生物安全防护省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

生生物物安安全全概概要要姚振江姚振江流行病与卫生统计学系流行病与卫生统计学系广东药学院广东药学院1第1页以前试验室.现在试验室对个人防护有了新要求.2第2页生物安全概要生物安全概要介绍试验室内感染生物危害分类感染/生物危害控制溢出响应生物医学废弃物处理总结3第3页什么是生物安全什么是生物安全?从业人员处理生物危害材料时办法，以防止感染自己、他人或环境达到此目主要通过：工程学控制行政管理控制操作与规程个体防护设备4第4页什么是生物危害什么是生物危害?比如：病毒、细菌、真菌和寄生虫以及他们毒素血液和体液,还有些人和动物组织 变异细胞系和一些特定类型核酸 是由生物或者此种生物产生物质引发对人、动是由生物或者此种生物产生物质引发对人、动物或环境含有潜在威胁物或环境含有潜在威胁5第5页为何我们关注生物危害物质？为何我们关注生物危害物质？可能取得试验室感染可能取得试验室感染(LAI)环境污染环境污染造成研究污染造成研究污染公众知晓公众知晓6第6页试验室感染试验室感染传输路径传输路径易感宿主易感宿主感染源感染源经皮接种吸入气溶胶粘膜接触食入培养物和储存物研究动物标本免疫系统免疫情况年纪7第7页只有只有20%可查到原因可查到原因80%是由人为错误造成20%是因为设备故障造成排在前排在前4位造成感染事故位造成感染事故溢出或溅出注射器及针尖锐物体，碎玻璃动物或体外寄生虫抓伤或咬伤试验室感染试验室感染8第8页试验室感染试验室感染谁什么哪里何时怎样研究者SARS台湾12月微生物学家西尼罗病毒美国8月划伤试验室工作人员流脑美国气溶胶?试验室工作人员牛痘病毒欧洲接触9第9页19791999年间试验室相关感染（年间试验室相关感染（LAI）统计）统计试验室感染试验室感染10第10页暴露风险暴露风险相关病原体体液类型暴露路径暴露连续时间暴露过程中血液量此次暴露病毒浓度个人保护设备使用11第11页假如发生了暴露或可能发生了暴露假如发生了暴露或可能发生了暴露开始抢救通知你管理者或指定人向医院急诊部门或大学卫生服务部门汇报向职业卫生、伤残和死亡办公室汇报（电话或网络）12第12页全方面预防全方面预防预防血传病原体传输最简单行之有效方法预防血传病原体传输最简单行之有效方法 包含包含:教育教育洗手洗手穿防护设备穿防护设备使用安全工作规程使用安全工作规程假如不能确保样品非感染性，按照感染性样品处理假如不能确保样品非感染性，按照感染性样品处理If samples cannot be guaranteed non-infective treat as infectious!13第13页生物危害分类生物危害分类常见病原体非传统病原体重组 DNA组织培养动物工作解剖标本14第14页BSL 4BSL 3BSL 2BSL 1_水平按箭头方向由低到高水平按箭头方向由低到高 微生物对人、动物、植物和微生物对人、动物、植物和/或环境危险性或环境危险性程序和设备需求程序和设备需求 围堵策略水平需求围堵策略水平需求 对人员、环境和小区保护程度对人员、环境和小区保护程度生物危害等级生物危害等级15第15页危险危险分组分组个体危险个体危险公众危险公众危险遏制遏制例子例子1LowLowLevel 1大肠杆菌 细杆菌2ModerateLimitedLevel 2 大肠杆菌 0157:H7,链球菌、沙门氏菌、腺病毒、肝炎病毒A、B、C，流感，麻疹。