罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急...胞铁死亡的抑制作用及其机制_杨巧玲.pdf

第 49 卷 第 2 期2023年 3 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.49 No.2Mar.2023DOI：10.13481/j.1671587X.20230211罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用及其机制杨巧玲1,2,符璐1,石雨1,叶严珏1,卢日峰3,刘永2,尹俐1（1.重庆理工大学药学与生物工程学院生物制药系，重庆 400054；2.陆军军医大学新桥医院肾内科，重庆 400037；3.吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室，吉林 长春 130021）摘要 目的目的：探讨罗格列酮对脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤（AKI）小鼠肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用，并阐明其作用机制。方法方法：18 只 C57BL/6 雄性小鼠随机分为对照组、LPS 组和LPS+罗格列酮组，每组 6 只。LPS 组和 LPS+罗格列酮组小鼠均腹腔注射 LPS（10 mg kg1）；LPS+罗格列酮组小鼠在 LPS注射前 30 min 尾静脉注射罗格列酮（0.5 mg kg1）；对照组小鼠注射与 LPS 组小鼠同体积的生理盐水。LPS 注射 24 h后处死小鼠，收集肾组织和血清。HE 染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现，分光光度法检测各组小鼠血清中肌酐（CRE）和血尿素氮（BUN）水平，实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组小鼠肾组织中长链脂酰 CoA 合成酶 4（ACSL4）、谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）、溶质载体家族 7成员 11（SLC7A11）、白细胞介素 6（IL-6）、白细胞介素1（IL-1）和肿瘤坏死因子 （TNF-）mRNA 表达水平，Western blotting法检测各组小鼠肾组织中GPX4、SLC7A11和 ACSL4蛋白表达水平。结果结果：HE染色，与对照组比较，LPS组小鼠肾小管管腔内出现空泡结构，肾小管损伤评分明显升高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中细胞排列紧密，管腔内基本无空泡，肾小管损伤评分明显降低（P0.01）。与对照组比较，LPS 组小鼠血清中 CRE 和 BUN 水平明显升高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠CRE 和 BUN 水平明显降低（P0.01）。RT-qPCR 法和 Western blotting 法，与对照组比较，LPS 组小鼠肾组织中 ACSL4 mRNA 和蛋白表达水平升高（P0.01），GPX4 和 SLC7A11 mRNA 和蛋白表达水平降低（P0.01），IL-6、IL-1 和 TNF-mRNA 表达水平升高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中 ACSL4 mRNA 和蛋白表达水平明显降低（P0.01），GPX4 和SLC7A11 mRNA及蛋白水平明显升高（P0.01），IL-6、IL-1 和 TNF-mRNA 表达水平降低（P0.01）。结论结论：罗格列酮可通过调控 ACSL4改善 LPS诱导的 AKI小鼠肾小管上皮细胞铁死亡。关键词 急性肾损伤；长链脂酰 CoA合成酶 4；铁死亡；罗格列酮中图分类号 R-332;R285.5文献标志码 AInhibitory effect of rosiglitazone on ferroptosis of renal tubular epithelial cells in mice with acute renal injury induced by lipopolysaccharide and its mechanismYANG Qiaoling1,2,FU Lu1,SHI Yu1,YE Yanjue1,LU Rifeng3,LIU Yong2,YIN Li1（1.Department of Biopharmaceutical Sciences，School of Pharmacy and Bioengineering，Chongqing 文章编号 1671587X(2023)02035109收稿日期 20220509基金项目 重 庆 市 科 委 自 然 科 学 基 金 面 上 项 目（cstc2019jcyj-msxmX0427）；吉 林 省 科 技 厅 重 点 研 发 项 目（20200403029SF）；重庆市教委科学技术研究项目（KJQN201901139）；重庆理工大学科研启动基金项目（2019ZD35）作者简介 杨巧玲（1996），女，重庆市人，在读硕士研究生，主要从事肾脏疾病基础方面的研究。