母婴分离应激导致青少年期大鼠抑郁并改变海马兴奋性突触传递.pdf

本文引文格式:韦红巧,邱然,王芳,等.母婴分离应激导致青少年期大鼠抑郁并改变海马兴奋性突触传递J.右江民族医学院学报,2 0 2 4,4 6(2):1 5 3-1 5 8.【论著与临床报道】母婴分离应激导致青少年期大鼠抑郁并改变海马兴奋性突触传递韦红巧1,邱然1,王芳1,林楚臻1,莫景筌1,陈业俊1,杨林杰2(1.广西医科大学基础医学院生理学教研室,广西 南宁 5 3 0 0 2 1;2.广西医科大学第一附属医院病理科,广西 南宁 5 3 0 0 2 1)摘 要:目的 明确母婴分离(M S)应激及G A B AA受体 6亚单位(G a b r a 6)抑制剂对海马AMP A受体介导的兴奋性突触后电流的影响。方法 将新生的S D大鼠随机分为对照组和M S组,M S乳鼠与母鼠定期分离,建立母婴分离大鼠模型;新环境进食抑制、强迫游泳以及糖水偏爱实验检测青少年期大鼠抑郁行为;全细胞脑片膜片钳方法检测对照及大鼠海马C A 1区椎体神经元诱发的兴奋性突触后电流(e E P S C)。结果 青少年期M S大鼠在新环境中进食潜伏期(P0.0 1)以及强迫游泳漂浮不动时间均延长(P0.0 1),G a b r a 6拮抗剂呋塞米可显著增强海马脑片C A 1区锥体细胞中记录到的e E P S C(P0.0 0 1),呋塞米对慢性M S应激大鼠海马脑片C A 1区锥体细胞e E P S C的增强作用较弱(P0.0 5)。结论 M S应激可作用于海马G a b r a 6,改变兴奋性突触后电流,并导致大鼠抑郁,在此基础上研究作用于G A B A受体的药物有望成为抑郁症治疗的新策略。关键词:母婴分离;海马;兴奋性突触后电流;GA B AA受体 6亚单位中图分类号:R 3 1 2;R 7 4 9.4 2 文献标识码:A 文章编号:1 0 0 1-5 8 1 7(2 0 2 4)0 2-0 1 5 3-0 6d o i:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 0 0 1-5 8 1 7.2 0 2 4.0 2.0 0 2M a t e r n a l s e p a r a t i o ns t r e s s i n d u c e sd e p r e s s i o n i na d o l e s c e n t r a t sa n dw e a k e n si n h i b i t o r ye f f e c t so fh i p p o c a m p a lG a b r a 6o nAMP Ar e c e p t o r sW e iH o n g q i a o1,Q i uR a n1,W a n gF a n g1,L i nC h u z h e n1,M oJ i n g q u a n1,C h e nY e j u n1,Y a n gL i n j i e2(1.D e p a r t m e n t o fP h y s i o l o g y,S c h o o l o fB a s i cM e d i c i n e,G u a n g x iM e d i c a lU n i v e r s i t y,N a n n i n g5 3 0 0 2 1,G u a n g x i,C h i n a;2.D e p a r t m e n t o fP a t h o l o g y,T h eF i r s tA f f i l i a t e dH o s p i t a l o fG u a n g x iM e d i c a lU n i v e r s i t y,N a n n i n g5 3 0 0 2 1,G u a n g x i,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e i m p a c t so fm a t e r n a l s e p a r a t i o n(M S)s t r e s sa n dt h e i n h i b i t i o no ft h eGA B AAr e c e p t o ra l p h a-6s u b u n i t(G a b r a 6)o ne x c i t a t o r yp o s t s y n a p t i cc u r r e n t sm e d i a t e db yh i p p o c a m p a lAMP Ar e c e p t o r s.M e t h o d s N e w b o r nS p r a g u e-D a w l e yr a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t oc o n t r o la n d M Sg r o u p s.T h eM Sg r o u pu n d e r w e n tr e