家兔基础实验操作及注意项目总结.docx

基础技能操作经验总结（一） 家兔给药、基础手术及相关仪器初步使用1. 家兔捉拿【试验方法】 先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随即手伸入笼内，从头前阻拦其跑动，一只手快速抓住兔颈背部皮毛，慢慢提起家兔，然后用另一只手轻轻托住臀部，尽可能使兔处于舒适、放松状态。【注意事项】避免抓住耳朵提拿家兔，这么不仅会损伤家兔耳朵，而且易引发家兔担心并激起挣扎和反抗。抓取动物时手法不妥，动作过激造成家兔惊吓， 产生强烈挣扎而长时间处于激动状态，大脑皮层细胞兴奋阈值增加，肾上腺素释放，大脑中枢电位频率增高，大脑皮层运动区过分兴奋，造成麻醉效果不佳。2. 家兔称重和放置【试验方法】兔笼放置在电子秤上，去皮。将兔子脖子卡住兔笼头端凹槽，盖上兔笼盖，使兔子呈趴伏状，统计数据。压住兔笼盖和后座，将兔笼转移到操作台准备试验。【注意事项】兔笼重量提前往皮；尽可能避免头尾不对应；时刻注意压住兔笼盖，避免转移途中兔子摆脱。3. 耳缘静脉麻醉【试验方法】穿刺前准备工作： 穿刺前应拔除待穿刺血管部位兔毛，轻柔或以手指轻弹待穿刺血管使其充血扩张，或用酒精棉球涂擦待穿刺血管使血管扩张。穿刺手法：左手食指和中指夹住静脉近端，拇指绷紧静脉远端，无名指及小指垫在下面，右手持头皮针尽可能从静脉远端刺入。若回抽注射器有暗红色血液流出或注射时若无阻力、无隆起现象，说明针头在血管内。移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液缓慢注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。l 注：本试验所用麻醉药乌拉坦用药剂量为1000 mg/Kg。【注意事项】1. 进针部位宜选择在耳缘静脉远心端血管段，若穿刺失败，可向近心端前移一段再进行穿刺；2.可利用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管扩张，便于操作；3. 静脉注射必需缓慢（大约每分钟推送5ml ），同时观察家兔肌肉担心、角膜反射和对皮肤夹捏反应，当这些活动显著减弱或消失时，应立即停止注射。在注射麻醉药品时，可先用麻醉药品总量三分之二，亲密观察动物生命体征改变，若已达成估计麻醉效果剩下药液可暂不注射，以避免麻醉过深抑制呼吸中枢造成动物死亡；4. 试验动物固定【试验方法】将动物麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈部伸直，口腔和气管成一直线，保持气管通畅。用粗麻绳打类蝴蝶结固定家兔四肢，用棉麻线套住家兔上切牙固定在兔台头端，使家兔四肢和头部伸展并固定。【注意事项】1.打结最好打利于捆缚结，避免家兔摆脱。2.尽可能使颈部抻直，避免扭曲。5.清理兔毛【试验方法】使用弯头兔毛剪剪掉试验部位兔毛。【注意事项】1.左手捏住要剪兔毛，方便剪掉后立即清理。注意不要将兔毛掕起，这么轻易剪到皮肤和皮下神经，引发兔子强烈挣扎。2.尽可能清理洁净，而且避免兔毛乱飞，可在废物桶中加水预防兔毛乱飘。6. 组织切开【试验方法】1组织切开通常标准 (1)依据试验目标要求确定手术切口部位和大小。如肾切除取左背部斜切口，肠切除取腹正中切口。 (2)依据不一样部位切口采取不一样执刀方法，常见执刀方法有三种，图1。【注意事项】 (1)切开前，应先将切口部位皮肤(或其它组织)拉紧，使其平坦担心而固定。 (2)刀刃和切开组织垂直，以一次切开为佳。 (3)组织要逐层切开，并以按皮肤纹理或各组织纤维方向切开为佳。图1执刀方法和组织切开方法(4)组织切开处应选择无关键血管及神经横贯地方，以免将其损伤。(5)选择切口时，应注意选择易于敷料或导管包扎和固定部位。避免术后动物活动时被碰撞、磨擦而脱落。7. 组织分离【试验方法】分离目标在于充足显露深层组织或血管，便于手术操作。1组织分离通常标准 (1)依据不一样部位手术需要采取不一样分离方法。常见分离方法有两种：用刀或剪作锐性分离，用剪割方法将组织分离。该方法常见于致密组织，如皮肤、韧带、筋膜等分离。用止血钳、手指或刀柄等将组织推开或牵拉开钝性分离。该法多用于皮下组织、肌肉筋膜间隙等疏松组织分离。 (2)沿正常组织间隙分离。这么易于分离，且出血少，视野洁净、清楚。【注意事项】 (1)肌肉分离应顺肌纤维方向作钝性分离。若需要横行切断分离，应在切断处上下端先夹两把血管钳，切断后结扎两断端以预防肌肉中血管出血。 (2)神经、血管分离应顺其平行方向分离。要求动作轻，柔，细心操作，不可避暴，切忌横向过分拉扯，以防断裂。8. 气管内插管【试验操作】气管插管目标关键是为了辅助呼吸、测定气道压力、通气量和描记呼吸曲线等。 