专题2-微生物的培养与应用--练习及答案(B4).doc

专题二 微生物的培养与应用
一 选择题
1．在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为 ( )
A．鉴别培养基 B．固体培养基 C．选择培养基 D．液体培养基
2．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基 ( )
A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水
C．KH2PＯ4、Na2HPＯ4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水
D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
3．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比 ( )
A．比实际值高 B．比实际值低 C．和实际值一致 D．都有可能
4．用来判断选择培养基是否起到了选择作要设置的对照是( )
A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基
5．关于土壤取样的叙述，错误的是( )
A．应选取肥沃、湿润的土壤 B．先铲去表层土3cm左右，再取样
C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D．应在火焰旁称取土壤
6．关于微生物培养的叙述错误的是( )
A．细菌一般在30～37℃的温度下培养1～2d
B．放线菌一般在25～28℃的温度下培养5～7d
C．霉菌一般在25—28℃的温度下培养3～4d
D．不同种类的微生物，一般需要相同的培养温度和培养时间
7．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征。下列属于菌落特征的是( )
①菌落的大小 ②菌落的形状 ③菌落的隆起程度 ④菌落的颜色 ⑤菌落的透明度
A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②③④⑤
8.分离土壤中纤维素分解菌用到的方法( )
①稀释倒平板法 ②涂布平板法 ③单细胞挑取法 ④选择培养
A．①② B．②③④ Ｃ．②③ D．①③④
9．纤维素酶可以将哪种物质分解? ( )
A．牛肉片 B．鱼片 Ｃ．滤纸条 D．塑料条
10．寻找纤维素分解菌应到( )
A．富含无机盐的环境中 B．富含纤维素的环境中
Ｃ．湿润的环境中 D．池塘中
11．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是 ( )
A．乳酸菌 B．硝化细菌 C．分解尿素的细菌 D．分解纤维素的细菌
12．两种刚果红染色法的结果是( )
Ａ．均会出现透明圈 Ｂ．均不会出现透明圈
C．方法一出现，方法二不出现 D．方法一不出现，方法二出现
13．生活在反刍动物胃内的纤维素分解菌，其新陈代谢类型为( )
A．自养需氧型 B．异养厌氧型 C．异养需氧型 D．自养厌氧型
14．培养基为微生物的生长繁殖提供( )
A．水 B．碳源 C.氮源 D．水、碳源、氮源和无机盐等
15．将配制好的培养基进行灭菌应用( )
A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌 C．干热灭菌 D．煮沸灭菌
16．为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数? ( )
A．30～100 B．30～200 C．30～300 D．30～600
17．土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种 ( )
A．尿素酶 B．脲酶 C．蛋白酶 D．肽酶
18．能排除培养基是否有杂菌污染的方法是( )
A．将未接种的培养基放在窗台上培养
B．将未接种的培养基放在实验桌上培养
C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养
D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养
20．灭菌的标准是 ( )
A．使病原菌不生长 B．杀死所有的微生物
C．杀死所有的病原微生物 D．杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子
21．能够测定样品活菌数的方法是( )
A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．重量法 D．比浊法
22.有关稀释涂布平板法，叙述错误的是（ ）
A．先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C．适宜条件下培养
D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落
23．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )
A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
24．甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）

粉状硫
10g
K2HPO4
4g
FeS04
0.5g
蔗糖
10g
(NH4)2SO4
0.4g
H20
100ml
MgS04
9.25g
CaCl2
0.5g
I
+
+
+
+

+
+
+
Ⅱ
+
十
+

+
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
+
+
+
+
A、甲、乙、丙都是异养微生物
B、甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物
C、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物
D、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
25．要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他的细菌分离出来，应将它们接种在（　　）
A．加入氮源和杀菌剂的培养基上 B．不加入氮源和不加杀菌剂的培养基上
C．加入氮源，不加杀菌剂的培养基上 D．不含氮源和杀菌剂的培养基上
26．刚果红染色时，加入刚果红应在（ ）
（1）制备培养基时（2） 梯度稀释时 （3）倒平板时 （4）涂布时 （5） 长出菌落时
A、（1）（3） B、（2）（5） C、（3）（5） D、（4）（5）
27．为以纤维素为唯一碳源筛选出真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似？（ ）
A．硝化细菌  B.蓝藻 C.蚯蚓  D.兔子

28.接种时的灭菌不正确的是(    ) 
A.对接种环的灭菌 B.对双手的灭菌     C.对培养基的灭菌 D.对试管口的灭菌
29．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（ ）
A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针
C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅
30．关于牛肉膏蛋白胨培养基的配制需要在火焰旁操作的是（ ）
 A. 称量 B.灭菌 C.溶化 D.倒平板
二、非选择题
1．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__ __和___ ___。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是__ _ __和__ ____。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_____ __。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于____ __中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在 另一平板上接种__ ___作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有__ ___种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被 称为___ _。
2.科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。
（1）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供 和 。
（2）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的 ，确定该蛋白质的抗菌效果。
（3）细菌培养常用的接种方法有 和 。实验结束后，对使用过的培养基应进行 处理。

