实验动物实验室的生物安全防护要求市公开课一等奖百校联赛特等奖课件.pptx

试验动物试验室试验动物试验室生物安全防护要求生物安全防护要求陕西省中医药研究院试验动物中心陕西省中医药研究院试验动物中心姚养正姚养正.12.18第1页v一、试验动物及试验动物设施一、试验动物及试验动物设施v二、动物试验室产生生物危害起源二、动物试验室产生生物危害起源 v三、试验动物试验室生物安全防护要求三、试验动物试验室生物安全防护要求（一）试验动物护理和使用标准（一）试验动物护理和使用标准（二）动物试验过程行为规范（二）动物试验过程行为规范（三）试验动物使用程序和要求（三）试验动物使用程序和要求v四、各级动物生物安全试验室设施与防护要求四、各级动物生物安全试验室设施与防护要求v五、无脊椎动物使用安全标准五、无脊椎动物使用安全标准 v六、部分相关法律、法规和部门规范六、部分相关法律、法规和部门规范第2页一、试验动物及试验动物设施：一、试验动物及试验动物设施：v以科学研究为目标而进行科学喂养、以科学研究为目标而进行科学喂养、繁殖动物称之为繁殖动物称之为试验动物试验动物。v它包含它包含严格意义严格意义上试验动物即在一定环境条件控制上试验动物即在一定环境条件控制下，经过科学育种、繁殖生产，遗传背景清楚，携下，经过科学育种、繁殖生产，遗传背景清楚，携带微生物情况明确，并对其生态学、生物学、生物带微生物情况明确，并对其生态学、生物学、生物化学、形态结构了解特殊动物如大鼠、小鼠、金黄化学、形态结构了解特殊动物如大鼠、小鼠、金黄地鼠、豚鼠、家兔、犬和小型猪等。地鼠、豚鼠、家兔、犬和小型猪等。v也也包含包含一部分家畜、家禽和一些未经过人工驯化野一部分家畜、家禽和一些未经过人工驯化野生动物，如猫、羊、非人灵长类、鸡、鸭、鸽、蛇、生动物，如猫、羊、非人灵长类、鸡、鸭、鸽、蛇、蛙和鱼类等等。蛙和鱼类等等。第3页v在进行动物试验中，应该重点注意三个在进行动物试验中，应该重点注意三个方面内容：方面内容：v一是正确选择试验动物，对所用动物必须了解其整一是正确选择试验动物，对所用动物必须了解其整体概况体概况v二是确保动物应享受福利即人道主义地使用动物二是确保动物应享受福利即人道主义地使用动物v三是在使用动物进行一些传染性疾病研究时，必须三是在使用动物进行一些传染性疾病研究时，必须保护好试验者和周围环境，预防感染和污染。保护好试验者和周围环境，预防感染和污染。第4页v试验动物设施广义是指进行试验动物喂养、试验动物设施广义是指进行试验动物喂养、保种、维持、生产、试验研究、生物制品生保种、维持、生产、试验研究、生物制品生产等设施总称。狭义上指保种、繁殖、生产、产等设施总称。狭义上指保种、繁殖、生产、育成试验动物喂养场所育成试验动物喂养场所.v试验动物设施类型：依据对喂养动物微生物试验动物设施类型：依据对喂养动物微生物控制程度和空气净化程度可分为开放系统、控制程度和空气净化程度可分为开放系统、屏障系统、隔离系统。屏障系统、隔离系统。第5页试验动物设施试验动物设施v试验动物设施分类试验动物设施分类v试验动物和动物试验设施、设备进展试验动物和动物试验设施、设备进展v屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障系统试验动物环境设施基本要求第6页试验动物设施分类试验动物设施分类按设施功效分类按设施功效分类 1）试验动物生产设施）试验动物生产设施2）动物试验设施）动物试验设施3）特殊试验动物试验设施）特殊试验动物试验设施包含感染动物包含感染动物试验设施和应用放射性物质或其它特殊化学试验设施和应用放射性物质或其它特殊化学物质等动物试验设施。物质等动物试验设施。第7页按设施平面布局分类按设施平面布局分类1）无走廊式）无走廊式普通为普通级设施普通为普通级设施2）单走廊式可为普通级或清洁级设施）单走廊式可为普通级或清洁级设施3）双走廊式）双走廊式是惯用一个试验动物屏障设是惯用一个试验动物屏障设施类型。可有效分割施类型。可有效分割清洁区和污染区清洁区和污染区4）三走廊式）三走廊式动物隔离良好，人员、动动物隔离良好，人员、动物、物品进入有专门通道，可有效防止交叉物、物品进入有专门通道，可有效防止交叉感染，但空间利用率低，而且投资大感染，但空间利用率低，而且投资大第8页按屏障设施内气流组织形式分类按屏障设施内气流组织形式分类1 1、乱流式屏障设施、乱流式屏障设施 指气流以不平均速度指气流以不平均速度成不平行流动，伴有回流或涡流洁净成不平行流动，伴有回流或涡流洁净室。室。