VPGY0330A1车间环境消毒再验证方案.doc

文件名称一车间环境消毒方法及效果再验证方案文件编号VP-GY-0330版本号A版所属部门小容量注射剂车间（一车间） 验证类型周期验证2015年7月文件审核及批准：部门姓名签名日期起草人验证部审核人验证部审核人小容量注射剂车间审核人化验室QA审核质量保障部批准人质量负责人备注目 录1. 目的-32. 范围-3 3. 验证小组成员与职责-34. 概述-45. 前提条件-136. 再确认-157. 附录-368. 验证总结-371.目的确认小容量注射剂车间（一车间）洁净区环境在现有规定的消毒方法下，能降低或减少微生物数量，使之达到安全或本厂规程的安全水平，保持洁净区相应的级别。2.范围适用于小容量注射剂车间（一车间）洁净区消毒的周期性再验证。验证地点为：小容量注射剂车间（一车间）洁净区3.验证小组成员与职责验证职务姓名所在部门职务本验证工作中职责组长质量保障部副厂长负责验证方案和报告的审核与批准，保证验证正常运行提供必要的资源。组员质量保障部副经理（QA）负责验证方案和报告的审核，协调安排验证过程中QA相关工作。组员小容量注射剂车间主任负责验证方案和报告的审核，协调安排验证过程中生产的执行。组员验证部经理验证方案和报告的审核，组织验证实施组员验证部职员制定验证方案，人员培训，验证报告整理；现场臭氧浓度监测组员 质量保障部现场QA现场操作监督；挑战性测试时测试皿放置、取样及送样组员化验室QC测试用菌液、培养皿制备；试验菌片转移及培养检测组员 小容量注射剂车间职员洁净区空间环境消毒操作及记录填写组员小容量注射剂车间职员洁净区表面擦拭消毒操作及记录填写4.概述本验证方案中所述环境消毒方法分为空间环境消毒和表面擦拭消毒。4.1.洁净区空间环境消毒 小容量注射剂车间（一车间）洁净区空间环境消毒方法为周期性（每月）的甲醛薰蒸和生产期间（每天）在生产结束后进行臭氧消毒。4.1.1.甲醛薰蒸消毒法甲醛其水溶液俗称福尔马林（formalin）。杀菌性能的原因主要是构成生物体（包括细菌）本身的蛋白质上的氨基能跟甲醛发生反应。由于其有特殊的刺激气味，对人眼、鼻等有刺激作用,且有一定毒性，故仅作为周期性的空间环境消毒剂。参考药品生产验证指南2003，规定使用量见下表：空调区域洁净级别甲醛含量使用量（ml）加水量（ml）JK2-1机组灌封A/B36%50001250JK2-2机组洗瓶D3000750JK2-3机组配料C40001000消毒流程（空调机组为消毒模式，内置自动程序）：流程操作空调消毒模式运行参数气化甲醛溶液加入气化罐，蒸气电磁阀设3小时，开启气化罐与空调机组管阀，经风管送入各洁净室。新风阀开度0，风机频率30Hz（JK2-3风速频率32Hz），回风阀开度50。熏蒸甲醛蒸气全部进入洁净区后，关闭空调机组风机。闷熏7小时。置换开启空调机组，置换不少于2小时。新风阀开度100，风速正常，排风机开，回风阀关至最小。结束空调机组转为正常模式消毒周期：每月。环境残留接受限度：0.08mg/m3注：甲醛浓度换算1ppm1.3mg/m34.1.2.臭氧消毒法臭氧是一种广谱高效灭菌剂，具有强烈杀菌消毒作用。在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2）和单个氧原子（O），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为氧分子（O2），不存在任何有毒残留物，为无污染消毒剂。