常用培养基配方.doc

(完整word)常用培养基配方常用培养基配方（微生物学与微生物检验学部分)渤海大学生物与食品科学学院2006年3月目 录01糖发酵管02 ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用)05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08HughLeifson培养基（O/F试验用)09 马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12 氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用）15 尿素琼脂16 氰化钾(KCN）培养基17 氧化酶试验18 硝酸盐培养基19 细胞色素氧化酶试验20 过氧化氢酶试验21 过氧化物酶试验22 磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24 乳酸苯酚溶液25 肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉（或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33 乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35 EC肉汤36 缓冲蛋白胨水（BP）37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM） 38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB) 39 四硫磺酸钠煌绿增菌液（换用方法） 40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC）41 GN增菌液42 肠道菌增菌肉汤43 亚硫酸铋琼脂(BS） 44 DHL琼脂45 HE琼脂46 SS琼脂47 WS琼脂48 麦康凯琼脂49 伊红美蓝琼脂（EMB） 50三糖铁琼脂（TSI) 51 三糖铁琼脂(换用方法） 52 克氏双糖铁琼脂(KI） 53 克氏双糖铁琼脂(换用方法) 54 葡萄糖半固体发酵管55 5乳糖发酵管56 CAYE培养基57 Honda氏产毒肉汤58 Elek氏培养基(毒素测定用)59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60 胰蛋白胨水61 Rustigian氏尿素培养液62 氯化钠结晶紫增菌液63 氯化钠蔗糖琼脂64 嗜盐菌选择性琼脂65 3。5%氯化钠三糖铁琼脂66 氯化钠血琼脂67 3。5氯化钠生化试验培养基68 改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用） 69 CIN1培养基70 嗜盐性试验培养基 71 改良Y培养基72 改良克氏双糖73 快速硫化氢(H2S）试验琼脂74 DNA酶甲基绿琼脂（DTA) 75 CaryBlair氏运送培养基76 Skirrow氏培养基77 TTC琼脂78 甘氨酸培养基79 改良磷酸盐缓冲液80 氯化镁孔雀绿肉汤81 胰酪胨大豆肉汤82 BairdParker氏培养基83 7.5氯化钠肉汤84 匹克氏肉汤85 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂86 3。8%柠檬酸钠溶液87 酪蛋白琼脂88 木糖明胶培养基89 庖肉培养基90 卵黄琼脂培养基91亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶琼脂（SPS） 92液体硫乙醇酸盐培养基（FT) 93含铁牛奶培养基94 动力硝酸盐培养基(A法）95 动力硝酸盐培养基(B法） 96 血清肉汤97 马丁氏肉汤98 明胶培养基99 察氏培养基100 高盐察氏培养基101 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) 102 马铃薯琼脂103 孟加拉红培养基104 玉米粉琼脂105 大米粉培养基106 亚硒酸盐煌绿增菌液107 煌绿肉汤增菌液108 肠毒素产毒培养基109 0。1蛋白胨水稀释剂110半固体琼脂01 糖发酵管成分：牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O)2g0。2滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法：1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0。5加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121高压灭菌15min。2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100mL，121高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。 注:蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌.试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于361培养，一般观察23d。迟缓反应需观察1430d。02 ONPG培养基成分：邻硝基酚D半乳糖昔（ONPG) 60mg（ONitrophenylDgalactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7。5) 10mL1蛋白胨水(PH7.5）30mL制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm75mm试管，每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于361培养13h和24h观察结果.如果半乳糖苷酶产生，则于13h变黄色，如无此酶则24h不变色。03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0。2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法：先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂，加热溶化.然后加入指示剂，混合均匀后分装试管,121高压灭菌15min。放成斜面。试验方法：挑取少量琼脂培养物接种，于361培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色.04 缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用)成分：磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法：溶化后校正pH,分装试管，每管1mL,121高压灭菌15min。甲基红（MR)试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于361培养25d，哈夫尼亚菌则应在2225培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性.甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸馏水。VP试验：用琼脂培养物接种本培养基中，于361培养24d。哈夫尼亚菌则应在2225培养。加入6%萘酚乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0。2mL，充分振摇试管，观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性，应放在361下培养4h再进行观察。05克氏柠檬酸盐培养基成分：柠檬酸钠 3g葡萄糖 0.2g酵母浸膏 0.5g单盐酸半胱氨酸 0.1g磷酸二氢钾 1g氯化钠 5g0.2酚红溶液 6mL琼脂 15g蒸馏水 1000mL制法:加热溶解,分装试管，121高压灭菌15min。放成斜面。试验方法：用琼脂培养物接种整个斜面，在361培养7d，每天观察结果。阳性者培养基变为红色。06 丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏 1g硫酸铵 2g磷酸氢二钾 0.6g磷酸二氢钾 0。4g氯化钠 2g丙二酸钠 3g0。