基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的薏苡竹叶散质量评价.pdf

B2024年3月422-436CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY第3期第41卷应用化学D0I:10.19894/j.issn.1000-0518.230277基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的意苡竹叶散质量评价王野谌邱智东张衍旭王俪颖王茂旭董雪莲（长春中医药大学药学院，长春130 117）摘要建立高效液相指纹图谱进行外部质量控制，结合化学计量学探究内部质量影响因素，通过量值传递规律确定制备工艺稳定性，全面完善薏苡竹叶散（YZP)质量评价系统。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2 0 12.130 7 2 3版本）绘制15批YZP指纹图谱并评价相似度；选择Origin2019b64Bit进行聚类分析（CA），利用SIMCA14.1进行主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA），获得导致质量差异的主要成分；测定15批淡竹叶药材和YZP中草苷和异草苷的含量，探究样品制备过程中的量值传递规律。结果表明，15批YZP指纹图谱得到2 1个共有峰，指认了6 种成分，分别为9 号峰（异草苷）、10 号峰（草苷）、13号峰（牡荆素）、14号峰（异牡荆素）、15号峰（连翘酯苷A）和2 0 号峰（连翘苷），相似度在0.9 56 0.9 9 5之间，符合相关规定；CA结果显示，15批YZP被分为两类，PCA共得到3个主成分，累计贡献率8 2.4%，OPLS-DA得出10 个贡献率较大成分，包括已指认出的9 号峰（异草苷）、13号峰（牡荆素）和2 0 号峰（连翘苷），有利于进一步质量评价；15批淡竹叶饮片中草昔、异草苷的质量分数为0.2 156%0.9 9 2 3%、0.530%2.0 52%，15批YZP中草昔、异草苷的质量分数为0.0 2 2%0.112%、0.0 6 5%0.312%，饮片-YZP中草苷、异药草苷转移率为7 8.41%119.54%、7 4.57%12 7.9 6%转移率皆在平均值30%范围内，未出现离散值，说明制备工艺较稳定。本文建立了HPLC指纹图谱结合多指标含量测定方法，有效控制YZP外部质量，通过化学计量学确定了影响质量的内部因素，转移率稳定确定制备工艺稳定可靠，为YZP全面质量评价奠定基础关键词薏苡竹叶散；量值传递；指纹图谱；化学计量学；草苷；异草苷；质量评价中图分类号：0 6 57.3；R284.1文献标识码：A文章编号：10 0 0-0 518(2 0 2 4)0 3-0 42 2-15薏苡竹叶散（Yiyi-zhuye powder，YZ P)出自清代吴鞠通所著温病条辩，由薏苡仁、淡竹叶、飞滑石、豆蔻仁、连翘、茯苓和通草7 味药材组成，具辛?解表、淡渗利湿之功，是除温湿之名方，吴鞠通称其为“双解表里之妙法 。现代临床主要用于治疗湿疹、荨麻疹、手足口病和带状疱疹等疾病2-4。散剂指由药材或药材与适宜辅料粉碎后混匀得到的干燥粉末状制剂，是中医重要传统剂型之一5，黄帝内经中有述：“散者散也，去急病用之”，具有起效快、效果显著和制作方法简单等诸多优势，至今仍被广泛应用(6-7 。但由于散剂剂型原始、制剂工艺粗糙，加之研究基础薄弱、研究进展缓慢，散剂的现代发展与传承举步维艰8-10 目前，有关YZP质量标准的研究相对较少且对其临床应用的研究占绝大多数3,缺乏整体的指纹图谱、含量测定以及制剂工艺研究，因此为了促进YZP复方的开发应用，通过查阅古籍文献确定YZP的处方剂量和制备工艺，采用高效液相色谱（HPLC)法开展YZP指纹图谱和含量测定研究，探究草苷、异草苷在淡竹叶饮片-YZP复方的量值传递规律，并结合化学计量学阐明15批YZP的整体质量和差异性成分，初步建立YZP质量控制标准，以期为YZP后续制剂研究与开发提供科学依据。1实验部分1.1仪器和试剂Agilent1260型高效液相色谱仪（HPLC，美国安捷伦科技有限公司）；EL204型电子天平（瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司）；MS105型十万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利多仪器有限公司）；KQ-500）2023-09-13收稿；2 0 2 3-12-2 9 接受吉林省科技发展计划项目（No.20200602034ZP）资助*E-mail:423第3期王野谌等：基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的薏苡竹叶散质量评价型超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；ZN-20L型小型粉碎机（北京中科耐驰技术有限公司）。