技术指标技术指标 1 1）换气次数、换气次数）换气次数、换气次数0.1-0.2m/s0.1-0.2m/s。2 2）气流组织）气流组织 其作用是确保均匀地送其作用是确保均匀地送风和回风，风口布置均匀，以降低涡风和回风，风口布置均匀，以降低涡流和气流盘旋。流和气流盘旋。3 3）自净时间）自净时间 普通不超出普通不超出3030分钟。分钟。2 2、单向流式屏障设施。、单向流式屏障设施。第9页v按微生物控制程度分类按微生物控制程度分类 1、普通环境普通环境试验动物生存环境直接与外试验动物生存环境直接与外界大气相通。界大气相通。2、屏障环境屏障环境进入试验动物生存环境空气须进入试验动物生存环境空气须经净化处理，其洁净度相当于经净化处理，其洁净度相当于10000级。进级。进入屏障内人、动物和物品等均须严格微生物入屏障内人、动物和物品等均须严格微生物控制，是喂养清洁级控制，是喂养清洁级SPF级试验动物场所。级试验动物场所。3、隔离环境隔离环境洁净度相当于洁净度相当于100级。人不能级。人不能直接接触动物。进入隔离系统内动物和物品直接接触动物。进入隔离系统内动物和物品都要经过严格都要经过严格净化和灭菌处理。是喂养净化和灭菌处理。是喂养SPF级悉生动物及无菌动物场所。级悉生动物及无菌动物场所。第10页以落下菌（非致病菌）为指标进行颗粒物污染测定：以落下菌（非致病菌）为指标进行颗粒物污染测定：按按5-10m2面积范围，距地面面积范围，距地面1m处放置处放置1只直径只直径9cm平皿（内置平皿（内置8-10ml血液琼脂），平放血液琼脂），平放30分分钟，经钟，经3748h培养，菌落计数应培养，菌落计数应30个个/皿。皿。落下菌数：落下菌数：普通动物普通动物30个；个；SPF动物动物3个；个；无菌动物无菌动物0第11页不一样试验动物设施环境级别对应于不一样试验动物设施环境级别对应于不一样动物级别，二者对应关系见下表不一样动物级别，二者对应关系见下表动物级别和洁净度对应关系动物级别和洁净度对应关系 动动物物级别级别 环环境境级别级别（洁净洁净度，落下菌）度，落下菌）普通普通动动物物 开放系开放系统统（3030个个/皿）皿）SPFSPF动动物物 屏障系屏障系统统（万（万级级，3 3个个/皿）皿）无菌无菌动动物或悉生物或悉生动动物物 隔离系隔离系统统（百（百级级，0 0个个/皿）皿）第12页试验动物和动物试验设施、设备进展试验动物和动物试验设施、设备进展1.动物繁育、喂养设施、设备改变动物繁育、喂养设施、设备改变v瓦罐瓦罐瓷瓷罐罐塑料盒塑料盒+不锈钢笼架不锈钢笼架v开开放放环环境境屏屏障障屏屏障障隔隔离离环环境境（正正压压）感感染染动动物物试验室（负压）试验室（负压）v屏障环境形式有：单走廊屏障环境形式有：单走廊 双走廊双走廊 三走廊（全新三走廊（全新风、部分新风）风、部分新风）v设备改变：平板笼架设备改变：平板笼架层流架层流架独立通气笼盒系统独立通气笼盒系统（IndividuallyVentilatedCagesIVC.）感染动感染动物笼盒物笼盒（全封闭、负压、外排双高效串连过滤）（全封闭、负压、外排双高效串连过滤）第13页2医学动物试验室种类、设计及使用要求医学动物试验室种类、设计及使用要求动物试验室种类：动物试验室种类：v用用途途（教教学学、科科研研、生生产产）试试验验种种类类（急急性性、慢慢性）性）v动动物物质质量量（CV、CL、SPF、GF）对对人人危危害害（无无害、有害）害、有害）气流方向（正压、负压）气流方向（正压、负压）v设计标准：小型（分体群控）、实用、方便、达标设计标准：小型（分体群控）、实用、方便、达标v设计依据：国家标准（设计依据：国家标准（GB14925-）第14页屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障环境动物试验室要求：屏障环境动物试验室要求：人人流流、物物流流、气气流流要要求求：单单向向、合合理理（防防止止交交叉叉污污染）染）人人流流（一一更更淋淋浴浴二二更更风风淋淋清清洁洁走走廊廊清清洁洁物品物品库库试验室或喂养室试验室或喂养室次清次清洁走廊洁走廊一更）一更）物物流流（外外准准备备室室 传传递递窗窗或或渡渡槽槽清清洁洁物物品品库库试验室或喂养室试验室或喂养室次清次清洁走廊）洁走廊）气气流流（清清洁洁物物品品库库清清洁洁走走廊廊试试验验室室次次清清洁洁走走廊）廊）第15页屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障系统试验动物环境设施基本要求动物及物品灭菌方法动物及物品灭菌方法动物：合格包装动物：合格包装传递窗（紫外）传递窗（紫外）进入进入饮饮水水：高高压压灭灭菌菌（12130分分钟钟）或或超超滤滤+酸化（酸化（PH3.0）进入进入笼笼盒盒及及饲饲料料：高高压压灭灭菌菌（1314分分钟钟）或或渡渡槽槽（传递窗）进入。