药物耐受性的临床研究及进展.ppt

药物耐受性物耐受性的的临床研究及床研究及进展展*1 1.n n药 物 用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症、用法、用量和注意事项的物质，包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其制剂、抗生素、生化药品、血清疫苗血液制品和诊断药品等。2 2.n n药物耐受性 *是指人体是指人体对药物的反物的反应性降低的一种性降低的一种现象，有先天性和后天象，有先天性和后天获得性之分。得性之分。先天性：是指患者在首次用药时出现耐受性，这种耐受一般可以长期存在。3 3.后天获得性：指某些药物如巴比妥类、肼屈嗪等连续多次用药后可使机体对其产生耐受性，但停药后这种耐受性即可消失。4 4.快速耐受性：有些药物短时间内反复用药数次后即出现耐受性。如麻黄碱和脑垂体后叶素等。交叉耐受性：有时机体对某一药物产生的耐受后，同时可对另一药物的反应性也降低。5 5.*是指病原微生物是指病原微生物对药物反物反应性降低性降低的一种状的一种状态。主要是由于长期应用抗菌药物，病原微生物通过产生使药物失活的酶，改变原有代谢过程或改变自身结构等机理，而产生的一种使药物效果降低的反应。6 6.想达到原有的杀菌效果，往往需要加大药物剂量，有时加大药物剂量也不能再杀死这些耐药病菌。7 7.人体获得性耐药的原因：多药耐药基因的表达 （多药耐药相关蛋白）谷胱甘肽硫转移酶 肺耐药相关蛋白 拓扑异构酶8 8.多多药耐耐药基因基因（mutildruge resistance gens）MDR9 9.n n第一个被发现的，与难治性癫痫有关的耐药基因。n n人类MDR基因主要有MDR1和 MDR2亚型n n第7号染色体长臂，编码一个170kd的包膜糖蛋白（P-gp）1010.n nP-g p 分子分子n n由1280个氨基酸组成n n主要存在于有分泌和排泄功能的“专业化”上皮细胞膜上n n其有ATP能量依赖性外排泵作用，能将进入细胞内的药物或毒物重新泵出细胞外1111.n n交叉抵抗若干结构和功能并不相关的亲脂类药物，是多种疾病耐药性产生的重要机制n nP-gp的含量与细胞内药物浓度及细胞耐药性直接相关 1212.MDR1表达的表达的调控控n n物理因素：加热和紫外线刺激可以使MDR1启动子活化 n n化学因素：药物诱导起重要作用。雌激素和黄体酮、短期接触化疗 柔红霉素、细胞分化剂（如维甲酸、丁酸钠和二甲亚砜等）1313.n n蛋白激酶：I型cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）可调节MDR1表达，PKA依赖性转录因子可上调MDR1表达 蛋白激酶C（PKC）是通过诱导MDR1基因过度表达和加速P-gp的磷酸化，参与了药物耐药性的发生和发展。1414.癫痫病人病人 MDR1表达表达n n19例手术切除的难治性癫痫患者脑组织中MDR1表达水平超过正常的10倍n n14例患者毛细血管内皮中P-gp染色较正常脑组织增强1515.n n神经外胚层细胞内苯妥英钠的浓度，MDR1表达细胞仅为非MDR1表达细胞的25%n nMDR的表达可以通过改变AEDs穿过血脑屏障的通透性从而在癫痫病人的药物耐受中起重要作用 1616.n n抗癫痫药对MDR的诱导作用 苯巴比妥（PB）、苯妥英钠（PHT）卡马西平（CBZ）、丙戊酸镁（VPA）一定浓度的AEDs作用一定时间后细胞均有不同程度的MDR1表达增强，且随着剂量增加和/或时间延长，AEDs对MDR1的诱导作用都明显增加1717.n n MDR1逆转剂在难治性癫痫治疗中的作用 钙通道阻滞剂、核酶、环胞素A 干扰素、反义寡脱氧核苷酸 加用盐酸氟桂利秦（西比灵）可提高难治性癫痫的疗效1818.检测MDR表达的价表达的价值n n预测病人对AEDs的敏感性n n指导药物的调整：在治疗过程中，MDR1表达逐渐增高，提示获得性耐药的发生，及时调整AEDs的种类n n改善病人的治疗：在未用AEDs前，MDR1即显示高表达，表示存在内源性多药耐药，可使用MDR逆转剂配合治疗。1919.谷胱甘谷胱甘肽硫硫转移移酶（glutathione s-transferase）GST2020.n n是多基因编码的蛋白质n n参与代谢外来化学物质的重要酶系 如致癌、致突变、和抗肿瘤药物等n n通过其细胞内药物代谢作用产生代谢性耐药。n n酸性GST-，中性GST-u，碱性GST-a2121.n n能催化药物或外源性化合物与谷胱甘肽偶合，形成谷胱甘肽偶合物，后者可被分泌排泄，也可进一步分解成硫基尿酸分泌到尿液中n n具有保护细胞免受毒素、药物和致突变化学物质损伤作用 2222.GST与与药物耐受性的相关机制物耐受性的相关机制 n nGST活性受一些化学物质的诱导，抗肿瘤药物能诱导 GST活性增高，这与肿瘤细胞获得性耐药性有关n n主要AEDs对组织和血清GST的活性有诱导作用，这可能与AEDs的耐药性产生有关 2323.n nGST耐药性逆转的研究 丁硫氨酸亚矾胺（BSO）可减少GSH水平80%-90%，使之对顺铂的耐药增敏1.6倍 利尿酸可抑制GST-，干扰素可抑制GST-a，使GSH与抗癌药物结合减少，增加肿瘤细胞对烷化剂的敏感性 2424.