结核分枝杆菌DNA及RNA检测在结核病中的诊断价值_陈江燕.pdf

左丽婷，陈建，张海蓉 高脂血症性胰腺炎的研究进展中国全科医学，：牛学琴，卢果成，赵玲，等 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并 型糖尿病患者体脂分布及血脂水平变化 云南医药，（）：型糖尿病患者血清胃肠道肿瘤相关抗原 的变化及其临床意义 中国糖尿病杂志，（）：，：，（）：，（）：，（）：，.：，（）：，（）：，：临床研究 收稿日期：基金项目：云南省教育厅科学研究基金项目（）；昆明市卫健委卫生科研课题项目（、）；昆明市卫生科技人才培养“千”工程后备人选（后备）、（后备）、（后备）。作者简介：陈江燕（）女，本科，主管技师，从事结核病检测与研究工作 余年。通信作者：李琼秀，：.。结核分枝杆菌 及 检测在结核病中的诊断价值陈江燕，王 霖，马志强，王晓燕，毛红艳，李琼秀（昆明市第三人民医院 云南省传染性疾病临床医学中心 检验科，云南 昆明）摘要 目的 分析结核分枝杆菌 和 联合检测在结核病诊断中的意义。方法对 例用实时荧光定量 法检测结核菌 为阳性的标本继续用恒温扩增技术检测结核菌。结果 例研究对象中，检测阳性 例，阳性率.；其中男性 例，阳性率.，女性 例，阳性率.；检测阳性 例，阳性率.；其中男性 例，阳性率.，女性 例，阳性率.。不同性别的 和 检测阳性率差异有统计学意义（.、.，.）。各类标本中痰液 和 及 检测阳性最高，分别为 例、例、例，阳性率分别为.、.、.，脑脊液 和 及 检测阳性最低。不同年龄组中，岁组 检测阳性最高，为 例，阳性率.。岁组 及 检测阳性最高，分别为 例、例，阳性率分别为.、.；岁组 和 及 检测阳性最低。结论 检测阳性率明显高于 且女性较男性高；各种检测在不同类型标本中，痰液阳性率最高，脑脊液最低；年龄组在 岁组 阳性率最高，岁组 及 阳性率最高，岁组各检测阳性率最低。关键词 结核分枝杆菌；结核菌脱氧核糖核酸检测；结核菌核糖核酸检测；检测中图分类号 文献标志码 文章编号 （），（，）云南医药 年第 卷第 期：.，.，.；（.），（.）；，.；（.），（.）（.，.，.），.，.，.，.，（.），.，；，.，.，.，.：，结核病是由结核分枝杆菌（，）感染引起的慢性传染病，在全球 个结核病流行严重的国家中，我国疫情不容乐观，其发病人数约为每年 万左右，占全球发病率的.，位居第 位，。目前检测结核菌的金标准是传统的罗氏培养，但其培养周期长、操作复杂，且存在不同程度地准确性较低、灵敏度差、周期长、特异性不高等问题，。因此需要一种简便快捷且灵敏度高、特异性强且能在临床中广泛普及的检测技术为辅助临床上结核病的早期诊断，对结核病患者的治疗预防具有重要意义。本研究回顾性分析了昆明市第三人民医院诊治的 例结核病患者实验室资料，通过采用 和 实时荧光核酸恒温扩增检测技术，探讨结核菌 和 检测在结核病中的诊断价值，现报告如下。资料与方法.一般资料选取 年 月 年 月于本院接收治疗的结核病确诊病例 例，其中男性 例，女性 例；年龄 岁，中位年龄 （，）岁。纳入标准：（）确诊按照 肺结核诊断标准（）；（）经结核菌痰涂片及痰培养检查确诊为结核病。排除标准：（）非结核菌病；（）其它感染性及自身免疫性疾病；（）合并重要器官疾病及严重高血压患者等。.仪器与试剂 主要仪器结核杆菌 和 检测仪：天隆 型；试剂：检测试剂：结核菌复合群核酸检测试剂盒荧光 法，检测的试剂：结核菌检测试剂盒 恒温扩增。.检测方法实验室检测：将采集的患者标本置于无菌容器内密封送检，按照实验室操作步骤进行液化、核酸提取、扩增等反应程序完成。结果判读标准：阳性判断：通道检测 值.为阳性，否则为阴性；阳性判断：值 为阳性，值 建议重新检测，值无数值或大于 为阴性。.统计学分析采用.统计软件对数据处理并分析。计量资料以中位数（四分位数）（，）表示，计数资料以率 百分数（）表示，组间比较用检验；以 .为差异有统计学意义。结果.结核菌 及 检测情况 例患者中，和 检测阳性分别为、例，阳性率分别为.、.；不同性别中 和 检测阳性男性分别为、例，阳性率分别为.、.，女性 分 别 为、例，阳 性 率.、.。不同性别中 和 阳性率差异有统计学意义（.、.，.），见表。云南医药 年第 卷第 期表 结核菌 及 检测情况 （）检测 检测阳性（.）（.）