电针调控肿瘤坏死因子受体1...胱尿潴留大鼠尿动力学的影响_卢壮.pdf

安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）电针调控肿瘤坏死因子受体1/受体相互作用蛋白激酶1/核因子B轴对骶髓损伤后神经源性膀胱尿潴留大鼠尿动力学的影响卢壮a，刘敏b，韦艳梅b，黄钰岚a，林静a作者单位：百色市人民医院，a康复医学科，b泌尿外科，广西壮族自治区 百色533000基金项目：百色市科学研究与技术开发计划（百科20184408）摘要：目的 探究电针调控肿瘤坏死因子受体1/受体相互作用蛋白激酶1/核因子B（TNFR1/RIPK1/NF-B）轴对骶髓损伤（SCI）后神经源性膀胱（NB）尿潴留大鼠的影响及机制。方法 采用随机数字表法将SD大鼠分为空白组、模型组、电针组和电针对照组，每组10只。建立SCI后NB尿潴留模型，电针组取穴“次髎”“中极”“三阴交”，电针对照组取三穴对照点，行电针治疗7 d。各组大鼠治疗前、后行尿动力学检测；取大鼠脊髓组织，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测 TNFR1、RIPK1表达；蛋白质印迹法（Western blotting）检测TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK、p-NF-B p65/NF-B p65和p-IB/IB蛋白表达；酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）检测TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量。该研究起止时间为2019年1月至2021年12月。结果 与空白组比较，模型组大鼠膀胱最大容量 （4.460.82）mL比（1.130.22）mL，P0.05、膀胱基础压 （32.004.23）cmH2O比（22.973.71）cmH2O，P0.05、漏尿点压力 （54.027.61）cmH2O比（38.855.32）cmH2O，P0.05 和膀胱顺应性 （0.190.03）mL/cmH2O比（0.080.01）mL/cmH2O，P0.05 升高，TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK、p-NF-B p65/NF-B p65、p-IB/IB表达及TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量增加（P0.05）；与模型组比较，电针组治疗后大鼠膀胱最大容量 （2.290.43）mL比（4.460.82）mL，P0.05、膀胱基础压 （23.693.43）cmH2O 比（32.004.23）cmH2O，P0.05、漏尿点压力 （40.115.91）cmH2O 比（54.027.61）cmH2O，P0.05 和膀胱顺应性 （0.120.02）mL/cmH2O 比（0.190.03）mL/cmH2O，P0.05 降低，TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK、p-NF-B p65/NF-B p65、p-IB/IB表达及TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量减少（P0.05）。结论 电针“次髎”“中极”“三阴交”可改善SCI后NB尿潴留大鼠膀胱功能，机制与抑制TNFR1/RIPK1/NF-B轴活化，抑制炎症反应有关。关键词：脊髓损伤；腰骶丛；电针；神经源性膀胱；尿动力学；炎症Electroacupuncture improves urodynamics in rats with neurogenic bladder urinary retention after sacral cord injury by regulating TNFR1/RIPK1/NF-B axisLU Zhuanga,LIU Minb,WEI Yanmeib,HUANG Yulana,LIN JingaAuthor Affiliation:aDepartment of Rehabilitation Medicine,bUrinary Surgery,The Peoples Hospital of Baise,Baise,Guangxi Zhuang Autonomous Region 533000,ChinaAbstract：Objective To explore the effect and mechanism of electroacupuncture on rat with neurogenic bladder(NB)urinary retention after sacral cord injury(SCI)by regulating the tumor necrosis factor receptor 1/receptor-interacting