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碱法提取普洱茶渣膳食纤维的工艺优化.pdf

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资源描述

1、食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究基金项目:天津市研究生科研创新项目(2022SKYZ113)作者简介:孟圆(2003),女(汉),本科生在读,研究方向:发酵工程。*通信作者:夏婷(1979),女,副教授,研究方向:膳食纤维营养与功能;白晓丽,女,正高级研究员,研究方向:茶渣膳食纤维的研究与开发。DOI:10.12161/j.issn.1005-6521.2023.18.021碱法提取普洱茶渣膳食纤维的工艺优化孟圆1,夏婷1*,程艳1,耿贝贝1,权冰艳1,2,宋睿喆1,于金浩1,王敏1,白晓丽2*(1.天津科技大学 生物工程学院 省部共建食品营养与安全国家重点实验室

2、,天津 300457;2.天士力医药集团股份有限公司 创新中药关键技术国家重点实验室,天津 300410)摘要:以普洱茶渣为原料,通过碱法提取茶渣中膳食纤维,研究影响因素(碱液浓度、碱解温度、碱解时间和料液比)对普洱茶渣中膳食纤维得率的影响。结合单因素和响应面试验得到最优提取工艺参数为碱液浓度 3.35%、碱解温度 100、碱解时间 2.36 h、料液比 128(g/mL)。在该条件下,普洱茶渣中膳食纤维的得率为 82.26%,较提取前极显著提高(P0.001)。提取后的茶渣膳食纤维中纤维素、半纤维素、木质素和果胶的含量分别为 52.10%、14.20%、15.30%和5.00%,以不溶性纤维

3、为主。关键词:茶渣;普洱茶;膳食纤维;碱法;响应面;提取工艺Optimization of Alkaline Extraction of Dietary Fiber from Pu-erh Tea ResidueMENG Yuan1,XIA Ting1*,CHENG Yan1,GENG Beibei1,QUAN Bingyan1,2,SONG Ruizhe1,YU Jinhao1,WANG Min1,BAI Xiaoli2*(1.State Key Laboratory of Food Nutrition and Safety,College of Biotechnology,Tianjin

4、University of Science&Technology,Tianjin 300457,China;2.State Key Laboratory of Innovative Chinese Medicine,TaslyPharmaceutical Group Co.,Ltd.,Tianjin 300410,China)Abstract:Dietary fiber was extracted from Pu-erh tea residue by alkaline method.The factors(alkali concentration,alkaline extraction tem

5、perature,extraction time,and solid-to-liquid ratio)influencing the dietary fiber yieldwere studied.The extraction conditions were optimized by single factor test and response surface methodology asextraction with 3.35%alkali and the solid-to-liquid ratio of 128(g/mL)at 100 for 2.36 h.Under these con

6、ditions,the yield of dietary fiber from Pu-erh tea residue was 82.26%,which was significantly higher than that before extraction(P0.001).The content of cellulose,hemicellulose,lignin,and pectin in dietary fiber from the tearesidue was 52.10%,14.20%,15.30%and 5.00%,respectively,and insoluble fiber wa

7、s the main fiber component.Key words:tea residue;Pu-erh tea;dietary fiber;alkaline method;response surface;extraction process引文格式:孟圆,夏婷,程艳,等.碱法提取普洱茶渣膳食纤维的工艺优化J.食品研究与开发,2023,44(18):158-164.MENG Yuan,XIA Ting,CHENG Yan,et al.Optimization of Alkaline Extraction of Dietary Fiber from Pu-erh Tea ResidueJ

8、.Food Research and Development,2023,44(18):158-164.茶起源于我国,已有千年发展历史,并成为风靡世界的三大无酒精饮料之一1-2。近年来,我国茶产业发展迅速,种植面积不断扩大,产量急剧增长,2021 年茶园面积达 326 亿 m2,茶叶产量达 306 万 t3。普洱茶属于黑茶,是以云南大叶种晒青茶为原料,经发酵制成,具有独特品质特征。普洱茶中含有多种营养成分,膳食纤维含量 9%22%,蛋白质含量 20%30%,此外还含有茶褐素、茶多酚和茶多糖等活性成分4。据报道,约 90%的茶叶在加工和消费后成为茶渣,这些茶渣通常被直接丢弃,会造成环境污染,此外,