参考中华人民共和国卫生行业标准WS/T 3672012（医疗机构消毒技术规范）“C.7.2.1空气消毒 采用20mg/ m3浓度臭氧，作用30分钟，对自然菌杀灭率90%以上，消毒后通风30分钟以上人员方可进入”“C.7.2.2物体表面消毒 相对湿度70%，采用60 mg/ m3浓度的臭氧，作用60120分钟”，“有人情况下室内允许臭氧浓度0.16mg/m3.”。设定本厂臭氧消毒参数如下表示：臭氧发生器安装位置所属区域洁净级别臭氧浓度消毒时间初始电流DFY-K120BJK2-2送风段洗瓶区D级10m31.5小时2.6ADFY-K120BJK2-3送风段配料区C级30m32小时3.4ADFY-K80BJK2-1送风段灌封区A/B级40m32小时4.6A消毒时空调机组运行模式（值班模式）参数：机组风速（m/s）风机频率（Hz）新风阀开度（%）回风阀开度（%）JK2-138.510050JK2-23010050JK2-33010050消毒周期：每天生产结束后。环境残留按受限度：0.16mg/m3。注：臭氧浓度换算1ppm2mg/m3。4.2.洁净区环境表面消毒环境表面消毒：采用消毒剂对洁净区表面包括墙面、地面、天顶、门、设备外表面等进行人工擦拭方法。消毒周期：周期对象消毒剂每日生产结束后台面、门窗、墙面、地面、用具、附属装置、设备操作台面及外表面。3%过氧化氢、75%乙醇每生产周期（2周）结束后日清洁对象；天顶、探头、报警器、灯罩、层流罩消毒剂配制（10000ml配制量）及使用周期：消毒剂名称配制使用3%过氧化氢35%过氧化氢860ml，加注射用水至10000ml。每月轮换交替使用75%乙醇95%乙醇7895ml，加注射用水至10000ml。4.3.参考资料中华人民共和国卫生行业标准WS/T 3672012（医疗机构消毒技术规范）国家食品药品监督管理局认证管理中心药品GMP指南 2011 药品生产验证指南 2003GB/T18883-2002室内空气质量标准5.前提条件5.1.文件确认检查与确认验证该系统所需的相应的操作规程是否已经具备，且经审核批准后按要求发放。文件确认表文件编号文件名称存放地点检查情况SOP-ZL-1001环境监测管理规程质量、岗位SOP-ZL-1003沉降菌测试标准操作规程质量、岗位SMP-ZL-0017注射剂车间环境监测管理程序质量、岗位SOP-XR-0004洁净室环境消毒（一车间）标准操作规程质量、岗位SOP-XR-0003空调净化系统标准操作规程（一车间）质量、岗位SOP-GY-5024洁净区清洁卫生标准操作规程质量、岗位SOP-GY-5018消毒液配制标准操作规程质量、岗位确认人/日期：5.2.相关消毒设备设施确认检查以下与消毒相关的设备设施，应已验证合格或处于完好状态编号名称是否符合？VP-GY-0222一车间空调净化系统再验证（JK2-1）是 否VP-GY-0223一车间空调净化系统再验证（JK2-2）是 否VP-GY-0224一车间空调净化系统再验证（JK2-3）是 否确认人/日期：5.3.验证培训确认确保验证相关人员了解验证方案，按照验证方案经行实施，并加强对验证相关文件了解。培训日期培训内容培训人被培训人VP-GY-0330(A)一车间环境消毒方法及效果再验证方案杨光远验证小组成员审核人/日期：验证培训签到记录见附件一。5.4.检测仪器设备确认确认验证用检测仪器均校验合格且在校验合格有效期内。名称型号用途校验单位校验结果有效期至固定式气体检测变送器MIC-500臭氧浓度检测气体检测仪（甲醛）GT-901环境甲醛残留检测确认人/日期：检验仪器计量证书见附件二。结论：上述前提条件均已完成，可以实施本次验证？是 否签名/日期6. 验证内容6.1.臭氧消毒测试确认目的：确认采用的规定臭氧消毒方法，能杀灭微生物至安全水平，使洁净室微生物水平符合规定。