LC-MS_MS测定氨磺乐灵在水和土壤中的残留量_黄慧.pdf

第 45 卷第 4 期世 界 农 药2023 年 4 月World Pesticide作者简介：黄慧，女，硕士，工程师，研究方向：农药安全性评测。E-mail：。通信作者：闫妮娜，女，本科，工程师，研究方向：化学品检测。E-mail：。收稿日期：2023-01-29。41LC-MS/MS 测定氨磺乐灵在水和土壤中的残留量测定氨磺乐灵在水和土壤中的残留量黄 慧，张 武，闫妮娜(浙江长三角化学品安全评价有限公司，杭州 310023)摘要：采用高效液相色谱质谱联用法建立氨磺乐灵在水和土壤等环境介质中的残留检测方法，为该除草剂在环境中的安全监测提供科学指导。样品经 Agilent ZORBAX Extend C18(2.1 mm50 mm，3.5 m)色谱柱分离，以乙腈/0.1%甲酸水溶液(8020，体积比)为流动相，流速为 0.4 mL/min，柱温为 30，采用 ESI MRM Negative 的扫描模式进行检测。加标回收试验结果表明，在 0.550.0 g/L 范围内，线性关系良好，相关系数 r 大于 0.999，定量限为 0.5 g/L，水中平均加标回收率为 104%109%，RSD 为 2.40%4.62%；土壤中平均加标回收率为 85.4%94.8%，RSD 为3.53%4.78%。该方法前处理简单、快速，检测结果准确、可靠、方法选择性强、灵敏度高，为农药污染及其有害因素监测提供技术支持。关键词：高效液质联用法；测定；氨磺乐灵；残留量中图分类号：TQ450.7文献标志码：A文章编号：1009-6485(2023)04-0041-04DOI：10.16201/10-1660/tq.2023.04.08Determinationof oryzalin residues in waterand soilby LCMS/MSHUANG Hui,ZHANG Wu,YAN Nina(Zhejiang Changsanjiao Chemical Safety Evaluation Co.,Ltd.,Hangzhou 310023,China)Abstract:In this study,a method was established for the determination of oryzalin residues in water/soil by LCMS/MS,providing scientific guidance for the safety monitoring of the herbicide in the environment.The samples were separated byAgilent Zorbax Extend C18(2.1 mm50 mm,3.5 m)column with acetonitrile:1%formic acid aqueous solution(80:20,V/V)as mobile phase,the flow rate was 0.4 mL/min and the column temperature was 30,under ESI MRM Negativemode.The results showed that in the range of 0.5-50.0 g/L,a good linear relationship was obtained,the correlationcoefficient(r)was more than 0.999,the limit of quantitation(LOQ)was 0.5 g/L,the average recovery in water was104%-109%,the relative standard deviation(RSD)was 2.40%-4.62%,and the average recoveries in soil was85.4%-94.8%,the RSD was 3.53%-4.78%.The pretreatment of this method was simple and fast,and the results wereaccurate,reliable,selective and sensitive,which provided a technical support for monitoring pesticide pollution and itsharmful factors.Keywords:LCMS/MS;determination;oryzalin;residues技术创新世 界 农 药第 45 卷42氨磺乐灵(oryzalin)，又名氨磺灵、黄草消，化学名称为 3,5-二硝基-N,N-二丙基对氨基苯磺酰胺，是一种低毒选择性芽前除草剂，其通过破坏幼苗分生细胞的有丝分裂，从而抑制杂草幼芽及幼根的生长，主要用于大豆、花生、棉花、果树等作物田防除一年生禾本科和阔叶杂草，也可用于水稻等作物田的杂草13。氨磺乐灵在国内已获得登记4，但对于氨磺乐灵在环境中的检测方法鲜有报道5。本研究拟采用高效液相色谱质谱联用法建立氨磺乐灵在土壤和水等环境介质中的残留检测方法，相对于目前已报导的高效液相色谱法6具有灵敏度高、可靠性强的特点，可为该除草剂在环境中的安全监测提供科学指导。1 1 材料与方法材料与方法1.11.1 供试样品与材料供试样品与材料98.0%氨磺乐灵标准品(CAS 号 19044-88-3，上海源叶生物科技有限公司)；乙腈、甲酸(均为色谱纯，美国 TEDIA 公司)；自来水；潮棕土：自然风干后过 2 mm 筛。