protein kinase 1/nuclear factor kappa-B(TNFR1/RIPK1/NF-B)axis.Methods The SD rats were assigned into blank group,model group,electroacupuncture group and electroacupuncture control group,with 10 rats in each group.A model of NB urine retention after SCI was established.The electroacupuncture group took the points of Ciliao(BL32)Zhongji(RN3),and Sanyinjiao(SP6),and the control group took the three-acupoint control points and treated them with electroacupuncture for 7 days.Urodynamic tests were performed before and after treatment in each group of rats.The rat spinal cord tissue was collected,and the expression of TNFR1 and RIPK1 was detected by qRT-PCR,the expression of TNFR1,RIPK1,p-IKK/IKK,p-NF-B p65/NF-B p65 and p-IB/IB was detected by Western Blotting,the content of TNF-,IL-1,IL-6,IFN-was detected by Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The study began and ended from January 2019 to December 2021.Results Compared with the blank group,the maximum bladder capacity(4.460.82)mL vs.(1.130.22)mL,P0.05,basal bladder pressure(32.004.23)cmH2O vs.(22.973.71)cmH2O,P0.05,leakage point pressure(54.027.61)cmH2O vs.(38.855.32)cmH2O,P0.05 and bladder compliance(0.190.03)mL/cmH2O vs.(0.080.01)mL/cmH2O,P0.05 increased in the model group,the expression of TNFR1,RIPK1,p-IKK/IKK,p-NF-B p65/NF-B p65,p-IB/IB and the content of TNF-,IL-1,IL-6 and IFN-increased,and the difference was statistically significant(P0.05).Compared with the model group,the maximum bladder capacity(2.290.43)mL vs.(4.460.82)mL,P0.05,basal bladder pressure(23.693.43)cmH2O vs.(32.004.23)cmH2O,P0.05,leakage point pressure(40.115.91)cmH2O vs.(54.027.61)cmH2O,P0.05 and bladder compliance(0.12临床医学引用本文：卢壮，刘敏，韦艳梅，等.电针调控肿瘤坏死因子受体1/受体相互作用蛋白激酶1/核因子B轴对骶髓损伤后神经源性膀胱尿潴留大鼠尿动力学的影响 J.安徽医药，2023，27（8）：1655-1660.DOI：10.3969/j.issn.1009-6469.2023.08.036.1655网络首发时间：2023-07-06 15:13:50网络首发地址：https:/ 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）0.02)mL/cmH2O vs.