食用葛解酒作用及急性毒性初步研究.docx

食用葛解酒作用及急性毒性初步研究 张晓南陈芬符德欢等摘要：目的观察食用葛水提物的解酒作用，并对其进行毒性做出初步评价。方法解酒作用：先灌胃给予小鼠药物，40 min后，灌胃给酒，给酒后立即记录翻正反射消失的小鼠只数、潜伏期和持续时间，结果进行统计学处理，比较各组差异。急性毒性：预实验一次性给药测定半数致死量基础上，灌胃给予最大浓度和最大体积食用葛水提物，测定最大给药量，观察小鼠死亡、一般情况和重要脏器病理组织学变化并记录体重。结果与空白对照组相比食用葛低、高剂量组出现翻正反射消失动物数减少，低、中剂量组的醉酒潜伏时间延长，食用葛低、高剂量能明显缩短小鼠的醉后睡眠时间。食用葛水提物的最大给药量为313.88 g/kg，为成人用量的193倍。结论结果表明，食用葛水提物具有一定的解酒醒酒作用，且无明显急性毒性反应，安全性较高，临床用药安全范围大。关键词：R285文献标志码：A：1007-2349（2014）08-0069-03酒精中毒俗称醉酒，是由于一次大量饮酒引起中枢神经系统由兴奋到抑制状态。急性酒精中毒患者发病比较急，重度中毒可使呼吸、心跳抑制而死亡，据滇南本草记载，葛根具有“解中酒热毒”之功效，而此种葛根即为豆科植物食用葛（Pueraria edulis Pampan）的根1。药理研究表明：食用葛的同属药用植物葛根（Pueraria lobata（Willd.）Ohwi）所含总黄酮500mg/kg能明显缩短乙醇引起的小鼠睡眠时间，葛根总黄酮500mg/kg，250mg/kg，125mg/kg都能不同程度地延长乙醇睡眠潜伏时间，缩短睡眠时间，可见葛根总黄酮具有“解酒毒”作用23。此外，大鼠饮用乙醇后可使ADH活性明显受到抑制，肝脏GST活性明显减低，葛根水煎液加蔗糖制成10%的口服液有提高肝脏ADH以及活性的活性作用4。葛根黄酮具有提高乙醇性肝损伤的大鼠肝组织中GSH 含量的作用，还具有降低乙醇性损伤的大鼠的肝组织甘油三脂（TG）含量的作用，表明葛根黄酮对乙醇性肝损伤具有保护作用5。葛根解酒、醒酒、保肝等药理作用的研究均有文献报道，但食用葛的相关作用的研究还是空白，本实验正是针对这种情况，初步评价食用葛水提取物对急性酒精中毒的预防和改善效果，并与葛根的解酒醒酒效果加以对比，用第一手数据证实了食用葛的解酒功效。同时，为了提供更可靠的理论依据，以开发食用葛这一宝贵的药食两用植物资源，笔者还研究了食用葛水提物的急性毒性，对其安全性做出了初步评价。1食用葛水提物的解酒作用1.1实验材料广能葛根口服液（云卫食证字2007第530000-000012号），昆明市添宝科技开发有限公司；蒸馏水；实验用酒：红星二锅头酒，56度，北京红星股份有限公司；SPF级小鼠，体重1822 g，合格证号SCXK-（军）-2007-004。1.1.1食用葛水煎液食用葛药材采自大理，经中国科学院昆明植物研究所李恒研究员鉴定为食用葛（Pueraria edulis Pampan）。取食用葛药材800 g，以8倍量水煎煮3次，每次90 min，滤液浓缩，干燥得干膏101.95 g，至干燥器中保存。使用时加蒸馏水配制成所需浓度。食用葛低剂量组（2.25 g生药/kg），食用葛中剂量组（11.25 g生药/kg），食用葛高剂量组（20.25 g生药/kg）。1.1.2葛根水煎液葛根药材采自大理，经中国科学院昆明植物研究所分类鉴定室陶德定副研究员鉴定为葛Pueraria lobata（Willd.）Ohwi。取葛根药材800 g，以8倍量水煎煮3次，每次1.5h，滤液浓缩，干燥得干膏220 g，至干燥器中保存。使用时加蒸馏水配制成所需浓度。葛根低剂量组（2.25 g生药/kg），葛根中剂量组（11.25 g生药/kg），葛根高剂量组（20.25 g生药/kg）。1.2方法与结果1.2.1方法雄性小鼠80只，称重，编号，随机分为空白对照组，阳性对照组，食用葛低、中、高剂量组，葛根低、中、高剂量组，每组10只，实验前禁食12h。实验组给予食用葛低、中、高3个剂量，葛根低、中、高三个剂量溶液灌胃给药，给药体积20mL /kg体重；空白对照组给予等容积的蒸馏水灌胃；阳性组给予葛根口服液灌胃，给药体积9mL /kg体重。给药40min钟后，所有小鼠灌胃给酒（56%酒精，14 mL /kg）。给酒后立即记录翻正反射消失的小鼠只数、翻正反射消失小鼠的潜伏期（乙醇灌胃后至翻正反射消失的时间）和持续时间（从翻正发射消失至恢复的时间）。结果进行统计学处理，比较各组差异。