紫杉醇自乳化给药体系的构建研究.doc

紫杉醇自乳化给药体系的构建研究摘 要紫杉醇（Paclitaxel，PTX）是一种天然的抗癌原料药，是从红豆杉属植物短叶红豆杉(Taxus brevifolia)的树皮中分离得到的单体双萜类化合物。它对多种人肿瘤细胞系如卵巢癌、乳癌、黑色素瘤等均有明显的细胞毒作用。由于其作用机理独特、抗癌活性显著，临床实验表白，紫杉醇也许成为治疗卵巢癌和乳癌的一线药物。在临床应用中，紫杉醇较差的水溶性（0.006mg/ml）导致其口服生物运用度很低，且存在急性过敏反映等问题。为此，我们尝试采用自乳化药物传递系统（SEDDS），使紫杉醇与油相、水相、表面活性剂、助表面活性剂形成O/W型微乳，解决其水溶性差的问题，同时减少毒性，提高药物的生物运用度。本研究通过对油相、水、表面活性剂、助表面活性剂的选择和配比优化，成功地将紫杉醇包埋在乳液中，由伪三元相图得到相应的微乳区域，并结合自乳化速率及对紫杉醇的溶解性能来筛选处方。最终确立微乳的最优配方为：油酸正丁酯+聚氧乙烯蓖麻油+1，2丙二醇（3:7(2:1)），经去离子水稀释迅速形成稳定的微乳，粒径在30nm。实验条件为在37水浴中，温和搅拌。并在229nm,以甲醇：乙腈：水14：36：50为流动相，流速为1ml/min的条件下，用高效液相色谱法（HPLC）准确分析紫杉醇含量，为构建紫杉醇自乳化给药体系作了初步探索。关键词：紫杉醇 自乳化 微乳 拟三元相图 高效液相色谱Studies on the SEDDS of paclitaxelABSTRACTPaclitaxel is a kind of natural anti-cancer drugs separated from the cortices of Taxus brevifolia. It is a monomer of di-terpene. It is active to many human cancer cell systems such as ovary cancer, breast cancer and so on. Because of its special anti-cancer mechanism and its obvious effect, Paclitaxel may become the preferred drug in curing the ovary and breast cancer in recent years.To solve all kinds of troubles caused by the clinical using of paclitaxel, such as the hypersensitivity reactions and the poor bioavailability, we try to prepare a Self-emulsifying Drug Delivery System (SEDDS) of Paclitaxel . The oil, water, surfactant and co-surfactant were chosen to establish a system which can dissolve the paclitaxel. SEDDS can improve the bio-absorbption of paclitaxel meanwhile reduce its toxicity.We choose prescription by portraying the pseudo-ternary phase diagram and testing the selfemulsifying rate. We successefully embed paclitaxel in the SEDDS microemulsion, and find the best prescription : normal-butyl oleate + Cremophor-EL + propane-1，2-diol（3:7(2:1)）.The HPLC method was established to determine the concentration of paclitaxel in Self-emulsifying Drug Delivery System. Keywords: paclitaxel SEDDS microemulsions HPLC一前 言癌症是当今威胁人类健康的最凶顽疾之一，是疾病导致死亡的头号杀手。据世界卫生组织记录，全世界平均每年死于癌症的患者达690多万人，每年新增患者约为870万例，并且该数字呈逐年上升的趋势。对于这种全身性、全程性的疾病来说，开发一种高效低毒的治疗药物具有非常重要的意义。植物生物碱和其他天然药物是抗肿瘤药中的领先类别，从临床用药情况看，呈现出逐年上升的趋势，已在抗肿瘤药物中占据了半壁江山。1紫杉醇1.1 理化性质及药理作用紫杉醇（Paclitaxel，PTX）是一种单体双萜类天然抗癌原料药，从红豆杉属植物短叶红豆杉(Taxus brevifolia)的树皮中分离得到，是由紫杉烷（taxane）衍生的生物碱。其分子式为：C47H51NO14， 分子量：853.90，分子结构式为 ： 作为一种天然抗癌药，紫杉醇具有高效、低毒和广谱的特点。紫杉醇是细胞克制剂类抗肿瘤药物，可干扰癌细胞的微管蛋白合成从而发挥抗癌作用，对正常细胞基本无影响。它对大多数实体瘤有强力克制作用，临床实验表白，它对多种人肿瘤细胞系如卵巢癌、乳癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、胃癌、结肠癌、黑色素瘤、白血病、膀胱癌、肝肿瘤、中枢神经肿瘤等均有明显的细胞毒作用1。特别对晚期卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌和卡波济氏肉瘤的疗效确切、副作用较小，故上市2023来一直保持较高的增长率。同时，它也用于风湿性关节炎、皮肤病症的治疗。紫杉醇的作用机理独特、结构新奇、抗癌活性显著，引起了医药界的极大重视和学科科研人员的广泛关注。但是紫杉醇较差的水溶性（170（2）十四酸异丙酯+Cremophor-EL+乙醇3：7（4：1）40（3）十四酸异丙酯+Cremophor-EL+异丙醇 2：8（1：1）80（4）十四酸异丙酯+Cremophor-EL+正丁醇3：7（1：1）160（5）油酸正丁酯+Cremophor-EL+1，2丙二醇3：7（8：1）10（6）油酸正丁酯+Cremophor-EL+异丙醇1：3（4：1）30（7）油酸正丁酯+Cremophor-EL+正丁醇3：7（8：1）40（8）油酸正丁酯+Cremophor-EL+乙醇3：7（2：1）50从表2-4可以清楚地看到，处方（5）的自乳化时间远远小于其他几个处方，在10分钟内便形成稳定的微乳体系，根据文献资料，良好的自乳化处方应当在15分钟内便达成稳定，因此此处方符合规定，自乳化速率抱负。27 最优处方的确立 从自乳化速率测定实验中，得到的最优处方配比为：油酸正丁酯+ Cremophor-EL+1,2丙二醇（3：7（8：1），微乳体系在10min内便达成稳定，自乳化速率比较抱负。且此配比的伪三元相图微乳区域很大，在所有相图中是最大的一个，配制过程中很容易形成透明带明显乳光的O/W型微乳，系统稳定，几种筛选比较方法结论一致，因此，确立该配比为最佳自乳化处方。3 微乳及紫杉醇自微乳体系特性评价31 紫杉醇的溶解度测定311 紫杉醇检测波长选择将少量的紫杉醇溶于流动相中，在200-400nm波长 范围内扫描，拟定紫杉醇的最大吸取波长。图213 紫杉醇波长扫描图结论：紫杉醇在229nm的波长下有最大吸取312 标准曲线的建立配制浓度为4，8，20，40，80，100g/ml的6个样品溶液，各取20 u1进样测定，记录各自中的紫杉醇在波长229nm所出的峰面积。以峰面积积分值对紫杉醇标准溶液浓度作图，得到体外测定紫杉醇浓度的标准曲线。 图214紫杉醇峰面积浓度标准曲线由图可见，以峰面积与浓度为两轴建立的标准曲线在4100g/ml浓度范围内线形关系良好。313 回收率实验 精密称取紫杉醇适量，用高、中、低三种标准工作液浓度按拟定的方法测定，以考察方法的回收率，结果见表2-4。表2-4 回收率表称 量 （g）稀释后浓度 （g/ml）测定的浓度 （g/ml）回 收 率 (%)平均回收率（）总回收率(%)0.015212.1611.90997.997.697.948.6447.63297.985.1282.578970.015112.0812.05899.898.848