(0.190.03)mL/cmH2O,P0.05 of rats in the electroacupuncture group decreased after treatment,the expression of TNFR1,RIPK1,p-IKK/IKK,p-NF-B p65/NF-B p65,p-IB/IB and the content of TNF-,IL-1,IL-6,IFN-decreased(P0.05).Conclusion Electroacupuncture of Ciliao(BL32)Zhongji(RN3),and Sanyinjiao(SP6)can improve the bladder function of NB urinary retention rats after SCI.The mechanism is related to inhibiting the activation of TNFR1/RIPK1/NF-B pathway and inhibiting inflammation.Key words：Spinal cord injuries;Lumbosacral plexus;Electroacupuncture;Neurogenic bladder;Urodynamics;Inflammation神经源性膀胱（neurogenic bladder，NB）是骶髓损伤（sacral cord injury，SCI）的常见临床并发症，SCI病人中 NB的发生率近乎 100%，严重影响了病人生存质量1。SCI后，受损的神经中枢无法有效调控膀胱逼尿肌及尿道括约肌，极易出现膀胱或尿道功能障碍，最终导致尿潴留，引发反复尿路感染、结石、慢性肾功能衰竭等疾病2。电针对神经官能症、神经痛和神经麻痹等疾病具有较好疗效。多项研究结果3-4表明，电针疗法具有促进损伤脊髓修复、双向调节膀胱功能及抗泌尿系统感染的独特功效。笔者前期研究已表明，电针取穴“次髎”“中极”“三阴交”可调控凋亡相关因子的表达，使SCI后NB模型大鼠的膀胱功能得到改善3-4。炎症反应与凋亡关系密切。过度炎症反应可诱发脊髓继发性损伤，加速神经元凋亡，影响SCI后神经功能的修复以及膀胱功能。研究发现，电针刺激还可通过抑制炎症反应改善大鼠SCI后下肢运动功能6，提示电针改善SCI后NB大鼠膀胱功能的机制也可能与其抗炎效应有关。故本研究拟选取SCI后NB大鼠模型为研究对象，探究电针对SCI后NB尿潴留大鼠尿动力学及炎症反应的影响及机制。本研究起止时间为2019年1月至2021年12月。1材料与方法1.1试剂与仪器注射用青霉素钠（石家庄石药集团中诺药业公司，批号H23020930）；乳酸钠林格注射液（安徽双鹤药业公司，批号H20055488）；水合氯醛（上 海 山 浦 化 工 有 限 公 司，批 号 30037516）；TriQuick Reagent（北京 Solarbio 公司）；反转录试剂（武汉 Monad 公司）；SYBR qPCR Master Mix（安徽Biosharp公司）；肿瘤坏死因子（TNF-）、白细胞介素-1（IL-1）、白细胞介素-6（IL-6）ELISA 试剂盒（上海酶联生物）；干扰素（IFN-）ELISA试剂盒（武汉基因美公司）；肿瘤坏死因子受体1（TNFR1）、受体相互作用蛋白激酶1（RIPK1）、磷酸化kappa B抑制 因 子 激 酶（p-IKK）、kappa B 抑 制 因 子 激 酶（IKK）、核因子B p65（NF-B p65）、磷酸化核因子B p65（p-NF-B p65）、磷酸化NF-B抑制蛋白（p-IB）、-actin、GAPDH 抗体（英国 Abcam 公司）；NF-B 抑制蛋白 （IB）抗体（美国 CST 公司）；BCA蛋白定量试剂盒（北京Solarbio公司）；RIPA裂解液（北京Solarbio公司）；WZ-50C6微量灌注泵（浙江史密斯医学仪器公司）；SDZ-V型电针治疗仪（苏州医疗公司）；MP150-WSW多通道生理记录仪（美国 Biopac公司）；电泳仪（美国 Bio-Rad公司）；多功能酶标仪（美国 MD 公司）；Real-Time PCR System（美国 Agilen 公司）；低温离心机（德国 Eppendorf公司）。1.2动物及分组SPF级SD大鼠45只，雄性，体质量范围为250300 g，由广西医科大学实验动物中心提供。采用随机数字表法挑选10只大鼠作为空白组，其余35只构建SCI后NB尿潴留大鼠模型，2周后确定SCI后NB模型成功后随机数字表法选取30只分为模型组、电针组与电针对照组，每组 10只。动物实验过程符合动物伦理委员会标准。1.3动物模型制备采用脊髓横断法并加以改良，构建SCI后NB尿潴留大鼠模型7-8：大鼠在手术前禁食 12 h；腹腔注射 10%水合氯醛（30 mg/kg）麻醉后固定于鼠板上；取大鼠俯卧位，消毒铺巾；以L2L3椎间隙为中心切开皮肤，分离肌肉和筋膜；切断L2L3棘间韧带，咬除椎板；用牙科探针挑起并切断脊髓；止血、缝合、消毒。手术后常规喂养，连续腹腔注射7 d 20万U青霉素防止感染。手术后，大鼠处于脊髓休克期，膀胱会出现尿潴留，每天手法辅助排尿23次。手术后第14天，大鼠度过脊髓休克期后，出现前肢可行走、后肢拖动，膀胱无抑制性收缩、膀胱最大容量明显下降，尿潴留等症状，说明SCI后NB尿潴留大鼠模型构建成功。1.4一般情况观察35只造模大鼠中，有1只后肢能自主活动，1只手术后死亡，1只不符合造模要求，共32只符合造模成功标准，取30只大鼠随机分为模型组、电针组和电针对照组，每组10只，纳入结果分析。1.5电针治疗建模成功 2 周后行电针治疗7，9。