多多药耐受相关蛋白耐受相关蛋白（Multi-drug resistance associated protein）MRP2525.n n是一种190kd的膜蛋白n n由1531个氨基酸组成，也是一种与ATP结合的磷酸化糖蛋白n n基因定位于人类16号染色体长臂13.1带（16q13.1），与MDR1基因同属ATP结合盒（ABC）基因超家族。2626.n nMRP的生理功能与细胞内解毒、氧化应激反应、炎症和肿瘤耐药有关，在化学致癌物侵袭时，对机体可以起到保护作用 n nGSH水平可调节MRP介导的药物转运，可逆转MRP的耐药 n n化疗药物可诱导细胞MRP的表达2727.MRP与与药物耐受性的相关机制物耐受性的相关机制 MRP类似P-gp的作用机制 1）导致对一些疏水类药物耐药 2）MRP主要位于细胞膜上 3）改变药物在细胞内的分布：核周区和胞浆中多，核内少 4）MRP能增加药物外排作用，“泵”可以逆浓度梯度将疏水化合物排出，2个ATP结合区使MRP靠ATP水解发挥转运活性2828.n nMRP的逆转 药物诱导表达MRP的耐药株在无药环境中培养，药物敏感性可逐渐恢复。MRP家族成员能被特殊的抑制因子抑制，这些因子可作为药物难治性癫痫的辅助治疗。异搏定、环胞菌素A2929.肺耐肺耐药相关蛋白相关蛋白（lung resistance-asociated protein）LRP3030.n nLRP是另一种多药耐药蛋白，也是一种分子量为110kd非糖类的穹隆蛋白n n LRP基因位于16号染色体(p13.1-11.2)，n n由896个氨基酸组成n n不位于细胞膜，而以颗粒的形式分布于细胞浆外部区域。3131.n nLRP可能在保护细胞核免受核毒性物质的损害中起重要作用。n nLRP表达阳性者肿瘤化疗有效率明显低于阴性者，耐药组LRP比非耐药组表达率显著增高，且LRP表达的强度与耐药程度呈正相关，认为LRP表达阳性可能是临床耐药的标志物。3232.n n耐药性产生可能与穹隆介导药物核浆转运有关，使药物从核到胞浆重新分布而产生耐药。n n化疗药物被包裹在隔离囊内而不能发挥作用，最终通过胞吐的方式排到胞外有关。n n故推测LRP与MRP一样具有导致药物积聚下降的作用。3333.拓扑异构拓扑异构酶(topoisomeras)3434.n nDNA拓扑酶广泛存在于生物体细胞核内n n是控制核酸生理功能的关键酶n n能调节核酸空间结构动态变化，在DNA复制、转录以及基因重组的过程中起重要作用3535.n n生物学作用可通过2种方式实现 一是调节控制DNA 的超螺旋状态及打结或解结DNA 的环连体状态，从而间接地影响细胞内核酸代谢过程 二是直接参与DNA 的重组、修复、转录及复制过程，是保持基因构型完整性必不可少的。3636.n n调节DNA 空间结构的拓扑异构酶有2种 型拓扑酶(Topo)使DNA单链断裂并瞬间连接，无需ATP提供能量 型拓扑酶(Topo 1I)可使双链断裂并瞬间连接，需ATP提供能量。二者在维持核酸的正常结构及功能中起重要作用。3737.n nToPo是肿瘤化疗的重要靶点 TopoII是机体重要的核酶，是许多化疗药物特别是ToPo II抑制剂的靶目标 药物作用于ToPoII，改变其功能或活性，使DNA断裂增加而发挥抗癌效应。3838.细胞内Topo水平直接影响Topo抑制剂的抗肿瘤活性，因此高水平的ToPo II表达是抗癌药物细胞毒作用的基础。Topo表达的下调或性质改变都会影响DNA酶易解离复合物的形成，降低化疗药物的敏感性。3939.n n其导致MDR机制有 (1)细胞内TopoII含量下降；(2)TopoII基因突变；(3)TopoII的磷酸化；(4)TopoII亚型的转换。4040.n n沙门氏菌属耐药性机制：拓扑异构酶基因的突变；抗菌药物摄取或累积量降低；可转移遗传元件介导的耐药性机制；质粒介导的喹诺酮类药物耐药性。4141.n n沙门菌染色体含有DNA旋转酶和拓扑异构酶编码基因，其中包含喹诺酮类药物抗性决定区（QRDR）n nDNA旋转酶是喹诺酮类药物作用的首要靶标酶，而其QRDR是喹诺酮类药物作用的主要靶位 n nQRDR突变是沙门菌对喹诺酮类药物产生耐药性的主要机制之一。4242.小小 结 MDR的的产生相关物生相关物质 P-gP、GST-LRP、TopoII4343.P-gPn nP-gP是MDR1基因的蛋白产物，其耐药机制是通过消耗ATP将药物从细胞内泵出到细胞外，从而降低肿瘤细胞内药物的浓度，导致多药耐药。P-gP高表达的肿瘤对长春新碱、长春花碱、阿霉素等高度耐药。4444.GSTn nGST是机体中催化还原型谷胱肽与亲电性物质发生结合的一类酶，是一多基因家族，其中GST-与肿瘤关系最为密切。通过非特异性GST-的结合作用可协助药物通过P-gP形成的药物排流泵，还可通过酶结合方式将抗癌药物及亲脂性化合物从体内排除。GST-阳性表达的肿瘤对顺铂及烷化剂具有耐受性。4545.TopoIIn nTopoII是机体重要的核酶，是许多化疗药物的靶目标，细胞内Topo水平直接影响Topo抑制剂的抗肿瘤活性，Topo表达的下调或性质改变 都会影响DNA酶易解离复合物的形成，降低化疗药物的敏感性。4646.4747.5/26/20245/26/20244848.