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动物细胞工程专题复习动物细胞工程专题复习1动物细胞培养动物细胞培养2动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞细胞悬浮悬浮液液10代代细胞细胞部分细胞部分细胞“癌变癌变”，遗传物质改变，无遗传物质改变，无限传代限传代动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成动物体最终培养成动物体50代细胞代细胞原原代代培培养养传代培养传代培养细细胞胞贴贴壁壁剥离、分瓶剥离、分瓶细胞株细胞株细胞细胞细胞系细胞系1 1、过程：、过程：3细胞细胞悬浮悬浮液液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限传无限传代代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？细胞系？多数组织细胞固定在表面多数组织细胞固定在表面生长和分裂。生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变4几个有关概念：几个有关概念：原代培养：原代培养：从机体取出后立即培养的细胞从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的为原代细胞。培养的第第1 1代代细胞与细胞与传传1010代代以内以内的细胞称为原代细胞培养。的细胞称为原代细胞培养。传代培养：传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。5细胞株：细胞株：原代细胞一般传至原代细胞一般传至1010代左右细胞生长代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40504050代，这种传代细胞为细胞株。代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至5050代后又出现细胞生长代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。易传代培养。61 1、无菌、无毒：、无菌、无毒：2 2、全部的营养物质：、全部的营养物质：3 3、适宜的温度和、适宜的温度和PHPH值：值：4 4、必要的气体条件：、必要的气体条件：（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）保证细胞顺利的保证细胞顺利的生长增殖生长增殖36.5+36.5+（-）0.50.5度度,7.2-7.4,7.2-7.4O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5%CO5%CO2 2）2 2、条件：、条件：维持培养液的维持培养液的PH7 3 3、应用：、应用：大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）干扰素、单克隆抗体）作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性判断某种物质的毒性用于生理、病理、药理等方面的研究，用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据为治疗和预防疾病提供理论依据8细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植株植株培养结果培养结果获得细胞获得细胞或或细胞产物细胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物葡萄糖、动物血清血清蔗糖、植物激蔗糖、植物激素素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较91.1.动物细胞工程技术的基础是（动物细胞工程技术的基础是（）A A、动物细胞融合、动物细胞融合 B B、胚胎移植、胚胎移植 C C、动物细胞培养、动物细胞培养 D D、核移植、核移植2.2.下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）A A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D D、培养至、培养至5050代后的传代细胞称为细胞株代后的传代细胞称为细胞株C CB B 103.3.下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（）A A、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组织织B B、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞个细胞C C、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液制成悬浮液D D、动物细胞培养只能传、动物细胞培养只能传5050代左右，所培养的细胞会衰代左右，所培养的细胞会衰老死亡老死亡D D 114.4.下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1 1）容器）容器A A中放置的是动物器官或组织。它一般取自中放置的是动物器官或组织。它一般取自 _。（2 2）容器）容器A A中的动物器官或组织首先要进行的处理是中的动物器官或组织首先要进行的处理是 ，然后用，然后用 酶处理，这是为了使细胞酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是分散开来，这样做的目的是 （3 3）培养首先在）培养首先在B B瓶中进行，瓶中的培养基成分有瓶中进行，瓶中的培养基成分有 _等。等。幼龄动物或胚胎的组织或器官幼龄动物或胚胎的组织或器官剪碎组织剪碎组织 胰蛋白胰蛋白 使细胞与培养液充分接触使细胞与培养液充分接触 葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长因子葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长因子与微量元素和动物血清与微量元素和动物血清 12在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培养到第养到第 代，到这时的培养称为代，到这时的培养称为_。为了把为了把B B瓶中的细胞分装到瓶中的细胞分装到C C瓶中，用瓶中，用 处理处理然后配置成然后配置成 ，再分装。，再分装。在在C C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是原因是 10 10 原代培养原代培养 胰蛋白酶胰蛋白酶 细胞悬液细胞悬液 细胞没有发生癌变细胞没有发生癌变 13核移植技术和克隆动物核移植技术和克隆动物14 1.1.概念：概念：将动物的一个细胞的细胞核，移将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的入一个已经去掉细胞核的卵母细胞卵母细胞中，使其中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。最终发育成动物个体。核移植核移植（难度高）（难度高）受体细胞：受体细胞：MM期的期的卵母细胞卵母细胞胚胎细胞核移植：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，细胞分化程度低，恢复全能性容易恢复全能性容易用核移植的方法得到的动物用核移植的方法得到的动物称为克隆动物称为克隆动物原理：动物体细胞核的全能性。原理：动物体细胞核的全能性。