电针组选取穴位：“次髎”“中极”“三阴交”，电针对照组选取上述 3 个穴位的对照点（穴外侧旁开 0.3 cm处），两组针刺操作方法相同，20 min/d，连续7 d。空白组和模型组不进行电针治疗。1.6尿动力学检测各组大鼠水合氯醛麻醉后排空膀胱，将 F3 导管从尿道导入，用微量灌注泵和MP150-WSW 多通道生理记录仪匀速（0.1 mL/min）1656安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）灌注恒温生理盐水，检测并记录膀胱最大容量（mL）、膀胱基础压（cmH2O）、漏尿点压力（cmH2O）和膀胱顺应性（mL/cmH2O）。1.7样本采集和处理各组大鼠完成尿动力学检测后，水合氯醛腹腔麻醉，以L2L3椎间隙为中心取上下各约l cm脊髓组织，生理盐水洗净，80 保存备用。1.8实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）TRIzol试剂盒从各组大鼠脊髓组织中提取总 RNA，逆转录混合底物逆转录总 cDNA。SYBR Green法进行PCR扩增，反应体系；95 30 s变性，94 变性5 s，60 退火30 s，72 延伸30 s，40个循环；均重复3次，结果取平均值，2Ct法计算TNFR1和RIPK1的相对表达量。引物见表1。1.9蛋白印迹法（Western Blotting）将大鼠脊髓组织匀浆后，离心取上清液，BCA法测定蛋白浓度，5Loading buffer混匀，沸水浴5 min；提总蛋白，行恒压SDS-PAGE电泳，转PVDF膜；TBST洗涤，5%脱脂奶粉-TBST 37 封闭1 h，加一抗，4 孵育过夜；加对应HRP标记二抗，37 孵育1 h，TBST洗涤，ECL显影，Image J 分析条带，计算 TNFR1、RIPK1、p-IKK、IKK、NF-B（p65）、p-NF-B（p65）、p-IB、IB的相对表达量。1.10酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）取适量组织块，预冷PBS冲洗，称重；加预冷PBS（组织与PBS质量体积比为1 5）于冰上充分研磨；匀浆液5 000g 离心 5 min，取上清；严格按说明书检测 TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量。1.11统计学方法使用 SPSS 25.0 和 GraphPad Prism 5进行数据分析和绘图，计量资料表示为x s。符合正态分布的数据用参数检验，多组间比较用单因素方差分析，组间两两比较用LSD-t和SNK-q检验；不符合正态分布的数据用非参数检验，多组间比较和组间两两比较用 Kruskal-Wallis 检验。P0.05表示差异有统计学意义。2结果2.1大鼠尿动力学检测与空白组比较，模型组大鼠膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、膀胱顺应性增加，差异有统计学意义（P0.05）；与电针组治疗前比较，电针组治疗后膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、膀胱顺应性降低，差异有统计学意义（P0.05）；与电针对照组治疗后比较，电针组治疗后膀胱最大容量、膀胱基础压、漏尿点压力、膀胱顺应性降低，差异有统计学意义（P0.05）；电针组及电针对照组治疗前与模型组比较均差异无统计学意义（P0.05）。见表2，3。2.2电针对大鼠脊髓组织 TNFR1/RIPK1 通路指标表达的影响与空白组比较，模型组 TNFR1、RIPK1 mRNA 和 TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK 和 p-IB/IB 蛋白表达升高，差异有统计学意义（P0.05）；与模型组比较，电针组TNFR1、RIPK1 mRNA和 TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK 和 p-IB/IB 蛋白表达降低，差异有统计学意义（P0.05）。见表4，5。表3大鼠治疗前后尿动学检测结果/x s组别电针对照组电针组F值P值鼠数1010膀胱最大容量/mL治疗前4.340.854.540.830.300.594治疗后4.140.882.290.4335.360.000膀胱基础压/cm H2O治疗前31.414.3232.164.780.140.717治疗后32.255.1523.693.4319.130.000漏尿点压力/cm H2O治疗前53.317.1754.257.840.080.783治疗后51.967.6140.115.9120.160.000膀胱顺应性/（mL/cm H2O）治疗前0.200.030.200.030.210.651治疗后0.190.030.120.0256.270.000注：与治疗前比较，P0.05。与电针对照组比较，P0.05。