9、茶渣也通应用技术158食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究常作为燃料、肥料、生物吸附剂直接使用5-6。目前茶渣中营养物质的有效利用仍不足,因此,对普洱茶废弃物的高值化利用具有重要的科学意义。膳食纤维是一种不被人体消化酶所消化,也不被小肠吸收的以多糖为主体的高分子物质的总称7。膳食纤维被称为人类第七大营养素,按照溶解性可分为水溶性膳食纤维和水不溶性膳食纤维。其中水不溶性膳食纤维具有良好的吸水性和膨胀性,能调节肠道功能,防止便秘,同时对心血管疾病、糖尿病、结肠癌等具有预防作用8。近年来多项研究显示化学法、物理法、酶法和发酵法是膳食纤维的主要提取方法9。其中化学法中的碱法是

10、膳食纤维提取的常用方法。丁莎莎10采用质量分数为 8%的 NaOH 溶液提取油橄榄果渣膳食纤维,结果得到产率为 52.39%的油橄榄果渣不溶性膳食纤维。Wang 等11发现采用 5%的 NaOH 提取得到的猕猴桃膳食纤维含量相较于酶法、酸法更高,并且提取后膳食纤维表现出更高的热稳定性。Karra 等12发现碱法提取的椰枣花膳食纤维含量为 89.75%,比水提取的椰枣花膳食纤维含量高,并且蛋白质和脂质含量较水提法明显降低。因而,采用碱法能更有效地提高膳食纤维提取率,更好地去除植物中的蛋白质和脂质杂质。本研究拟以普洱茶渣为原料,采用碱法提取普洱茶渣中的膳食纤维(tea dietary fiber,

11、TDF),通过 Box-Behnken 试验设计和响应面分析,获得最佳提取工艺条件。并对提取前后的普洱茶渣中 TDF 的含量及组成进行分析,以期提高普洱茶渣的综合利用价值。1材料与方法1.1材料与试剂茶渣:云南天士力帝泊洱生物茶集团有限公司;氢氧化钠:天津市致远化学试剂有限公司;盐酸:福晨(天津)化学试剂有限公司;95%乙醇:康科德科技有限公司;硫酸:国药集团化学试剂有限公司;十氢化萘、双氧水:天津市大茂化学试剂厂;无水亚硫酸钠:天津渤化化学试剂有限公司;丙酮:洛阳昊华化学试剂有限公司;十六烷基三甲基溴化铵:广东翁江化学试剂有限公司。以上试剂均为分析纯。1.2仪器与设备火焰原子吸收光谱仪(GG

12、X-100):北京海光仪器有限公司;紫外分光光度计(U-3900):日立株式会社;鼓风干燥箱(UF160):美墨尔特(上海)贸易有限公司;电热鼓风干燥箱(WGLL-125BE):天津市泰斯特仪器有限公司;快速水分测定仪(MA37-1CN):赛多利斯科学仪器(北京)有限公司;集热式恒温加热磁力搅拌器(DF-101S):邓州长城科工贸有限公司;马弗炉(SX2-2.5-10):天津市中环实验电炉有限公司;粗脂肪测定仪(SZF-06A):上海新嘉电子有限公司;数控超声波清洗器(KQ-500DB):昆山市超声仪器有限公司。1.3试验方法1.3.1茶膳食纤维碱法提取工艺称取 15 g 茶渣,按料液比 12

13、5(g/mL)加入 1.40%的 NaOH 溶液,搅拌至分散均匀,再进行超声辅助提取1 h,提取完毕后,水洗涤提取后的样品,直至滤液为中性,过滤,滤渣在 105 鼓风干燥箱中干燥,备用。1.3.2单因素试验1)在固定碱解温度 60、碱解时间 1 h、料液比110(g/mL)的条件下,考察碱液浓度(1%、2%、3%、4%、5%)对 TDF 提取率的影响。2)在固定碱液浓度 2%、碱解时间 1 h、料液比110(g/mL)的条件下,考察碱解温度(60、70、80、90、100)对 TDF 提取率的影响。3)在固定碱液浓度 2%、碱解温度 60、料液比110(g/mL)的条件下,考察碱解时间(1、2