连翘苷对照品（批号：110 8 2 1-2 0 2 117，纯度9 4.9%）、连翘酯苷A对照品（批号：1118 10-2 0 2 10 8，纯度9 6.2%）和异草苷对照品（批号：1119 7 4-2 0 140 1，纯度9 8%）均购自中国食品药品检定研究院；草苷对照品（批号：G11N11L130730，纯度9 8%）、牡荆素（批号：M12GB14216，纯度9 8%）和异牡荆素（批号：2 7 GB165516，纯度9 8%）均购自上海源叶生物科技有限公司；乙睛、甲醇为色谱纯（美国Fisherscientific公司）；磷酸为分析纯，购自于天津市永大化学试剂有限公司；实验用水为娃哈哈纯净水。YZP中所涉及到的饮片均购自于各主产地，饮片的批号、产地等相关信息见表1。经长春中医药大学中药鉴定教研室翁丽丽教授鉴定：薏苡仁为禾本科植物薏米Coixlacryma-jobiL.var.ma-yuen（R o ma n.）S t a p f 的干燥成熟种仁；淡竹叶为禾本科植物淡竹叶LophatherumgracileBrongn的干燥茎叶；飞滑石为硅酸盐类矿物滑石族滑石经水飞法炮制后的粉末；豆蔻仁为姜科植物白豆蔻AmomumkravanhPierre exGagnep.的干燥成熟果实；连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspensa（T h u n b.）Va h l 的干燥果实；茯苓为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos（S c h w.）W o l f 的干燥菌核；通草为五加科植物通脱木Tetrapanax papyrifer(Hook.）K K o c h 的干燥茎髓。表1YZP中饮片产地来源及批号Table 1Origin and batch number of YZP Chinese decoction piecesCoicis SemenLophatheri HerbaTalci PulvisForsythiaeFructusNumberOriginBatch numberOriginBatch numberOriginBatch numberOriginBatch numberBozhou,Changde,Guilin,Jincheng,S120220201CLB-20210906HS220605220702AnhuiHunanGuangxiShanxiXingren,Qujing,Guilin,Linfen,S2C608211101SES-2021081320211012C343210802GuizhouYunnanGuangxiShanxiYunnan,Guangning,Yunnan,Yunnan,S320220711HLB-2021093022050120211105KunmingGuangdongKunmingKunmingBozhou,Dazhou,Guilin,Yunnan,S420220202CSL-202009152021101620211102AnhuiSichuanGuangxiKunmingYunnan,Luan,Yunnan,Jincheng,S520220713GYX-20211007220601220703KunmingAnhuiKunmingShanxiBozhou,Changde,Guilin,Bozhou,S620220203CLB-20210908HS220602210301AnhuiHunanGuangxiAnhuiXingren,Qujing,Guilin,Linfen,S7220703SES-2021081520211015C343210801GuizhouYunnanGuangxiShanxiYunnan,Guangning,Guilin,Luan,S820220714HLB-20210922HS220603210421KunmingGuangdongGuangxiAnhuiLuan,Dazhou,KunmingBozhou,S9200602CSL-20200913220607210303AnhuiSichuanYunnan,AnhuiLuan,Dazhou,KunmingJincheng,S10200601CSE-20201013220603220701AnhuiSichuanYunnan,ShanxiYunnan,Luan,Guilin,KunmingS1120220712GYX-20210913HS22060420211103KunmingAnhuiGuangxiYunnan,Anlong,Qujing,Guilin,Linfen,S12220701SES-2021081620211011C343210806GuizhouYunnanGuangxiShanxiLuan,Guangning,KunmingKunmingS13200603HLB-2021092622060920211104AnhuiGuangdongYunnan,Yunnan,Xingren,Changde,Guilin,KunmingS14220704CLB-20210901HS22060120211101GuizhouHunanGuangxiYunnan,Anlong,Luan,Guilin,Linfen,S15C608211103GYX-2021091120211014C343210803GuizhouAnhuiGuangxiShanxiContinuedonthenext