表1引物序列引物名称TNFR1-FTNFR1-RRIPK1-FRIPK1-R-actin-F-actin-R引物序列TGACCGGGAGAAGAGGGATAAGTAGGTTCCTTTGTGGCACTGCGGAAAAGCCTCTAAGGACAGTCCAAGGACATGTCTGGCTCGTAAAGACCTCTATGCCAACATAGGAGCCAGGGCAGTAATC产物长度/bp9797120表2大鼠尿动学检测结果/x s组别电针对照组空白组模型组电针组H值P值鼠数10101010膀胱最大容量/mL4.340.851.130.224.460.824.540.8322.090.001膀胱基础压/cm H2O31.414.3222.973.7132.004.2332.164.7819.640.002漏尿点压力/cm H2O53.317.1738.855.3254.027.6154.257.8418.670.002膀胱顺应性/（mL/cm H2O）0.200.030.080.010.190.030.200.0322.590.004注：与空白组比较，P0.05。1657安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）2.3电针对大鼠脊髓组织NF-B通路指标表达及炎症反应的影响与空白组比较，模型组p-NF-B p65/NF-B p65蛋白表达和TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量升高，差异有统计学意义（P0.05）；与模型组比较，电针组 p-NF-B p65/NF-B p65 蛋白表达TNF-、IL-1、IL-6、IFN-含量降低，差异有统计学意义（P0.05）。见图1和表6，7。3讨论中医学将SCI后NB尿潴留归于“癃闭”范畴，肾气不足、正气亏损、膀胱气化失司、三焦不能同调水道是其主要病机，膀胱内充满尿液无法排出。大量研究表明，临床运用电针治疗可双向调节膀胱功能及抗泌尿系统感染10-11。笔者前期研究证实电针取穴“次髎”“中极”“三阴交”治疗SCI后NB大鼠，可一定程度改善受损膀胱组织功能障碍。“次髎”属膀胱经，主治排尿不利而导致的尿潴留，骶神经（支配膀胱等盆腔脏器）位于该穴下，刺激“次髎”可激活传入神经元将刺激传导至脊髓排尿中枢，运动逼尿肌和括约肌节，引发排尿反射。“中极”为膀胱之募穴，是治六腑病的要穴，髂腹下神经（支配膀胱和直肠）位于该穴下，刺激“中极”可收缩膀胱逼尿肌，引发排尿反射，利于膀胱功能调节及气化。“三阴交”是足三经交会穴，主下焦气机不通，刺激“三阴交”可通过反射弧传导至脊髓后跟，刺激腰骶部排尿中枢，引发排尿反射，调节膀胱活动和功能。本研究构建SCI后NB尿潴留大鼠模型后，大鼠膀胱最大容量、漏尿点压力和膀胱顺应性升高，说明模型大鼠尿潴留现象明显，膀胱功能障碍，造模成功。利用电针刺激SCI后NB尿潴留大鼠次髎、中极、三阴交后发现，膀胱最大容量、漏尿点压力和膀胱顺应性降低，与既往研究结果一致12-13，表明电针可改善SCI后排尿中枢功能，刺激逼尿肌及括约肌活动，降低膀胱内压、最大容量，减少残尿量，恢复尿潴留大鼠膀胱功能。SCI 后神经元和轴突中大量分泌炎性因子（TNF-、IL-1、IL-6和 IFN-等），过度的神经元炎症加重了脊髓神经组织损伤，影响膀胱功能恢复，表5各组大鼠脊髓组织TNFR1/RIPK1通路指标蛋白的表达/x s组别电针对照组空白组模型组电针组H值P值鼠数10101010TNFR12.100.241.000.112.250.311.500.2432.820.000RIPK11.430.181.000.111.570.191.240.1526.020.000p-IKK1.600.221.000.121.730.281.220.1728.850.000IKK1.130.181.000.131.140.181.090.157.700.053p-IKK/IKK1.510.401.060.221.580.241.180.2517.530.001p-IB1.960.281.000.152.170.291.300.1930.610.000IB1.100.181.000.151.120.170.990.135.630.131p-IB/IB1.850.461.010.121.990.431.330.2625.220.000注：TNFR1为肿瘤坏死因子受体1，RIPK1为受体相互作用蛋白激酶1，p-IKK为磷酸化kappa B抑制因子激酶，IKK为kappa B抑制因子激酶，p-IB为磷酸化NF-B抑制蛋白。与空白组比较，P0.05。与模型组比较，P0.05。与电针对照组比较，P0.05。表4各组大鼠脊髓组织TNFR1、RIPK1 mRNA的表达/x s组别电针对照组空白组模型组电针组F值P值鼠数10101010TNFR12.370.401.020.202.610.181.530.3738.380.000RIPK11.680.281.010.181.780.311.290.1820.660.000注：TNFR1为肿瘤坏死因子受体1，RIPK1为受体相互作用蛋白激酶1。与空白组比较，P0.05。