（传递窗）进入。试验器具：试验器具：渡槽或渡槽或传递窗传递窗进入进入屏障环境技术参数动态监控屏障环境技术参数动态监控第16页屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障系统试验动物环境设施基本要求v最适宜温度：最适宜温度：20-25，温差：，温差：3或或4v适宜相对湿度：适宜相对湿度：40-70%v换气次数：换气次数：10-20次次/小时，洁净程度越高，要求换气次小时，洁净程度越高，要求换气次数越多。数越多。v气流速度：气流速度：0.1-0.2m/s。v压强梯度：洁净区高于污染区，每级压差压强梯度：洁净区高于污染区，每级压差20-50Pa。合。合理组织气流和风速可调整室内温度和湿度，又可降低室理组织气流和风速可调整室内温度和湿度，又可降低室内粉尘和有害气体污染，控制传染病流行。内粉尘和有害气体污染，控制传染病流行。第17页屏障系统试验动物环境设施基本要求屏障系统试验动物环境设施基本要求v光照：工作照度光照：工作照度150-300lx,动物照度动物照度18-30lx，明暗，明暗交替时间交替时间12/12或或10/14。v噪声：噪声：60dB以下，防止高频率噪声和超声波干扰。以下，防止高频率噪声和超声波干扰。v氨浓度：小于氨浓度：小于14/m3。v动物环境设施指标应符合动物环境设施指标应符合GB14925-要求：见下表要求：见下表1、2第18页表表1试验动物繁育、生产设施环境指标（静态）试验动物繁育、生产设施环境指标（静态）项项目目指指标标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪犬、猴、猫、小型猪鸡鸡普通普通环环境境屏障屏障环环境境隔离隔离环环境境普通普通环环境境屏障屏障环环境境隔离隔离环环境境屏障屏障环环境境温度，温度，1818292920202626161628282020262616162828日温差，日温差，-4 4-4 44 4相相对对湿度，湿度，%40407070换换气次数，次气次数，次/h/h8 81010101020201 1202050502 28 81010101020201 1202050502 2101020202 2气流速度，气流速度，m/sm/s0.10.10.20.2压压强强梯度，梯度，P Pa a-202050502 2100100150150-202050502 2100100150150202050502 2空气空气洁净洁净度，度，级级-1000010000100100-10000100001001001000010000落下菌数，个落下菌数，个/皿皿 30303 3无无检检出出30303 3无无检检出出3 3氨氨浓浓度，度，mg/mmg/m3 31414噪声，噪声，dB dB 6060光照光照工作照度工作照度150150300300动动物照度物照度151520201001002002005 51010昼夜明暗交替昼夜明暗交替时间时间，h h12/1212/12或或10/1410/14v注：表中氨浓度指标为动态指标。v普通采取全新风，确保动物室有足够新鲜空气。假如先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体，不排除使用循环空气可能，但再循环空气仅限于同一单元，新鲜空气不得少于50%。并确保供风温、湿度参数。v单走廊设施必须确保饲育室、试验室压强最高。第19页表表2动物试验设施（设备动物试验设施（设备3）环境指标（静态）环境指标（静态）项项目目指指标标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪犬、猴、猫、小型猪鸡鸡普通普通环环境境屏障屏障环环境境隔离隔离环环境境普通普通环环境境屏障屏障环环境境隔离隔离环环境境屏障屏障环环境境温度，温度，1919262620202525161626261818222216162626日温差，日温差，4 43 34 43 33 3相相对对湿度，湿度，%40407070换换气次数，次气次数，次/h/h8 81010101020201 1202050502 28 81010101020201 1202050502 2101020202 2气流速度，气流速度，m/sm/s0.10.10.20.2压压强强梯度，梯度，P