g u l a rs e p a r a t i o nf r o mt h e i rm o t h e r st oe s t a b l i s har a tm o d e lo fm a t e r n a ls e p a r a t i o n.B e h a v i o r a l t e s t s,i n c l u d i n gn o v e l t y-s u p p r e s s e df e e d i n g,f o r c e ds w i mm i n g,a n ds u c r o s ep r e f e r e n c ew e r ec o n d u c t e dt oa s s e s sd e p r e s s i v eb e h a v i o r s i na d o l e s c e n t r a t s.Wh o l e-c e l l p a t c h-c l a m pr e c o r d i n g sw e r eu s e dt om e a s u r e e v o k e de x c i t a t o r yp o s t s y n a p t i c c u r r e n t s(e E P S C s)i n t h eh i p p o c a m p a lC A 1r e g i o no f c o n t r o l a n dM Sr a t s.R e s u l t s A d o l e s c e n tM Sr a t se x h i b i t e dp r o l o n g e d l a t e n c yt o f e e d i nan e we n v i r o n m e n t(P0.0 1)a n di n c r e a s e d i mm o b i l i t y t i m e i n f o r c e ds w i mm i n g(P0.0 1).T h eG a b r a 6a n t a g o n i s t f u r o s e m i d e s i g n i f i c a n t l ye n-h a n c e de E P S C s r e c o r d e df r o mp y r a m i d a ln e u r o n s i nt h eC A 1r e g i o no f t h eh i p p o c a m p a ls l i c e s(P0.0 0 1).C h r o n i cM Ss t r e s sa t t e n u a t e dt h ee n h a n c i n ge f f e c to f t h eG a b r a 6a n t a g o n i s t f u r o s e m i d eo ne E P S C s i nt h eC A 1351第4 6卷 第2期 右江民族医学院学报 V o l.4 6N o.22 0 2 4年4月 J o u r n a l o fY o u j i a n gM e d i c a lU n i v e r s i t yf o rN a t i o n a l i t i e s A p r.2 0 2 4基金项目:广西自然科学基金青年项目(2 0 1 8 G X N S F B A 2 8 1 1 4 1);广西医科大学基础医学科技创新培育基金项目(G XMU BM-S T C F-G 2 6);国家级大学生创新创业训练计划项目(2 0 2 1 1 0 5 9 8 0 1 1)第一作者:韦红巧,博士,副教授,研究方向:心脑血管疾病及精神疾病,E-m a i l:w e i h o n g q i a o 7 51 6 3.c o m 通讯作者:杨林杰,博士,讲师,研究方向:抑郁症与肿瘤,E-m a i l:e y a n g l i n j i e 1 6 3.c o mr e g i o no f t h eh i p p o c a m p a l s l i c e s(P0.0 5).C o n c l u s i o n M Ss t r e s sm a ya l t e r t h e e x p r e s s i o no f h i p p o c a m p a lG a b r a 6,a f f e c t i n ge x c i t a t o r yp o s t s y n a p t i cc u r r e n t s,a n di n d u c ed e p r e s s i v eb e h a v i o r si nr a t s,s u g g e s t i n gt h a td r u g s t a r g e t i n gGA B Ar e c e p t o r sm a yo f f e rn e ws t r a t e g i e s f o rd e p r e s s i o nt r e a t m e n t.K e yw o r d s:m a t e r n a ls e p a r a t i o n;h i p p o c a m p u s;e x c i t a t o r yp o s t s y n a p t i cc u r r e n t s;GA B AAr e c e p t o ra l-p h a-6s u b u n i t 慢性应激是抑郁症发生的重要原因,然而慢性应激导致抑郁发生的具体机制尚需要进一步明确。