与模型组比较，P0.05。与电针对照组比较，P0.05。62341578注：1-actin；2NF-B p65；3-actin；4p-NF-B p65；5空白组；6模型组；7电针组；8电针对照组。图1各组大鼠脊髓组织中NF-B p65、p-NF-B p65的表达表6各组大鼠脊髓组织NF-B通路指标蛋白的表达/x s组别电针对照组空白组模型组电针组F值P值鼠数10101010p-NF-B p651.900.231.000.202.050.231.070.2065.060.000NF-B p650.970.271.000.240.990.281.010.270.050.986p-NF-B p65/NF-B p652.010.561.000.272.130.581.080.3416.930.000注：NF-B p65为核因子B p65，p-NF-B p65为磷酸化核因子B p65。与空白组比较，P0.05。与模型组比较，P0.05。与电针对照组比较，P0.05。1658安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）而电针可抑制SCI大鼠的炎症反应，促神经系统恢复14。研究发现，SCI后NF-B通路在脊髓组织神经组织中异常激活，大量研究表明抑制该通路可减轻神经元炎症反应，恢复调控功能15-16。正常状态下，NF-B在胞质中以IKB-NF-B p65-NF-B p50复合物形式存在，受到外界刺激因素（如 TNF-）后，IKB发生磷酸化，而后被泛素化并降解，NF-B p65移位入核，诱发一系列炎性因子表达。NF-B受到TNFR1/RIPK1通路的调控，TNFR1活化后会快速募集RIPK1，激活其下游IKK，IKK活化进一步磷酸化IKB，释放并激活NF-B。研究17表明，通过抑制 SCI大鼠 TNFR1 表达可减少组织损伤及炎症反应，改善运动功能。但电针能否通过调控 TNFR1/RIPK1/NF-B通路发挥作用尚未可知。本研究结果显示，SCI后NB尿潴留大鼠脊髓组织TNFR1、RIPK1和p-IKK/IKK蛋白表达升高，表明TNFR1/RIPK1通路在SCI后NB尿潴留大鼠脊髓组织中显著激活；利用电针治疗后，TNFR1、RIPK1、p-IKK/IKK 蛋白表达降低，表明电针可抑制 TNFR1/RIPK1通路活化。同时我们发现，在应用电针治疗后，大鼠脊髓组织 p-NF-B p65/NF-B p65 及pIKB/IKB 蛋白表达降低，提示电针可通过抑制TNFR1/RIPK1通路活化进一步拮抗NF-B。本研究还进行了NF-B下游炎症相关因子的检测，发现电针治疗可降低大鼠脊髓组织中 TNF-、IL-1、IL-6和 IFN-的水平，表明电针治疗后，TNFR1/RIPK1/NF-B通路被抑制，进而影响下游TNF-、IL-1、IL-6和IFN-的表达，减轻神经元炎症反应，促进神经组织修复，恢复排尿中枢功能，改善膀胱功能。既往研究证实，电针刺激“中极”“次髎”“三阴交”可显著改善SCI后NB尿潴留，但相关机体机制研究较少，主要为抑制神经元凋亡（如活化 PI3K/AKT通路和拮抗NGF/TrkA通路），与笔者前期研究发现电针可抑制PTEN/Akt通路抑制神经元凋亡相似。而对于SCI后脊髓组织中广泛的炎症反应和异常激活的NF-B，电针对其的调控机制尚未见研究。既往研究中，不乏围绕NF-B对电针调控机制的研究，如电针抑制 NF-B活性改善大鼠认知障碍18、治疗高血压性脑出血19和溃疡性结肠炎20等。本研究首次发现电针可通过抑制TNFR1/RIPK1通路拮抗NF-B活化，减轻脊髓神经元炎症反应，重塑部分脊髓神经功能，使逼尿肌和括约肌正常活动，改善SCI后NB尿潴留大鼠膀胱功能。综上所述，本研究结果表明电针“次髎”“中极”“三阴交”可改善 SCI后 NB 尿潴留大鼠膀胱功能，其机制可能与抑制 TNFR1/RIPK1/NF-B通路，减轻神经元炎症反应，促进神经组织修复有关，表明电针在治疗 SCI 后 NB 尿潴留有较好疗效，具有明显抗炎效应，临床应用价值较高，值得应用、推广。参考文献1 PANICKER JN.Neurogenic bladder：epidemiology，diagnosis，and management J.Semin Neurol，2020，40（5）：569-579.2 LEE JK.Neurogenic bladder managementJ.Radiol Technol，2021，92（3）：281-295.3 ZHANG T，YU J，HUANG Z，et al.Electroacupuncture improves neurogenic bladder dysfunction through activation of NGF/TrkA signaling in a rat model J.J Cell Biochem，2019，120（6）：9900-9905.4 LU JY，YING XW，CHEN XL，et al.Effects of electroacupuncture at different acupoints on the histomorphology of neurogenic bladder and the expression of hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channels in interstitial cells of Cajal in a rat model of suprasacral spinal cord injury J.Ann Palliat Med，2020，9（6）：3830-3838.5 卢壮，黄钰岚，阮成志，等.