3HighLowLevel 3 炭疽杆菌，结核分支杆菌，汉坦病毒，HIV，黄热病度4HighHighLevel 4 拉沙病毒,埃博拉病毒,马尔堡病毒Unlikely to cause disease in healthy workers or animalsRarely cause serious human or animal diseaseMay cause serious diseaseLikely to cause very serious disease常见病原体等级常见病原体等级16第16页不常见病原体不常见病原体p传输性海绵体脑病阮病毒疾病；致死性神经变性传输性海绵体脑病阮病毒疾病；致死性神经变性情况情况庫賈氏病庫賈氏病,新型克雅氏病新型克雅氏病,疯牛病疯牛病,绵羊瘙痒病，绵羊瘙痒病，慢性消耗性疾病。慢性消耗性疾病。p对通常灭活病毒破坏方法产生抗性对通常灭活病毒破坏方法产生抗性p与危坏处理办公室接触以评定其需求（防护、程与危坏处理办公室接触以评定其需求（防护、程序、废弃物处理）序、废弃物处理）17第17页重组重组DNA危险级别依赖于DNA起源、载体及宿主 生物安全委员会将帮助研究者作出这方面判断遗传工程 =在体外将遗传物质从一个细胞参入到另一个细胞18第18页组织培养组织培养普通可能含有致病微生物潜在风险普通可能含有致病微生物潜在风险Level 2人和灵长类含有支原体细胞系当使用新细胞系时要进行详细评定其它Level 119第19页动物工作动物工作动物可储存感染性微生物（自然或引进）等级基于所从事工作类型对全部从事动物工作人员都需要进行专门动物照料培训全部工作包含动物使用必须得到动物委员会许可20第20页解剖标本解剖标本全部 标本都应考虑其可能存在感染性微生物考虑标本类型尤为主要血液,器官,组织脊髓,脑组织来自于感染病人普通而言，生物2级仅仅依据于其工作特征21第21页感染感染/生物危害控制生物危害控制工程控制工程控制管理控制管理控制实践与操作实践与操作个人防护设备个人防护设备22第22页工程控制工程控制在技术层面上,经过改变危害起源以降低 或根除危害暴露防护:一道 vs二道 防护水平23第23页第一道防护（一级屏障）第一道防护（一级屏障）确保工作人员和直接环境免受感染性微生物暴露保护性外壳 封闭感染性微生物或动物培养皿,玻璃罐,瓶塞等生物安全柜，手套箱和动物笼等装备 控制效果取决于防护完整性控制效果取决于防护完整性24第24页第二道防护（二级屏障）第二道防护（二级屏障）保护试验室外环境免遭暴露包含试验室设计和规章制度25第25页生物安全防护水平生物安全防护水平防护水平与危险水平相同生物安全委员会将对研究提案进行评定以确保防护水平恰当。一级 二级 三级 四级26第26页一级水平一级水平 最基本试验室不需要尤其设计特征不需要生物安全柜可在开放试验台上进行工作27第27页二级水平二级水平 含有生物危害2级临床、诊疗、研究和教学部门假如含有气溶胶或溅出潜在风险，需要一级或二级生物安全柜必须制订处理溢出应急方案使用权应加以控制28第28页专门设计和建造一级屏障保护个体二级屏障保护环境全部工作人员必须进行专门培训：病原微生物使用，个人防护设备，设备、废弃物处理，还有实践与操作三级水平三级水平 安全柜：安全柜：安全柜：安全柜：型型(全密封型全密封型)29第29页四级水平四级水平在一个国家普通只有一个设计规范异常严格，工作人员完全与感染性材料隔离30第30页31第31页32第32页生物安全柜生物安全柜对生物病原物理防护有效方法，尤其当产生气溶胶时。高效分子空气过滤器能以99.97%效率去除颗粒（最小 0.3微米）有三个主要级别安全柜（I,II,III）能提供不一样水平保护。