中枢神经系统存在对于应激刺激的敏感性较强的区域,其中海马是对慢性应激较为敏感的区域之一1。抑郁症患者的海马区存在-氨基丁酸(-a m i n ob u t y r i ca c i d,GA B A)能抑制系统的改变2,但其具体机制以及在抑郁症发生过程中的作用尚不清楚,这些改变与抑郁症发生之间的因果关系有待明确。母亲和新生儿之间的充分接触是母婴健康的重要因素3。然而特殊情况下,为了避免病毒等病原体在母婴间传播,避免感染对于身体可能造成的危害,部分母亲和新生儿之间不鼓励甚至禁止皮肤接触和母乳喂养4。这些情况所导致的母婴分离(m a t e r n a ls e p a r a t i o n,M S)对于母亲和新生儿都属于强烈的应激事件,可能对于母婴的身心健康产生严重影响,甚至这些婴儿在成年后的行为模式和精神健康状态仍有可能受到影响5-6。本课题组前期研究发现新生大鼠经历过慢性M S后,可在青少年期出现抑郁症状7。同时,海马GA B AA受体 6亚单位(GA B AAr e c e p t o r s u b u n i t a l p h a-6,G a b r a 6)蛋白水平显著降低,并且G a b r a 6蛋白参与构成的GA B AA受体在海马C A 1区锥体神经元的抑制性突触传递中发挥重要作用7。然而,M S大鼠中G a b r a 6蛋白表达降低对GA B AA受体功能的影响,以及对海马突触传递的影响尚有待进一步研究。研究提示慢性应激导致的兴奋性神经传递改变在抑郁症发生过程中发挥重要作用8,本研究在前期基础上观察慢性M S应激以及阻断G a b r a 6对大鼠海马兴奋性突触传递以及大鼠抑郁的影响,从而进一步探讨G a b r a 6改变在慢性M S应激导致大鼠抑郁中的作用。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物 S D孕鼠购于广西医科大学实验动物中心S C X K(桂)2 0 2 2-0 0 0 3,所有母鼠均为初产,同一窝的幼崽随机分为对照组和母婴分离组。母婴分离组从出生后第2天开始,每天上午1 0:0 0到下午4:0 0进行幼鼠与母鼠的分离(M S),直到出生后第1 5天,分离过程中将幼鼠放置于另外的干净笼子里,待到分离结束后再放回到母鼠身边。对照组动物正常饲养,幼鼠与母鼠保持同笼不受干扰。幼鼠在出生后第2 2天离乳,于出生后第4 2天第4 9天进行行为学检测。本研究中涉及对实验动物的操作处理符合医学伦理学标准和动物3 R原则,已获广西医科大学动物护理委员会批准。1.1.2 主要试剂与仪器 GA B AA受体 6亚单位(G a b r a 6)拮抗剂F u r o s e m i d e购于S i g m a-A l d r i c h公司;AMP A受体拮抗剂二硝基喹酮(D NQ X)购于S i g-m a-A l d r i c h公司;动物孵育箱(青岛精诚仪器仪表有限公司生产);振动切片机(L e i c aVT1 2 0 0S,美国);脑片膜片钳记录系统(M u l t i C l a m p 2 0 0 B放大器、D i g i-d a t a1 4 4 0 A数模转换器,A x o nI n s,美国);C l a m p e x1 0.3软件(M o l e c u l a rD e v i c e s,美国)。1.2 实验方法1.2.1 新环境进食抑制试验 实验在暗室中进行。无盖方箱侧壁和底面均涂为黑色(长、宽均为6 0c m,高为4 0c m),底面均匀铺一层木削(约23c m厚),将圆形白色滤纸(直径约1 6c m)放在箱底中央后,将提前称重的单颗大鼠饲料放在滤纸中央。用聚光灯从方箱上方照亮滤纸,箱内其他位置保持黑暗。通过调节聚光灯亮度,将对照组大鼠从放入方箱到开始进食的时间控制在1 0m i n以内。实验前所有动物均提前禁食2 4h,实验过程中将大鼠从方箱的角落放入箱内,并观察1 0m i n,记录从大鼠进入箱中到开始啃咬食物的时间,即进食潜伏期。实验完成后将大鼠和测试所用原饲料颗粒一同放回原饲养笼中,记录大鼠在5m i n内进食饲料的重量,数值计算为进食饲料重量(g)/大鼠体重(k g),以便排除大鼠之间食欲差异对进食潜伏期的影响。用大鼠进食潜伏期长度作为判断抑郁严重程度的指标。1.2.2 强迫游泳试验 实验于盛有水的透明玻璃圆桶中进行。桶直径为2 0c m,桶高为3 0c m,水面距离圆桶上沿为1 0c m,水温保持为(2 21)。