沙门氏菌属的生物危害评估分析报告.doc

沙门氏菌属生物危害评定汇报日期:-08-03 21:49:58起源: 检验在线点击:3805次一、细菌传输和致病沙门菌(salmonella spp)是1880年由Eberth首先发觉。至今已发觉沙门氏菌属细菌有多个血清型。中国发觉有200个血清型。沙门菌感染关键是经过消化道传输，少部分也可经过微生物或感染性材料胃肠道外接种传输。人是伤寒、副伤寒天然宿主，除此之外，有沙门菌专对动物致病，有则是人兽共患疾病病原体。沙门菌致病性含有种系特异性，临床上可表现为胃肠炎,肠热病,菌血症综合征或局灶性疾病。每个沙门菌血清型可产生下述临床综合征中任何一个症状或全部症状,即使某一特定血清型常伴有特异症群。无症状带菌状态也可发生。胃肠炎通常在摄入细菌后1248小时起病,表现为恶心和痉挛性腹痛,接着可有腹泻,发烧,有时可出现呕吐。粪便多为水样,但也可呈半固体糊状,粘液或血液罕见。本病通常较轻微,病程14日。偶见较严重迁延型。在用甲基蓝染色粪便标本中常见白细胞,表明有炎症性结肠炎。肠热病是一个全身性综合征,其特征为发烧,衰竭和败血症。可由伤寒、副伤寒沙门菌A,B和C型引发。细菌随污染食物和饮水进入人体。未被胃酸杀死细菌进入小肠，穿过粘膜上皮细胞或细胞间隙，侵入肠壁淋巴组织，在吞噬细胞中繁殖。部分细菌经过淋巴管到肠系膜淋巴结大量增殖。因无临床症状，故称为潜伏期，约1-2周。当细菌在淋巴组织中增殖到一定程度后，经胸导管进入血流，引发第一次菌血症。患者全身疼痛、不适、发烧。此时为病疾前驱期。细菌经过血流进入全身各脏器，并在其中增殖。被脏器中吞噬细胞吞噬细菌再次进入血流，引发第二次菌血症。此时临床症状显著而经典，如连续高热、肝脾肿大、全身中毒症状、皮肤出现玫瑰疹，相当于发病第1周。胆囊中细菌随胆汁排入肠道，一部分随粪便排出。进入肠道细菌又可经过肠粘膜再次进入肠壁淋巴组织，引发迟发型变态反应，造成孤立和集合淋巴结坏死、溃疡。肾脏中细菌可随尿排出。此时大约是疾病第2-3周。沙门菌感染局灶性表现可有或无连续菌血症。有菌血症病人,可发生不足感染而累及消化道(肝,胆囊和阑尾),内皮表面(动脉硬化斑块,股动脉或主动脉瘤,心脏瓣膜),心包,脑膜,肺,关节,骨,泌尿生殖道或软组织。原有实质性肿瘤偶然被细菌感染而发生脓肿,反过来又可成为沙门菌菌血症病源灶。猪霍乱沙门菌和鼠伤寒沙门菌是局灶性感染最常见病原菌。胃肠炎病人菌血症相对少见。但在其它人群中,猪霍乱沙门菌,鼠伤寒沙门菌和海得尔堡沙门菌可引发连续1周菌血症综合征。艾滋病或HIV感染病人可有沙门菌所致反复发作菌血症或其它侵袭性感染(如脓毒性关节炎)。一个有多重沙门菌感染而无其它危险因子病人,应快速作HIV检验。带菌者在大规模非伤寒胃肠炎暴发流行中不起关键作用。仅0。2%0。6%非伤寒沙门菌感染者在其粪中连续排菌长达1年。二、细菌生物学特征沙门菌属于肠杆菌科，为革兰氏阴性直杆菌，较细长，大小约为0。71。52。05。0m。除鸡沙门菌无鞭毛外大多数菌有周身鞭毛，能运动，有时也会出现无鞭毛突变型。有菌毛，无芽胞无荚膜。兼性厌氧，最适生长温度是3537，pH范围是6。87。8。对营养要求不高，在一般培养基和肠道杆菌判别培养基平板上均可生长。沙门菌抗原结构关键有三种：（1）菌体抗原O抗原：是细菌脂多糖，含有耐热性，能耐受1002。5h。O抗原是分群依据，每个沙门菌血清型可含一个或数种O抗原。它刺激机体关键形成IgM型抗体，和对应抗血清反应时呈颗粒状凝集。依据O抗原不一样可将沙门氏菌分42个组，引发人类疾病多在AE组。 （2）鞭毛抗原H：属蛋白质，不稳定，加热或用乙醇处理均被破坏。刺激机体关键产生IgG型抗体，和对应抗血清呈絮状反应。沙门氏菌属H抗原有两相，称第1相和第2相。前者为特异相，后者为非特异相，同时含有第一和第二相H抗原细菌为双相菌，仅有一相者称单相菌。H抗原是定型依据，按O抗原分组后，每一组沙门菌再依据H抗原分成不一样种或血清型。（3）表面抗原包含Vi、M和5抗原三种，Vi抗原不耐热，加热6030min或经石炭酸处理即可破坏，经人工培养基传代后也易失活。