50%苯菌灵可湿性粉剂的分析方法研究_陈伟.pdf

第 45 卷第 4 期世 界 农 药2023 年 4 月World Pesticide作者简介：陈伟，男，技师，研究方向：农药新产品检测方法的建立、技术更新及检测分析。E-mail：。收稿日期：2023-03-02。4550%苯菌灵可湿性粉剂的分析方法研究苯菌灵可湿性粉剂的分析方法研究陈 伟1，何培迎1，黄华树2(1.江苏蓝丰生物化工股份有限公司，江苏 新沂 221400；2.中国农药工业协会，北京 100125)摘要：采用高效液相色谱技术建立了测定 50%苯菌灵可湿性粉剂制剂产品中有效成分含量的定性定量方法，以乙腈和乙酸溶液(体积比 8020)为流动相，使用 C18为填充料的不锈钢柱，紫外检测器，检测波长为 290 nm。结果表明，该方法中苯菌灵的标准曲线线性回归系数为 0.999，标准偏差为 0.158，变异系数为 0.312%，平均回收率为 99.702%。关键字：苯菌灵；高效液相色谱；分析中图分类号：TQ450.7文献标志码：A文章编号：1009-6485(2023)04-0045-04DOI：10.16201/10-1660/tq.2023.04.09Study on the analytical method of benomyl 50%wettable powderCHEN Wei1,HE peiying1,HUANG huashu2(1.Jiangsu Lanfeng Biochemical Co.,Ltd.,Xinyi 221400,Jiangsu,China;2.China Pesticide IndustryAssociation,Beijing 100125,China)Abstract:In this paper,a liquid chromatography method was established to analyze the content of benomyl 50%WP with C18stainless steel column and UV detector using acetonitrile and acetic acid solution(8020,by vol)as the mobile phase,at thedetection wavelength was 290 nm.The results showed that the standard curve linear regression coefficients of benomyl were0.999,the standard deviation were 0.158,the coefficient of variation were 0.312%,and the average recovery were 99.702%.Keywords:benomyl;high performance liquid chromatography;analysis苯菌灵(benomyl)是美国杜邦公司研制开发的高效、广谱、内吸性的氨基甲酸甲酯类杀菌剂，具有保护、治疗和铲除作用，其在植物体内代谢为多菌灵及具有挥发性的异氰酸丁酯而发挥杀菌作用，主要用于防治谷类作物、葡萄、仁果及核果类、水稻和蔬菜上的子囊菌纲、半知菌纲及某些担子菌纲真菌引起的病害1。苯菌灵的分析方法除了少数采用气相色谱法和薄层色谱法外，主要采用液相色谱法2-5。50%苯菌灵可湿性粉剂作为一种常用登记制剂产品，有关其分析方法报道较少。基于此，本文采用反相高效液相色谱法开展了 50%苯菌灵可湿性粉剂中有效成分的分析方法研究，以期为该产品的质量控制提供技术支撑。1 1 材料与方法材料与方法1.11.1 供试药剂和试剂供试药剂和试剂苯菌灵标样(沈阳化工研究院有限公司)，已知质技术创新世 界 农 药第 45 卷46量分数含量99.0%；正丁基异氰酸酯、乙腈、乙酸，色谱纯(上海国药)。1.21.2 主要仪器主要仪器Agilent1260 型高效液相色谱仪配可调波长紫外检测器和色谱数据处理机(安捷伦)；AL204 型电子天平(梅特勒)。1.31.3 色谱检测条件色谱检测条件色谱柱：250 mm4.6 mm 不锈钢柱，内填 5 m化学键合 C18；流动相：乙腈+2%乙酸溶液80+20(体积比)；流量：1.0 mL/min；柱温：40；检测波长：290 nm；进样体积：20 L；采用外标法峰面积定量。