page424应用化学第41卷Continuedfrom previous pageCoicis SemenPoriaTetrapanacis MedullaNumberOriginBatch numberOriginBatch numberOriginBatch numberS1Kunming,Yunnan211101Bozhou,Anhui220401Luan,Anhui211102S2Kunming,Yunnan220303Huaihua,Hunan220300041Baise,GuangxiTC3842211S3Bozhou,Anhui220503Lijiang,Kunming220901S1Bozhou,Anhui220401S4Bozhou,Anhui220505Bozhou,Anhui220403Guilin,GuangxiTC-06S5Kunming,Yunnan211105Luan,Anhui220606Bozhou,Anhui220406S6Luan,Anhui210601Huaihua,Hunan220300008Bozhou,Anhui220402S7Kunming,Yunnan220304Anqing,Anhui211107Guilin,GuangxiTC3842210S8Bozhou,Anhui220504Luan,Anhui220607Guilin,GuangxiTC-10S9Luan,Anhui210701Huaihua,Hunan220300024Bozhou,Anhui220403S10Luan,Anhui220801Lijiang,Yunnan220901S2Luan,Anhui211107S11Bozhou,Anhui220411Huaihua,Hunan220300023Bozhou,Anhui220405S12Kunming,Yunnan220305Huaihua,Hunan220300012Baise,GuangxiTC3842204S13Bozhou,Anhui220420Lijiang,Kunming220901S5Luan,Anhui211103S14Luan,Anhui220702Bozhou,Anhui220402Bozhou,Anhui220404S15Kunming,Yunnan211103Luan,Anhui220608Baise,GuangxiTC38422051.2实验方法1.2.1YZP制备工艺考证温病调辩！中记载薏苡竹叶散用法用量为：“薏苡五钱，竹叶三钱，飞滑石五钱，白蔻仁一钱五分，连翘三钱，茯苓块五钱，白通草一钱五分，共为细末，每服五钱，日三服”。经查阅中国科学技术史度量衡卷 1、中国历代度量衡单位量值表及说明12 等书籍文献后确定，清代一钱约为今之3.7 3g，一分约合0.37 3g。细末在古代口服散剂中应用较多，张仲景伤寒论中五苓散原方粉碎粒度为“为细末”13,2 0 2 0 版中国药典中粉末粒度被分为最粗粉、粗粉、中粉、细粉、最细粉和极细粉6 个规格，其中五苓散制法为“粉碎成细粉，过筛，混匀，分装”。因此，根据古今对照建议原方中细末”采用2 0 2 0 版中国药典中细粉规格，即过六号筛（150 m）。综上所述，最终确认YZP现代制备工艺为：薏苡仁18.6 5g，淡竹叶11.19 g，飞滑石18.6 5g，豆蔻仁5.595g，连翘11.19 g，茯苓18.6 5g，通草5.59 5g，粉碎后过六号筛（150 m）筛，即得1.2.2指纹图谱测定方法1.2.2.1标准品溶液的制备精密称取连翘苷、连翘酯苷A、草苷、异草苷、牡荆素和异牡荆素对照品适量，加人8 0%甲醇溶夜分别制成浓度为8 6.52、30.0 2、6 2.34、49.33、8 9.8 9 和7 4.36 g/mL的单一对照品溶液1.2.2.2供试品溶液的制备精密称取5.0 gYZP样品（S15），精密加人30 mL80%甲醇，超声处理30 min（50 0 W，40 k Hz），冷却至室温后补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，过0.45m的微孔滤膜，即得1.2.2.3各单味饮片溶液的制备分别精密称取YZP样品（S1)中各单味饮片，即薏苡仁18.6 5g，淡竹叶11.19 g，飞滑石18.6 5g，豆蔻仁5.59 5g，连翘11.19 g，茯苓18.6 5g，通草5.59 5g，精密加人30 mL80%甲醇，超声处理30 min（50 0 W，40kHz），冷却至室温后补足重量，摇匀，滤过，滤液浓缩至5mL，过0.45um的微孔滤膜，即得。1.2.2.4色谱条件色谱柱为AgilentEclipseSB-C18色谱柱（4.6 x250mm，5m）；流动相为乙腈（A)-0.05%磷酸水溶液（B）梯度洗脱（0 2 0 min，5%A；2 0 30 mi n，5%10%A；30 40 mi n，10%13%A；40 6 0 mi n，13%15%A;6080 min,15%16%A;80110 min,16%28%A;110130 min,28%8%A);流速为0.8 mL/min;样品溶液。