14、、3、4、5 h)对TDF 提取率的影响。4)在固定碱液浓度 2%、碱解温度 60、碱解时间 1 h 的条件下,考察料液比110、120、130、140、150(g/mL)对 TDF 提取率的影响。1.3.3响应面试验基于单因素试验结果,根据 Box-Behnken 中心组合试验设计原理,以碱液浓度(A)、碱解温度(B)、碱解时间(C)、料液比(D)为自变量,以 TDF 提取率为响应值,采用四因素三水平的响应面分析方法求取优化的工艺参数,试验因素及水平如表 1 所示。1.3.4茶渣基本成分测定1.3.4.1总膳食纤维含量测定参照 GB 5009.882014 食品安全国家标准 食品中膳食纤维的

15、测定测定总膳食纤维含量。1.3.4.2纤维素、半纤维素和木质素含量测定参考 Escarnot 等13的方法稍作修改,测定纤维素、半纤维素和木质素含量,具体操作方法如下。中性洗涤纤维测定:准确称取 1.00 g(M1)样品,添加 100 mL 中性洗涤剂、数滴十氢化萘及 0.5 g 无水亚硫酸钠,煮沸 1 h,在已知质量的坩埚(M2)中用沸水和丙酮洗涤残渣。将残渣在 105 烘箱干燥过夜,冷却至室温后,称量恒重(M3)。表 1Box-Behnken 设计试验因素及水平Table 1Factors and levels of Box-Behnken design水平因素A 碱液浓度/%D 料液比/

16、(g/mL)-131200413015140B 碱解温度/C 碱解时间/h8029031004应用技术159食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究酸性洗涤纤维测定:准确称取 1.00 g(M4)样品与酸性洗涤液(2%十六烷三甲基溴化铵)煮沸 1 h,在已知质量的坩埚(M5)中用蒸馏水和丙酮清洗残渣,将清洗后的残渣放置在 105 烘箱中干燥过夜,冷却至室温后,称量恒重(M6)。纤维素含量测定:向酸性洗涤过程中剩余的残渣中添加 72%的硫酸进行消化 3 h,消化完毕后用热蒸馏水清洗残渣,残渣再次在 105 烘箱干燥过夜,冷却至室温后,称量恒重(M7)。木质素含量测定:将纤维

17、素测定剩余的残渣置于马弗炉中 550 煅烧 3 h 灰化,称量恒重(M8)。中性洗涤纤维含量(Y1,%)按下列公式计算。Y1=M3-M2M1100式中:M1为中性洗涤时试样的质量,g;M2为坩埚的质量,g;M3为坩埚和中性洗涤剩余残渣的质量,g。酸性洗涤纤维含量(Y2,%)按下列公式计算。Y2=M6-M5M4100式中:M4为酸性洗涤时试样的质量,g;M5为坩埚的质量,g;M6为坩埚和酸性洗涤后剩余残渣的质量,g。纤维素含量(Y3,%)按下列公式计算。Y3=M6-M7M4100式中:M7为经 72%硫酸处理后的残渣的质量,g。木质素含量(Y4,%)按下列公式计算。Y4=M7-M8M4100式中

18、:M8为经 72%硫酸处理后的残渣灰化后的质量,g。半纤维素含量(Y5,%)按下列公式计算。Y5=Y1-Y21.3.4.3果胶含量测定参考 Blumenkrantz 等14的方法测定果胶含量。1.3.5数据分析处理所有试验均重复 3 次,结果以平均值标准差表示。采用 SPSS 25.0 对试验数据进行 ANOVA 方差分析和 Tukey 显著性检验。P0.05。此外,模型的确定系数 R2=0.946 6,R2Adj=0.893 3,结果表示本次拟合的模型能够解释89.33%的响应值变化。由表 3 可知,影响 TDF 提取率的 4 个因素大小顺序为 BCAD,即碱解温度碱解时间碱液浓度料液比。由