33第33页在生物安全柜内安全操作在生物安全柜内安全操作使用前使用前:确保生物安全柜经过检验关闭紫外灯，打开荧光灯用适宜消毒剂消毒工作台面将最基本条目放入安全柜在工作之前，让排风机运转 5-10 分钟34第34页使用中使用中:确保材料和器材放置在靠近安全柜内后部，尤其是产生气溶胶设备，不要阻挡通风口。使用技术降低飞溅和气溶胶产生。总工作流程应该是从清洁区域到污染区域。降低运动以免妨碍气流在生物安全柜内打开火焰存在着争议。在生物安全柜内安全操作在生物安全柜内安全操作35第35页使用后使用后:保持排风机工作最少5分钟以清洁安全柜移走和消毒用过器材和材料消毒安全柜台面关闭排风机和荧光灯，打开紫外灯。在生物安全柜内安全操作在生物安全柜内安全操作36第36页保养保养:2次/天-擦拭工作台面1次/周 擦拭紫外灯1次/月 擦拭全部垂直面1次/年 紫外灯强度验证-用甲醛气体去除沾染(ORM)-认证(ORM)在生物安全柜内安全操作在生物安全柜内安全操作37第37页行政管理控制行政管理控制危险评定医学监测培训/教育资源检验符号&标志依据程序、信息和方法将暴露危险降至最低38第38页风险评定风险评定确定防护种类,方法和所需安全设备使用者职责,能从ORM得到帮助考虑方面有:试验设计,方法,个人经验和知识情况等http:/www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf*行政管理控制行政管理控制39第39页医学监测医学监测 用医学方法监测环境污染对人类健康影响，观察人群健康水平和人体对环境污染生物学效应。培训培训&教育教育试验室专门政策和规程生物安全培训行政管理控制行政管理控制40第40页检验检验日常自查生物安全检验清单另外,检验试验室以确保其按照规程或 指导方针工作并提供反馈意见行政管理控制行政管理控制41第41页标识标识&标签标签生物危害标识必须粘贴在使用生物危害材料试验室门上生物危害标签应贴在使用生物病原容器、设备和储存装置上行政管理控制行政管理控制42第42页实践和规程实践和规程总安全指导方针好微生物学实践洗手专门规程离心机注射器、针头和其它尖锐物移液管混匀器、研磨器、超声破碎仪、冷冻真空干燥器接种环冷冻切片机43第43页普通试验室安全指导方针普通试验室安全指导方针基本常识,你必须了解你所面正确试验室危险，而且经过正确培训方便处理这些危险。最基本是知道全部试验危险举出5个例子?b i o s a f et y使用移液管和移液器使用接种环分离血清打开安瓶使用离心机44第44页良好微生物实践良好微生物实践(GMP)(GMP)基本使用标准适合用于全部微生物学试验工作目标预防试验室人员和环境被污染预防试验或样本被污染无菌操作、降低气溶胶产生、控制污染、个人防护、应急反应。45第45页洗手洗手预防感染单纯有效方法之一假如经常正确执行假如经常正确执行何时洗手？开始任何操作之前离开试验室之前当手有显著污物时在安全柜内完成任何试验之前和之后每次脱掉手套时在触及脸和嘴之前下班时Level 1 lab -a non antiseptic soap can be usedLevel 2 lab-requires antiseptic hand washing solutions46第46页安全使用离心机安全使用离心机使用前裂纹？过满？平衡？盖子或塞子安置正确？转速能到达？使用可封闭转子 使用后离心完全停顿？溢出或渗漏？使气溶胶沉降（30分钟）or 在生物安全柜内打开47第47页注射剂及针注射剂及针尽可能防止使用在生物安全柜内完成感染性材料操作使用注射器时小心抽吸保护从塞子退出针不要弄弯、切断或翻新针处理全部使用过针和注射器，将其放入黄色尖锐物体盛放器内48第48页移液管移液管禁用嘴吸移液管全部生物危害材料移液管都应在生物安全柜内使用。