通信作者 尹 俐，副教授，硕士研究生导师（E-mail：）351第 49 卷 第 2 期 2023 年 3 月吉林大学学报（医学版）University of Technology，Chongqing 400054，China；2.Department of Nephrology，Xinqiao Hospital，Army Military Medical University，Chongqing 400037，China；3.Department of Hygiene Toxicology，School of Public Health，Jilin University，Changchun 130021，China）ABSTRACT Objective：To investigate the inhibitory effect of rosiglitazone on ferroptosis of renal tubular epithelial cells in the mice with acute kidney injury（AKI）induced by lipopolysaccharide（LPS），and to clarify its mechanism.Methods：A total of 18 C57BL/6 male mice were randomly divided into control group（n=6），LPS group（n=6），and LPS+rosiglitazone group（n=6）.The mice in LPS group and LPS+rosiglitazone group were injected with 10 mg kg1 LPS intraperitoneally；the mice in LPS+rosiglitazone group were injected with 0.5 mg kg1 rosiglitazone via the tail vein 30 min before LPS injection；the mice in control group were injected with the same volume of normal saline.The mice were sacrificed 24 h after LPS injection，and the kidney tissue and serum were collected.HE staining was used to observe the pathomorphology of kidney tissue of the mice in various groups；the levels of serum creatinine（CRE）and urea nitrogen（BUN）of the mice were detected by spectrophotometry；real-time fluorescence quantitative PCR（RT-qPCR）method was used to detect the expression levels of acyl CoA synthetase long-chain family member 4（ACSL4），glutathione peroxidase 4（GPX4），solute carrier family 7 member 11（SLC7A11），interleukin-6（IL-6），interleukin-1（IL-1），and tumor necrosis factor-（TNF-）mRNA in kidney tissue of the mice in various groups；Western blotting method was used to detect the expression levels of ACSL4，GPX4，and SLC7A11 proteins in kidney tissue of the mice in various groups.Results：The HE staining results showed that compared with control group，there were vacuoles in the renal tubule lumen of the mice in LPS group，the score of renal tubular injury was increased significantly（P0.01）；compared with LPS group，the renal tubular epithelial cells in kidney tissue of the mice in LPS+rosiglitazone group were closely arranged，there was almost no protein tube，and the score of renal tubular injury of the mice was decreased significantly（P0.01）.Compared with control group，the levels of CRE and BUN in serum of the mice in LPS group were increased（P0.01）；compared with LPS group，the levels of CRE and BUN in serum of the mice in LPS+rosiglitazone group were decreased significantly（P0.01）.The RT-qPCR and Western blotting results showed that compared with control group，the expression levels of ACSL4 mRNA and protein in kidney tissue of the mice in LPS group were increased（P0.01），the expression levels of GPX4 and SLC7A11 mRNA and proteins were decreased（P0.01），and the expression levels of IL-6，IL-1，and TNF-mRNA were increased（P0.01）；compared with LPS group，the expression levels of ACSL4 mRNA and protein in kidney tissue of the mice in LPS+rosiglitazone group were decreased（P0.01），the expression levels of GPX4 and SLC7A11 mRNA and proteins were increased（P0.01），and the expression levels of IL-6，IL-1，and TNF-mRNA were decreased（P76%。