15取供体细胞取供体细胞取卵母细胞取卵母细胞 供体细胞培养供体细胞培养培养到培养到 M中期中期 卵母细胞去核卵母细胞去核 供体细胞供体细胞注入去核的卵母细胞注入去核的卵母细胞 供体核进入受体卵母细胞供体核进入受体卵母细胞 重组胚胎重组胚胎 代孕母牛代孕母牛 生出与供体遗传物质基本相同的个体生出与供体遗传物质基本相同的个体2.2.过程：过程：163.3.克隆动物的研究意义：克隆动物的研究意义：1.1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白2.2.改良动物品种改良动物品种 3.3.治疗人类疾病，作为供体治疗人类疾病，作为供体4.4.保护濒危动物保护濒危动物4体细胞核移植技术存在的问题：体细胞核移植技术存在的问题：1.1.许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。2.2.成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。171.1.下列哪下列哪项属于克隆（项属于克隆（）A A将鸡的某个将鸡的某个DNADNA片段整合到小鼠的片段整合到小鼠的DNADNA分子中分子中 B B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞细胞 D D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系D D2.2.（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的外形和功能都与真的血管一样外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织这一研究成果是生物组织培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正确的是（确的是（）A A属于属于“克隆克隆”B B可能要利用去核卵细胞可能要利用去核卵细胞C C关键是激发血管细胞的全能性关键是激发血管细胞的全能性 D D关键是激发血管细胞发育成血管的潜能关键是激发血管细胞发育成血管的潜能ABDABD183.3.从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状（）A A、难以预测、难以预测 B B、像甲、像甲 C C、像乙、像乙 D D、像丙、像丙4.4.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生复生”将不再将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生复生”野驴的方法是野驴的方法是 （）A A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体化、再分化，培育成新个体B B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体体C C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体经孕育培养成新个体D D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体B B C C 195.5.下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答下列问题：下列问题：蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的_，重新组合的细胞相当于蛙的重新组合的细胞相当于蛙的_ 细胞，经过细胞，经过_ _ 和和_形成组织和器官。形成组织和器官。全部基因全部基因 受精卵受精卵 细胞分裂细胞分裂 细胞分化细胞分化 本实验结果说明本实验结果说明_具有全能性，具有全能性，图中图中A A过程采用的技术手段称做过程采用的技术手段称做_。动物体细胞核动物体细胞核 核移植技术核移植技术20动物细胞融合动物细胞融合211.1.过程：过程：动物细胞动物细胞A A动物细胞动物细胞B B诱导，融合诱导，融合2 2个完整的个完整的杂交细胞杂交细胞ABAB有丝分裂有丝分裂（膜融合、质融合）（膜融合、质融合）（核融合）（核融合）注意：注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞胞222.2.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。3.3.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体23植物体细胞杂交和动物细胞融合比较植物体细胞杂交和动物细胞融合比较比较项目比较项目比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合动物细胞融合原理原理原理原理融合前处理融合前处理融合前处理融合前处理诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法用途用途用途用途细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、用纤维素酶、果胶酶去壁果胶酶去壁果胶酶去壁果胶酶去壁用胰蛋白酶用胰蛋白酶用胰蛋白酶用胰蛋白酶使细胞分散使细胞分散使细胞分散使细胞分散物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学方法物理、化学、物理、化学、物理、化学、物理、化学、生物方法生物方法生物方法生物方法获得部分或完获得部分或完获得部分或完获得部分或完整植株整植株整植株整植株主要用于制备主要用于制备主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体241 1、基因型为、基因型为AaAa与基因型为与基因型为BbBb的动物体细胞混合，用灭活的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞A AAAaa BAAaa BAaBb CAaBb CAabb DAabb DBBbbBBbb2 2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同所用的技术手段不相同所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞都能形成杂种细胞A.A.B.C.B.C.D.D.3 3、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是融合中有特殊性的是A A、融合的原理、融合的原理 B B、融合的优点、融合的优点 C C、融合的诱导手段、融合的诱导手段 D D、融合的过程、融合的过程C C C C C C 254.4.科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析回答：回答：该实验结果说明了细胞膜该实验结果说明了细胞膜 ，这是因为，这是因为若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于0条件下再保持条件下再保持40min，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧光，另一半膜发红色荧光，这说明光，另一半膜发红色荧光，这说明具有一定的流动性具有一定的流动性 构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的 膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制26单克隆抗体单克隆抗体271.