3.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后过行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊红
美蓝
蒸馏水
PH
10g
5g
5g
2g
0．4g
0.065 g
100 mL
7．2
A.制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。
B.为了得到更加准确的结果，你选用 (平板划线法、稀释涂布平板法)接种样品。
C.适宜温度下培养。
结果分析：
(1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养其中，得到以下几种统计结果，正确可信的是( )
A.一个平板，统计的菌落数是230
B.两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240
C.三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260
D.四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250
(2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2ML)_______________。
(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量 ，因为____________________________
________________________________。
成分
含量
NaNO3
3g
K2HPO4
1s
KCl
0.5g
MgS04·7H2O
0.5
FeSO4
0.01g
(CH2O)
30g
H20
100mL
青霉素
0.1万单位
4．下表所示为某微生物培养基配方，请分析回答：
(1)根据物理性质，该培养基属于 培养基；根据用途划分则属于 培养基。
(2)根据培养基原料，所培养的微生物的代谢类型是 ，培养的微生物可能是 。
(3)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，至少要加入
和 ，除去 。

5.植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合物，其中的葡萄糖糖苷酶可将                 分解成              。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成          色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的                   。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙 两种培养基（成分见下表）

注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲       （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙        （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是                ；

6．乙醇等"绿色能源"的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：

（1）玉米秸秆预处理后，因该选用___ _酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）
A.酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌 C.制作酸奶的乳酸菌
D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌 E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物
（3）若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为_____ _（按功能分），培养基中的碳源为___________ 。
（4）发酵阶段需要的菌种是_________，生产酒精是要控制的必要条件是____ ____ 。
7.为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                         ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为          。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过          灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是            。
（3）示意图A和B中，          表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的             的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高        的利用率。

8（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

9．培养蘑菇时常使用的原料为棉花壳、花生粉饼、朽木等，再喷洒适量的水，加入一定量的尿素等。请回答下列问题：
（1）按物理性质分类该培养基为 培养基。
（2）培养过程中发现培养基上长出了其他杂菌，经鉴定为细菌，细菌与蘑菇的关系为 ，在培养基上施用适量的 即可抑制细菌生长。
（3）蘑菇的代谢类型为 在生态系统的成分中属于 。

10、在探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验中，需利用计数板对微生物细胞进行直接计数。计数板是一个特制的可在显微镜下观察的玻片，样品就滴在计数室内。计数室由25×1 6=400个小室组成，容纳液体总体积为O．1 mm3。某同学操作时将1 mL酵母菌样品加99 mL无菌水稀释，用无菌吸管吸取少许使其自行渗入计数室，盖上盖玻片并用滤纸吸去多余菌液，进行观察计数。
(1)在实验中，某同学的部分实验操作过程是这样的：①从静置试管中吸取酵母菌培养液加入计数板进行计数，并记录数据；②把酵母菌培养液放置在冰箱中；③第七天再取样计数，记录数据，统计分析绘成曲线。请纠正该同学实验操作中的3处错误：① ；② ；③ 。
(2)在实验前应该对计数板、吸管等器具进行 处理。

(3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应采取的措施是 。
(4)如果观察到如图2—2—2所示a、b、c、d、e 5个人格共80个小室内共有酵母菌48个，则上述1 mI．酵母菌样品中约有酵母菌 个；要获得较为 准确的数值，减少误差，你认为该怎么做?

11．氯苯化合物是重要的有机化工原料，原因不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培养基配方如表1。

（1）配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的____________。
（2）培养基配制时，灭菌与调PH的先后顺序是____________。
（3）从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于____________培养基和____________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____________。
（4）在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为
____________。
（5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线（如图2）。从图2可知SP1菌在____________培养条件下最早停止生长，其原因是____________。

专题二 微生物的培养与应用练习答案
一、选择题
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
C
A
B
C
C
D
D
B
C
B
D
A
B
D
B
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
C
B
C
无
D
A
D
C
D
B
C
C
B
C
D

二、非选择题
1（1）氮源 碳源 无机盐 水 （2）高压蒸汽灭菌
（3）恒温培养箱 无菌水 （4）多 高
（5）盐 选择性培养基
2（1）碳源 氮源 （2）数量
（3）平板划线法 稀释涂布平板法 灭菌
3 步骤B：稀释涂布平板法
结果分析：(1)D (2)1.17×108
(3)多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落
4 (1)液体 选择 （2）异 养型 真菌
（3）伊红水溶液 美篮水溶液 青霉素
5 （1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红 透明圈
（3）不能 该培养基是液体培养基 不能 该培养基没有纤维素
6．（1）纤维素（酶） （2）B、E
(3)选择培养基；纤维素 （4）酵母菌 无氧（密封、密闭）
7.（1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107
（2）灼烧 讲聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B （4） 溶解氧 营养物质
8. （1）温度　酸碱度　 （2）灭菌　消毒　损伤DNA的结构
（3）比例合适 （4）鉴定(或分类)
（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生
（6）灭菌
9.（1）天然固体 （2）竞争 青霉素
（3）异养需氧型 分解者
10.（1）①应将试管轻轻震荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数 
②应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养  
③应连续七天，每天观察、取样计数并记录数据
（2）灭菌 （3） 适当稀释 （4）2.4×108   多次记数，求平均值
11.（1）琼脂 （2）先调PH值后灭菌 （3）通用 选择 硝酸铵
（4）芽孢 （5）20mg/L氯苯 碳源最早耗尽

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