新分离伤寒和副伤寒丙沙门菌常带有此抗原，它在菌体最表层，有抗吞噬及保护细菌免受对应抗体补体溶菌作用，当Vi抗原存在时可用于分型，但它也可阻止O抗原和对应抗体凝集反应，必需在血清学判定时加以注意；M抗原又称粘液抗原，虽不能用于分型，但它存在也可阻止O抗原和对应抗体凝集反应；5抗原可被1mol/L盐酸所破坏，属于一个表面抗原。沙门菌抵御力不强：加热601520min即被杀死。在水中可存活23周，粪便中可存活12个月，它们对胆盐和煌绿等染料有抵御力，能够此制备选择性培养基。另外本属细菌在一定条件下可发生变异，关键表现为：（1）H-O变异：是指有鞭毛细菌失去鞭毛变异。（2）S-R变异：是指菌落由光滑型（smooth）变为粗糙型（rough）。（3）V-W变异：是指失去Vi抗原变异。（4）位相变异：是指双相沙门菌接种于琼脂平板，所得菌落有是第1相，有是第2相。沙门菌致病因子包含（1）侵袭力：可能和该菌特异O抗原或Vi抗原相关。细菌被吞噬细胞，吞噬后不被消亡，在巨噬细胞中繁殖，由巨噬细胞携带至机体深层部位。（2）内毒素三、细菌试验室检验及其它检验1、标本采集 败血症时取血，胃肠炎取粪便、呕吐物或可疑食物。肠热症在病程不一样阶段采取不一样标本：第1、2周取血，病程第2周以后取粪便、尿；粪便标本应作 数次培养。整个病程均可取骨髓。2、分离培养和判定：直接接种于肠道选择性培养基，取可疑菌落深入做生化反应和血清学判定。血培养为最常见确实诊依据。伤寒病程第12周阳性率最高（80%90%），第3周约为50%，第4周后不易检出。因为骨髓中巨噬细胞丰富，含菌多，骨髓培养阳性率高于血培养，阳性连续时间亦较长。粪便培养于伤寒第34周阳性率较高。尿培养早期常为阴性，伤寒病程第34周有时可获阳性结果。十二指肠引流胆汁培养操作不便，病者不适，极少应用。玫瑰疹吸收物培养亦可获伤寒沙门菌，但不作为常规。3、血清学诊疗肥达反应：常规方法是用已知伤寒杆菌O、H和甲、乙型副伤寒杆菌H抗原和病人血清进行定量凝集试验，称为肥达反应（Widal reaction）。依据试验结果判定抗体含量及其增加情况，可供诊疗肠热症时参考。肠热症病人肥达反应阳性率自第2周升高，至第4周阳性率可达90%，但也有少数病例抗体效价一直不上升。所以，血清学检验结果判定必需结合临床症状、病期及地域情况。通常说，间隔5-7d反复采血，如凝集价随病程延长而逐步上升4倍以上，方有诊疗价值。通常进行肥达反应判定结果时，应着重考虑经以下情形：（1）正常凝集价：通常情况下，伤寒杆菌O抗体凝集价在1:80以上，H抗体凝集价在1:160以上，甲、乙型副伤寒杆菌H抗体凝集价在1:80以上才有诊疗意义。（2）在病程第3周，抗体凝集价仍在1:80以下，则伤寒病可能性不大，但也须注意临床症状和周围流行情况等。（3）H抗体和O抗体性质及其消长意义：若发觉O和H凝集价均超出正常值，则伤寒可能性很大，若二者均低于正常值，则可能性甚小。若O凝集价高而H低于正常值，则可能是感染早期或沙门氏菌属中其它细菌感染起O凝集交叉反应。若O凝集价低而H高于正常值，则能可是以往预防接种结果或是非特异性回想反应。（4）也可用血清学方法检验Vi抗体，Vi抗体效价在1:10以上再反复取粪便/胆汁等标本进行分离培养，以确定是否为带菌者。四、细菌防治沙门菌预防关键应预防食物被感染动物和病人污染。家禽,肉,蛋和其它食物烹调,制备,储存和冷冻必需符合卫生要求。感染动物(如玩赏龟)和可能被污染物品(如胭脂红染料)必需查清并加以控制。发觉伤寒病例必需汇报。胃肠炎诊疗是对症性,给补液和清淡饮食。抗生素会延长细菌排泄时间,所以对无并发症病例没有必需用抗生素。住院养老病人,婴儿和HIV感染或艾滋病患者因为死亡率高,故应该用抗生素诊疗。非伤寒沙门菌对抗生素耐药性比伤寒沙门菌耐药性更常见。儿童用TMP-SMX,TMP5mg/kg每12小时口服1次,或成人用环丙沙星500mg每12小时口服1次,是可接收诊疗方案。无免疫受损病人应诊疗35日,但艾滋病患者需长久抑制性诊疗以防复发。全身性或局灶性疾病应该用抗生素诊疗,所用剂量按上述伤寒诊疗剂量。