64.425王野谌等：基于指纹图谱、量值传递及化的薏苡竹叶散质量评价第3期检测波长为2 10 nm；柱温为30；对照品及供试品溶液进样量为10 L。1.2.3草苷、异草苷含量测定方法1.2.3.1供试品溶液的制备1)淡竹叶饮片：精密称取2.0 g淡竹叶饮片样品（S1），置具塞锥形瓶中，精密加人2 0 mL60%乙醇，超声处理30 min（50 0 W，40 k Hz），冷却至室温后用6 0%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液过0.45m的微孔滤膜，即得。2)YZP：精密称取5.0 gYZP样品（S15），置具塞锥形瓶中，精密加入40 mL60%乙醇，超声处理30 min（50 0 W，40 k H z），滤过，容器洗涤3次，合并溶液，蒸干，精密加人5mL60%乙醇溶解，过滤，续滤液过0.45um的微孔滤膜，即得1.2.3.2对照品溶液的制备精密称取草苷、异草苷对照品，加入6 0%乙醇定容至2 0 mL，分别制备质量浓度为33.2 0 和17ug/mL的混合对照品溶液1.2.3.3阴性样品溶液的制备按处方比例称取各药材，按照1.2.3.1小节步骤2材，按照1.2.3.1小节步骤2)制备不含淡竹叶的阴性1.2.3.4色谱条件色谱柱：AgilentEclipseSB-C18（4.6 x 2 50 mm，5m）；流动相：乙腈（A-0.05%磷酸水溶液（B），梯度洗脱(0 7 min,8%A;717 min,8%13%A;1730 min,13%15%A;3045 min,15%18%A;4550 min,18%8%A；50 56 m i n，8%A）；流速：0.8 mL/min；检测波长：36 0 nm；柱温：30；进样量：10 L。2结果与讨论2.115批YZP指纹图谱建立2.1.1相似度评价及色谱峰归属取15批YZP样品（S1-S15)以及各单味饮片按照1.2.2.2 小节和1.2.2.3小节方法制备供试品溶液，按照1.2.2.4小节色谱条件进样测定，记录色谱图。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2 0 12 版）软件进行分析，以S1为参照图谱，采用中位数法，经多点校正后匹配生成YZP指纹图谱，结果见图1。21个共有峰相似度为0.9 56 0.9 9 5,结果见表2 和表3，符合指纹图谱要求，认为15批YZP化学构成相似。所得薏苡仁、淡竹叶、连翘、豆蔻仁、飞滑石、茯苓和通草各单味饮片图谱见图2。结果显示，全方中21个共有峰多数来自于淡竹叶、连翘、豆蔻仁和薏苡仁，而通草、滑石和茯苓3味饮片色谱峰较少，这可能与饮片成分检测特殊性关有151220913141623456111718192110RSi5个S105101520253035404550556065707580859095100105110115120125130Time/min图115批YZPHPLC指纹图谱和对照指纹图谱Fig.1HPLC fingerprints and control fingerprints of 15 batches of YZP426应用化学第41卷表2YZP指纹图谱相似度值Table 2Similarity value of YZP fingerprintSampleSimilaritySampleSimilarityS10.995S90.973S20.971S100.976S30.956S110.953S40.962S120.981S50.966S130.966S60.956S140.979S70.972S150.989S80.982表315批YZP指纹图谱相似度评价结果Table3Similarity evaluation results of 15 batches of YZP fingerprintSampleS1S2S3S4S5S6S7S8S9S10S11S12S13S14S15SS110.9540.9980.9780.9990.9970.9560.9970.992 0.998 0.9990.952 0.996 0.9750.980.995S20.95410.9510.970.9520.9510.9990.9480.9410.950.9530.9980.9480.9670.9810.971S30.9980.95110.9820.99910.95210.9940.9980.9980.9510.9990.978 0.9820.996S40.9780.970.98210.980.9820.970.9820.9860.9810.982 0.9730.9830.9990.9870.992S50.9990.9520.9990.9810.9980.9540.9980.99310.9990.9510.9980.9760.983 0.996S60.9970.95110.9820.99810.95210.9930.9980.9980.95110.9780.9830.996S70.9560.9990.9520.970.9540.95210.9490.9420.9520.9540.9980.9490.9660.9810.972S80.9970.94810.9820.99810.94910.9940.9980.9980.94910.9780.9810.996S90.9920.9410.9940.9860.9930.9930.9420.99410.9940.995 