测试大鼠游泳总时长为6m i n,记录大鼠在桶中后4m i n内大鼠分别处于四肢明显运动和漂浮不动状态的时间。大鼠漂浮不动时间长度为判断抑郁严重程度的指标。1.2.3 糖水偏爱试验 大鼠正式实验前进行糖水训练4 8h,实验过程中大鼠提前禁水2 4h,测试时大鼠给予提前称重的两瓶水,分别为普通饮用水和含有1%蔗糖的饮用水,测试大鼠自由饮水3h后,两瓶水交换位置,大鼠继续饮水3h(共6h),称量普通饮用水和糖水的重量,并计算糖水偏爱程度(%)=糖水摄4512 0 2 4年 右江民族医学院学报 第2期入量(g)/糖水摄入量(g)+普通水摄入量(g)。1.2.4 海马脑片切片 大鼠使用1%戊巴比妥钠腹腔注射(4 0m g/k g)全身麻醉后立即断头处死,快速分离海马,并使用L e i c aVT1 2 0 0S振荡切片机切成4 0 0m厚的切片,置于0 的人工脑脊液(A C S F)中,A C S F成分 为:N a C l1 2 4 mm o l/L,K C l3 mm o l/L,N a H2P O41.2 5mm o l/L,M g C l21.5mm o l/L,C a C l22.5 mm o l/L,N a HC O32 6 mm o l/L和g l u c o s e1 0mm o l/L,提前3 0m i n使用9 5%O2/5%C O2饱和。切片在饱和9 5%O2/5%C O2A C S F中室温下恢复1h以上进行实验。1.2.5 诱发的兴奋性突触后电流(e E P S C)记录 将切片转移到浴槽中,在室温下用A C S F灌流(流速约12m L/m i n)。近红外(I R)光照明下,正置显微镜4 0倍物镜下观察海马脑片C A 1区锥体细胞,使用由I R敏感的C C D摄像机采集图像。浴槽中的电极电阻为36 M,串联电阻3 0 M。电极内液包含K C l1 3 5 mm o l/L、N a C l2 mm o l/L、M g S O41 mm o l/L、C a C l20.2 mm o l/L、E G T A2 mm o l/L、Q X 3 1 4-C l5mm o l/L、M g-AT P4mm o l/L、t r i s-G T P0.3mm o l/L和HE P E S1 0mm o l/L(用KOH调节p H至7.2,并用蔗 糖 校 正 渗 透 压 至2 9 5 m o s M)。脑 片 外 灌 流A C S F,并加入T T X0.5m o l/L以阻断动作电位。锥体细胞的膜电位保持在-6 5mV,使用同心双极钨刺激电极以0.0 5H z的频率使用递增强度的1 0 0s持续时间电流刺激海马脑片T A束,最终刺激强度设置为阈值强度的1 5 0%,并使用全细胞膜片钳方法记录C A 1区锥体细胞e E P S C。使用M u l t i c l a m p7 0 0B放大器进行数据采集,滤波频率为2k H z,使用D i g i-d a t a1 4 4 0 A和C l a m p e x1 0.3软件进行数据采集和分析。1.3 统计学方法 实验数据应用S P S S2 3.0软件进行统计分析,作图采用S i g m a P l o t1 3.0软件。计量资料采用(xs)表示,P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 母婴分离应激导致大鼠出现抑郁样行为 对照组大鼠在新环境中进食潜伏期为(1.9 90.1 6)m i n,M S组大鼠为(3.2 50.2 0)m i n,M S组大鼠进食潜伏期明显延长(P0.0 5,见图1 A,提示两组大鼠间食欲无差异。M S大鼠强迫游泳的漂浮不动时间为(1 4 4.5 78.0 5)s,与对照组大鼠(8 2.4 16.8 3)s相比不动时间明显延长(P0.0 5,见图1 C。注:A.新环境进食抑制实验(N S F T);B.强迫游泳实验(F S T);C.糖水偏爱实验。*P0.0 1。图1 M S应激导致大鼠出现抑郁样行为5512 0 2 4年 右江民族医学院学报 第2期2.2 大鼠海马脑片C A 1区锥体细胞e E P S C 全细胞脑片膜片钳方法可以在海马脑片C A 1区锥体细胞中记录到稳定的e E P S C,见图2 A、图2 B。脑片外灌流A C S F中加入5 0m o l/L谷氨酸受体拮抗剂D NQ X可显著抑制e E P S C,见图2 A、图2 B。D NQ X使e E P-S C电流幅度由(1 0 3.6 76.2 9)%减小为(1 3.3 41.4 1)%,P0.0 1,见图2 C,证实该电流为AMP A受体介导的兴奋性突触后电流。注:A.e E P S C瞬时电流图;B.e E P S C时程图;C.e E P S C统计图。*P0.0 1。图2 大鼠海马脑片C A 1区锥体细胞e E P S C记录2.3 G a b r a 6拮抗剂呋塞米使e E P S C幅度增加 脑片外灌流A C S F中加入1 0 0m o l/LG a b r a 6拮抗剂呋塞米可显著增强全细胞脑片膜片钳方法在海马脑片C A 1区锥体细胞中记录到的e E P S C,且脑片外灌流正常A C S F洗脱呋塞米可使e E P S C幅度恢复,见图3 A、图3 B。