1.6 分 光 光 度 法 检 测 各 组 小 鼠 血 清 中分 光 光 度 法 检 测 各 组 小 鼠 血 清 中 CRE 和和BUN 水平水平小鼠安乐死后，用灭菌尖镊眼球取血，血样室温静置 30 min，3 000 r min1离心 15 min，取上清后按照南京建成生物工程研究所 CRE 和BUN 测定试剂盒说明书进行检测，紫外分光光度计在波长 546和 640 nm 处检测吸光度（A）值，然后通过公式计算各组小鼠血清中 CRE 和 BUN 水平。CRE 水平（mol L1）=（测定组 A 值空白组 A 值）/（标准组 A 值空白组 A 值）标准组 C 值。BUN 水平（mmol L1）=（测定组A 值空白组 A 值）/（标准组 A 值空白组A值）标准组 C值样本稀释倍数。1.7透射电镜观察各组小鼠肾组织超微结构形态透射电镜观察各组小鼠肾组织超微结构形态表现表现小鼠安乐死后取肾组织皮质部分放至 EP 管中，轻柔地加入 1 mL 电镜液（2.5%戊二醛固定液），4 过夜，然后用磷酸缓冲液漂洗 3次，每次10 min，再用 1%锇酸固定液固定 2 h，磷酸缓冲液继续漂洗 3 次，梯度丙酮脱水，丙酮/包埋剂渗透，纯包埋剂包埋后进行超薄切片，染色干燥后透射电镜观察。电镜样品检测由陆军军医大学电子显微中心实验室完成。1.8统计学分析统计学分析采用 GraphPad Prism 8 统计软件进行统计学分析。各组小鼠肾组织中肾小管损伤评分，血清中 CRE和 BUN 水平，肾组织中 GPX4、SLC7A11 和 ACSL4 mRNA 及 蛋 白 表 达 水 平，IL-6、IL-1 和 TNF-mRNA 水平均符合正态分布，以 xs 表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，组 间 两 两 比 较 采 用 LSD-t检验。以P0.05为差异有统计学意义。2 结 果 2.1各组小鼠肾脏病理形态表现及血清中各组小鼠肾脏病理形态表现及血清中 CRE 和和BUN 水平水平肾脏组织 HE染色结果显示：对照组小鼠肾组织结构完整，排列整齐；LPS组小鼠肾组织结构破坏，肾小管管腔内出现明显空泡结构；与LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中管腔内基本 无 空 泡 结 构，见 图 1。与 对 照 组 比较，LPS 组小鼠肾小管损伤评分明显升高（P0.01）；与 LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾小管损伤评分明显降低（P0.01），见图 2。与对照组比较，LPS 组小鼠血清中 CRE 和 BUN 水平明显升高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠血清中 CRE 和 BUN 水平明显降低（P0.01），见表 2。2.2各组小鼠肾组织中线粒体形态及铁死亡标志各组小鼠肾组织中线粒体形态及铁死亡标志分 子分 子 GPX4 和和 SLC7A11 mRNA 及 蛋 白 表 达 水 平及 蛋 白 表 达 水 平 透射电镜观察结果显示：对照组小鼠肾小管上皮细胞线粒体双层膜结构完整，线粒体嵴清晰；LPS 组小鼠肾小管上皮细胞出现线粒体体积缩小、膜密度增加和线粒体嵴减少等铁死亡典型特征；与LPS组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾小管上皮细胞线粒体体积和嵴消失等形态改变明显改善，见图 3。与 对 照 组 比 较，LPS 组 小 鼠 肾 组 织 中 GPX4 和SLC7A11 mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中 GPX4 和 SLC7A11 mRNA 及蛋白表达水平明显升高（P0.01）。见图 4和 5。2.3各组小鼠肾组织中各组小鼠肾组织中 ACSL4 mRNA 和蛋白表和蛋白表达 水 平达 水 平 与 对 照 组 比 较，LPS 组 小 鼠 肾 组 织 中ACSL4 mRNA 和 蛋 白 表 达 水 平 明 显 升 高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中 ACSL4 mRNA 和蛋白表达水平明显降低（P0.01）。见图 6。2.4 各 组 小 鼠 肾 组 织 中各 组 小 鼠 肾 组 织 中 IL-6、IL-1 和和 TNF-mRNA 表达水平表达水平与对照组比较，LPS 组小鼠肾组织中 IL-6、IL-1和 TNF-mRNA 表达水平明显升高（P0.01）；与 LPS 组比较，LPS+罗格列酮组小鼠肾组织中 IL-6、IL-1和 TNF-mRNA 表达水平明显降低（P0.01）。见图 7。354杨巧玲，等.罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用及其机制3 讨 论 AKI主要表现为肾功能在数天至数周内急剧下降，在住院患者中 AKI 发生率及病死率较高，已成为世界范围内的公共卫生问题10-11。由 LPS引起的脓毒症是 AKI 的常见病因，目前尚无理想的防治手段12-13。氧化应激、细胞凋亡、自噬及炎症等均参与 AKI的发生发展过程14-15。铁死亡是由细胞膜 中 含 多 不 饱 和 脂 肪 酸 磷 脂（poly-unsaturated fatty acids-containing phospholipids，PUFA-PLs）的铁依赖性的过氧化引发的一种调节性细胞死亡。近年来，研究16-17表明：铁死亡在 AKI 的发生发展过程中发挥重要作用。