1、动物微生物细菌人工培养 一、实验目的一、实验目的 1、掌握平板划线、斜面、液体和半固体培养基等各种接种方法。2、熟悉接种细菌用具、接种细菌的环境要求和无菌操作要领。3、熟悉细菌在各种培养基的生长现象。二、实验原理二、实验原理 1、细菌在适宜的生长环境下,如营养、酸碱度、温度和氧等条件下进行生长繁殖。2、细菌的分离培养是根据细菌在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过调取单菌落而获得一种纯培养。三、器材和试剂三、器材和试剂 1、菌种、菌种 :葡萄球菌 大肠埃希菌 2、培养基、培养基:液体(普通肉汤)、半固体和固体培养基(琼脂平板和斜面)3、其他、其他:接种环、
2、接种针、酒精灯 四、实验步骤和方法四、实验步骤和方法 1、平板接种法、平板接种法 三段分区划线分离法 意义:本方法可使标本中混杂的多种细菌分散成单个菌落,在培养基表面各自生长繁殖成单个细菌集团即菌落,以获得纯培养,为进一步鉴定细菌提供条件。2 2、斜面接种法、斜面接种法 意义:主要用于纯菌移种,以进一步鉴定或保存菌种。3、液体接种法、液体接种法 意义:用于肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等液体培养基的接种。4、半固体穿刺接种法、半固体穿刺接种法 意义:用于半固体培养基和KIA培养基的接种,以保存菌种或观察细菌的动力和生化反应。四、结果判定四、结果判定 1、在固体培养基上的生长情况、在固体培养基上的生长
3、情况 (1)在平板上形成肉眼可见的细菌集团,称为菌落,观察菌落的大小、形状、边缘、表面、颜色、溶血等情况。(2)在琼脂斜面上长成菌台。a丝状 b刺毛状 c念珠状 d扩展状 e树状 f假根状 2、在液体培养基中的生长情况、在液体培养基中的生长情况 (1)表面生长:液体清晰,细菌生长在液面上形成菌膜。(2)混浊生长:液体均匀混浊或有少量沉淀。(3)沉淀生长:液体清晰,细菌生长在管底,形成沉淀。3、在半固体培养基中的生长情况、在半固体培养基中的生长情况 (1)有鞭毛的细菌,由于能运动,在半固体培养基内沿穿刺线弥漫生长,原来的穿刺线不清。(2)无鞭毛的细菌,因不能运动,接种后仍沿穿刺线生长,穿刺线与周围界限清晰。细菌在半固体培养上的培养特征细菌在半固体培养上的培养特征 abd 沿穿刺线生长 cef运动生长医学资料仅供参考,用药方面谨遵医嘱