1.21.2 仪器仪器LCMS-8040 高效液相质谱联用仪(日本岛津公司)；XSE205DU 电子天平(美国梅特勒-托利多公司)；VELOCITY 14 Pro 离心机(英国 Dynamica 公司)；MS 3 BASIC 涡旋混合器(德国艾卡公司)。1.31.3 试验设计试验设计依据 农药登记 土壤和水中化学农药分析方法建立和验证指南(NY/T 31512017)7、农作物中农药残留试验准则(Y/T 7882018)8，分别进行水、土中的添加回收试验。准确称取标准物质，用乙腈溶解配制储备液；用乙腈/水(11，体积比)混合溶液逐步稀释配制系列标准溶液。以氨磺乐灵的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。并以水/土中的基质溶液配制基质标准溶液，分别考察基质效应；当基质效应20%，可使用溶剂标准曲线进行计算，否则需用基质标准曲线进行计算。1.41.4 试验方法试验方法1.4.1 溶液配制以乙腈为溶剂，配制得到质量浓度为 1 000 mg/L的储备液 1。溶剂标准曲线：以乙腈/水(11，体积比)混合溶液为溶剂，逐级稀释配制质量浓度为 0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0 g/L 的系列标准溶液，待仪器稳定后依次连续注入上述标准溶液，以峰面积对质量浓度回归分析，制得标准曲线。水中基质标准曲线：以空白自来水为溶剂，制得 0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0 g/L 的基质标准溶液。以峰面积对质量浓度回归分析，制得标准曲线。土中基质标准曲线：以空白土壤提取液为溶剂，制得 0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0 g/L 的基质标准溶液。以峰面积对质量浓度回归分析，制得标准曲线。用乙腈/水(11，体积比)混合溶液稀释制得质量浓度为0.1mg/L的储备液2和1.0 mg/L的储备液3，待用。1.4.2 水中添加回收试验分别设置 1.0、10 g/L 2 个添加水平，每个添加水平设置 5 个平行，同时设置 1 个空白对照。量取 10 mL 空白自来水，分别加入质量浓度为0.1mg/L的储备液2和1.0mg/L的储备液3各100L，使添加水平分别为 1.0、10 g/L，摇晃混匀。静置片刻后，过 0.22 m 滤膜，LC-MS/MS 测定。1.4.3 土壤中添加回收试验分别设置 0.001、0.01 mg/kg 2 个添加水平，第 4 期黄慧等：LC-MS/MS 测定氨磺乐灵在水和土壤中的残留量43每个添加水平设置 5 个平行，同时设 1 个空白对照。称取空白土壤10.0g 于100mL 离心管中，分别加入质量浓度为0.1 mg/L的储备液2和1.0 mg/L的储备液 3 各 100 L，使添加水平分别为0.001、0.01 mg/kg。待溶剂挥发后，加入5 mL乙腈和5mL水，超声10min，180 r/min 振荡 20 min 混匀，然后 1 000 r/min 离心5 min，取上层提取液过 0.22 m 滤膜，LC-MS/MS测定。1.4.4 检测条件液相色谱条件：色谱柱：Agilent ZORBAXExtend C18(2.1 mm50 mm，3.5 m)；柱温：30；进样体积：10 L；流速：0.4 mL/min。表 1流动相洗脱程序时间/min流速/(mL/min)乙腈/%0.1%甲酸水/%0.100.4080203.000.4080203.00stopMS 条件：扫描模式：ESI MRM Negative，喷雾气流速：3 L/min，DL 温度：250，加热块温度：400，干燥气流速：15 L/min。表 2离子对及参数离子对Dwell/msQ1 Pre Bias/VCE/VQ3 Pre Bias/V345.10/281.0510015.020.028.0345.10/158.9010015.043.011.0345.10/236.9510015.034.014.02 2 结果与分析结果与分析2.12.1 重复性重复性将 5.0 g/L 氨磺乐灵标准溶液重复进样 7 次，检测该方法中保留时间和响应值(峰面积)的重复性。试验结果见表 3，保留时间平均值为 0.487 0 min，RSD 为 0.110%；峰面积平均值为 1.06105，RSD 为1.91%。符合分析方法质量控制要求。表 3氨磺乐灵检测重复性进样次数保留时间/min平均值/minRSD/%峰面积平均值RSD/%10.488 10.487 00.1101.451051.061051.9120.487 21.0310530.487 41.0710540.486 91.0610550.486 51.0910560.486 61.0710570.486 41.101052.22.2 水中添加回收试验水中添加回收试验溶剂配标为 0.550.0 g/L 时，氨磺乐灵的峰面积与质量浓度呈线性相关，标准曲线方程为y=1.68104x+4.01103(r=0.999 9)，各质量浓度点准确度范围为 90.8%111.0%；基质配标为 0.550.0 g/L时，氨磺乐灵的峰面积与质量浓度呈线性相关，标准曲线方程为 y=1.14104x+3.28103(r=0.999 1)，各质量浓度点准确度范围为 88.5%109%。利用斜率计算基质效应，结果为 31.9%，基质效应20%，因此以基质配标得到的标准曲线进行定量。