连续性菌血症通常需诊疗46周。脓肿应外科手术引流,术后最少用抗生素诊疗4周。感染动脉瘤,心脏瓣膜和骨或关节感染通常需外科处理和长程抗生素诊疗。无症状带菌通常是自限性,极少需用抗生素诊疗。抗生素诊疗可使停药后粪中排菌时间延长。少数病例(如食品操作人员或保健人员)根治可试用环丙沙星500mg每12小时口服1次,共1个月。但在服药数周后应复查粪便培养以证实沙门菌是否被清除。五、细菌生物安全防护依据病原微生物生物试验室生物安全管理条例中相关要求，人间传输微生物名目（待颁布）沙门菌属于三类，BSL-2。相关防护事宜包含：（1）操作要求1、试验时，未经试验室主任同意，限制或严禁进入试验室。2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。3、全部操作过程应尽可能细心，避免产生和溅出气溶胶。4、对于污染锐器，必需时刻保持高度警惕，包含针、注射器、玻片、加样器等。5、注射和吸收感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器（即注射器和针头是一体）。用过一次性针头必需弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿、用于搜集废弃锐器容器中。非一次性锐器必需放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，最好高压杀菌。6、打坏器皿不能直接用手处理，必需用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染针头、锐器、碎玻璃容器在倒掉前，应按摄影关要求进行消毒。7、全部培养物、储存物及其它要求废物在释放前，均应使用可行消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近试验室消毒物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出试验室。离开该系统进行消毒物料，在转移前应包装，其包装应符合相关法规。8、溅出或偶然事件中，显著暴露于传染源时，要立即向试验室主任汇报。进行合适医学评定、观察、诊疗，保留书面统计。9、按日常程序、在相关传染源工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其它传染源污染后，试验室设备和工作台面应该使用有效消毒剂消毒。污染设备在送去修理、维护前，要按摄影关要求消毒；在离开设施转移前，要按摄影关要求打包运输。（2）安全设备1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其它适宜人员防护设施、或物理遏制装置。2、确定可能形成传染性气溶胶或溅出物试验过程，包含离心、研磨、匀浆、猛烈震荡或混匀、超声波破裂、开启装有传染源容器、采集感染标本等。3、包含高浓度或大致积传染源时，若选择密封转头或带安全罩离心机，若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放试验室内离心。4、当必需在生物安全柜外处理标本时，需采取面部保护方法（跟镜、口罩、面罩、或其它防溅装置），以免传染源或其它有害物溅或洒到面上。5、在试验室内，必需使用专用防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非试验室区域时，防护服必需留在试验室内。防护服能够在试验室内处理，也能够在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。6、可能接触潜在传染源、被污染表面或设备时，要戴手套。一次性手套不用清洗、不能反复使用，不能用于接触“洁净”表面（键盘、电话等），也不应该戴着到试验室外。要备有带滑石粉乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。