在该色谱条件下，苯菌灵保留时间约为5.2 min，如图 1 所示。01234567时间/min350300250200150100500电压/mv图 1苯菌灵标样的高效液相色谱图(3.2 g/L)1.41.4 检测步骤检测步骤1.4.1 流动相配制准确移取乙酸 10 mL 于 500 mL 超纯水中，配制成 2%乙酸溶液，按照乙腈+乙酸溶液=80+20(体积比)配制成流动相，超声脱气备用。1.4.2 标准溶液的配制准确称取苯菌灵标样约 40 mg(称准至 0.1 mg)置于 250 mL 容量瓶中，用含有 5%正丁基异氰酸酯的乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。1.4.3 试样溶液的配制准确称取含有苯菌灵试样约40mg(称准至0.1mg)置于 250 mL 容量瓶中，用含有 5%正丁基异氰酸酯的乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀、过滤。1.4.4 进样分析按 1.3 节所述的仪器条件运行液相色谱仪，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻 2 针的相对响应值变化小于 1.0%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。1.4.5 结果计算将测得 2 针试样溶液以及试样前后 2 针标样溶液中苯菌灵面积进行平均，苯菌灵的质量分数 X1(%)按式(1)计算：(1)21121mRpmRX=式中：R1为标样溶液中苯菌灵峰面积的平均值；R2为试样溶液中苯菌灵峰面积的平均值；m1为苯菌灵标样的质量，g；m2为试样的质量，g；p 为苯菌灵标样的质量分数，%。2 2 结果与讨论结果与讨论2.12.1 检测波长的选择检测波长的选择采用二极管阵列检测器(DAD)在190400 nm吸收波长范围内观察苯菌灵的紫外吸收曲线，扫描结果如图 2 所示。从图 2 可知，在扫描范围内苯菌灵最大吸收波长为 290 nm，结合出峰峰形及干扰峰情况，最终选择 290 nm 作为本方法的检测波长。200250300350400450500波长/nm9008007006005004003002001000吸光度/mAU图 2苯菌灵标样的紫外吸收扫描第 4 期陈伟等：50%苯菌灵可湿性粉剂的分析方法研究472.22.2 流动相的选择流动相的选择目前国内行业方法检测苯菌灵采用的流动相是甲醇加 1%乙酸配制而得。但在实际试验操作中发现，在该流动相条件下，苯菌灵制剂中出现了更多的杂质峰，部分杂质峰与苯菌灵峰的出峰位置接近甚至重叠，无法达到良好的分离效果，从而影响检测结果的可靠性。因此本文优化了流动相条件，采用 2%乙酸溶液的缓冲体系作为流动相对苯菌灵和杂质进行有效分离。结果发现，将乙酸配制成 2%溶液，加入乙腈，以乙腈乙酸溶液 8020 的体积比配制成流动相，所得色谱图显示能够将苯菌灵和杂质进行更好地分离，且有效成分出峰位置无明显杂质干扰，符合定量分析要求，且峰形更好(图 1)，因此本试验选用该体系作为流动相。2.32.3 分析方法的线性相关性试验分析方法的线性相关性试验准确配制一系列不同质量浓度的苯菌灵标样溶液，分别为 0.208 3、0.709 2、1.205 9、1.410 8、2.219 8 mg/mL，然后分别按 1.4 节测定步骤进行分析检测，以苯菌灵的质量浓度为横坐标，苯菌灵的峰面积为纵坐标，计算一元性回归方程和作线性相关图，结果如图 3 所示。在选定质量浓度范围内，苯菌灵的质量浓度与峰面积线性良好，苯菌灵线性回归方程y=2 370.7x+39.80，相关系数(R2)为 0.999。y=2 370.7x+39.80R2=0.99901000200030004000500060000123456峰面积质量浓度/(mg/mL)图 3苯菌灵线性回归曲线2.42.4 分析方法的精密度试验分析方法的精密度试验任取一批 50%苯菌灵可湿性粉剂，按 1.4 节测定步骤连续测定苯菌灵含量 5 次，分别计算其标准偏差、变异系数。精密度测定试验数据见表 1，可见，苯菌灵的标准偏差为0.158，变异系数为0.312%。