2溴麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH6.8制法：先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121高压灭菌15min.试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种,于361培养48h，观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。07 葡葡糖铵培养基成分：氯化钠5g硫酸镁（MgSO47H2O） 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0。2溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6。8制法：先将盐类和糖溶解于水内,校正pH，再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min,放成斜面.试验方法：用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20100之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于361培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。08 HughLeifson培养基（O/F试验用）成分：蛋白胨 2g氯化钠 5g磷酸氢二钾 0.3g琼脂 4g葡萄糖 10g0。2溴麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH7。2制法：将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正pH至7。2。加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂,然后加入指示剂。混匀后，分装试管，121高压灭菌15min,直立凝固备用。试验方法：从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化的1琼脂液于表面，高度约1cm，于361培养。09 马尿酸钠培养基成分：马尿酸钠1g肉浸液100mL制法：将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内，并于管壁画一横线。以标志管内液面高度，高压灭菌12120min.试剂:三氯化铁（FeCl36H2O）12g，溶于2%盐酸溶液100mL中即成。试验方法:用纯培养物接种，于42培养48h，观察培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL，加入三氯化铁试剂0。2mL，立即混合均匀，经1015min,观察结果。结果：出现恒久之沉淀物为阳性。10营养明胶成分：蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mLpH6.87。0制法：加热溶解、校正至pH7.47.6，分装小管，121高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH应为6.87.0。试验方法：用琼脂培养物穿刺接种，放在2225培养,每天观察结果，记录液化时间。或放在36士1培养,每天取出，放冰箱内30min后再观察结果。11苯丙氨酸培养基成分：酵母浸膏3gDI苯丙氨酸（或L苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000mL制法：加热溶解后分装试管，121高压灭菌15min，使成斜面。试验方法：自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂，在361培养4h或1824h。滴加10三氯化铁溶液23滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。12 氨基酸脱羧酶试验培养基成分：蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000mL1.6滇甲酚紫乙醇溶液1mLL氨基酸或DL氨基酸 0。5或1g/100mLpH6。8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶100mL,分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸.L氨基酸按0.5%加入,DL氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，115高压灭菌10min。试验方法：从琼脂斜面上挑取培养物接种，于361培养1824h，观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。13蛋白胨水（靛基质试验用）成分：蛋白胨（或胰蛋白胨） 20g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法：按上述成分配制，分装小试管,121高压灭菌15min.靛基质试剂柯凡克试剂：将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中。然后缓慢加入浓盐酸25mL。欧波试剂：将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL。试验方法:挑取小量培养物接种，在361培养12d，必要时可培养45d。加入柯凡克试剂约0。5mL，轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色；或加入欧波试剂约0.5mL，沿管壁流下，覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。注：蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。14 硫酸亚铁琼脂（硫化氢试验用)成分：牛肉膏 3g酵母浸膏 3g蛋白胨 10g硫酸亚铁 0。2g硫代硫酸钠 0。3g氯化钠 5g琼脂 12g蒸馏水 1000mLpH7.4制法：加热溶解,校正pH，分装试管，115高压灭菌15min，取出直立候其凝固。试验方法：挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺,于361培养12d，观察结果。产硫化氢者使培养基变为黑色。注：肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生，应采用三糖铁琼脂或本培养基。 15 尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0。4酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000mL20%尿素溶液 100mLpH7.20.1制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121高压灭菌15min.冷至5055,加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2,最终pH应为7。20.1。分装于灭菌试管内，放成斜面备用。试验方法：挑取琼脂培养物接种，在361培养24h，观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16 氰化钾（KCN)培养基成分:蛋白胨 10g氯化钠 5g磷酸二氢钾 0.225g磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水 1000mL0。5%氰化钾溶液 20mLpH7.6制法：将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0。5氰化钾溶液2.0mL（最后浓度为110000），分装于12mm100mm灭菌试管，每管约4mL，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4冰箱内,至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。17 氧化酶试验试剂:1盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制,干冰箱内避光保存。