1.2.2结果小鼠灌胃给酒（56%酒精，14mL /kg）后，空白对照组10只小鼠陆续醉酒昏迷，肌肉松驰，角膜反射消失，翻正反射消失。实验组小鼠在同等剂量酒精灌胃后，有部分小鼠活动正常，反应灵敏，未出现翻正反射消失等醉酒表现；一些小鼠在给酒后出现肌肉松驰，角膜反射消失，翻正反射消失等醉酒状症，小鼠昏睡后一段时间相继苏醒，恢复翻正反射。阳性对照组有8只小鼠活动正常，未出现翻正反射消失等醉酒表现；另2只小鼠在酒精灌胃后出现肌肉松驰，角膜反射消失，翻正反射消失等醉酒状症。记录醉酒小鼠翻正反射消失时间及持续时间。2食用葛水提物的急性毒性2.1实验材料2.1.1药物食用葛选用大理产药材，800 g食用葛药材以8倍量水煎煮3次，合并滤液浓缩至干膏，干膏为109.95 g，于干燥器中备用。2.1.2动物SPF级小鼠，雌雄各半，体重20 g左右，合格证号SCXK-（军）-2007-004。2.1.3主要器材锥形瓶（50mL）、量筒（50mL）、注射器（1mL）及针头，1.0%苦味酸溶液。2.2实验方法及结果 2.2.1预实验SPF级体重1822 g小鼠20只，雌雄各半，按体重和性别随机分为两组，每组10只。实验前禁食不禁水12h。最大的给药浓度以生药量计为313.88 g/kg，给药体积为0.4mL /10 g。给药后即刻观察，持续5h，主要观察动物饮食、外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应症状及其起始时间、严重程度、持续时间、是否可逆及恢复时间，体重变化等，以后每天观察2次，连续7 d，记录各组小鼠的死亡情况。2.2.2预实验结果给药后，给药组所有小鼠均活动减少，4h后恢复正常；1只雄性小鼠竖毛，3只雄性小鼠出现轻微腹泻；有1只雌性小鼠竖毛，3只雌性小鼠出现轻微腹泻；腹泻小鼠大便为水样，颜色呈药液颜色，第2天观察恢复正常。因在大剂量下，无动物死亡，难于测出LD50，故观察最大给药量的毒性反应。2.2.3最大给药量的测定方法取体重1822 g小鼠40只，根据雌雄、体重随机分成2组，每组20只，雌雄各半，为试验组和空白对照组，分笼饲养。试验组给药剂量以生药量计为313.88 g/kg，给药体积为0.4mL /10 g，空白对照组给予等体积的生理盐水，给药当天持续观察2h，之后每天观察两次，主要观察行为活动、肌肉运动、植物神经系统反应、呼吸等；并详细记录动物反应情况及称量动物体重，连续观察14 d。第14天处死、解剖小鼠，肉眼观察其主要脏器的外观。3小结与讨论我国酒文化盛行，饮酒成风，再加上人们对饮酒造成的早期损害常常忽视，所以乙醇性肝病的发病率极高。乙醇中毒是80%肝硬化的原因，对病毒性肝炎、肝癌等的发生、发展及预后都有重要影响；我国现有酒民3亿多，乙醇性肝病的发病率在20%左右5。因此，研究和开发有效的解酒保肝药物的是当今社会的迫切需要。天然解酒药物的作用机制是通过抑制乙醇胃肠吸收和加速代谢以降低机体血醇浓度，解除醉酒状态。从酒精在人体代谢的机制来看，目前的解酒制品主要从以下几个方面发挥作用降低酒精在胃肠道的吸收速度和增加酒精在胃内的代谢，增强肝内ADH 的活性，加快乙醇在肝脏内的氧化代谢，提高肝组织中超氧化物岐化酶（SOD）的活性和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH2PX）的活性，消除血浆与肝组织中的自由基和脂质过氧化物对机体的损伤6。 本项目的研究结果表明“食用葛水煎液”在一定程度对小鼠急性酒精中毒有预防作用，但其作用机理尚不明确，同时，主要有效成分也还没有针对性的研究，这些都需要我们在未来的工作中进一步加强。葛根类是中国传统医药学中最具代表性的天然解酒药物，食用葛作为其中的一员，醒酒解酒疗效确切，且急性毒性低，作为保健品或解酒药品开发必定前景广阔。参考文献：1滇南本草整理组.滇南本草M.昆明：云南人民出版社，1977，212.2周吉银，周世文.葛根总黄酮及葛根素解酒的药理研究进展J.中国医院药学杂志，2007，27（9）：12801282.3张恩户，赵勤，梁作峰，等.葛根总黄酮解酒作用的实验观察J.陕西中医学院学报，1995，18（3）：38.4张廼哲，符云峰，赵会军，等.葛根解酒毒的实验研究J.中国医药学报，1998，13（4）：2627.5赵鹏，姚思宇，李凤文.葛根黄酮对乙醇性肝损伤的保护作用J.中国热带医学，2009，9（3）：444445.6李玉洁.我国天然解酒制品的研究进展J.海峡药学，2008，20（4）：47.（ -全文完-