SMP1100701色谱柱管理规程.doc

黑龙江宝庆隆生物技术有限责任公司文件名称色谱柱标准管理规程文件编号SMP-11-007版 本 号01拷贝号起 草 人起草日期 年 月 日审 核 人审核日期 年 月 日审 核 人审核日期 年 月 日批 准 人批准日期 年 月 日颁发部门质量管理部执行日期 年 月 日分发部门 中心化验室1 目的建立色谱柱标准管理规程，明确色谱柱的管理和操作方法及要求。2 范围适用于中心化验室气相色谱仪和液相色谱仪用的所有色谱柱。3 责任者中心化验室、质量管理部、质量受权人4 职责4.1 中心化验室副主任负责本标准管理规程的起草。4.2 中心化验室主任负责本标准管理规程的审核。4.3 质量管理部部长负责本标准管理规程的审核。4.4 质量受权人负责本标准管理规程的批准。5 内容5.1 色谱柱的购入5.1.1 新色谱柱购入时，验收人检查外包装、封口和标签是否完好，造册登记，内容包括：生产公司、品名、规格、编号、购进时间、启用日期、柱内保护溶液等。在包装盒空白处贴上色谱柱专用标签，标签上填写编号、购入日期、用途等，并在色谱柱上贴上简单标签，填写色谱柱台账依规定放至特定位置。5.1.2 标签格式色谱柱专用标签格式详见表1和表2。表1 包装盒标签编 号购入日期启用日期保护液体用 途表2 色谱柱用标签编 号保护液体用 途5.1.3 色谱柱编号- 序号，按照色谱柱购入日期进行编号 色谱柱品牌的拼音首字母 色谱柱种类例如：C18-Agilent-20130506注释：如果一天内购入同一种类色谱柱多个，则在日期后编码，例如：C18- Agilent -20130506a、C18- Agilent -20130506b。5.2 色谱柱存放和保养5.2.1 每启用一根新色谱柱，在色谱柱上贴上标签并注明启用日期，启用前依据柱子的使用说明(注射前润湿程序、清洗程序和保养程序)对相关人员进行培训并记录。5.2.2 色谱柱使用一段时间后，常遇到色谱柱被污染，柱效会有一定程度的下降，采用适当的方法(具体参照柱子的使用说明)对色谱柱进行保护，可以延长色谱柱的使用寿命。5.2.3 如果必要，需进行样品的预处理。溶解的样品进样前用滤膜过滤，以除去不溶物。5.2.4 流动相中如有不纯物质将影响柱效，所以溶剂尽量使用色谱级别的，至少是分析纯级别，流动相使用前用微孔膜过滤。5.2.5 色谱柱分类存放，按不同柱分类，装入对应的包装盒中。随色谱柱说明书也贴上相应的标签放在文件夹中归档(归于检验室档案柜中)保存。5.2.6 每根色谱柱每两个月保养一次，特别是对于一些使用频率少的色谱柱，因为放置时间长，容易干柱，每一次做好保养记录同时记录于色谱柱使用记录。5.3 色谱柱使用5.3.1 柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。5.3.2 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。5.3.3 应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。大多数反相色谱柱的 pH 稳定范围是 27.5，尽量不超过该色谱柱的 pH 范围。5.3.4 如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。5.3.5 一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。5.3.6 避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。5.3.7 经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的 20 倍左右，即常规分析需要 50ml75ml。5.3.8 保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。5.3.9 色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。5.3.10 在完成分离分析工作之后，不应立即停机，需及时对色谱分析系统进行冲洗，一般 0.5h 以上，以除去色谱柱内的杂质。5.3.11 如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水“过渡”即每天分析开始前必须先用纯水冲洗 30 分钟以上再用缓冲盐流动相平衡；分析结束后必须先用纯水冲洗 30 分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗 30 分钟保护柱子。5.3.11由于品种对色谱柱有较强的选择性，经试验摸索后，确定每个品种的专用色谱柱，贴上标签，做到专柱专用。延长柱子的寿命。5.3.12 每次使用完色谱柱后，填写色谱柱使用记录。5.3.13 对于确已失效的柱子，申请停用，填写色谱柱停用记录，不能随意丢弃，专门存放。5.3.14 对于使用时间较长柱效降低的柱子，可把它用于检测产品的中间体。5.4 色谱柱再生色谱柱使用一段时间后,常遇到柱子被污染,柱效会有一定程度的下降，采用适当的方法对色谱柱进行保护，可以延长色谱柱的使用寿命。5.4.1 保护柱(预柱)的使用：对于较昂贵的色谱柱，可以在柱前加一保护柱，防止样品中杂质污染分析柱，对于制备柱,因其进样量大，使用保护柱尤为重要。5.4.2 再生处理包括正反两种顺序：5.4.2.1 硅胶柱（未键合）：正己烷二氯甲烷异丙醇。5.4.2.2 硅胶基质非极性键合相（C18, C8, C4, C2, C1, PHENYL, CN, NH2）：95%水/ 5%乙腈（甲醇）乙腈（甲醇） THF；（含蛋白污染物）B 从 10到 90的梯度，A=0.1TFA水溶液，B=0.1TFA 乙腈溶液。5.4.2.3 硅胶基质极性键合相（CN，NH2，DIOL 等）：氯仿异丙醇二氯甲烷庚烷。5.4.2.4 凝胶色谱柱（GPC/GFC 等）：通常用稀的氢氧化钠或非离子型去垢剂冲洗。5.4.3 建议清洗柱子的其他条件： 溶剂体积：推荐使用柱体积的 1020 倍流速：推荐使用常规流速的 1/51/2 不同流动相转换：推荐换相时浓度梯度由小到大6 相关文件 无7 修订历史版本号修订原因修订内容执行日期011 公司组织架构改变2增加文件和记录的适用性，规范性1 各部门的名称及职责改变2 文件格式调整、内容优化年 月 日8 附件附件1色谱柱台账 编号及版本号：SMP-11-007-R01-01附件2色谱柱使用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R02-01附件3色谱柱停用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R03-01 附件1 色谱柱台账 编号及版本号：SMP-11-007-R01-01 页码：1/1 年 接收日期启用日期编 号出厂编号生产厂家型 号规 格备 注月 日月 日月 日月 日 月 日 月 日月 日月 日月 日月 日 月 日 月 日月 日月 日月 日月 日 月 日 月 日月 日月 日月 日月 日 月 日 月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日 附件2 色谱柱使用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R02-01 页码：1/1 年 色谱柱类型：编号：品牌：型号：使用日期 检品名称柱压柱效维护保养使用人备注月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日月 日 附件3 色谱柱停用记录 编号及版本号：SMP-11-007-R03-01 页码：1/1 年 色谱柱类型编号品牌型号购入日期停用日期停用原因备注月 日月 日月 日 月 日月 日月 日月 日 月 日月 日月 日月 日 月 日月 日月 日月 日 月 日月 日月 日月 日 月 日月 日 月 日月 日月 日月 日 月 日月 日 月 日月 日 月 日