单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程诱导其融合的方法有哪些？诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞融合后培养液中有几种细胞怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点瘤细胞有何优点注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么为何要进行克隆化培养和专为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选一抗体检测，多次筛选大量增殖杂交瘤细胞获得单大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法克隆抗体的方法28过程：过程：B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞细胞B-瘤细胞瘤细胞瘤瘤-瘤细胞瘤细胞选择培养选择培养杂交瘤细胞杂交瘤细胞（B-瘤细胞）瘤细胞）克隆化培养克隆化培养抗体检测抗体检测产生所需抗产生所需抗体的杂交瘤体的杂交瘤细胞细胞体外培养体外培养小鼠腹腔内增殖小鼠腹腔内增殖单克隆抗体单克隆抗体292.2.单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：.作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合并与抗原特异性结合2.2.用于用于运载药物：制成运载药物：制成“生物导弹生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速优点：准确、高效、简易、快速单克隆抗体的单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高优点：特异性强、灵敏度高优点优点:疗效高、毒副作用小疗效高、毒副作用小301 1、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1 1过过程注射的物质和程注射的物质和A A细胞的名称为细胞的名称为()()A A、抗体、抗体、T T淋巴细胞淋巴细胞 B B、抗原、抗原、T T淋巴细胞淋巴细胞C C、抗体、抗体、B B淋巴细胞淋巴细胞 D D、抗原、浆细胞、抗原、浆细胞D D312 2、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C C、可以利用基因工程技术生产、可以利用基因工程技术生产 D D、可以在生物体内生产，不能体外生产、可以在生物体内生产，不能体外生产3 3、“生物导弹生物导弹”是指是指A A、单克隆抗体、单克隆抗体 B B、带有特定药物的单克隆抗体、带有特定药物的单克隆抗体C C、杂交细胞、杂交细胞 D D、B B淋巴细胞淋巴细胞D D B B 4.4.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是的是A A特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 B B与抗癌药物结合可制成与抗癌药物结合可制成“生物导弹生物导弹”C C体外培养体外培养B B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体D D由效应由效应B B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌C C 325.5.下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合）下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合）请据图回答：请据图回答：I I若若A A、B B是基因型分别为是基因型分别为rrHHrrHH、RRhhRRhh两个烟草品种细胞两个烟草品种细胞的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对隐性纯合基因隐性纯合基因(rr(rr或或hh)hh)的作用，在光照强度大于的作用，在光照强度大于800800勒勒克斯时，都不能生长。克斯时，都不能生长。实验开始时必须用实验开始时必须用 除去不利于原除去不利于原生质体融合的物质。生质体融合的物质。实验中除获得杂种细胞外，还有基因型实验中除获得杂种细胞外，还有基因型为为 的融合细胞。的融合细胞。纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶rrHHrrHH、RRhhRRhh 33设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，方法：种细胞，方法：将杂种细胞培养成杂种植株依据的理论基础将杂种细胞培养成杂种植株依据的理论基础是是 。IIII若该过程是制备治疗若该过程是制备治疗“SARS”“SARS”病毒的单克隆抗体，病毒的单克隆抗体，A A为为人人B B淋巴细胞（染色体组成为淋巴细胞（染色体组成为2A2AXX=46XX=46），），B B为鼠骨髓瘤为鼠骨髓瘤细胞（染色体组成为细胞（染色体组成为2A2AXX=40XX=40）用单克隆抗体制成用单克隆抗体制成“生物导弹生物导弹”主要利用了抗体主要利用了抗体的的 特性。特性。AA细胞来自于细胞来自于 ，杂种细胞，杂种细胞C C共有共有 个个染色体组。染色体组。杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用培养基要用 培养基。（物理状态），培养基中除培养基。（物理状态），培养基中除了添加必要的营养物质为还需加入了添加必要的营养物质为还需加入 。置大于置大于800800勒克斯光照下培养，收集分化的勒克斯光照下培养，收集分化的 细胞团细胞团 细胞的全能性细胞的全能性 抗体与抗原结合，发挥特异性免疫效应抗体与抗原结合，发挥特异性免疫效应 非典患者非典患者 4 4 液体液体 动物血清动物血清 346.6.右图是制备分泌抗右图是制备分泌抗X X抗体的过程，根据图解回答问题：抗体的过程，根据图解回答问题：35给小鼠注射抗原的目的是给小鼠注射抗原的目的是_。在单克隆抗体制备过程中之所以选用在单克隆抗体制备过程中之所以选用B B淋巴细胞和骨髓淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有有_ 的特性。的特性。由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了_和和_的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用导剂与植物原生质体融合不同的是可用_。动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有有_。获得能产生相应抗体的获得能产生相应抗体的B B细胞细胞 既能无限增殖，又能产生特定抗体既能无限增殖，又能产生特定抗体 动物细胞融合动物细胞融合 动物细胞培养动物细胞培养 灭活的病毒灭活的病毒 动物血清动物血清 36在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用开，以利于细胞融合，可用_处理离体组处理离体组织细胞使之分散开。织细胞使之分散开。图中有两次筛选过程，其中步骤图中有两次筛选过程，其中步骤的目的是筛选出的目的是筛选出_，步骤，步骤的目的是筛选出的目的是筛选出_ _。胰蛋白酶胰蛋白酶 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 能产生特定抗体的杂交瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞 37