0.9420.9950.9850.9770.993S100.9980.950.9980.98110.9980.9520.9980.99410.9980.950.9970.978 0.9820.996S110.999 0.9530.9980.9820.9990.9980.9540.9980.9950.99810.9510.9980.9790.981 0.996S120.9520.9980.9510.9730.951 0.9510.9980.9490.9420.950.95110.9490.970.9820.971S130.9960.9480.9990.9830.99810.94910.9950.9970.9980.94910.980.9820.996S140.9750.967 0.9780.9990.9760.9780.9660.9780.985 0.9780.9790.970.9810.9840.99S150.980.9810.982 0.9870.983 0.983 0.9810.9810.977 0.982 0.9810.9820.9820.98410.992S0.995 0.9710.996 0.9920.9960.9960.972 0.9960.9930.9960.9960.9710.9960.990.9921152021h1613g15f1718人人e9113d51020C12161314b34215618一210111719a05101520253035404550556065707580859095100105110115120125130Time/min图2YZP中单味饮片测定结果Fig.22Results of single decoction pieces in YZPa.Complete prescription;b.Amomi fructus rotundus;c.Lophatheri Herba;d.Coicis Semen;e.Forsythiae Fructus;f.Poria;g.Talic Pulvis;h.Tetrapanacis Medulla427王野谌等：基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的薏苡竹叶散质量评价第3期将YZP指纹图谱与各对照品色谱图比对，以保留时间是否相近为主要评判标准，同时结合色谱图中其它信息，最终指认出6 个成分，分别为9 号峰（异草苷）、10 号峰（草苷）、13号峰（牡荆素）、14号峰（异牡荆素）、15号峰（连翘酯苷A)和2 0 号峰（连翘苷）。由于16 号峰分离度良好且峰面积适宜，因此选择16 号色谱峰为参照峰，计算出各共有峰的相对峰面积值，结果RSD值在12.2%133.3%之间，反映不同批次YZP中各成分含量相差较大，质量有明显区别，具体结果见表4。表415批YZP共有峰相对峰面积Table 4Common peak-peak area of 15 batches of YZPNumberof the peaksSample123456789101110.0950.0500.1070.0770.1430.1380.0970.0520.0350.0930.02920.4940.1010.2670.1840.4070.3990.0450.2950.5180.1920.11230.0800.0330.0940.0750.0930.1740.0210.0250.0220.1270.08540.1100.0440.0750.0350.0810.1310.2740.0840.0180.0970.03250.0900.0410.0820.0590.1040.2590.0310.0220.0190.2470.01960.0790.0320.0280.0780.1060.2480.0240.0230.0190.1470.08470.4690.1040.0910.1780.4250.6010.0430.2910.5040.2940.12280.0720.0220.0680.0140.0940.2210.0280.0240.0980.1620.07690.0890.0360.0590.0380.0820.1030.3920.0230.1060.1060.030100.0820.0340.0580.0540.0880.2420.0440.0240.1150.2840.029110.0850.0420.0820.0720.0860.1120.0950.0230.1050.1030.018120.3670.0970.2060.1660.3760.4600.0340.2550.4070.3620.095130.0800.0300.0820.0780.0850.2010.0520.0140.0690.1350.069140.1090.0410.0600.0360.0840.1220.1400.0190.1000.0950.028150.4760.1010.2270.1860.4210.5710.0400.3000.4970.2900.111RSD/%91.155.565.866.980.862.2116.9120.6111.549.360.4Numberof