特特异异性性抗抗体；不一体；不一样样种种类类B淋巴淋巴细细胞分泌抗体不一胞分泌抗体不一样样;B淋巴淋巴细细胞在体外培养胞在体外培养时时不能无限增殖；不能无限增殖；骨髓瘤骨髓瘤细细胞能胞能够够无限增殖。无限增殖。第25页2.单单克隆抗体制克隆抗体制备过备过程中程中筛选筛选及原因及原因(1)第一次第一次筛选筛选是在是在B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞胞融合之后，因融合之后，因为为有三种融合情况：有三种融合情况：B淋巴淋巴细细胞与胞与B淋巴淋巴细细胞融合、骨髓瘤胞融合、骨髓瘤细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合、胞融合、B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合，胞融合，而只有而只有B淋巴淋巴细细胞与骨髓瘤胞与骨髓瘤细细胞融合胞融合细细胞才胞才是需要是需要杂杂种种细细胞。胞。第26页(2)第二次第二次筛选筛选需先在多孔培养皿上培养，在需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个每个孔只有一个杂杂交瘤交瘤细细胞情况下开始培养，胞情况下开始培养，然后再然后再筛选筛选出能出能产产生所需特异性抗体生所需特异性抗体细细胞群。胞群。因因为该细为该细胞群是由胞群是由单单个个杂杂交瘤交瘤细细胞克隆来，胞克隆来，所以所以产产生抗体一定是化学性生抗体一定是化学性质单质单一、特异性一、特异性强强单单克隆抗体。克隆抗体。第27页 (北京四中高二北京四中高二质检质检)1975年科学家年科学家首次利用首次利用B淋巴淋巴细细胞胞杂杂交瘤技交瘤技术术制制备备出出单单克隆克隆抗体。抗体。请请依据下列依据下列图图回答下列回答下列问题问题：例例2第28页(1)病病原原体体注注入入小小鼠鼠体体内内后后，要要经经过过_细细胞胞处处理理后后形形成成抗抗原原MHC复复合合体体，才才能能被被免疫免疫细细胞胞识别识别。(2)制制备备单单克克隆隆抗抗体体所所用用B淋淋巴巴细细胞胞普普通通从从脾脾中中采集，然后以采集，然后以_第29页作作诱诱导导剂剂，使使B淋淋巴巴细细胞胞和和骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞融融合合。经经过过筛筛选选和和克克隆隆培培养养，取取得得杂杂交交瘤瘤细细胞胞含含有有_特点。特点。(3)单单克隆抗体特点是克隆抗体特点是_。第30页依依据据上上图图写写出出应应用用杂杂交交瘤瘤技技术术取取得得单单克克隆隆抗抗体两种主要方法体两种主要方法_。解析：解析：灭灭活仙台病毒和聚乙二醇均可活仙台病毒和聚乙二醇均可诱导动诱导动物物细细胞融合。胞融合。杂杂交瘤交瘤细细胞同胞同时时含有两个含有两个亲亲代代细细胞胞遗传遗传特征。能特征。能够够在体外也能在体外也能够够在体内培在体内培养养杂杂交瘤交瘤细细胞取得胞取得单单克隆抗体。克隆抗体。第31页答案：答案：(1)吞噬吞噬(或巨噬或巨噬)(2)灭灭活活仙仙台台病病毒毒或或聚聚乙乙二二醇醇既既能能产产生生特特异异性抗体，又能无限增殖性抗体，又能无限增殖(3)特异性特异性强强，纯纯度高度高(或：或：专专一性一性强强、灵敏度、灵敏度高高)体外培养法和体外培养法和动动物体内培养法物体内培养法第32页变式训练变式训练(西宁五中高二西宁五中高二检测检测)依据依据单单克隆抗体制克隆抗体制备备流程流程示意示意图图判断以下判断以下选项选项中正确是中正确是()第33页A单克隆抗体技术原理包含细胞增殖、细胞单克隆抗体技术原理包含细胞增殖、细胞膜流动性、细胞全能性等膜流动性、细胞全能性等B依据培养基物理性质分类，图中依据培养基物理性质分类，图中HAT培养培养基属于选择培养基基属于选择培养基C在制备单克隆抗体过程中有两次选择，第在制备单克隆抗体过程中有两次选择，第一次是选择杂交瘤细胞，第二次是选择能够产一次是选择杂交瘤细胞，第二次是选择能够产生特异性抗体杂交瘤细胞生特异性抗体杂交瘤细胞第34页D老鼠骨髓瘤细胞染色体数是老鼠骨髓瘤细胞染色体数是40，效应，效应B细胞染色体数为细胞染色体数为46，融合后形成杂交瘤细胞，融合后形成杂交瘤细胞DNA分子数为分子数为86解析：解析：选选C。