阴性（.）（.）性别阳性阴性阳性阴性 男性（.）（.）（.）（.）女性（.）（.）（.）（.）.不同类型标本 和 检测情况不同类型标本中痰液 和 及 检测阳性最高，分别为、例，阳性率分别为.、.、.；脑脊液 和 及 检测阳性最低，分别为、例，阳性率分别为.、；见表、图。表 不同类型标本 和 检测阳性情况 （）标本类型 阳性 阳性 阳性痰液（.）（.）（.）灌洗液（.）（.）（.）脓液（.）（.）（.）支刷物（.）（.）（.）胸水（.）（.）（.）尿液（.）（.）（.）脑脊液（.）（.）（.）包积积液（.）（.）（.）合 计图 不同类型标本 和 检测阳性情况.不同年龄标本 和 检测情况不同年龄组中，岁组 检测阳性最高，为 例，阳性率.；岁组 及 检测阳性最高，分别为、例，阳性率分别为.、.；岁组 和 及 检测阳性最低，分别为、例，阳性率分别为.、.、.，见表。表 不同年龄标本 和 检测阳性情况 （）年龄组（岁）阳性 阳性 双阳性（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）（.）合 计图 不同年龄标本 和 检测阳性情况 讨论目前诊断结核病的方法有影像学检查、细菌学、免疫学检测等，结核病确诊的金标准是痰液中检出结核菌。结核病发病率较高，但其发现率却仅有 左右，对于结核患者的快速诊断是结核防控的重要措施，而常规检测很难达到快速诊断的效果。近年来，荧光定量 技术因其快速、高效的诊断被逐渐应用到结核的检测中，其可间接检出痰液标本中结核菌含量，也能鉴别结核菌和非结核菌，因此得到了大量普及。同时恒温扩增（）技术检测不仅检测标本中结核菌存在情况，还能鉴定结核菌活性，因此可用于活动性肺结核的检测及诊断，。本研究通过对 例研究对象标本进行实验室检测，结果发现结核菌 检测阳性率远高于 检测，可能是因为 双链较 云南医药 年第 卷第 期单链稳定，不易被降解，同时在 恒温扩增中 逆转录成，通过多聚酶等作用又形成新的，虽然两种检测的状态同样一直持续进行，但 存在于活的结核菌中，这也可能是其阳性率低于 检测的原因，。在不同类型的标本中，痰液检出率较最高，这也与以往的研究结果相一致。本研究结果还显示，结核菌 检测阳性率女性高于男性，可能的原因有结核病发病率的差异在不同性别中可能与传播动力学的因素有关，且细胞免疫、糖皮质激素、社会经济因素和文化因素等方面的差异可能都与其有一定的相关性。在不同年龄段中中青年组 和 阳性检出比例最高、最常见，这可能与青年的免疫功能状态有关，也可能与青年发病时易出现菌血症或血行播散性结核病有关。综上所述，结核菌 和 检测在结核病患者的不同类型标本和各年龄段的检出率均有差异，对患者结核菌检测方法及标本的选择有参考价值，减少误诊和漏检，可推广应用于结核病的实验室诊断工作中。参考文献 康玉红 化疗方案治疗老年肺结核的临床疗效及其对免疫功能的影响 云南医药，（）：（）：，（）：周曙光 结核分枝杆菌快速培养及常规药敏试验在脊柱结核治疗中的应用研究 云南医药，（）：王晨，张双双，刘晓莉 结核病诊断中细菌学检验的临床价值 内蒙古医学杂志，（）：张文艳，陈珊 痰标本结核分枝杆菌 检测在结核病中的诊断价值 河南医学研究，（）：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.肺结核诊断标准（）新发传染病电子杂志，（）：柴国祥，韩斌孝，孙建军，等 实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的价值分析 中国实用医药，（）：秦万，王琼，王明栋，等 恒温扩增法与 荧光探针法在含结核菌菌量较少标本中检出率的比较贵州医药，（）：刘亚芹，杨振斌 在活动性肺结核疑似患者中的应用研究 标记免疫分析与临床，（）：曹佳伟，邹南南，江国峰，等 荧光探针法与 恒温扩增法对肺结核诊断的价值 精准医学杂志，（）：杨翰，李爱芳，王佩，等 实时荧光恒温扩增法在结核病临床检测中的应用价值 中国防痨杂志，（）：于佳佳，李亮，杜建，等 肺结核住院患者并发肺外结核状况及其与性别和年龄相关性的多中心研究 中国防痨杂志，（）：，（）：公益广告糖 尿 病 患 者 自 我 管 理 是 控 制 糖 尿 病 病 情 的有效方 法，自 我 血 糖 监 测 应 在 专 业 医 生 和 或 护士的指导下开展。云南医药 年第 卷第 期