检测工具：MIC-500系列固定式气体检测变送器金黄色葡萄球菌菌液（50100CFU/ml）、90mm培养碟臭氧消毒流程：1、空调机组转换成值班模式；2、分别设定并检查一车间各个洁净区域的消毒时间，开启臭氧发生器。JK2-2送风段洗瓶区1.5小时JK2-3送风段配料区2小时JK2-1送风段灌封区2小时确认方法：1、臭氧消毒浓度及残留监测将MIC-500系列固定式气体检测变送器放置在“最差条件”的洁净室（JK2-1为器具存放室/211309；JK2-2为清洗器具室/210608；JK2-3为洗衣室/211016）进行臭氧浓度测试，通过数据连接线将洁净区外的控制系统（电脑）与臭氧检测仪进行连接，开始监测。并在臭氧消毒程序完成2小时后，再次监测臭氧浓度，以确认臭氧残留。2、挑战性试验2.1、试验用测试皿制备：2.1.1、配制金黄色葡萄球菌菌液，要求浓度为50100CFU/ml；2.1.2、吸取1ml菌液，滴入90mm培养碟，制成挑战用测试平皿；2.2、将挑战用测试平皿放入测试房间，每个测试房间放置2个。测试房间与“6.1”项“采样点布置表”同。2.3、臭氧消毒结束后，人员按照更衣要求，进入洁净区，盖上培养皿盖后取出培养皿并对每个培养皿标注房间名称及日期，交由QC浇注15ml营养琼脂培养基，再倒置放在3035的培养箱中培养48小时。同时另取2个无菌培养皿和2个未经臭氧消毒程序的挑战用测试平皿作为空白和阳性对照。一同培养后检查菌落生长情况。计算臭氧的杀灭率。杀灭率=（阳性对照菌落数挑战后菌落数）/阳性对照菌落数100%接受标准：1、 臭氧消毒程序中，达到规定的臭氧浓度持续时间应不少于60分钟：JK2-1（灌封区）浓度40mg/m3；JK2-2(洗瓶区)浓度10mg/m3；JK2-3（配料区）浓度30mg/m3。2、臭氧消毒结束2小时后，臭氧残留限度0.16mg/m3。3、检查挑战性测试平皿菌落数，臭氧杀灭率不小于90%。（注：臭氧浓度换算1ppm2mg/m3）测试结果：臭氧消毒效果确认项目接受标准检查结果是否接受？JK2-1JK2-2JK2-3臭氧消毒流程与规定一致。是否臭氧浓度和持续时间JK2-1：40mg/m3，60分钟JK2-2：10mg/m3 60分钟JK2-3：30mg/m3 60分钟 是否臭氧残留检测残留浓度0.16mg/m3是否挑战性测试臭氧杀灭率不小于90%是否确认人/日期：附件三：臭氧消毒记录（表1）；臭氧浓度监测记录（表2）；挑战性测试记录（表3）；小结与评价：分析人/日期： 6.2.洁净区表面微生物监测确认目的：确认洁净区在采用擦试消毒和臭氧消毒后，其表面微生物水平符合规定。测试工具：55mm接触碟洁净区擦试消毒流程：按SOP-GY-5024 洁净区清洁卫生标准操作规程进行，按下表要求用洁净抹布沾取消毒剂人工操作：对象消毒剂台面、门窗、墙面、地面、用具、附属装置、设备操作台面及外表面。3%过氧化氢、75%乙醇测试方法：1、采样时间：按本车间实际生产情况是在生产结束后进行人工擦试清洁消毒，并在人工清洁后进行臭氧消毒。第二天进入下一轮生产周期。据此，模拟实际生产情况，在臭氧环境消毒后第二天进行采样。2、用Rodac直接接触法取样，取样时，将取样部位直接与接触碟接触10秒钟左右，确保全部琼脂表面与取样点表面充分接触。并做好采样编号标记及记录好培养基批号，同时取2个空白平板做阴性对照。采集完毕后，放培养箱中，30-35培养48小时，取出后计算菌落数。