呋塞米使e E P S C相对电流幅度由(1 0 0.8 77.2 1)%增加为(1 7 5.8 41 2.1 8)%(P0.0 1),见图3 C,证实阻断G a b r a 6可使突触传递增强,提示正常情况下G a b r a 6在大鼠C A 1椎体神经元中发挥紧张性抑制e E P S C的作用。5 0m o l/LD NQ X使e E P S C电流幅度减小为(1 4.5 82.0 5)%(P0.0 1),见图3 C,证实阻断G a b r a 6所增强的电流为AMP A受体介导的兴奋性突触后电流。注:A.呋塞米(f u r o s e m i d e,F u r o s)增强e E P S C瞬时电流图;B.呋塞米增强e E P S C时程图;C.e E P S C统计图。与C o n t r o l组比较,*P0.0 1。图3 大鼠海马脑片C A 1区锥体细胞e E P S C记录2.4 呋塞米对M S大鼠e E P S C的增强作用较弱 脑片外灌流A C S F中加入1 0 0m o l/LG a b r a 6拮抗剂呋塞米可显著增强对照组大鼠中记录到的e E P S C,其对M S组大鼠e E P S C的增强作用显著降低,见图4 A。e E P S C s时程图显示,呋塞米可使正常大鼠e E P S C幅度持续增强,对M S大鼠e E P S C幅度的增强作用较小,且增强作用随时间衰减,见图4 B。呋塞米使对M S大鼠e E P S C相对电流幅度增加为(1 3 2.8 55.0 8)%,低于对照组大鼠(P0.0 5),见图4 C。G a b r a 6拮抗剂呋塞米使M S大鼠海马C A椎体神经元e E P S C增加幅度减小,提示M S大鼠海马中G a b r a 6对于C A 1椎体神经元e E P S C紧张性抑制的作用减弱。6512 0 2 4年 右江民族医学院学报 第2期注:A.M S抑制呋塞米(f u r o s e m i d e,F u r o s)对e E P S C的增强作用瞬时电流图;B.M S抑制呋塞米增强e E P S C时程图;C.e E P S C统计图。*P0.0 5。图4 G a b r a 6拮抗剂呋塞米对M S大鼠e E P S C的增强作用3 讨论兴奋性突触传递在大脑功能和功能障碍中发挥关键作用8。兴奋性受体介导神经元之间的兴奋性信号传递,是脑区特异性变构抑制剂的重要作用位点9,并且兴奋性受体参与新型快速抗抑郁药物的作用1 0,提示兴奋性受体功能可能在抑郁症发生和治疗中发挥重要作用,且有望成为治疗抑郁症特异性药物的靶点。本课题组所记录到的兴奋性突触后电流可以被兴奋性AMP A受体拮抗剂阻断,证实该兴奋性突触后电流为AMP A受体介导的突触后电流。在此基础上观察M S大鼠海马中兴奋性受体介导的突触后电流特性的改变,从而进一步探讨其在慢性M S应激导致大鼠抑郁之一过程中的改变及可能作用。GA B A受体主要包括GA B AA和GA B A B受体两种亚型。GA B AA受体为配体门控氯离子通道,由、等多种亚单位构成,亚单位组合方式的不同使其在结构、功能及药理学特性等存在差异。研究表明1 1,GA B AA受体在抑郁症中发挥重要作用。抑郁症发生和治疗过程中存在GA B AA受体的改变,抑郁症自杀者以及抑郁症患者治疗过程中大脑GA B AA受体蛋白水平均发生改变,提示GA B AA受体可能参与抑郁症的发生和治疗。最新的研究表明1 2,一些选择性激活GA B AA受体特定亚单位的药物可发挥快速抗抑郁的作用,进一步证实抑郁症GA B AA受体亚单位的表达改变在郁抑症治疗中发挥重要作用。因此,研究慢性应激对大鼠大脑GA B AA受体表达及功能的影响有助于揭示大鼠罹患应激障碍性疾病的可能机制,并有望为应激障碍性疾病的的预防和治疗提供理论基础和实验依据。本课题组前期研究发现慢性M S应激导致大鼠在新环境中的进食潜伏期延长7,提示M S导致雄性大鼠发生抑郁。动物行为学实验是检测大鼠抑郁的重要手段。研究表明蔗糖偏爱降低提示快感缺失,是抑郁症的重要表现之一1 3。此外,强迫游泳实验可以检测大鼠 的 绝 望 行 为,是 反 映 大 鼠 抑 郁 程 度 的 重 要 指标1 4,这些指标对于判断大鼠发生抑郁具有重要作用。本次研究结果表明出生早期M S应激导致青春期大鼠在新环境中的进食潜伏期延长,并且强迫游泳实验中漂浮不动时间延长,提示早期M S应激导致青春期大鼠出现抑郁症中的绝望行为,证实早期M S应激可导致青春期大鼠发生抑郁。此外,本次研究结果表明慢性M S应激并未导致青春期大鼠出现蔗糖偏爱降低,提示慢性M S应激未能导致大鼠出现快感缺失,这一现象可能与应激的类型及其影响的大脑核团差异有关。本课题组前期发现慢性M S应激使雄性大鼠海马G a b r a 6蛋白水平显著降低,选择性拮抗剂可以抑制海马C A 1区锥体细胞的抑制性突触后电流,下调海马G a b r a 6蛋白表达可导致正常大鼠出现抑郁样行为7,这些结果提示G a b r a 6蛋白参与构成的GA B AA受体氯通道在调节海马C A 1区锥体细胞相关的抑制性突触传递及抑郁症的发生中发挥重要作用。