但是目前关于铁死亡在脓毒症引发的 AKI 作用机制的研究较少，因此本研究采用 LPS 构建脓毒症引发的 AKI 小鼠模型，并从铁死亡特征和标志分子 GPX4 及 SLC7A11 角度探讨铁死亡在 AKI 中的作用机制，对于 AKI 的防治具有重要意义。ACSL4 是调控机体内脂肪代谢关键酶 ACSLs家 族 中 的 一 员。ACSLs 家 族 包 括 ACSL1、ACSL3、ACSL4、ACSL5 和 ACSL6，主要负责将 1220 个碳链长度的脂肪酸、三磷酸腺苷和辅酶 A 催化形成长链酰基辅酶 A18-19。ACSL4 能将花生四烯酸和肾上腺酸催化合成花生四烯酰 CoA和肾上腺酰 CoA，以使其参与膜磷脂的合成20。A，D：Control group；B，E：LPS group；C，F：LPS+rosiglitazone group；A-C：Lower magnification（200）；D-F：Higher magnification of black frame line（400）；Yellow arrow indicated cavitation structure.图图 1HE染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现Fig.1Pathomorphology of kidney tissue of mice in various groups observed by HE staining*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.图图 2各组小鼠肾小管损伤评分各组小鼠肾小管损伤评分Fig.2 Injury scores of renal tubular of mice in various groups表表 2各组小鼠血清中各组小鼠血清中 CRE和和 BUN水平水平TabTab.2 2 Levels of serum CRE and BUN of mice in various Levels of serum CRE and BUN of mice in various groupsgroups(n=6，xs）GroupControlLPSLPS+rosiglitazoneCREcB/(mol L1)15.132.6132.666.28*22.834.17BUNcB/(mmol L1)7.421.0221.012.13*13.001.74*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.355第 49 卷 第 2 期 2023 年 3 月吉林大学学报（医学版）细胞膜上的长链多不饱和脂肪酸（二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和花生四烯酸等）常被氧化，从而引 发 细 胞 的 铁 死 亡21-22。徐 硕 等23研 究 表 明：ACSL4 敲除/过表达可以减少/增加细胞脂质氧化物生成从而调控铁死亡。敲除 ACSL4 可以抑制铁死亡而减轻肾脏缺血再灌注诱导的肾脏损伤24。本研究中，小鼠腹腔注射 LPS 诱导 AKI 后，铁死亡标志分子 GPX4 和 SLC7A11 mRNA 及蛋白表达水平明显降低，而 ACSL4 mRNA 和蛋白表达水平明显升高，表明在 LPS 模拟的脓毒症诱导的 AKI铁死亡中，ACSL4 也具有调控铁死亡从而保护肾脏免受 LPS损伤的潜在作用。鉴于铁死亡在 AKI 中重要的调控作用，大量研究采用铁死亡抑制剂来减轻 AKI25-27。铁死亡抑制剂种类较多，包括：以脂质过氧化为靶点的ferrostatin-1、帕 立 骨 化 醇 和 维 生 素 E 等；以GPX4为靶点的硒和多巴胺；以铁离子为靶点的去铁胺等；以 Xc系统（胱氨酸/谷氨酸反向转运体）为靶点的环己酰亚胺和肝再生增强因子；以 ACSL4为靶点的噻唑烷二酮类25。在缺血再A，D：Control group；B，E：LPS group；C，F：LPS+rosiglitazone group；A-C：Lower magnification（Bar=1 m）；D-F：Higher magnification of black frame line.图图 3各组小鼠肾组织中线粒体形态表现各组小鼠肾组织中线粒体形态表现Fig.3Morphology of mitochondrion in kidney tissue of mice in various groupsA：SLC7A11.B：GPX4.*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.图图 4各组小鼠肾组织中各组小鼠肾组织中 SLC7A11和和 GPX4 mRNA表达水平表达水平Fig.4Expression levels of SLC7A11 and GPX4 mRNA in kidney tissue of mice in various groups356杨巧玲，等.罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用及其机制灌注损伤诱导的 AKI 小鼠模型中，ferrostatin-1 可保护小鼠免受功能性急性肾衰竭26。帕立骨化醇能够通过降低膜脂质过氧化抑制铁死亡而在功能和组织学上减轻顺铂诱导的 AKI27。罗格列酮属于噻 唑 烷 二 酮 类，能 减 轻 各 种 因 素 诱 导 的 肾 损伤28-30。谷名晓等31研究显示：在庆大霉素诱导Lane 1：Control group；Lane 2：LPS group；Lane 3：LPS+rosiglitazone group；*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.