3、采样点选取：在实际生产中，易于接触且接触频率高的点或区域相对风险较高，故验证中遵循上述原则，设置取样点位置如下：区域洁净级别主操作间/房号采样位置采样数量（个）JK2-2洗瓶区D级洗瓶室/210610门把手（内外各一）2洗瓶机（3台）操作台面、触摸屏3+3遂道干燥灭菌机触摸屏3电话机、墙壁1+1JK2-3配料区C级稀配室/211013 门把手（内外各一）2配制罐外壁1电话机、墙壁1+1JK2-1灌封区B级灌封室/211308门把手（内外各一）2电话机、墙壁1+1灌封机触摸屏、隔离门3+3按受标准：表面微生物平均值应符合下表规定：洁净级别A级B级C级D级接触（55mm） cfu /碟152550测试结果：洁净区表面微生物监测确认区域洁净级别平均值（cfu /碟）是否接受？JK2-2洗瓶区D级是否JK2-3配料区C级是否JK2-1灌封区B级是否汇总人/日期：附件三：洁净区微生物监测记录（表4）小结与评价：分析人/日期：6.3. 甲醛消毒方法及效果测试确认目的：确认采用的规定甲醛消毒方法，能杀灭微生物至安全水平。测试工具：枯草黑色变种芽孢生物指示剂(ATCC9372)菌片、90mm培养碟子、甲醛检测仪消毒流程：按SOP-XR-0004洁净室环境消毒（一车间）标准操作规程进行消毒流程如下：1、打开气化罐，加放规定量的甲醛和注射用水，关闭气化罐；2、开启蒸气电磁阀并设置3小时，打开气化罐至空调机组的气化管阀（顶阀）；3、切换空调机组为消毒模式；4、加热气化3小时后，关闭空调，闷熏7小时。5、置换新风循环通风2小时。确认方法：1、生物挑战性测试1.1、消毒开始前，取枯草黑色变种芽孢生物指示剂(ATCC9372)菌片，将菌片取出，置于培养皿内，每个培养皿内放置1片，然后将培养皿放置于洁净室地面中央。按每个系统放置不少于3个，其中1个放置于系统末端所在房间（注：送风管末端，消毒时间相对较短，换气次数小，属最差条件），另2个放置主要操作房间。建立采样点布置表如下：采样点布置表车间区域洁净级别采样房间/房号采样说明1车间JK2-2洗瓶区D级清洗器具/210608系统末端（最差条件）洗瓶/210610主要操作室走廊/210606主要操作室JK2-3配料区C级洗衣/211016系统末端（最差条件）稀配/211013主要操作室浓配/211012主要操作室JK2-1灌封区A/B级器具存放/211309系统末端（最差条件）灌封/211308主要操作室手消毒/211307主要操作室1.2、消毒完成后盖好盖子取出，以无菌技术接种于培养液内，37培养48小时，并设置1支未经消毒菌片做阳性对照。阳性对照培养液应变浑浊，颜色有红变黄，以“+”表示。1.3、消毒菌片培养液应澄清，颜色不变，继续培养至7天，应仍无菌生长，以“-”表示。2、甲醛残留测试各洁净环境中暴露于环境中的设备设施均为非直接接触药品的设备，验证中不需对设备表面检测甲醛残留，仅检测环境空气中的甲醛残留，以确认经置换后洁净区环境内甲醛残留。采用甲醛检测仪，待消毒程序全部结束后，进入被消毒区。抽取不少于3个房间进行检测，检查房间与采样点布置房间同。按受标准：1、阳性对照培养液应变浑浊，颜色有红变黄，以“+”表示。消毒菌片培养液应澄清，颜色不变，继续培养至7天，应仍无菌生长，以“-”表示。2、被测房间空气中甲醛含量均应0.08mg/m3。（注甲醛浓度换算1ppm1.3mg/m3）测试结果：甲醛消毒效果确认项目接受标准检查结果是否接受？甲醛消毒方法与规定一致。是否挑战性测试阳性对照培养液显阳性；消毒菌片培养液应澄清是否环境残留检测甲醛含量0.08mg/m3是否确认人/日期：附件三、甲醛消毒记录（表5）；挑战性测试记录（表6）；残留检测记录（表7）小结与评价：分析人/日期：7. 附件编号内容一方案培训签到表二测试用仪器校准书三臭氧消毒记录（表1）臭氧浓度监测记录（表2）挑战性测试记录（表3）洁净区微生物监测记录（表4）甲醛消毒记录（表5）挑战性测试记录（表6）残留检测记录（表7）8. 验证总结总结项目总结内容偏差调查验证结论评价与建议备注再验证年月