基质效应的计算结果见表 4。表 4基质效应结果名称斜率结果结论溶剂标准曲线1.6810431.9%有基质效应基质标准曲线1.14104水中添加回收试验分别设置 1.0、10 g/L 2 个添加水平，每个添加水平设置 5 个平行，同时设 1 个空白对照，空白自来水在目标出峰处无干扰。1.0、10 g/L 添加水平的平均回收率分别为 104%和109%，RSD 分别为 4.62%和 2.40%。试验结果见表5 及图 1。世 界 农 药第 45 卷44表 5氨磺乐灵水中加标回收率样品名称测定浓度/(g/L)样品浓度/(g/L)准确度/%平均值/%RSD/%CK20%，因此以基质配标得到的标准曲线进行定量。基质效应计算结果见表 6。表 6基质效应结果名称斜率结果结论溶剂标准曲线1.8010457.8%有基质效应基质标准曲线7.60103土壤中添加回收试验分别设置 0.001、0.01 mg/kg2 个添加水平，每个添加水平设置 5 个平行，同时设 1 个空白对照，空白土壤提取液在目标出峰处无干扰。0.001、0.01mg/kg 的平均回收率分别为 94.8%和 85.4%，RSD 分别为 3.53%和 4.78%。试验结果见表 7 及图 2。表 7氨磺乐灵土壤中添加回收率样品名称测定浓度/(g/L)土壤中含量/(mg/kg)准确度/%平均值/%RSD/%CKLODTJ-0.001mg/kg0.9429.4210-494.294.83.530.9019.0110-490.10.9399.3910-493.90.9909.9010-499.00.9689.6810-496.8TJ-0.01mg/kg8.808.8010-388.085.44.788.818.8110-388.18.108.1010-381.08.908.9010-389.08.098.0910-380.9（下转第 48 页）0.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)1(10 000)21 1112.001.000.00峰面积(1 000)4 1210.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)14.003.002.001.00峰面积(10 000)33 1400.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)13.002.001.000.00峰面积世 界 农 药第 45 卷48分析化学,1999,27(7):802-805.3陈军,张宗祥,朱宇芳.固相萃取-高效液相色谱法测定环境水体 中 多菌 灵 和 苯菌 灵 J.环境监测管理与技术,2006,18(6):30-31.4王明月,袁宏球,王秀兰.高效液相色谱法测定多菌灵农药中的有效成分含量J.热带农业科学,2004,24(1):23-26.5杜秀利,王广成,许艳秋.草铵膦母药及水剂的高效液相色谱分析方法J.世界农药,2022,44(11):52-55.（上接第 44 页）空白土壤提取液质谱图土壤中添加水平 0.001 mg/kg 样品质谱图土壤中添加水平 0.01 mg/kg 样品质谱图图 2土壤中添加回收试验质谱图3 3 结结论论对氨磺乐灵在水和土壤中的残留量检测研究中，建立了高效液相液质联用仪(LCMS/MS)的分析方法。测得在水中 1.0、10.0 g/L 和土壤中 0.001、0.01 mg/kg 共 4 个添加水平下平均回收率和相对标准偏差，均符合农药登记 土壤和水中化学农药分析方法建立和验证指南(NY/T 31512017)和食品安全国家标准食品中农药最大残留限量(GB27632012)要求。该方法灵敏、有效，适合实验室大批量检测。参考文献1张义聚.世界农药新品种技术大全M.北京:中国农业科学技术出版社,2010:887.2STRACHAN S D,HESS F D.The biochemical hechanism of action ofthe dinitroaniline herbicide oryzalinJ.Pesticide Biochemistry&Physiology,1983,20(2):141-150.3陈帆,雷进海,张捷龙.除草剂氨磺乐灵合成路线的绿色化改进J.广州化工,2011,39(18):40-41.4第 2 个氨磺乐灵、氨氟乐灵原药产品分别获批登记J.农化市场十日讯,2011(31):33.5刘显良,向兰香,李俊凯,等.除草剂氨磺乐灵的毒力、药效及安全性评价J.农药,2018,57(7):539-541.6段文胜,干丽君.高效液相色谱法测定氨磺乐灵的含量C/中国化工学会农药专业委员会第十四届年会论文集,沈阳,2010.7农药登记土壤和水中化学农药分析方法建立和验证指南:NY/T31512017S.北京:中国农业出版社,2017.8农作物中农药残留试验准则:NY/T 7882018S.北京:中国农业出版社,2018.(10 000)52 7770.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)15.004.003.002.001.000.00峰面积峰面积345.10281.05(-)10.000.501.001.502.002.50保留时间/min3.002.001.000.00(1 000)3 1091.201.000.800.600.400.200.000.000.501.001.502.002.50保留时间/min345.10281.05(-)1(10 000)12 586峰面积