图图 5各组小鼠肾组织中各组小鼠肾组织中 SLC7A11 和和 GPX4蛋白表达电泳图蛋白表达电泳图（A)和直条图和直条图（B,C)Fig.5Electrophoregram(A)and histograms(B,C)of expressions of SLC7A11 and GPX4 proteins in kidney tissue of mice in various groupsLane 1：Control group；Lane 2：LPS group；Lane 3：LPS+rosiglitazone group；*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.图图 6各组小鼠肾组织中各组小鼠肾组织中 ACSL4 蛋白表达电泳图蛋白表达电泳图（A)和和 ACSL4蛋白蛋白（B)及及 mRNA(C)表达直条图表达直条图Fig.6Electrophoregram(A)expression of ACSL4 protein(B)and histograms of expressions of ACSL4 protein(B)and mRNA(C)in kidney tissue of mice in various groupsA：IL-6；B：IL-1；C：TNF-.*P0.01 vs control group；P0.01 vs LPS group.图图 7各组小鼠肾组织中各组小鼠肾组织中 IL-1、IL-6和和 TNF-mRNA表达水平表达水平Fig.7Expression levels of IL-1,IL-6,and TNF-mRNA in kidney tissue of mice in various groups357第 49 卷 第 2 期 2023 年 3 月吉林大学学报（医学版）的大鼠急性肾损害模型中，给予罗格列酮灌胃的大鼠肾小管坏死程度、上皮细胞空泡变性程度和间质炎性细胞浸润程度较庆大霉素组轻。魏啸等32研究显示：罗格列酮预处理可以拮抗 LPS 激活过氧化 物 酶 体 增 殖 物 激 活 受 体 （peroxisome proliferator-activated receptor，PPAR-）介导的肾脏炎症反应从而减轻小鼠急性肾损伤。本研究从铁死亡角度出发，发现铁死亡分子 ACSL4 在 LPS诱导的 AKI 中具有潜在的调控作用，进一步选用以 ACSL4 作为靶点的铁死亡抑制剂噻唑烷二酮类药物罗格列酮，结果显示：罗格列酮能够明显改善LPS 诱导的 AKI 小鼠中肾脏组织损伤、肾功能、铁死亡和炎症水平。本研究结果进一步证实了罗格列酮能减轻 LPS 诱导的肾损伤，但机制较前期研究32发现的罗格列酮以 PPAR-作为靶点有所不同，结果显示：罗格列酮改善 LPS 诱导的急性肾损伤时以铁死亡调控分子 ACSL4 作为靶点发挥作用。综上所述，罗格列酮可以 ACSL4 为靶点减轻 LPS 所致小鼠急性肾损伤，其保护机制可能是通过抑制 ACSL4 介导的肾小管上皮细胞铁死亡而发挥作用。ACSL4 抑制剂罗格列酮可作为潜在药物用于防治细菌 LPS所致脓毒症诱发的 AKI。参考文献1 LICHTENBERGER F B，PATZAK A.AKI and CKD J.Acta Physiol（Oxf），2021，232（2）：e13646.2 LEVEY A S.Defining AKD：the spectrum of AKI，AKD，and CKD J.Nephron，2022，146（3）：302-305.3 KELLUM J A，ROMAGNANI P，ASHUNTANTANG G，et al.Acute kidney injuryJ.Nat Rev Dis Primers，2021，7（1）：52-65.4 ORIEUX A，BOYER A，DEWITTE A，et al.Acute kidney injury in intensive care unit：a review J.Nephrol Ther，2022，18（1）：7-20.5 KELLUM J A，WEN X Y，DE CAESTECKER M P，et al.Sepsis-associated acute kidney injury：a problem deserving of new solutions J.Nephron，2019，143（3）：174-178.6 WANG Z，GU Z Y，HOU Q，et al.Zebrafish GSDMEb cleavage-gated pyroptosis drives septic acute kidney injury in vivoJ.J Immunol，2020，204（7）：1929-1942.7 JIANG S Q，ZHANG H，LI X，et al.Vitamin D/VDR attenuate cisplatin-induced AKI by down-regulating NLRP3/caspase-1/GSDMD pyroptosis pathway J.J Steroid Biochem Mol Biol，2021，206：105789.8 XIAO C C，ZHAO H J，ZHU H，et al.Tisp40 induces tubular epithelial cell GSDMD-mediated pyroptosis in renal ischemia-reperfusion injury via NF-B signaling J.Front Physiol，2020，11：906.9 HU Z X，ZHANG H，YI B，et al.VDR activation attenuate cisplatin induced AKI by inhibiting ferroptosis J.Cell Death Dis，2020，11（1）：73.10GRANATA S，VOTRICO V，SPADACCINO F，et al.Oxidative stress and ischemia/reperfusion injury in kidney transplantation：focus on ferroptosis，mitophagy and new antioxidantsJ.Antioxidants（Basel），2022，11（4）：769.11HEPOKOSKI M，SINGH P.Mitochondria as mediators of systemic inflammation and organ cross talk in acute kidney injury J.Am J Physiol Renal Physiol，2022，322（6）：F589-F596.12STASI A，INTINI A，DIVELLA C，et al.Emerging role of Lipopolysaccharide binding protein in sepsis-induced acute kidney injury J.Nephrol Dial Transplant，2017，32（1）：24-31.13罗晓琴，晏 萍，张宁雅，等.