Pa a-202050502 2100100150150-202050502 21001001501501001001501502 2空气空气洁净洁净度，度，级级-1000010000100100-1000010000100100100100落下菌数，个落下菌数，个/皿皿 30303 3无无检检出出30303 3无无检检出出无无检检出出氨氨浓浓度，度，mg/mmg/m3 31414噪声，噪声，dB dB 6060光照光照工作照度工作照度150150300300动动物照度物照度151520201001002002005 51010昼夜明暗交替昼夜明暗交替时间时间，h h12/1212/12或或10/1410/14v注：表中氨浓度指标为动态指标。v普通采取全新风，确保动物房有足够新鲜空气。假如先期去除了粉尘颗粒物和有毒有害气体，不排除使用循环空气可能，但再循环空气应取自于无污染区域或同一单元，新鲜空气不得少于50%。并确保供风温、湿度参数。v单走廊设施必须确保饲育室、试验室压强最高。v此处动物试验设备系指动物喂养和试验时，保障动物所处局部环境应抵达本环境指标设备。第20页试验动物级别试验动物级别v一级动物一级动物（普通动物普通动物）不携带主要人畜共患病和动）不携带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原。物烈性传染病病原。v二级动物二级动物（清洁动物清洁动物，国际上无此等级）除不能携，国际上无此等级）除不能携带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原外，不能带主要人畜共患病和动物烈性传染病病原外，不能携带对动物危害大和对科研干扰大病原。携带对动物危害大和对科研干扰大病原。v三级动物三级动物（SPF级级，无特定病原体动物）除一、二，无特定病原体动物）除一、二级动物应排除病原外，不携带主要潜在感染或对科级动物应排除病原外，不携带主要潜在感染或对科研干扰大病原。研干扰大病原。v四级动物四级动物（无菌动物无菌动物）不携带可检出一切病原体。）不携带可检出一切病原体。悉生动物则是在无菌动物物体内移入一个或几个已悉生动物则是在无菌动物物体内移入一个或几个已知微生物后动物。知微生物后动物。第21页因为试验动物常采取群体因为试验动物常采取群体喂养，易造成动物疾病暴喂养，易造成动物疾病暴发和流行。造成动物传染发和流行。造成动物传染病流行病原各种多样，有病流行病原各种多样，有病原宿主广泛，属人畜共病原宿主广泛，属人畜共患病，可同时引发人和动患病，可同时引发人和动物疾病，就更具危险性。物疾病，就更具危险性。严格试验动物管理制度，严格试验动物管理制度，预防在先，杜绝人和动物预防在先，杜绝人和动物间疾病传输根本确保。间疾病传输根本确保。包含包含：1、保障试验动物室、保障试验动物室生物安全基本办法生物安全基本办法2、试验动物检疫和、试验动物检疫和疾病控制及处理疾病控制及处理3、试验动物室消毒、试验动物室消毒办法办法第22页1、保障试验动物室生物安全基本办法、保障试验动物室生物安全基本办法v(1)试验动物设施为试验动物设施为单独单独区域，与办公和其它试验区域，与办公和其它试验场所分开。场所分开。v(2)工作人员应经过工作人员应经过培训培训。取得。取得上岗证上岗证。v(3)含有一定规模试验动物室建筑，周围最少应有含有一定规模试验动物室建筑，周围最少应有20m卫生卫生间隔间隔区。不一样种属、不一样品系、不一区。不一样种属、不一样品系、不一样起源动物必须样起源动物必须分室分室喂养，不一样对象、不一样内喂养，不一样对象、不一样内容试验分室进行。各室之间定向气流容试验分室进行。各室之间定向气流不能交叉不能交叉循环。循环。v(4)定时检测定时检测，更换高、中、低效滤膜，保持系统处，更换高、中、低效滤膜，保持系统处于良好状态。于良好状态。第23页v（5）选取具备有效试验动物生产）选取具备有效试验动物生产许可证书许可证书动物。动物。v（6）动物、工作人员、物品）动物、工作人员、物品分别进入分别进入屏障及隔离系屏障及隔离系统，并只能由统，并只能由洁净度高区域向洁净度低洁净度高区域向洁净度低区域定向移区域定向移动。房间随时关门。动。房间随时关门。工作人员工作人员更换工作服、鞋、戴帽、手套、口罩、风更换工作服、鞋、戴帽、手套、口罩、风淋后方可进入。淋后方可进入。动物动物由动物传递窗，外包装经紫外线照射或喷洒消由动物传递窗，外包装经紫外线照射或喷洒消毒液后传入，入室后检疫毒液后传入，入室后检疫3-7天。