the peaksSample1213141516171819202111.4120.2760.3897.0421.0000.0540.2850.0780.7540.06321.6440.3960.7778.4901.0000.4620.0780.1250.7452.39731.2390.2160.3705.6821.0000.0350.1680.0160.7890.07940.8190.2250.3355.2821.0000.0220.0910.1150.9880.90551.1850.2720.3306.2831.0000.0410.1940.0610.7270.06461.2270.2460.3875.6581.0000.0360.1650.0160.8020.07471.9140.4320.89110.1281.0000.5450.0690.0500.7252.73081.1960.2550.3965.6241.0000.0350.1680.0350.8020.04790.7830.2480.3335.0961.0000.0220.1190.0760.9200.040101.1170.2850.3436.0751.0000.0430.2220.0730.7040.066111.1760.2500.3235.9121.0000.0440.2030.0620.7120.073121.4120.3500.6387.2861.0000.3740.0790.0850.7482.107131.1480.2460.4205.3191.0000.0320.1550.0360.8140.058140.8270.2510.3505.1281.0000.0220.1080.1100.9850.911151.7380.4180.8378.8661.0000.4740.0970.1070.6872.629RSD/%26.224.642.723.6一133.342.650.112.2132.02.1.2方法学考察2.1.2.1专属性考察取1.2.2.1和1.2.2.2 小节标准品和供试品溶液各10 L，按1.2.2.4小节色谱条件注人高效液相色谱仪测定，结果显示各对照品峰形良好，分离度较高（R1.5），理论塔板数按连翘苷计不低于50 0 0，表明该方法具有较强的专属性，结果见图3。428应用化学第41卷159g1415f20e13人d21C10122014b516834910111311721918人人a051015 20253035404550556065.707580859095100105110115120125130Time/min图3YZP指纹图谱专属性试验Fig.33SpecificitytestofYZPfingerprinta.Complete presecription;b.orientin;c.forsythin;d.vitexin;e.isooroientin;f.isovitexin;g.forsythiolate glycoside A2.1.2.2精密度、重复性和稳定性实验精密度实验精密吸取1.2.2.2 小节供试品溶液10 L，按照1.2.2.4小节色谱条件连续进样6 次，将2 2 号峰（连翘酯苷A）作为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积值。结果显示，RSD值均小于2%（n=6），表明仪器精密度良好。重复性实验取1.2.2.2 小节供试品溶液6 份，精密吸取10 L并按照1.2.2.4小节色谱条件分别测定6 次，将2 2 号峰（连翘酯苷A)作为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积值。结果显示，RSD值均小于2%（n=6），表明方法重现性良好。稳定性实验将1.2.2.2 小节供试品溶液于室温下放置0、2、4、6、8、12 和2 4h后，精密吸取10 L，按照1.2.2.4小节色谱条件测定6 次，将2 2 号峰（连翘酯苷A）作为参照峰，计算各共有峰相对保留时间及相对峰面积值。结果显示，RSD值均小于2%（n=6），表明供试品溶液在室温下2 4h内稳定性良好2.2饮片-YZP中草苷、异草苷含量测定2.2.1淡竹叶饮片-YZP样品草苷、异草苷含量对应关系将15批饮片按照表1排序依次搭配成15批YZP（S 1-S 15），按1.2.3.4小节色谱条件进样分析，测淡竹叶饮片和YZP样品的异草苷含量，考察淡竹叶饮片-方的质量传递关系如公式（1）14-151所示：饮品一样品转移率=（样品中目标成分含量处方样品质量)（饮片中目标成分含量饮片投料量）10 0%（1结果见表5和表6。15批淡竹叶饮片中草苷、异草苷的质量分数为0.2 156%0.9 9 2 3%、0.530%2.052%，15批YZP中草苷、异草苷的质量分数为0.0 2 2%0.112%、0.0 6 5%0.312%，饮片-YZP中草苷、异草苷转移率为7 8.41%119.54%、7 4.57%12 7.9 6%，草苷、异草苷从饮片到处方的转移率在平均值30%范围内，未出现离散数据，符合相关规定，表明样品的制备工艺稳定可靠。