绪论组织学和胚胎学.pptx

组织学与胚胎学组织学与胚胎学(histology and embryology)绪论(Introduction)细胞(cell)组织学与胚胎学的定义和研究内容光学显微镜术电子显微镜术组织化学和免疫组织化学技术原位杂交组织学与胚胎学的学习方法细胞连接重点与小结内容提要一一、组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学与胚胎学的定义和研究内容组织学组织学（histology）：研究机体微细结构及其相关研究机体微细结构及其相关 功能的科学。功能的科学。细胞细胞细胞间质细胞间质上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌肉组织肌肉组织神经组织神经组织器官和系统器官和系统人体人体研究内容：研究内容：胚胎学（胚胎学（embryologyembryology）：研究机体发生、生长及其研究机体发生、生长及其 发育机制的一门科学。发育机制的一门科学。研究内容：研究内容：受精卵受精卵胚胚胎胎儿儿（28周周）（938周周）人体组织学（人体组织学（human organization)human organization)：研究人体结构（微细结构）的自组织过程及其研究人体结构（微细结构）的自组织过程及其规律的科学。规律的科学。人体发生人体发生 细胞细胞 组织组织 器官系统器官系统（微细结构及演化规律）（微细结构及演化规律）研究内容：研究内容：为什么学习组织学与胚胎学为什么学习组织学与胚胎学？哪哪个个是是不不正正常常的的？问题问题 解决方法解决方法 观察对象太小观察对象太小 放大放大（显微镜）显微镜）观察对象无色，无反差观察对象无色，无反差 染色染色（HEHE染色染色）观察对象生化成分不同观察对象生化成分不同 细胞化学细胞化学、免疫组织化学免疫组织化学 观察对象是活体观察对象是活体 培养培养二、二、组织学与胚胎学的研究方法和技术组织学与胚胎学的研究方法和技术(一一)光镜技术光镜技术 1.1.石蜡切片石蜡切片石蜡切片石蜡切片:取材固定取材固定取材固定取材固定 脱水透明脱水透明脱水透明脱水透明 包埋切片包埋切片包埋切片包埋切片 染色封片染色封片染色封片染色封片 2.2.冰冻切片、涂片、铺片、磨片等冰冻切片、涂片、铺片、磨片等冰冻切片、涂片、铺片、磨片等冰冻切片、涂片、铺片、磨片等光镜标本制作程序切片机3.组织切片染色法组织切片染色法HE染色染色：苏木精苏木精（Hematoxylin）伊红伊红（Eosin）染色染色碱性染料碱性染料将嗜碱性物质将嗜碱性物质（本本身酸性身酸性）染成蓝色染成蓝色酸性染料酸性染料将嗜酸性物质将嗜酸性物质（本本身碱性身碱性）染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA和和RNA、细胞质中细胞质中的的RNA细胞质细胞质、膜性结构膜性结构（线粒体线粒体、溶酶体溶酶体、滑面内质网滑面内质网）嗜碱性嗜碱性嗜碱性嗜碱性:对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏对于碱性染料亲和力强的性质。可被苏 木精染成紫蓝色。木精染成紫蓝色。木精染成紫蓝色。木精染成紫蓝色。嗜酸性嗜酸性嗜酸性嗜酸性:对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊对于酸性染料亲和力强的性质。可被伊 红染成红色。红染成红色。红染成红色。红染成红色。中性中性中性中性:对于两种染料亲和力都不强的性质对于两种染料亲和力都不强的性质对于两种染料亲和力都不强的性质对于两种染料亲和力都不强的性质,HEHEHEHE染染染染 色着色淡。色着色淡。色着色淡。色着色淡。