1%-萘酚乙醇溶液。试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色，并逐渐加深;再加萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。阴性于两分钟内不变色。以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同.18 硝酸盐培养基成分：硝酸钾 0。2g蛋白 5g蒸馏水 1000mLpH7.4制法:溶解，校正pH，分装试管，每管约5mL，121高压灭菌15min。硝酸盐还原试剂：甲液：将对氨基苯磺酸0。8g溶解于2。5mol/L乙酸溶液100mL中。乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。试验方法:接种后在361培养14d，加入甲液和乙液各一滴，观察结果。硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色。 注：本试验阴性的原因有三：细菌不能还原硝酸盐；亚硝酸盐继续分解，生成氨和氮；培养基不适于细菌的生长。如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许，可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色。19 细胞色素氧化酶试验试剂:1盐酸二甲基对苯二胺溶液。1%-萘酚乙醇溶液。试验方法:取37（或低于37）培养20h的斜面培养物一支，将两种试剂各23滴，从斜面上端滴下，并将斜面略加倾斜，使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物，则可用试剂混合液滴在菌落上.结果：于2min内呈现蓝色者为阳性。阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应，2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果。20 过氧化氢酶试验试剂：3过氧化氢溶液：临用时配制.试验方法：挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加3过氧化氢溶液2mL,观察结果。结果:于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性.21 过氧化物酶试验试剂：2%儿茶酚溶液。3%过氧化氢溶液。试验方法：挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加2儿茶酚溶液1mL及3过氧化氢溶液1mL.静置于室温(20)中3060min，观察结果。结果:阳性反应，细菌变为黑褐色；阴性反应，细菌不变色。注：过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。22 磷酸盐缓冲液储存液磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7。2制法：先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000mL。稀释液：取储存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL。分装每瓶100mL或每管10mL，121高压灭菌15min。23明胶磷酸盐缓冲液成分：明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000mLpH6.2制法：加热溶解,校正pH，121高压灭菌15min.24 乳酸苯酚溶液成分：苯酚10g乳酸(比重1.21)10g甘油20g蒸馏水10mL制法：将苯酚在水中加热溶解，然后加入乳酸及甘油.用途：检验真菌形态时用。25 肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000mL制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH7.47。6煮沸并过滤，分装烧瓶,121高压灭菌30min。26肉浸液琼脂成分：肉浸液肉汤(PH7.4） 1000mL琼脂1720g制法：加热溶化琼脂，分装烧瓶或试管,121高压灭菌30min。根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分：绞碎牛肉(或牛心）1000g15氢氧化钠溶液 27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000mL制法:1称取碎牛肉，加蒸馏水,隔水加热到80，维持15min.2加氢氧化钠溶液，对pH试纸呈弱碱性，冷至40。3加胰蛋白酶、氯仿，在361放置45h，每小时摇动一二次。44h后，吸取上层液5mL于试管中，加5%硫酸铜溶液0.1mL、4%氢氧化钠溶液5mL,混合之。若呈红色，则不须再消化，可由温箱取出。5加入15乙酸溶液45mL，对pH试纸呈酸性.6煮沸15min，使胰蛋白酶破坏，冷后，放冰箱内一夜。7次日吸取上层清液，加氯化钠10g,并加水补足原量，煮沸。8校正pH7。47.6(加15氢氧化钠溶液约10mL)，加热，用滤纸过滤,分装烧瓶，121高压灭菌20min。注：此培养基可作为琼脂培养基的基础，不需加蛋白胨。胰蛋白酶之配制：称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL、蒸馏水1500mL,混合之,装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后,用绒布过滤挤出其汁，加盐酸至0。05，放冰箱内保存备用。28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000mL浓盐酸10mL制法：1洗涤猪胃,除去油脂，保留胃粘膜，用绞肉机绞碎。2用绞肉机将猪血块绞碎。3将蒸馏水加热至55，加入猪胃、猪血块和盐酸，置55水浴中24h,时常加以摇动.4从水浴内取出,加入1moL/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min，置于冰箱内一夜。5吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g，加热至75，加入1mol/L碳酸钠溶液45mL，煮沸,校正pH7。27.4。6用滤纸过滤,分装烧瓶，121高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分：牛心消化汤（PH7.47。6) 1000mL琼脂 20g黄豆粉浸液 50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内，加热溶解，过滤。加入豌豆粉浸液，分装每瓶100mL，121高压灭菌15min。豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g、氯化钠10g，加入蒸馏水100mL。置100水浴内加热1h,放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆浸液。30血琼脂成分:pH7.47.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血）510mL制法:加热溶化琼脂，冷至50,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀，倾注平板。亦可分装灭菌试管,置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分：蛋白胨10g牛肉膏3g 氯化钠5g琼脂1520g蒸馏水1000mL制法：将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7。27。4。加入琼脂,加热煮沸，使琼脂溶化.分装烧瓶，121高压灭菌15min。注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面，则应为2%.32营养肉汤成分：蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.4制法：按上述成分混合，溶解后校正pH,分装烧瓶，每瓶225mL,121高压灭菌15min.33 乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐（或牛、羊胆盐)5g乳糖10g0。