魔芋多糖抗氧化性研究.docx

魔芋多糖抗氧化性研究

魏杰

【摘 要】本试验在一定条件下对魔芋多糖的抗氧化性进行研究，采用稀碱提取法提取魔芋多糖。采用DPPH法对其抗氧化能力进行检测。研究结果显示：魔芋具有抗氧化活性，对DPPH、羟基（·OH）自由基均有较高的清除作用。
【关键词】魔芋；多糖；抗氧化
一、前言
魔芋是天南星科魔芋属多年生草本植物的地下块茎。魔芋在工业、医药、食品等方面之所以有广泛的用途。魔芋含有多种氨基酸、多种矿物质微量元素和丰富的食物纤维，对防治糖尿病、高血压有特效；魔芋低热、低脂、低糖，对预防和治疗结肠癌、乳腺癌、肥胖症的人群可以说是一种上等的既饱口福、又治病健体的食品，还可以防治多种肠胃消化系统的多种常见慢性疾病，是有益的碱性食品，对食用动物性酸性食品过多的人，搭配吃魔芋，可以达到食品酸碱平衡。此外，魔芋还具有水平降血糖、降血脂、降压、散毒、養颜、通脉、减肥、通便、开胃等多功能由此可见，魔芋是一种“天赐良药”，食用起来有百利而无一害。总之，由于魔芋精粉具有多种营养、保健功能，逐渐引起了国内外医药、保健品、食品等各界及关心自身保健的人们的关注。我国的魔芋精粉，从十几年前开始向日本出口，继而发展到向日本、东南亚一带及欧美国家吃口。出口量逐年加大，国际市场价格也不断上扬。
研究表明多糖具有多种生物功能如：增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒、降血糖等，因此对多糖的研究愈来愈引起国内外生物学家、化学家和药理学家的兴趣，有关专家预言“21世纪将是多糖的时代”。多糖具有多种生物活性，某些多糖不但具有抗癌、抗病毒、抗衰老等作用，还是理想的免疫增强剂，因此，关于魔芋多糖的研究具有十分重要的意义。
二、试验方法
（一）多糖提取方法
经过资料查询与预实验，提取结果以稀碱提取魔芋多糖结果最优。故选用稀碱提取法提取魔芋多糖。
新鲜魔芋经切片、烘干、粉碎（过40目筛），备用。
1g魔芋粉→加入100mL 0.5mol/L氢氧化钠溶液→80℃热水（料液比1：100）浸提→5000r/min4离心15min，合并上清液→浓缩5倍→Sevage法去蛋白质3次→脱蛋白碱提浓缩液→加入3倍体积浓度95%的乙醇→冷冻干燥→抽滤→收集醇沉淀物→依次用75%乙醇、无水乙醇、丙酮滤洗→魔芋粗多糖→真空冷冻干燥→称重→测定多糖提取率。
（二）苯酚硫酸法测定多糖的方法
参照苯酚-硫酸法，测定多糖。
0.1%葡萄糖溶液：准确称取干燥葡萄糖0.1000g，定容至100mL，再分配成10、20、40、60、80、100mg/L的系列标准溶液。
2g/L的蒽酮试剂：溶解蒽酮0.2g于100mL 95%硫酸中，置于棕色瓶中冷暗处保存。
分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL葡萄糖溶液并用蒸馏水补至2.0mL，然后加入1.0mL 6%苯酚及5.0mL浓硫酸，立即摇匀，室温放置20min后再于490nm测光密度，以2.0mL水按同样显色操作空白对照，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。结果表明，葡萄糖溶液在0.4mg/mL-1.2mg/mL范围内呈线性关系。
吸取已定容的水解样0.2mL置于10mL比色管中，加6%苯酚试剂1.0mL及浓硫酸5.0mL，摇匀后在室温下静置20min，每个样品做三个平行样，于490nm处用空白调零测吸光度，然后代入标准曲线算出其总糖含量。
（三）抗氧化活性的检测方法
1.DPPH自由基清除能力测定
在10mL比色管中依次加入4mLDPPH溶液和4mL样品溶液，再加入无水乙醇至刻度，混匀后在517nm波长处测吸光值（A），吸光值记为Ai，再在室温避光保存30min后测吸光值，记为Aj，对照试验为只加DPPH的乙醇溶液，吸光值记为Ac。（用无水乙醇调百分百）
按公式计算自由基清除率（K）：K（%）=[1-（Ai-Aj）/Ac]×100%
其中Ai为样液+DPPH的吸光值，Aj为样液+蒸馏水的吸光值，Ac为蒸馏水+DPPH的吸光值。
2.OH清除能力的测定
在比色管中依次先加入2mL 3mmol/LFeSO4，2mL 3mmol/L乙醇-水杨酸，接着加入适量去离子水（蒸馏水代替），然后加入2mL3mmol/LH2O2，最后加入样液，摇匀，37℃水浴加热15min，取上清液，以维生素C为阳性对照于510nm测其吸光度。A0测定时，参比溶液为不加双氧水的体系。Ax和Ax0测定时，参比溶液为去离子水。
按公式计算自由基清除率（K）：K （%）=[1-（AX-AX0）/A0]×100%
其中A0 为空白对照的吸光值，AX为加样品的吸光值，AX0为不加显色剂H2O2，并测其吸光度值。
三、试验结果
（一）抗氧化能力的检测结果
通过对魔芋多糖提取物的抗氧化能力进行测定，试验结果如表1所示：
表1结果显示，两种不同的方法全部显示魔芋多糖物质具有很强的抗氧化能力。其中羟基（·OH）自由基清能力和DPPH自由基清除能力都很强。
四、总结
本试验以魔芋为原料，通过稀碱法提取魔芋多糖。试验中先对魔芋多糖提取物组分进行抗氧化活性的定性测定，研究结果显示：
1.魔芋多糖具有一定的清除自由基能力，具有抗氧化性；
2.总抗氧化能力最强的提取条件下获得的魔芋多糖提取物，对DPPH自由基清除率为71.73%，·OH自由基清除率为85.46%，抗氧化效果显著。
我国魔芋资源丰富，长期以来我国民间就有栽培和食用魔芋的历史。本试验证明魔芋具有良好的抗氧化能力，将魔芋多糖添加至食品中，不仅可以增加食品的营养价值，还可起到一定的抗氧化的效果。在未来食品和化工等领域具有有广泛的应用前景和价值。
参考文献：
[1]郑殿升，杨庆文.中国作物野生近缘植物资源[J].植物遗传资源学报，2014.
[2]尉芹，马希汉.魔芋开发利用研究综述[J].西北林学院学报，1998.
[3]谢建华，庞杰，朱国辉，等.魔芋葡甘聚糖功能研究进展[J].食品工业科技，2005，.
[4]张颖.魔芋葡甘聚糖的提取及其抗氧化活性研究[J].食品研究与开发，2015.

-全文完-