天。全部全部样品、饲料（钴样品、饲料（钴60照射）照射）经槽或渡传递窗经槽或渡传递窗紫外紫外线照射或喷洒消毒液后传入。线照射或喷洒消毒液后传入。非试验用具非试验用具（如食物、饮水、香烟和手机等）一律（如食物、饮水、香烟和手机等）一律不得带入动物试验室。不得带入动物试验室。第24页v(7)器具、饮水瓶、垫料等须经高压器具、饮水瓶、垫料等须经高压灭菌灭菌后方后方可使用。动物饮水、屏障系统内使用灭菌水。可使用。动物饮水、屏障系统内使用灭菌水。v(8)每七天更换笼具、饮用水两次。用过器具每七天更换笼具、饮用水两次。用过器具及时及时清洗清洗并高压并高压消毒消毒。试验结束后及时清洗。试验结束后及时清洗并消毒。并消毒。v(9)按按操作规程操作规程抓持、固定动物，试验操作。抓持、固定动物，试验操作。v(10)设置安全出口、出口设置安全出口、出口指示指示、灭火器械。、灭火器械。配置应急洗眼器。配置应急洗眼器。v(11)废弃物废弃物由污物走廊传出。专门放在指定由污物走廊传出。专门放在指定位置统一处理。位置统一处理。第25页2、试验动物检疫和疾病控制及处理、试验动物检疫和疾病控制及处理v（1）凡外来试验动物最少经过）凡外来试验动物最少经过37天天隔离检疫隔离检疫。v（2）试验和研究开始前）试验和研究开始前,要确实确保动物无任何疾要确实确保动物无任何疾病，并确保动物防止可影响研究目标及实施原因。病，并确保动物防止可影响研究目标及实施原因。v（3）动物发生疾病）动物发生疾病死亡死亡应及时进行病理尸检或其它应及时进行病理尸检或其它试验室检验，作出诊疗，提出试验室检验，作出诊疗，提出处理处理意见。当动物发意见。当动物发生生传染病传染病时，标准上全部时，标准上全部销毁销毁。试验室、用具、笼。试验室、用具、笼架、垫料、衣帽等必须进行架、垫料、衣帽等必须进行彻底消毒彻底消毒。动物室消毒。动物室消毒后后封锁封锁一段时间一段时间,经检测合格才能使用。要及时经检测合格才能使用。要及时汇报汇报试验室责任人或上级主管部门。试验室责任人或上级主管部门。第26页v（4）试验动物发生）试验动物发生烈性传染病烈性传染病流行时，应马流行时，应马上上上报上报试验动物检定机构，同时采取严格试验动物检定机构，同时采取严格隔隔离消毒离消毒办法，以免传染病蔓延。办法，以免传染病蔓延。v（5）尸体处理尸体处理：尸体处理普通要求：尸体处理普通要求焚烧焚烧，深，深埋，大型动物可消毒加工后利用。埋，大型动物可消毒加工后利用。第27页3、试验动物室消毒办法、试验动物室消毒办法v动物试验室普通日常清洁消毒制度可结合各动物试验室普通日常清洁消毒制度可结合各试验室不一样硬件，但都应满足动物级别和试验室不一样硬件，但都应满足动物级别和洁净度基本要求。洁净度基本要求。第28页二、动物试验室产生生物危害起源：二、动物试验室产生生物危害起源：v动物生物安全试验室是一个特殊经过人工或自然感动物生物安全试验室是一个特殊经过人工或自然感染进行动物感染试验试验室。染进行动物感染试验试验室。v第一、动物性气溶胶第一、动物性气溶胶（AnimalAerosol）产生：感）产生：感染动物在观察喂养期间，它们在呼吸、排泄、抓咬、染动物在观察喂养期间，它们在呼吸、排泄、抓咬、挣扎、逃逸、跳跃时，在更换垫料、饲料，进行感挣扎、逃逸、跳跃时，在更换垫料、饲料，进行感染接种时，在尸体剖检、病理组织、排泄物处理等染接种时，在尸体剖检、病理组织、排泄物处理等过程中会大量产生传输过程中会大量产生传输危害性极大危害性极大动物性气溶胶。动物性气溶胶。所以所以对气溶胶生物安全防护对气溶胶生物安全防护，应该是动物试验室建，应该是动物试验室建设中设中关键关键。第29页第二、试验动物尤其是试验用动物(Experjmental animals)本身可能患有能感染人人畜共患病（zoonotic Disease）。病比如下：第30页v动物试验室出现这两大危害有力说明：动物试验室动物试验室出现这两大危害有力说明：动物试验室不论在操作技术规范制订，个人安全防护设备设置，不论在操作技术规范制订，个人安全防护设备设置，以及试验室设施设计和建设上，都有很大特点和特以及试验室设施设计和建设上，都有很大特点和特殊要求。殊要求。第一个危害要用试验室设施（二级隔离）来防范第一个危害要用试验室设施（二级隔离）来防范，经，经过静态隔离（负压梯度）动态隔离和排风处理过静态隔离（负压梯度）动态隔离和排风处理（HEPA过滤）等办法，把产生动物性气溶胶牢牢过滤）等办法，把产生动物性气溶胶牢牢地控制在污染区内，确保不向外环境扩散地控制在污染区内，确保不向外环境扩散。