不要使液体溢出，使用移液管装置。防止飞溅，沿管壁将液体慢慢注入试管或瓶内不要用抽-吸混匀溶液。可再度使用移液管应水平放置在已消毒浅盘上49第49页混匀器、研磨器、超声破碎器和冷冻干燥器混匀器、研磨器、超声破碎器和冷冻干燥器尽可能地在BSC内操作，再打开前静置5分钟以使气溶胶沉降。安全地混匀不要用玻璃混匀罐使用后马上去除污染冷冻真空干燥器使用玻璃制造真空部件时，确保使用前无损坏。使用后全部表面都要消毒尽可能使用真空蒸发套50第50页接种环接种环在开放火焰上灭菌可能产生含有活微生物气溶胶柄越短，越能降低震动一次性塑料接种环是很好替换51第51页冷冻干燥器冷冻干燥器在准备冰冻切片时戴手套，当使用冷冻干燥器时戴厚手套。经常性去污(70%乙醇or 专门消毒剂)防范和上锁!52第52页个体防护设备个体防护设备个体防护设备是非常主要防护屏障，也是最终一道防护线监督者和使用者职责就是确保使用个体防护设备监督者和使用者职责就是确保使用个体防护设备护目镜手套试验室外衣 鞋 53第53页个体防护设备个体防护设备考虑标准阻断暴露路径提供保护级别轻易使用只有当正确选择、适合、小心使用和个体培训才能产生效果确保离开试验室前脱下个体防护设备54第54页个体防护设备个体防护设备鞋袜鞋袜应该穿包裹脚趾鞋，在一些较高级防护试验室和动物设施部门穿靴子。试验室外衣试验室外衣长袖达膝外衣有弹性袖口后背系带长大衣定时清洗55第55页个体防护设备个体防护设备手套手套对于从事生物病原人使用乳胶、腈、乙烯树脂材料手套测验手套不应再用，实用手套能消毒再用，假如它们没有变形征兆。考虑弹性和手掌长度双层手套危险处理办公室对那些含有过敏人提供帮助，找到替换材质手套。在公共场所不要带试验手套56第56页个体防护设备个体防护设备眼和脸防护眼和脸防护护目镜、安全眼镜能够保护眼睛面罩能够保护面部皮肤呼吸罩呼吸罩57第57页溢出溢出溢出反应不一样主要基于：溢出是什么？溢出多少？在哪里溢出?对环境潜在风险是什么？溢出物应该被马上清理（除非产生了气溶胶），确保正确去除污染方法确保恰当使用个体防护设备，去除设备轻易使用58第58页溢出溢出 普通清理普通清理用吸收性物质盖住溢出区域用恰当消毒剂（10%漂白剂）浸泡溢出区从吸收性物质外围向内倒消毒剂确保每个玻璃碎片都被捡起（用镊子！）并将其放入尖锐物品盛放器内。作用20-30分钟 擦拭掉吸收性物质废弃物应放入适当生物危害物品袋，方便高压灭菌处理 59第59页溢出溢出 特殊案例特殊案例在离心机内在生物安全柜内开放区域(试验室,再转送过程中)可用溢出响应方案在：http:/www.uottawa.ca/services/ehss/SPILLRESPONSEPLAN.pdf60第60页废弃物处理废弃物处理生物废弃物(未处理)61第61页废弃物处理废弃物处理生物废弃物生物废弃物 (已处理已处理)With H2O 1:10In compliance with Sewer use by-laws*62第62页特殊废弃物特殊废弃物EB（溴化乙锭）（溴化乙锭）(4.2 g亚硝酸钠(NaNO2)和20 ml 次磷酸(50%)(H3PO2)加蒸馏水至 300 ml）用蘸取清洗液纸巾清洗1次污染区，然后用纸巾蘸取自来水清洗5次，再用新纸巾擦拭1次，最终用紫外灯检测，以确保EB被完全去除。Recombinant DNA（重组（重组DNA）液体培养物必须加次氯酸钠至终浓度10%，作用最少5分钟，然后倒入下水道。63第63页总总 结结生物安全 确保个体和环境不受感染生物危害 微生物,血液和体液，组织和组织培养大学内每一个人都有职责大学内每一个人都有职责正确知识、计划和关注，生物暴露是可防止64第64页65第65页