危重症患者脓毒症急性肾损 伤 后 的 早 期 恢 复 模 式 与 预 后J.中南大学学报（医学版），2022，47（5）：535-545.14ALLISON S J.Acute kidney injury：mechanism of AKI sensitivity in diabetic nephropathy J.Nat Rev Nephrol，2014，10（9）：484.15LI Y F，REN K.The mechanism of contrast-induced acute kidney injury and its association with diabetes mellitus J.Contrast Media Mol Imaging，2020，2020：3295176.16BELAVGENI A，MEYER C，STUMPF J，et al.Ferroptosis and necroptosis in the kidney J.Cell Chem Biol，2020，27（4）：448-462.17HU Z X，ZHANG H，YANG S K，et al.Emerging role of ferroptosis in acute kidney injuryJ.Oxid Med Cell Longev，2019，2019：8010614.18ROELANDS J，GARAND M，HINCHCLIFF E，et al.Long-chain acyl-CoA synthetase 1 role in sepsis and immunity：perspectives from a parallel review of public transcriptome datasets and of the literatureJ.Front Immunol，2019，10：2410.19MA F，ZOU Y L，MA L F，et al.Evolution，characterization，and immune response function of long-chain acyl-CoA synthetase genes in rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）under hypoxic stress J.Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol，2022，260：358杨巧玲，等.罗格列酮对脂多糖诱导小鼠急性肾损伤肾小管上皮细胞铁死亡的抑制作用及其机制110737.20YAN S，YANG X F，LIU H L，et al.Long-chain acyl-CoA synthetase in fatty acid metabolism involved in liver and other diseases：an update J.World J Gastroenterol，2015，21（12）：3492-3498.21MCCULLOUGH K，BOLISETTY S.Ferritins in kidney disease J.Semin Nephrol，2020，40（2）：160-172.22QU X F，LIANG T Y，WU D G，et al.Acyl-CoA synthetase long chain family member 4 plays detrimental role in early brain injury after subarachnoid hemorrhage in rats by inducing ferroptosis J.CNS Neurosci Ther，2021，27（4）：449-463.23徐 硕，李 华.酰基辅酶A合成酶长链家族成员4介导的脂质过氧化导致乳腺癌细胞发生铁死亡 J.成都医学院学报，2020，15（5）：545-551，566.24WANG Y，ZHANG M H，BI R，et al.ACSL4 deficiency confers protection against ferroptosis-mediated acute kidney injury J.Redox Biol，2022，51：102262.25YANG X D，YANG Y Y.Ferroptosis as a novel therapeutic target for diabetes and its complicationsJ.Front Endocrinol（Lausanne），2022，13：853822.26MARTN-SAIZ L，GUERRERO-MAUVECIN J，MARTN-SANCHEZ D，et al.Ferrostatin-1 modulates dysregulated kidney lipids in acute kidney injury J.J Pathol，2022，257（3）：285-299.27HU Z X，ZHANG H，YI B，et al.VDR activation attenuate cisplatin induced AKI by inhibiting ferroptosis J.Cell Death Dis，2020，11（1）：73.28LU H Y，SUN X F，JIA M，et