气管暴露和分离 切开皮肤后，对肌肉、气管、血管和神经分离应用止血钳进行钝性分离。钝性分离皮下组织，暴露颈部肌肉，分开颈部正中肌群即可看到气管。在甲状腺下11.5cm处，用止血钳将气管后软组织稍加分离，在气管下穿二条较粗结扎线，准备结扎固定气管插管之用。 气管插管 在甲状腺以下约12 cm处，用手术剪将气管软骨环剪一倒 “T”型切口，剪开气管口径约二分之一以上，用棉签向肺方向擦净气管内分泌物，然后再向肺方向插入气管插管。用已穿好粗线扎紧后，再在插管侧管上打结，以防插管脱出。【注意事项】1.切忌粗暴操作，小心勿伤及甲状腺及气管两侧后方静脉；2. 不要在软骨环之间气管组织切开，所以处血管较多，如仍有出血，可用温湿纱布压拨迫片刻，同时将兔台后部抬高，使兔头位置低下，以预防血液流入气管造成窒息，出血停止后再做插管；3. 插管前注意检验气管内有没有内分泌物，有话先清理气管后插管；插管后，若气管内分泌物或血液较多，可用一细塑料管从插管侧管处将液体吸出。4. 用已穿好粗线扎紧后，再在插管侧管上打结，以防插管脱出；5. 气管插管过程中应随时注意观察动物呼吸改变。最好隔一段时间放开被夹闭Y型管软管，避免人为性呼衰。9. 颈总动脉分离及插管【试验操作】沿胸锁乳突肌前缘分离胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌之间结缔组织，在肌缝下找到呈粉红色较粗血管，用手指触之有搏动感，即为颈总动脉。分离颈总动脉时应选在距甲状腺以下较远地方开始，预防将甲状腺前动脉切断，用玻璃分针轻轻分离该动脉和神经之间结缔组织，切勿损伤血管和神经。在分离好颈总动脉下面穿过两根结扎线，先结扎远心端，再用动脉夹夹闭血管近心端。于远心端结扎线前用眼科剪呈45角做V型切口，剪开血管管径1/31/2。将准备就绪动脉导管插入血管2cm3cm，用备用线将导管和血管牢靠结扎并和远心端结扎线连接扎紧，以防导管滑脱出血管。取下动脉夹，可见导管中有动脉回血，并随心跳而搏动。用少许肝素将回血推回血管内，实时观察血压。【注意事项】1. 分离颈总动脉时应选在距甲状腺以下较远地方开始，预防将甲状腺前动脉切断，而且切勿损伤血管和神经。伴行血管一束神经包含：迷走神经最粗且明亮；交感神经次之，光泽较暗；最细是减压神经；2. 为了便于动脉插管，颈总动脉应尽可能分离得长部分。通常家兔4cm5cm，豚鼠和大鼠2c m3cm；3. 结缔组织尽可能分离洁净，不然插管时轻易插到膜内；4. 两根结扎线可经过一根线对折穿过动脉下后剪断取得。远心端结扎线和备用结扎线一定要结扎紧，避免出血；5. 动脉夹操作时一定要小心避免磨破动脉，最好将动脉夹深入颈总动脉下于动脉夹中段夹闭血管，以防夹闭不完全；6. 插入血管内插管尽可能长，此时易于固定。不过一定不要插到动脉夹夹闭处，因为插管和动脉夹全部是硬性材料，两厢触碰易使动脉管破裂；7.喷血时，应快速找到出血口，并立即夹闭近心端血管，并用棉球清理创面；若还是出血不止，则考虑是否是远心端结扎线未扎紧，这时夹闭远心端；若多种方法全部不起效，则能够考虑完全结扎试验侧颈总动脉；8.若是少许出血，则可能只是毛细血管受到损伤，这是可用棉球轻轻压迫创面即可止血。10. 输尿管插管【试验方法】下腹部剪毛，普鲁卡因局麻，在耻骨联合向上沿中线做长约4cm切口，沿腹白线切开腹膜，暴露出膀胱，并将膀胱翻向体外，在膀胱底部找到并分离两侧输尿管，在输尿管靠近膀胱处用线结扎，略等片刻，待输尿管略充盈后，用眼科剪剪一小口，向肾脏方向插入一根细塑料管，结扎，搜集尿液。【注意事项】1.家兔膀胱十分脆弱，分离时应用镊子探查，避免直接用手术刀或剪刀粗暴分离；2.输尿管位置较深，分离和插管时需一人帮助拨开肠子和拉扯膀胱，此时需注意用力大小，用力过大时膀胱会因尿液排出而快速缩小（并不影响试验）；3.假如能够，分离输尿管时避免损伤伴行血管，不然会大出血影响视线；4.输尿管近膀胱处结扎后，可略等片刻，待输尿管略充盈后在剪口插管，会轻易很多；5.插管管子剪口需有一定锐度，但锐度过高易损伤输尿管；插管时，可转动插管，使斜面向下，不然易撕裂输尿管。11.处死【试验方法】空气栓塞法【注意事项】判定家兔死亡标准能够是呼吸停止，这是可能生物电还存在波动，可能原因是心脏自律细胞还在活动，但此时心脏功效细胞其实已经停止工作，故能够判定为死亡。12.其它注意事项1.创面长时间开放时，可撒些生理盐水或用生理盐水浸润纱布覆盖，以防组织风干；2.切开皮肤前，可少很多点注射局麻，避免家兔因损伤皮神经而猛烈反抗。13.整体动物体征观察及应对1.兔耳耷拉，表示家兔饮水不足，这时需立即给家兔补充水分，不然会影响试验结果；2.家兔呼吸急促并伴有鸣声，表示家兔呼吸系统有问题，气管插管时应注意清理气管，并在不需要呼吸频率数据时段打开Y型管软管，使呼吸通畅。时刻注意呼吸频率改变。3.当血压降低时，可能是失血过多，此时家兔可能已经休克。