第二种危害，则要用安全防护设备（一级隔离）和其第二种危害，则要用安全防护设备（一级隔离）和其它个人防护设备它个人防护设备（personnelprotectiveEquipmentPPES）来预防病原微生物对试验人员）来预防病原微生物对试验人员感染。感染。第31页三、动物生物安全试验室设施与防护要求：三、动物生物安全试验室设施与防护要求：v生物安全动物试验室设计标准就是要做到生物安全动物试验室设计标准就是要做到三保护：三保护：保护人、保护环境和保护试验动物。保护人、保护环境和保护试验动物。保护人员保护人员免受相关危害。如感染、过敏、中毒或被免受相关危害。如感染、过敏、中毒或被动物抓挠撕咬等；动物抓挠撕咬等；保护动物保护动物即确保试验动物即确保试验动物质量质量和确保和确保人道主义使用人道主义使用试验动物；试验动物；保护环境保护环境即确保室内空气、污水及废弃物（垫料、即确保室内空气、污水及废弃物（垫料、粪便、动物组织、动物尸体）等不污染室外环境。粪便、动物组织、动物尸体）等不污染室外环境。v为到达三保护标准，生物安全动物试验室主要经过为到达三保护标准，生物安全动物试验室主要经过设施设施（Facilities）、）、设备设备（Equipment）、）、人员人员及素质及素质（trainedpersonal）、）、标准操作程序标准操作程序等等有效结合加以实现。有效结合加以实现。第32页（一）试验动物护理和使用标准（一）试验动物护理和使用标准v1、试验动物、试验动物喂养和使用喂养和使用应应恪守恪守国家相关国家相关法律法律和法规和法规要求。要求。v2、应、应明确明确使用试验动物使用试验动物理由和目标理由和目标。v3、明确明确试验所使用动物试验所使用动物种类和数量种类和数量，动物数，动物数量应满足统计学要求。量应满足统计学要求。第33页v4、完善、完善标准操作规程标准操作规程，防止或减轻因试验对动物造，防止或减轻因试验对动物造成不适和痛苦。成不适和痛苦。v5、严格按标准操作程序、严格按标准操作程序实施试验后动物处理实施试验后动物处理。v6、试验过程中要求确保试验动物、试验过程中要求确保试验动物良好生活条件良好生活条件。v7、研究人员和试验动物操作人员应接收试验动物基、研究人员和试验动物操作人员应接收试验动物基本知识和操作技能等方面本知识和操作技能等方面培训培训。v8、使用过程中要求确保周围、使用过程中要求确保周围环境和环境和试验试验人员安全人员安全。第34页（二）动物试验过程（活动）行为规范（二）动物试验过程（活动）行为规范：1、物理限制、物理限制物理限制是指在试验过程中（包含检验、搜集标本、物理限制是指在试验过程中（包含检验、搜集标本、给药、治疗或试验操作等），用手或工具给药、治疗或试验操作等），用手或工具限制动物限制动物活动过程活动过程。主要标准和要求包含：。主要标准和要求包含：v不能不能作为作为常规常规喂养工具；喂养工具；v工具设计应工具设计应合理合理；v尽可能尽可能降低降低限制限制时间时间，v在限制过程中，假如发生损伤或严重行为改变，在限制过程中，假如发生损伤或严重行为改变，应应暂停或禁止暂停或禁止限制，并给与处理或治疗。限制，并给与处理或治疗。v确保确保试验人员和周围人员试验人员和周围人员安全安全。第35页2、手术操作、手术操作v操作操作一定要使用一定要使用适当适当镇静、镇痛或麻醉方镇静、镇痛或麻醉方法；法；v禁止禁止无须要无须要重复操作；重复操作；v不提倡不提倡利用一个动物进行利用一个动物进行多个手术多个手术试验；试验；v严格试验操作规程严格试验操作规程，预防发生血液，预防发生血液/体液外体液外溅和刺伤，防止生物污染；溅和刺伤，防止生物污染；v手术后动物、标本以及所用器具材料等必手术后动物、标本以及所用器具材料等必须按照要求程序须按照要求程序妥善处置妥善处置。第36页3、饮食限制、饮食限制v啮齿类试验动物标准上要求自由啮齿类试验动物标准上要求自由自由摄食或饮水；自由摄食或饮水；v假如一些试验需要动物限制食物或水摄入量，应确假如一些试验需要动物限制食物或水摄入量，应确保动物存活所需要保动物存活所需要最低需求量最低需求量。v对于水分限量摄入，一定要对于水分限量摄入，一定要预防预防动物发生动物发生脱水脱水现象。现象。v保持动物保持动物膳食平衡膳食平衡。第37页4、废弃物和尸体处理、废弃物和尸体处理v血液和体液标本处理血液和体液标本处理：用于抗体、抗原、病原微：用于抗体、抗原、病原微生物、生化指标等检验血液和体液，按照要求进行生物、生化指标等检验血液和体液，按照要求进行处理并检测，处理并检测，检测后检测后标本经标本经121，30min高压灭高压灭菌处理。