19、该模型优化得到的最优工艺为碱液浓度 3.35%、碱解温度 100、碱解时间 2.36 h、料液比 128(g/mL),在该条件下得到的 TDF 提取率理论值为 82.259%。2.2.3各因素相互作用对膳食纤维提取率的影响为了更加直观地表示各因素交互作用与 TDF 提取率之间的关系,通过 Box-Behnken 试验设计,将 4 个图 3碱解时间对 TDF 提取率的影响Fig.3Effect of alkaline extraction time on the yield of TDF图 4料液比对 TDF 提取率的影响Fig.4Effect of solid-to-liquid ratio

20、on the yield of TDF试验号A 碱液浓度/%B 碱解温度/CC 碱解时间/hD 料液比/(g/mL)TDF提取率/%14100314077.262390314069.343490313077.044490414072.675590213069.766480314074.537580313076.068390413068.199390213076.7410490313079.1411490313079.3812380313073.2313490412071.5414490313080.3615480413074.8116490212073.5017590312068.311849

21、0313080.1719390312075.7520590314072.39213100313079.89224100413076.3523490214075.90245100313074.31254100213079.3226480213076.2727480312072.32284100312076.6929590413072.79表 2响应面设计方案及结果Table 2The response surface design and test results碱解时间/hTDF 提取率/%74727068666445321料液比/(g/mL)TDF 提取率/%7672686414015013

22、0120110应用技术161食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究方差来源平方和自由度均方F 值P 值显著性模型329.831423.5617.740.000 1*A 碱液浓度7.5517.555.690.031 8*B 碱解温度22.96122.9617.290.001 0*C 碱解时间19.10119.1014.380.002 0*D 料液比1.3211.320.990.335 7AB17.68117.6813.310.002 6*AC33.52133.5225.240.000 2*AD27.51127.5120.710.000 5*BC0.5710.570.430

23、.523 0BD0.6710.670.510.488 5CD0.4010.400.300.590 3A2108.721108.7281.850.000 1*B20.2410.240.180.679 4C247.60147.6035.840.000 1*D287.08187.0865.560.000 1*残差18.60141.33失拟误差11.61101.160.660.727 0纯误差6.9941.75误差和348.4328表 3方差分析结果Table 3Analysis of variance注:*表示影响显著(P0.05);*表示影响极显著(P0.01)。影响因素(碱液浓度、碱解温度、碱解

24、时间及料液比)与TDF 提取率组成三维响应曲面。各因素交互作用对膳食纤维提取率的影响见图 5。D 料液比/(g/mL)TDF 提取率/%8266687072120125130135140A 碱液浓度/%5.04.54.03.53.0C 碱解时间/h2.02.53.03.54.0TDF 提取率/%A 碱液浓度/%5767874725.04.54.03.53.0727474C 碱解时间/hTDF 提取率/%82687074782.02.53.03.54.0A 碱液浓度/%5.04.54.03.53.0727680D 料液比/(g/mL)TDF 提取率/%A 碱液浓度/%5767874725.04.

25、54.03.53.072707412012513013514076B 碱解温度/TDF 提取率/%A 碱液浓度/%57678745.04.54.03.53.080808590951007678A 碱液浓度/%5.04.54.03.53.0TDF 提取率/%8274767880727068B 碱解温度/8085909510074767880应用技术162食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究图 5各因素交互作用的响应面与等高线Fig.5Response surface plot and contour plot of the effects ofinteractions

26、between factors on the yield of dietary fiber from tearesidue由图 5 可知,碱解温度较碱液浓度的曲面轴陡,说明碱解温度对 TDF 提取率的影响更大,TDF 提取率随碱解温度的升高逐渐增大。碱液浓度和碱解温度两个因素的交互作用极显著。当碱液浓度一定时,TDF 提取率随碱解时间的延长先逐渐增大后减小,碱解时间一定时,TDF 提取率随着碱液浓度的增加先增大后减小,碱液浓度(A)和碱解时间(C)的等高线呈椭圆形,说明两者的交互作用对 TDF 提取率的影响极显著。碱液浓度和料液比的交互作用影响极显著,碱液浓度比料液比曲面轴陡,说明碱液浓度对