单单克隆抗体制克隆抗体制备过备过程中，程中，杂杂交交瘤瘤细细胞不能培育成个体，未表达胞不能培育成个体，未表达细细胞全能性，胞全能性，A错错；培养基依据物理性；培养基依据物理性质质可分可分为为固体培养固体培养基和液体培养基等，按用途分基和液体培养基等，按用途分为选择为选择培养基、培养基、判判别别培养基等，培养基等，B错错；融合后；融合后杂杂交瘤交瘤细细胞染胞染色体数是色体数是86，DNA数要考数要考虑细虑细胞胞质质中中DNA，多于多于86，D错错；C项项描述正确。描述正确。第35页关关键键点三植物体点三植物体细细胞胞杂杂交和交和动动物物细细胞融合比胞融合比较较比比较项较项目目植物体植物体细细胞胞杂杂交交动动物物细细胞融合胞融合(单单克隆抗克隆抗体制体制备备)融合前融合前处处理理纤维纤维素素酶酶、果胶、果胶酶酶除去除去细细胞壁胞壁注射特定抗原免疫注射特定抗原免疫处处理理正常小鼠正常小鼠促融促融物理法：离心、物理法：离心、振振动动、电电激激化学法：聚乙二化学法：聚乙二醇醇物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇生物法：灭活病毒理理论论基基础础细胞全能性、细胞膜流动性细胞膜流动性、细胞增殖第36页比比较项较项目目植物体植物体细细胞胞杂杂交交动动物物细细胞融合胞融合(单单克隆抗体制克隆抗体制备备)过过程程原生质体制备原生质体融合杂种细胞筛选与培养杂种植株诱导与判定第37页比比较较项项目目植物体植物体细细胞胞杂杂交交动动物物细细胞融合胞融合(单单克隆抗克隆抗体制体制备备)意意义义和用和用途途克服远缘杂交不亲和障碍，大大扩展杂交亲本组合范围应用：如白菜甘蓝杂种植株制备单克隆抗体诊疗、治疗、预防疾病。比如：a.肿瘤定位诊疗，放射性抗体肿瘤b.生物导弹治疗，抗体抗癌药品肿瘤第38页 有性生殖生物有性生殖生物产产生后代需生后代需进进行受精行受精作用，植物体作用，植物体细细胞胞杂杂交要交要进进行原生行原生质质体融合，体融合，单单克隆抗体制克隆抗体制备备需需进进行行动动物物细细胞融合，可胞融合，可见见细细胞融合技胞融合技术术有着广泛有着广泛应应用。以下用。以下为细为细胞融胞融合合简简略略过过程，据程，据图图回答相关回答相关问题问题：例例3第39页(1)若若a、b分分别别是是基基因因型型为为Hhrr、hhRr两两个个烟烟草草品品种种花花粉粉，且且这这两两对对基基因因分分别别位位于于两两对对同同源源染染色色体体上上。因因为为一一对对隐隐性性纯纯合合基基因因(rr或或hh)作作用用，在在光光照照强强度度大大于于800 lx时时都都不不能能生生长长。要要想想从从融融合合细细胞胞培培养养液液中中分分离离出出基基因因型型为为HhRr杂杂 种种 细细 胞胞，较较 为为 简简 便便 筛筛 选选 方方 法法 是是_。第40页(2)若若a、b表表示示两两种种植植物物体体细细胞胞，则则由由d细细胞胞形形成成杂杂种植株原理是种植株原理是_。这这种育种方法种育种方法优优点是点是_。第41页(3)若若a、b分分别别为为骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞和和B淋淋巴巴细细胞胞，则则d细细胞胞特特点点是是_。由由d细细胞胞产产生生抗抗体体与与普普通通血血清清抗抗体体相相比比较较，含含有有_特特点点。普普通通不不能能经经过过直直接接培培养养B淋淋巴巴细细胞胞方方法法生生产产单单克克隆抗体主要原因是隆抗体主要原因是_。第42页【解析解析】(1)a是基因型是基因型为为Hhrr烟草花粉烟草花粉,故其故其基因型基因型为为Hr、hr；b是基因型是基因型为为hhRr烟草花粉，烟草花粉，故其基因型故其基因型为为hR、hr,所以所以经细经细胞融合可能形胞融合可能形成融合成融合细细胞有：胞有：HHrr、hhrr、hhRR、Hhrr、hhRr、HhRr，共，共6种，分析种，分析这这6种种细细胞除胞除HhRr之外都有一之外都有一对隐对隐性性纯纯合基因合基因(rr或或hh)，即，即在光照在光照强强度大于度大于800 lx时时都不能生都不能生长长,所以所以获获取取基因型基因型为为HhRr杂杂种种细细胞，胞，较为简较为简便便筛选筛选方法方法是是给给予大于予大于800 lx光照。光照。第43页(2)a、b表示两种植物体表示两种植物体细细胞，胞，则经过细则经过细胞融胞融合形成合形成d细细胞可借助植物体胞可借助植物体细细胞胞杂杂交技交技术术，杂杂交交细细胞能形成胞能形成杂杂种植株是因种植株是因为为植物植物细细胞含胞含有全能性，有全能性，这这种育种方法最大种育种方法最大优优点是克服了点是克服了远缘杂远缘杂交不交不亲亲和障碍。