电针对骶髓损伤后神经源性膀胱尿潴留大鼠尿动力学的影响和机制研究 J.检验医学与临床，2020，17（19）：2841-2845，2849.6 邹恩苗，胡洁，高丽萍，等.电针刺激对大鼠脊髓损伤后炎症反应的影响 J.中国中医骨伤科杂志，2018，26（10）：10-13.7 艾坤，刘琼，许明，等.电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱尿流动力学及逼尿肌垂体腺苷酸环化酶激活肽/环磷酸腺苷/蛋白激酶 A 信号通路的影响 J.针刺研究，2021，46（9）：728-734，741.8 郭宁，秦合伟，李彦杰，等.基于瞬时受体电位香草酸1通道探讨电针治疗骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠的作用机制表7各组大鼠脊髓组织中炎症相关因子的表达/（ng/L，x s）组别电针对照组空白组模型组电针组H值P值鼠数10101010TNF-83.6118.0939.9510.7589.0121.5549.1710.9528.100.000IL-129.084.6613.912.4631.375.2820.364.8326.700.000IL-691.3917.0351.529.4594.6018.5569.5515.4224.920.000IFN-75.8916.5231.004.9877.6415.9851.618.0330.150.000注：TNF-为肿瘤坏死因子，IL-1为白细胞介素1，IL-6为白细胞介素6，IFN-为干扰素。与空白组比较，P0.05。与模型组比较，P0.05。与电针对照组比较，P0.05。1659安 徽 医 药 Anhui Medical and Pharmaceutical Journal 2023 Aug，27（8）J.实用医学杂志，2021，37（24）：3126-3131.9 彭咏梅.电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学和脊髓组织PACAP-38，PAC1R的影响 D.长沙：湖南中医药大学，2018.10吴明莉，任亚锋，王磊，等.督脉穴、夹脊穴电针联合电子生物反馈治疗脊髓损伤后神经源性膀胱临床观察 J.中国康复医学杂志，2020，35（7）：843-846，863.11乔硕，张争.针灸治疗脊髓损伤后神经源性膀胱疗效观察 J.现代中西医结合杂志，2019，28（16）：1758-1760，1780.12许明，刘笑萌，艾坤，等.电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠膀胱功能及髓内NGF和NT-3的影响 J.湖南中医药大学学报，2021，41（2）：252-258.13邓石峰，余雨荷，刘笑萌，等.电针对完全性骶髓损伤神经源性膀胱大鼠尿流动力学及逼尿肌组织中MLCK、MLC、p-MLC的影响 J.湖南中医药大学学报，2020，40（6）：727-731.14苏标瑞，李震宇，黄萍萍，等.电针对大鼠脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生的影响 J.国际中医中药杂志，2019，41（3）：263-268.15王军，桑卫华，苏柯.基于NF-B信号通路的高压氧干预对BMSCs移植治疗脊髓损伤大鼠炎症因子及血糖水平的影响 J.转化医学杂志，2020，9（4）：215-218.16陈剑平，廖祥萍，李正南，等.芍药苷基于IKK/NF-B信号通路对大鼠脊髓损伤后继发性损害的保护作用 J.广东医学，2019，40（18）：2578-2582.17HUIE JR，FERGUSON AR，KYRITSIS N，et al.Machine intelligence identifies soluble TNFa as a therapeutic target for spinal cord injury J.Sci Rep，2021，11（1）：3442.18冯楚文，屈媛媛，孙忠人，等.电针抑制NF-B活性改善慢性疲劳综合征大鼠认知功能障碍的实验研究 J.针刺研究，2021，46（9）：775-781.19周爽，徐佳，黄建华，等.电针对大鼠高血压性脑出血血肿周围组织 NF-B TNF-表达的影响 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