本研究在这一基础上,进一步观察G a b r a 6选择性拮抗剂对大鼠海马兴奋性突触后电流的影响,发现拮抗剂呋塞米可显著增强海马脑片C A 1区锥体细胞中记录到的兴奋性突触后电流,证实阻断G a b r a 6可使突触传递增强。此外,G a b r a 6选择性拮抗剂对M S大鼠海马兴奋性突触后电流的增强作用显著降低,提示慢性M S应激可能通过改变G a b r a 6表达或功能,从而减弱其对于兴奋性突触后电流的抑制作用。研究表明兴奋性受体在突触可塑性中发挥关键作用,兴奋性受体激动剂具有抗抑郁作用1 5,提示兴奋性受体表达或功能改变可能参与抑郁症的发生及治疗。结合阻断G a b r a 6对M S大鼠海马兴奋性突触后电流的增强作用降低表现,可推测出生早期慢性M S应激降低青春期大鼠海马G a b r a 6表达,改变对于兴奋性突触后电流的抑制,从而参与青春期抑郁症的发生过程。7512 0 2 4年 右江民族医学院学报 第2期综上所述,M S应激可能通过改变海马G a b r a 6,从而影响兴奋性突触后传递,本研究进一步加深对于G a b r a 6在抑郁症发生中作用的认识,在此基础上进一步研究新的作用于GA B AA受体的药物,有望为抑郁症的治疗提供新策略。参考文献:1 L E VON EB R,C R YANJF,OL E A T Y O F.S p e c i f i cs u b-r e g i o n so ft h el o n g i t u d i n a la x i so ft h eh i p p o c a m p u sm e d i a t eb e h a v i o u r a lr e s p o n s e st o c h r o n i c p s y c h o s o c i a ls t r e s sJ.N e u r o p h a r m a c o l o g y,2 0 2 1,2 0 1:1 0 8 8 4 3.2 S U B R AMAN I ANS,L O P E ZR,Z O R UM S K ICF,e ta l.E l e c t r o c o n v u l s i v et h e r a p yi nt r e a t m e n tr e s i s t a n td e p r e s-s i o nJ.JN e u r o lS c i,2 0 2 2,4 3 4:1 2 0 0 9 5.3 C AA D A SCD,C A R R E OPT,B O R J ACS,e t a l.B e n-e f i t so fk a n g a r o om o t h e rc a r eo nt h ep h y s i o l o g i c a ls t r e s sp a r a m e t e r so fp r e t e r mi n f a n t sa n dm o t h e r s i nn e o n a t a l i n-t e n s i v ec a r eJ.I n t JE n v i r o nR e sP u b l i cH e a l t h,2 0 2 2,1 9(1 2):7 1 8 3.4 AN J URKI,D A RM S TA D T GL.S e p a r a t i o no fm a t e r n a la n dn e w b o r nc a r ei n U Sh o s p i t a l s:as y s t e m i ct h r e a tt os u r v i v a l,h e a l t ha n dw e l l-b e i n gJ.H e a l t hS y s tR e f o r m,2 0 2 3,9(1):2 2 6 7 2 5 5.5 C I M I NOS,C E R N I G L I AL.I m p a c to fm a t e r n a l-n e w b o r ns e p a r a t i o n i n i t a l i a nw o m e nw i t hs u s p e c t e dC OV I D-1 9i n-f e c t i o no np s y c h o p a t h o l o g i c a l s y m p t o m sa n dq u a l i t yo f i n-t e r a c t i o n s d u r i n g b r e a s t f e e d i n gJ.P s y c h o p a t h o l o g y,2 0 2 3,5 6(5):3 3 5-3 4 1.6 Z HAO X D,Z HAN G A H,L I U W X,e ta l.C h i l d h o o ds e p