和障碍。第44页(3)a、b分分别为别为骨髓瘤骨髓瘤细细胞和胞和B淋巴淋巴细细胞，胞，则则d细细胞胞为杂为杂交瘤交瘤细细胞胞,其特点是既能无限繁殖，其特点是既能无限繁殖，又能又能产产生特定抗体。生特定抗体。产产生抗体生抗体为单为单克隆抗体，克隆抗体，同血清抗体相比，它含有特异性同血清抗体相比，它含有特异性强强、灵敏度、灵敏度高、可大量制高、可大量制备备等特点。生等特点。生产产上普通不能上普通不能经经过过直接培养直接培养B淋巴淋巴细细胞来制胞来制备单备单克隆抗体是因克隆抗体是因为为B淋巴淋巴细细胞高度分化胞高度分化,不能增殖。不能增殖。第45页【答案答案】(1)给给予大于予大于800 lx光照光照(2)植物植物细细胞全能性克服了胞全能性克服了远缘杂远缘杂交障碍交障碍(3)既能无限增殖，又能既能无限增殖，又能产产生特定抗体特异生特定抗体特异性性强强、灵敏度高、可大量制、灵敏度高、可大量制备备B淋巴淋巴细细胞胞高度分化，不能增殖高度分化，不能增殖第46页【探探规寻规寻律律】杂杂交交细细胞胞筛选筛选方法方法(1)细细胞胞工工程程中中利利用用特特定定选选择择培培养养基基可可将将人人们们所所需需细细胞胞筛筛选选出出来来。利利用用细细胞胞一一些些代代谢谢特特点点，在在培培养养基基中中加加入入特特定定化化学学物物质质，使使细细胞胞代代谢谢进进行行或或不不能能进进行行下下去去而而得得以以保保留留或或淘淘汰汰，如如单单克隆抗体克隆抗体筛选筛选。(2)动动物物细细胞融合与植物体胞融合与植物体细细胞胞杂杂交交筛选筛选方法方法不一不一样样：前者可用免疫法，后者可用机械方：前者可用免疫法，后者可用机械方法、生理学或法、生理学或遗传遗传学方法。学方法。第47页变变式式训练训练以下关于以下关于细细胞工程叙述，胞工程叙述，错误错误是是()A电电刺刺激激可可诱诱导导植植物物原原生生质质体体融融合合或或动动物物细细胞融合胞融合B去去除除植植物物细细胞胞细细胞胞壁壁和和将将动动物物组组织织分分散散成成单单个个细细胞均需胞均需酶酶处处理理C小小鼠鼠骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞和和经经抗抗原原免免疫疫小小鼠鼠B淋淋巴巴细细胞融合可制胞融合可制备单备单克隆抗体克隆抗体D某种植物甲乙两品种体某种植物甲乙两品种体细细胞胞杂杂种与甲乙两种与甲乙两品种品种杂杂交后代染色体数目相同交后代染色体数目相同第48页解析：解析：选选D。在植物体。在植物体细细胞胞杂杂交和交和动动物体物体细细胞融合胞融合时时，均可采取离心、，均可采取离心、电电刺激、振刺激、振动动等等物理方法或化学促融物理方法或化学促融剂剂如聚乙二醇等方法；如聚乙二醇等方法；植物植物细细胞外面因有胞外面因有细细胞壁会影响胞壁会影响细细胞融合，胞融合，故故应应在在试验试验前用前用纤维纤维素素酶酶或果胶或果胶酶酶除去除去细细胞胞壁，而壁，而动动物物细细胞培养胞培养过过程中存在着接触性抑程中存在着接触性抑制效制效应应，故需要用胰蛋白，故需要用胰蛋白酶酶进进行行处处理；理；第49页单单克隆抗体制克隆抗体制备备就是利用就是利用经经抗原免疫抗原免疫过过小鼠小鼠B淋巴淋巴细细胞与小鼠骨髓瘤胞与小鼠骨髓瘤细细胞融合再胞融合再经筛选经筛选而成；甲、乙两个品种植物体而成；甲、乙两个品种植物体细细胞胞杂杂交相当交相当于形成了异源四倍体，而常于形成了异源四倍体，而常规杂规杂交形成是二交形成是二倍体。倍体。第50页知能演练轻巧夺冠知能演练轻巧夺冠第51页本部分内容讲解结束本部分内容讲解结束按按ESC键键退出全屏播放退出全屏播放第52页新知初探新知初探思维启动思维启动要点突破要点突破讲练互动讲练互动知能演练知能演练轻巧夺冠轻巧夺冠专题专题2 细胞工程细胞工程；http:/www.99dyw.co/九九电影网http:/www.99dyw.tv/九九电影网http:/youhuijuan.co/淘宝优惠券网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网 天堂网天堂网天堂网 天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网 天堂网 天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网天堂网第53页