27、TDF 提取率的影响更大,与方差分析结果一致。碱解时间比料液比的曲面更陡,说明碱解时间对 TDF 提取率的影响更大,二者的交互作用对 TDF 提取率影响不显著。综上所述,碱液浓度(A)和碱解温度(B)、碱液浓度(A)和碱解时间(C)以及碱液浓度(A)和料液比(D)的交互作用对 TDF 提取率均有显著影响,并且交互作用大小顺序为 ACADAB。2.2.4工艺优化与验证试验根据响应面分析法得到 TDF 的理论最优提取条件为碱液浓度 3.35%、碱解温度 100、碱解时间2.36 h及料液比 128(g/mL),该条件下得到的 TDF 提取率理论值为 82.259%。在此工艺参数条件下进行验证,重复

28、操作 3 次,得到的 TDF 膳食纤维含量为82.26%。试验结果表明,实际测得的结果与理论推测值高度一致。说明该回归模型可以较真实地反映各因素对响应值的影响,具有良好的预测效果。2.3茶膳食纤维成分分析膳食纤维主要包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶等。茶渣和 TDF 中膳食纤维组成成分见图 6。由图 6 可知,提取前茶渣中膳食纤维含量为61.87%,其中的纤维素、半纤维素、木质素和果胶的含量分别为22.12%、17.72%、32.9%、7.81%。在最优工艺调节下,提取得到的 TDF 中膳食纤维含量为 82.26%,较茶渣中的含量极显著升高(P0.001)。进一步分析 TDF中膳食纤维的组成

29、成分,研究发现 TDF 的主要成分为以纤维素、半纤维素和木质素为代表的不溶性膳食纤维和以果胶为代表的可溶性膳食纤维,其含量分别为52.10%、14.20%、15.30 和 5.00%,提取后纤维素含量极显著升高(P0.001),半纤维素含量显著升高(P碱解时间碱液浓度料液比。根据模型及*表示组间差异显著(P0.01);*表示组间差异极显著(P0.001)。图 6茶渣和 TDF 中膳食纤维组成成分Fig.6Dietary fiber components in tea residue and tea dietary fiberTDF 提取率/%826668707274767880C 碱解时间/h

30、2.02.53.03.54.0D 料液比/(g/mL)TDF 提取率/%C 碱解时间/h5767874724.03.53.02.52.0741201251301351407476含量/%9080706050403020100膳食纤维纤维素半纤维素木质素果胶茶渣TDFD 料液比/(g/mL)120125130135140应用技术*163食品研究与开发23 年 9 月第 44 卷第 18 期基础研究响应面分析,获得最佳提取工艺为碱液浓度 3.35%、碱解温度 100、碱解时间 2.36 h 及料液比 128(g/mL)。在此条件下,提取得到的普洱茶渣膳食纤维得率最高,经验证得到的得率为 82.26

31、0%,与理论推测值高度一致。提取得到的普洱茶渣膳食纤维得率较前明显提高了 20.39%,该普洱茶渣膳食纤维主要为不溶性膳食纤维,其中纤维素和半纤维素含量分别为 52.10%、14.20%,较提取前含量显著增高。普洱茶渣膳食纤维提取工艺的优化,为普洱茶渣的综合利用提供较好的理论依据和参考价值。参考文献:1王智勇.“一带一路”战略与茶文化共同体研究J.福建茶叶,2019,41(3):263-264.WANG Zhiyong.Study on the belt and road initiative strategy andtea culture communityJ.Tea in Fujian,2

32、019,41(3):263-264.2ZHAI X T,ZHANG L A,GRANVOGL M,et al.Flavor of tea(Camellia sinensis):A review on odorants and analytical techniquesJ.Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety,2022,21(5):3867-3909.3安明霞.原叶茶饮料驶入发展快车道将成为缓解茶叶产能过剩的突破口N.中华合作时报,2022-09-06(B01).AN Mingxia.The original leaf tea

33、 beverage has entered the fasttrack of development-it will become a breakthrough to alleviate teaovercapacityN.China Co-operation Times,2022-09-06(B01).4吴少雄,郭祀远,李琳,等.普洱茶营养成分分析和营养学评价J.中国公共卫生,2006,22(7):826.WU Shaoxiong,GUO Siyuan,LI Lin,et al.Analysis of nutritionalcomponents and nutritional evaluati

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