菌处理。v动物组织脏器处理动物组织脏器处理：动物器官组织，尤其是用于：动物器官组织，尤其是用于病原微生物分离组织按照标准程序进行处理；用于病原微生物分离组织按照标准程序进行处理；用于病理切片组织，均需经过甲醛固定后再进行切片。病理切片组织，均需经过甲醛固定后再进行切片。剩下剩下组织经组织经121，30min高压灭菌处理。高压灭菌处理。第38页v动物尸体处理动物尸体处理：安乐死后动物：安乐死后动物尸体尸体，取材完成，取材完成，经经121，30min高压灭菌处理后，集中送环境保高压灭菌处理后，集中送环境保护部门处理。护部门处理。朊病毒感染动物处理标准参见其它相朊病毒感染动物处理标准参见其它相关内容关内容。动物生物安全三级（。动物生物安全三级（animalbiosafetylevel3，ABSL-3）试验室）试验室及以上级及以上级试验室感染动试验室感染动物尸体需经物尸体需经室内和双扉两道高压灭菌室内和双扉两道高压灭菌，才能移出试，才能移出试验室。验室。v动物咽拭子处理动物咽拭子处理：用于病原分离和：用于病原分离和PCR检测咽拭检测咽拭子，按照各自要求处理后，进行病毒分离和子，按照各自要求处理后，进行病毒分离和PCR检检测，测，剩下剩下标本经标本经121，30min高压消毒处理。高压消毒处理。v病原分离培养物处理病原分离培养物处理：病原分离培养物，不论是：病原分离培养物，不论是阳性还是阴性结果，均需经阳性还是阴性结果，均需经121，30min高压消高压消毒处理。毒处理。第39页（三）、试验动物使用程序和要求（三）、试验动物使用程序和要求1、试验动物基本使用程序和要求、试验动物基本使用程序和要求v（1）试验室如需要使用试验动物，应首先向生物安）试验室如需要使用试验动物，应首先向生物安全和伦理委员会提出全和伦理委员会提出申请申请，填写申请表；，填写申请表；v（2）使用试验室得到）使用试验室得到认可认可后，依据申请中申请动物后，依据申请中申请动物种属和数量，安排试验动物喂养和使用；种属和数量，安排试验动物喂养和使用；v（3）试验动物试验动物必须在指定区域内喂养和使用，试验必须在指定区域内喂养和使用，试验操作结束时，动物须返回指定喂养区域内，不能在操作结束时，动物须返回指定喂养区域内，不能在试验室内过夜。试验室内过夜。v（4）动物试验动物试验应在试验室内指定区域进行。应在试验室内指定区域进行。第40页2、含有感染性材料动物试验要求、含有感染性材料动物试验要求 v（1）包括感染性材料操作要在）包括感染性材料操作要在生物安全柜生物安全柜中进行，中进行，并预防泄露在安全柜底面；并预防泄露在安全柜底面；v（2）动物笼具在清洗前）动物笼具在清洗前先做去除污染处理先做去除污染处理；v（3）污物、一次性物品需放入医疗）污物、一次性物品需放入医疗废物废物专用垃圾袋专用垃圾袋中，经高压中，经高压灭菌灭菌后方可拿出试验室；后方可拿出试验室；v（4）动物）动物尸体尸体用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，用双层医疗废物专用垃圾袋包裹后，放入标有动物尸体专用容器中，用放入标有动物尸体专用容器中，用消毒液喷雾容器消毒液喷雾容器表面表面后处理。后处理。v（5）生物安全柜生物安全柜每次使用后应该每次使用后应该消毒消毒。第41页2、含有感染性材料动物试验要求、含有感染性材料动物试验要求 v（6）废液废液需按百分比倒入有需按百分比倒入有消毒消毒液桶中，倒入时需液桶中，倒入时需沿容器壁轻倒沿容器壁轻倒,应戴眼罩，预防溅入眼中；应戴眼罩，预防溅入眼中；v（7）假如有）假如有感染性物质感染性物质溅到生物安全柜上、地上以溅到生物安全柜上、地上以及其它地方，应按及其它地方，应按“菌（毒）外溢在台面、地面和菌（毒）外溢在台面、地面和其它表面其它表面”处理处理；v（8）天天）天天工作结束工作结束时，应用时，应用消毒消毒液擦拭门把手和地液擦拭门把手和地面等表面区域。面等表面区域。v（9）废物废物放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条，放入高压灭菌器内时需同时粘贴指示条，物品移出前观察指示条是否到达物品移出前观察指示条是否到达灭菌灭菌要求。颜色不要求。颜色不符时需重复高压灭菌。符时需重复高压灭菌。v（10）高压灭菌器需）高压灭菌器需每个月做灭菌测试每个月做灭菌测试一次，并作一次，并作统计统计。