组织结构的嗜色性组织结构的嗜色性特殊染色法特殊染色法：硝酸银、地衣红、甲苯胺蓝染色法等活体染色活体染色：台盼蓝活体注射地衣红染色示弹性纤维甲苯胺蓝染色示肥大细胞台盼蓝活体染色示巨噬细胞血涂片Wright染色透射电镜透射电镜（transmission electron microscope）：）：观察细胞内部结构观察细胞内部结构扫描电镜扫描电镜（scanning electron microscope)：观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构（二）电子显微镜技术（二）电子显微镜技术分辨率：电镜(0.2nm)、光镜(0.2m)透射电镜结构图电子密度高电子密度低透射电镜结构图透射电镜结构图扫描电镜结构图(三)组织化学技术 1一般组织化学术一般组织化学术 原理：原理：化学或物理反应原理 应用：应用：对组织或细胞内某种化学成分进行定性、定位、定量及相关功能的研究。PAS反应：过碘酸-Schiff反应(periodic acid Schiff reaction,PAS反应）是显示组织或细胞内多糖的一种染色方法。多糖多糖醛醛紫红色沉淀紫红色沉淀氧化氧化Schiff试剂试剂HIO4糖类PAS反应肝糖原小肠粘原颗粒 2.2.免疫组织化学(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)技术：原理：原理：抗原和抗体特异性结合。应用：应用：检测细胞、组织中多肽、蛋白质等。（1）直接法（2）间接法免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）示胰岛B细胞呈胰岛素阳性(四四)原位杂交技术原位杂交技术(in site hybridization)为核酸（为核酸（DNA和和RNA）组织化学术。用组织化学术。用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该核酸。位显示该核酸。（五）细胞培养术（cell culture）细胞培养术：是把从机体取得的细胞在体外模拟体 内的条件下进行培养的技术。原代培养(primary culture)：传代培养(sub culture)：细胞系(cell line)：细胞株(cell strain)：超净工作台培养箱体外培养的上皮细胞在相差显微镜下的图象三、组织胚胎学学习方法要点平面与立体的关系结构与功能相联系静态结构了解动态变化纵横联系深化认识平面与立体结构与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态静态与动态综合与比较四、细胞（一）基本结构 （二）细胞连接（二）细胞连接 (cell junction)(cell junction)1.1.紧密连接紧密连接 2.2.中间连接中间连接 3.3.桥粒桥粒 4.4.缝隙连接缝隙连接1.紧密连接紧密连接(tight junction)(tight junction)功能功能:（1 1）阻止大分子物）阻止大分子物质由外部进入细质由外部进入细胞间隙。胞间隙。（2 2）有一定机械性）有一定机械性的连接作用。的连接作用。功能功能:（1）粘着和连粘着和连接相邻细胞。接相邻细胞。（2）保持细胞保持细胞的形态。的形态。2.2.中间连接中间连接(intermediate(intermediate junction)junction)3.3.桥粒桥粒(desmosome)(desmosome)是一种最牢是一种最牢固的细胞连接，固的细胞连接，多见于易受机械多见于易受机械刺激或摩擦较多刺激或摩擦较多的部位。的部位。功能：功能：（1 1）利于细胞之）利于细胞之间小分子物质和离间小分子物质和离子的交换，协调各子的交换，协调各细胞的功能。细胞的功能。（2 2）利于细胞之）利于细胞之间传递电冲动。间传递电冲动。4.4.缝隙连接缝隙连接(gap junction)(gap junction)两种或两种以上的细胞连接紧接连在一起，则称为连接复合体。连接复合体连接复合体（junctional complex)junctional complex)：组织学研究技术新进展流式细胞术流式细胞术(flow cytometry)流式细胞仪形态计量术形态计量术(morphometry)图像分析仪五、重点与小结1.HE1.HE染色的概念染色的概念2.2.嗜酸性、嗜碱性、嗜中性的含义嗜酸性、嗜碱性、嗜中性的含义3.PAS3.PAS反应反应4.4.免疫组织化学技术免疫组织化学技术5.5.原位杂交技术原位杂交技术6.6.细胞连接类型、功能细胞连接类型、功能7.7.连接复合体连接复合体 预习：预习：人体的胚胎发生人体的胚胎发生