2.2.2方法学考察2.2.2.1专属性实验取1.2.3.2 小节2 种对照品溶液各10 L，按照1.2.3.4小节色谱条件分别进行HPLC测定，结果显示草苷、异草苷峰形良好，分离度高（R1.5），理论塔板数不低于50 0 02.2.2.2线性关系考察1)淡竹叶饮片：精密吸取浓度为0.50 0 1和0.49 9 0 mg/mL的草苷、异草苷对照品溶液，加甲醇制成一系列不同质量浓度的对照品溶液，按照1.2.3.4小节色谱条件进样分析，测定峰面积，以峰面积(Y）对质量浓度（X）进行线性回归，结果见表7。429王野谌等：基于指纹图谱、量值传递及化学计量学的薏苡竹叶散质量评价第3期表5饮片-YZP样品草苷质量传递结果Table5The mass transfer results of orientin between decoction pieces and YZP sampleNumberSample mass/mgSamplecontent/%Hydration/%Absolutecontent/%Tansfer rate/%Average/%CSL-2020091311.250.276 15.50.292CSL-2020091511.270.271 14.60.284CSE-2020101311.190.274.74.70.288SES-2021081311.260.992 33.41.027SES-2021081511.200.987 93.91.028SES-2021081611.240.990 54.81.040CLB-2021090111.230.41995.20.443DecoctionCLB-2021090611.200.421 65.10.444piecesCLB-2021090811.220.42554.80.447HLB-2021092211.270.215 63.80.224HLB-2021092611.190.21714.30.227HLB-2021093011.230.22084.30.231GYX-2021100711.210.44785.10.472GYX-2021100911.230.436 64.60.458GYX-2021101111.280.428 85.50.454S189.900.0327.20.03494.31S289.650.0308.60.03391.88S389.720.0348.90.037103.81S489.700.1097.80.11891.68S589.750.1058.00.11488.97S689.630.1127.10.12192.40S789.970.0518.20.056100.49YZP sampleS889.84.0.0498.20.05396.3894.32S989.880.0457.40.04987.10S1089.700.0317.90.034119.54S1189.650.0308.80.033116.17S1289.760.0228.90.02483.66S1389.840.0467.30.05084.28S1489.540.0418.90.04578.41S1589.960.0457.80.04985.78表6饮片-YZP样品异草苷质量传递结果Table 6The mass transfer results of isoorientin between decoction pieces and YZP sampleNumberSample mass/mgSamplecontent/%Hydration/%Absolutecontent/%Tansferrate/%Average/%CSL-2020091311.250.6545.50.692CSL-2020091511.270.6304.60.660CSE-2020101311.190.6474.70.679SES-2021081311.262.0523.42.124SES-2021081511.202.0413.92.124SES-2021081611.242.0084.82.109CLB-2021090111.230.6075.20.640DecoctionCLB-2021090611.200.5305.10.558piecesCLB-2021090811.220.5484.80.576HLB-2021092211.270.8303.80.863HLB-2021092611.190.8604.30.899HLB-2021093011.230.8854.30.925GYX-2021100711.211.0185.11.073GYX-2021100911.230.9744.61.021GYX-2021101111.280.9655.51.021Continued on the next page430应用化学第41卷Continued from previous pageNumberSample mass/mgSamplecontent/%Hydration/