第42页3、小动物喂养、小动物喂养 小动物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动小动物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等啮齿类动物，其喂养应遵照以下物，其喂养应遵照以下标准标准：v（1）使用动物）使用动物检验合格检验合格，充分准备后进入系，充分准备后进入系统，喂养人员应按试验设施要求程序要求进统，喂养人员应按试验设施要求程序要求进入系统；入系统；v（2）及时观察及时观察动物饮食、精神情况，有没有动物饮食、精神情况，有没有异常表现，患病或死亡；异常表现，患病或死亡；v（3）动物应可自由进食、饮水，同时）动物应可自由进食、饮水，同时确保确保其其它它喂养条件完备喂养条件完备。第43页4、大动物喂养、大动物喂养 大动物主要指犬、猪及非人类灵长类动物等，大动物主要指犬、猪及非人类灵长类动物等，其喂养应遵照以下其喂养应遵照以下标准标准：v(1)使用动物使用动物检验合格检验合格，按，按检疫检疫要求充分准备要求充分准备后方可进入动物试验室；后方可进入动物试验室；v(2)应将每只动物日摄取总量应将每只动物日摄取总量分批次分批次喂给，以喂给，以确保动物进食量和降低浪费；确保动物进食量和降低浪费；v(3)应经常应经常检验检验饮水装置，及时补充不足。饮水装置，及时补充不足。第44页4、大动物喂养、大动物喂养v(4)动物喂养区域应天天清扫，保持动物喂养区域应天天清扫，保持清洁清洁，每，每七天将地面七天将地面消毒消毒3次；次；v(5)喂给瓜果、蔬菜等须喂给瓜果、蔬菜等须洗净消毒洗净消毒，禁止喂给，禁止喂给腐烂发霉不洁食物，饮水要清洁。腐烂发霉不洁食物，饮水要清洁。v(6)对饲喂动物所用小推车、食物容器、水容对饲喂动物所用小推车、食物容器、水容器等器等用具用具每七天进行两次每七天进行两次消毒消毒。v(7)室内光照室内光照，要求明暗各，要求明暗各12h自动交替（开自动交替（开灯灯12h，关灯，关灯12h）。）。第45页5、动物检疫、动物检疫 v（1）试验动物）试验动物进入检疫室进入检疫室；v（2）依据要求进行）依据要求进行检疫检疫；v（3）各动物）各动物检疫期检疫期不一样，大动物为不一样，大动物为2周，周，小动物为小动物为1周；周；v（4）在检疫期内）在检疫期内观察观察动物精神状态、食欲、动物精神状态、食欲、营养情况、排泄物等，如有任何营养情况、排泄物等，如有任何异常异常，动物，动物不得用于试验，应不得用于试验，应退出退出动物检疫室；动物检疫室；v（5）检疫）检疫合格合格动物经适当处理后由缓冲间或动物经适当处理后由缓冲间或物流通道进入动物试验室。物流通道进入动物试验室。第46页6、动物试验相关操作、动物试验相关操作v（1）投药投药：依据试验要求，按不一样动物，不一样路径给：依据试验要求，按不一样动物，不一样路径给药。主要包含药。主要包含灌胃和静脉注射灌胃和静脉注射。大动物大动物，将动物，将动物麻醉麻醉后方可后方可进行灌胃或静脉注射。进行灌胃或静脉注射。小动物小动物可可依据情况依据情况选择是否麻醉，静选择是否麻醉，静脉注射时需使用固定器。脉注射时需使用固定器。v（2）采样采样：标准上：标准上活检活检时应对动物进行时应对动物进行麻醉麻醉。大动物进行。大动物进行采血或体检时，要求将动物麻醉。对小动物进行采血时，可采血或体检时，要求将动物麻醉。对小动物进行采血时，可不麻醉动物，但要预防动物咬抓。不麻醉动物，但要预防动物咬抓。v（3）标本）标本运输运输：要求用：要求用防渗漏防渗漏容器装标本。容器应确保容器装标本。容器应确保密密封封。将大、小动物标本从试验室。将大、小动物标本从试验室传出传出应应严格按照严格按照相关相关要求要求程程序执行。序执行。v（4）送检单填写送检单填写：送检单应包含送检目标，送检物品，送：送检单应包含送检目标，送检物品，送检单位，送检人，送检日期，联络方式等内容。检单位，送检人，送检日期，联络方式等内容。第47页四、各级动物生物安全防护四、各级动物生物安全防护试验室设施与防护要求试验室设施与防护要求v（一）一级动物生物安全（一）一级动物生物安全（ABSL-1）试验室）试验室v（二）二级动物生物安全（二）二级动物生物安全（ABSL-2）试验室）试验室v（三）三级动物生物安全（三）三级动物生物安全（ABSL-3）试验室）试验室v（四）四级动物生物安全（四）四级动物生物安全（ABSL-4）试验室）试验室第48页v为了预防感染病原微生物动物试验室为了预防感染病原微生物动物试验室,可能对可能对观察试验动物人员以及其它试验室造成污染，观察试验动物人员以及其它试验室造成污染，要求这类动