表 1苯菌灵精密度测定样品质量分数/%标准偏差变异系数/%12345平均值苯菌灵50.750.450.550.850.650.60.1580.3122.52.5 方法准确度试验方法准确度试验准确称取已知含量的 50%苯菌灵可湿性粉剂样品 5 份，分别加入定量的苯菌灵标样，然后按 1.4 节测定步骤测定苯菌灵标样的加入量，同理论值进行比较，计算回收率。回收率测定试样数据见表 2。可见，苯菌灵的回收率分别为 98.80%100.60%，平均回收率为 99.702%。表 2回收率测定样品编号添加量/mg实测量/mg回收率/%平均回收率/%1234558.570.449.665.467.457.870.149.964.967.698.8099.57100.6099.24100.3099.7023 3 结结论论本文采用高效液相色谱仪建立了一种检测苯菌灵可湿性粉剂有效成分的定量分析方法，其用于测定苯菌灵可湿性粉剂中苯菌灵的含量，能够有效避免杂质干扰，具有简便快速、重现性好、准确度高及分离效果好等优点，是检测苯菌灵加工的制剂中有效成分质量分数的有效检测方法，适用于此类产品的质量控制和检测。参考文献1刘长令.世界农药大全:杀菌剂卷M.北京:化学工业出版社,2006:73.2汤淼荣,章小波,李乃芳.液相色谱法直接测定可湿性制剂苯菌灵J.世 界 农 药第 45 卷48分析化学,1999,27(7):802-805.3陈军,张宗祥,朱宇芳.固相萃取-高效液相色谱法测定环境水体 中 多菌 灵 和 苯菌 灵 J.环境监测管理与技术,2006,18(6):30-31.4王明月,袁宏球,王秀兰.高效液相色谱法测定多菌灵农药中的有效成分含量J.热带农业科学,2004,24(1):23-26.5杜秀利,王广成,许艳秋.草铵膦母药及水剂的高效液相色谱分析方法J.世界农药,2022,44(11):52-55.（上接第 44 页）空白土壤提取液质谱图土壤中添加水平 0.001 mg/kg 样品质谱图土壤中添加水平 0.01 mg/kg 样品质谱图图 2土壤中添加回收试验质谱图3 3 结结论论对氨磺乐灵在水和土壤中的残留量检测研究中，建立了高效液相液质联用仪(LCMS/MS)的分析方法。测得在水中 1.0、10.0 g/L 和土壤中 0.001、0.01 mg/kg 共 4 个添加水平下平均回收率和相对标准偏差，均符合农药登记 土壤和水中化学农药分析方法建立和验证指南(NY/T 31512017)和食品安全国家标准食品中农药最大残留限量(GB27632012)要求。该方法灵敏、有效，适合实验室大批量检测。参考文献1张义聚.世界农药新品种技术大全M.北京:中国农业科学技术出版社,2010:887.2STRACHAN S D,HESS F D.The biochemical hechanism of action ofthe dinitroaniline herbicide oryzalinJ.Pesticide Biochemistry&Physiology,1983,20(2):141-150.3陈帆,雷进海,张捷龙.除草剂氨磺乐灵合成路线的绿色化改进J.广州化工,2011,39(18):40-41.4第 2 个氨磺乐灵、氨氟乐灵原药产品分别获批登记J.农化市场十日讯,2011(31):33.5刘显良,向兰香,李俊凯,等.除草剂氨磺乐灵的毒力、药效及安全性评价J.农药,2018,57(7):539-541.6段文胜,干丽君.高效液相色谱法测定氨磺乐灵的含量C/中国化工学会农药专业委员会第十四届年会论文集,沈阳,2010.7农药登记土壤和水中化学农药分析方法建立和验证指南:NY/T31512017S.北京:中国农业出版社,2017.8农作物中农药残留试验准则:NY/T 7882018S.北京:中国农业出版社,2018.(10 000)52 7770.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)15.004.003.002.001.000.00峰面积峰面积345.10281.05(-)10.000.501.001.502.002.50保留时间/min3.002.001.000.00(1 000)3 1091.201.000.800.600.400.200.000.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)1(10 000)12 586峰面积