04%滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法：将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL,并放入一个小倒管，115高压灭菌15min。注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。34乳糖发酵管成分：蛋白胨20g乳糖10g0。04%溴甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水1000mLpH7.4制法：将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115高压灭菌15min。注：双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35 EC肉汤成分：胰蛋白胨20g3号胆盐（或混合胆盐） 1.5g乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121高压灭菌15min，最终pH为6.90。2。36 缓冲蛋白胨水（BP)成分：蛋白胨 10g氯化钠 5g磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O) 9g磷酸二氢钾 1。5g蒸馏水 1000mLpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装，121高压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶225mL.注：本培养基供沙门氏菌前增菌用。37 氯化镁孔雀绿增菌液（MM）甲液胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾1.6g蒸馏水1000mL乙液氯化镁（化学纯）40g蒸馏水100mL4。13.3丙液0.4%孔雀绿水溶液。制法：分别按上述成分配好后,121高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL，以无菌操作混合即可。注：本培养基亦称Rappaport 10（R10）增菌液.38 四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB)基础培养基多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000mL碘溶液碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法：将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100mL.分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀.121高压灭菌15min备用.临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL、0.1%煌绿溶液1mL.39 四硫磺酸钠煌绿增菌液（换用方法）基础液:蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 3g碳酸钙 45g蒸馏水 1000mL将各成分加入于蒸馏水中，加热至约70溶解，校正pH至7.00.1,121高压灭菌20min。硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O） 50g蒸馏水加至100mL碘溶液碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量。贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用。煌绿水溶液煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d，使其自然灭菌.牛胆盐溶液干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121高压灭菌20min。制备：基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分，均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠5。5g磷酸二氢钾4.58L-胱氨酸0.01g蒸馏水1000mL1%L胱氨酸氢氧化钠溶液的配法:称取L胱氨酸0.1g(或DL胱氨酸0。2g)，加1mol/L氢氧化钠1。5mL，使溶解，再加入蒸馏水8.5mL即成。制法：将除亚硒酸氢钠和L胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸,俟冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，候冷，以无菌操作与上液混合。再加入1L胱氨酸氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中，每瓶100mL,pH应为7.00.1。41 GN增菌液成分：胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mLpH7.0制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶225mL，115高压灭菌15min。42 肠道菌增菌肉汤成分：蛋白胨1 10g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000mLpH7。2制法：按上述成分配好,加热使溶解，校正pH.分装每瓶30mL，115高压灭菌15min。43 亚硫酸铋琼脂（BS）成分：蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0。3g磷酸氢二钠4g煌绿0。025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂1820g蒸馏水1000mLpH7。5制法：1将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至804将以上三液合并，补充蒸馏水至1000mL，校正pH，加0。5煌绿水溶液5mL，摇匀。冷至5055，倾注平皿.注：此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44 DHL琼脂成分：蛋白胨 20g牛肉膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g去氧胆酸钠 1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠 1g柠檬酸铁铵 1g中性红 0.03g琼脂 1820g蒸馏水 1000mLpH7。3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中，校正pH。再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并加入0。5%中性红水溶液6mL，待冷至5055，倾注平板。45 HE琼脂成分：脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂1820g蒸馏水1000mL0.4溴麝香草酚蓝溶液16mLAndrade指示剂 20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法：将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液；将琼脂加入于600mL蒸馏水内，加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内，校正pH。再加入指示剂，并与琼脂液合并,待冷至5055,倾注平板。注:此培养基不可高压灭菌。甲液的配制硫代硫酸钠 34g柠檬酸铁铵 4g蒸馏水 100mL乙液的配制去氧胆酸钠 10g蒸馏水 100mLAndrade指示剂酸性复红 0。5g1mol/L氢氧化钠溶液 16mL蒸馏水 100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液12mL.46 SS琼脂基础培养基：牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