a r a t i o nf r o mp a r e n t sw i t hc o g n i t i v ea n dp s y c h o p a t h o-l o g i c a l o u t c o m e s i na d o l e s c e n c eJ.D e vS c i,2 0 2 3,2 6(3):e 1 3 3 2 4.7 YAN GLJ,X UT,Z HAN GK,e ta l.T h ee s s e n t i a l r o l eo fh i p p o c a m p a l a l p h a 6s u b u n i t-c o n t a i n i n gG A B AAr e c e p t o r si n m a t e r n a ls e p a r a t i o ns t r e s s-i n d u c e da d o l e s c e n td e p r e s-s i v eb e h a v i o r sJ.B e h a vB r a i nR e s,2 0 1 6,3 1 3:1 3 5-1 4 3.8 G ON Z L E Z-A R I A SC,S N CHE Z-R U I ZA,E S P R Z AJ,e ta l.D y s f u n c t i o n a ls e r o t o n e r g i cn e u r o n-a s t r o c y t es i g n a-l i n g i nd e p r e s s i v e-l i k es t a t e sJ.M o lP s y c h i a t r y,2 0 2 3,2 8(9):3 8 5 6-3 8 7 3.9 YUJ,R AOP,C L A R KS,e ta l.H i p p o c a m p a lAMP Ar e-c e p t o ra s s e m b l i e sa n d m e c h a n i s m o fa l l o s t e r i ci n h i b i t i o nJ.N a t u r e,2 0 2 1,5 9 4(7 8 6 3):4 4 8-4 5 3.1 0 HA R A H,S U Z UK IA,KUNUG IA,e ta l.TAK-6 5 3,a nAMP Ar e c e p t o r p o t e n t i a t o rw i t hm i n i m a l a g o n i s t i c a c t i v-i t y,p r o d u c e sa na n t i d e p r e s s a n t-l i k ee f f e c tw i t haf a v o r a-b l es a f e t yp r o f i l e i nr a t sJ.P h a r m a c o lB i o c h e m B e h a v,2 0 2 1,2 1 1:1 7 3 2 8 9.1 1 L U S CHE R B,MAGU I R EJL,R U D O L P H U,e ta l.G A B AAr e c e p t o r sa st a r g e t sf o rt r e a t i n ga f f e c t i v ea n dc o g n i t i v es y m p t o m so fd e p r e s s i o nJ.T r e n d sP h a r m a-c o lS c i,2 0 2 3,4 4(9):5 8 6-6 0 0.1 2 C L AY T ON A H,L A S S E R R,P A R I KH S V,e ta l.Z u r a n o l o n e f o rt h et r e a t m e n to fa d u l t sw i t h m a j o rd e-p r e s s i v e d i s o r d e r:a r a n d o m i z e d,p l a c e b o-c o n t r o l l e dp h a s e3t r i a lJ.AmJP s y c h i a t r y,2 0 2 3,1 8 0(9):6 7 6-6 8 4.1 3 Y I NCY,L IL D,XUC,e ta l.An o v e lm e t h o df o ra u t o-m a t i cp h a r m a c o l o g i c a le v a l u a t i o no fs u c r o s ep r e f e r e n c ec h a n g e i nd e p r e s s i o nm i c eJ.P h a r m a c o lR e s,2 0 2 1,1 6 8:1 0 5 6 0 1.1 4 NA D E AUBG,MA R CHAN TEG,AM I RS,e t a l.T h