高效液相色谱-串联质谱法测...中的残留及膳食摄入风险评估_段云.pdf

研究论文doi:10.16801/j.issn.1008-7303.2022.0146高效液相色谱-串联质谱法测定 13 种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在杧果中的残留及膳食摄入风险评估段云1,关妮*,2,马晨1,陈棠钻1,罗金辉1,魏静3(1.中国热带农业科学院分析测试中心，国家市场监管重点实验室(热带果蔬质量与安全)，农业农村部热作产品质量安全风险评估实验室(海口)，海南省热带果蔬质量安全重点实验室，海口571101；2.广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心，南宁530007；3.海南省食品检验检测中心，海口570314)摘 要：为掌握我国杧果中甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂残留的风险水平，建立了高效液相色谱-串联质谱技术同时测定吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑等 13 种杀菌剂的分析方法，并运用点评估法对儿童和成人的长期及短期膳食暴露风险进行评估。结果表明：13 种杀菌剂在 1100g/L 范围内线性关系良好，决定系数 R20.9994，定量限(LOQ)为 5g/kg；在 5 种不同添加水平下，平均回收率为 76%122%，相对标准偏差(RSD)为 0.7%14%。残留检测结果显示：我国杧果主产区和消费城市 1056 份全果样品中检出率较高的杀菌剂有吡唑醚菌酯(22.6%)、嘧菌酯(18.5%)和苯醚甲环唑(15.5%)。运用杀菌剂 50th和 97.5th百分位点的残留值分别计算对长期摄入风险的贡献率和短期膳食摄入风险。结果表明：杧果中吡唑醚菌酯等 13 种杀菌剂对成人和儿童的长期摄入风险的贡献率分别为 0.01%0.5%和 0.01%0.3%，9 种有急性参考剂量的杀菌剂残留在成人和儿童中短期暴露风险商分别为 0.01%7.2%和 0.02%28.9%，通过杧果摄入 13 种杀菌剂对人体产生的长期和短期膳食摄入风险较小。根据上述杀菌剂在我国杧果上的登记情况、GB27632021食品安全国家标准食品中农药最大残留限量以及膳食评估结果，建议加强对醚菌酯、丙环唑、腈菌唑、氟硅唑、腈苯唑、氟环唑和三唑醇 7 种杧果上未登记农药的监管，修订吡唑醚菌酯及制定肟菌酯等杀菌剂在杧果中最大残留限量(MRL)。关键词:高效液相色谱-串联质谱；甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂；三唑类杀菌剂；杧果；残留；膳食摄入风险评估中图分类号：TQ450.26；S481.1文献标志码：ADietary risk assessment of 13 strobilurin and triazole fungicide residues inmangoes by high performance liquid chromatography-tandemmass spectrometryDUANYun1,GUANNi*,2,MAChen1,CHENTangzuan1,LUOJinhui1,WEIJing3收稿日期：2022-06-01；录用日期：2022-10-10；网络首发日期：2022-12-21.Received:June1,2022;Accepted:October10,2022;Published online:December21,2022.URL:https:/doi.org/10.16801/j.issn.1008-7303.2022.0146http:/ Journal of Pesticide ScienceE-mail:(1.Analysis and Test Centre,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Key Laboratory of Tropical Fruits and Vegetables Qualityand Safety for State Market Regulation,Laboratory of Quality and Safety for Tropical Products(Haikou)of Ministry of Agriculture andRural Affairs,Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables,Haikou 571101,China;2.National Engineering Research Center of Non-food Biorefinery,Guangxi Academy of Sciences,Nanning 530007,China;3.Hainan Institute for Food Control,Haikou 570314,China)Abstract:Thesprayingoffungicidesonmangoesnearharvesttimetoreduceoccurrenceofdiseasescouldresultinthepesticideresiduesinharvestedproducts.ToexplorethepotentialhealthriskforsubgroupsinChina,aresidueanalyticalmethodwasdevelopedbyhighperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry(HPLC-MS/MS)forsimultaneousdeterminationof13strobilurinandtriazolefungicidesinmango.Basedontheresiduedata,thelong-termandshort-termdietaryexposureriskassessmenttoadultsandchildreninChinawasconductedbypointestimatesmethod.Thelinearityof13fungicideswasexcellentintherangeof1-100g/L,withthecoefficientsofdetermination(R2)above0.9994.Thelimitofquantification(LOQ)was5g/kg.Theaveragerecoverieswere76%-122%at5spikedlevels,withtherelativestandarddeviation(RSD)of0.7%-14%.TheresidueresultsofthemangosamplesfromthemainproducingareasandconsumercitiesinChinaindicatedthatthefungicideswithhighdetectionrateswerepyraclostrobin(22.6%),azoxystrobin(18.5%)anddifenoconazole(15.5%).The50thand97.5thpercentileresiduelevelswereusedtocalculatethecontributionrateofthefungicidestothelong-termandshort-termdietaryintakerisks,respectively.Theresultsdemonstratedthatthecontributionratesof13fungicidesinmangotothelong-termdietaryriskofadultsandchildrenwere0.01%-0.5%and0.01%-0.3%,respectively.Fortheshort-termassessment,thedietaryexposurerisksofthe9fungicidesthathaveacutereferencedose(ARfD)wereacceptablewithriskquotients(RQs)of0.02%-28.9%forchildrenand0.01%-7.2%foradults.Fromtheriskassessmentresults,itcouldbeconcludedthatlong-termandshort-termexposureof13fungicidesinmangoeswouldnotcauseahealthconcernforgeneralpopulation.Accordingtotheregistrationstatusofthe13pesticides,theMRLsinnationalstandardsofChina(GB27632021),andtheresultsofdietaryexposureassessmentofthe13fungicides,itisrecommendedtostrengthenthesupervisiononapplicationof7unregisteredpesticidesonmangoes,includingkresoxim-methyl,propiconazole,myclobutanil,flusilazole,fenbuconazole,epoxiconazoleandtriadimenol,andtomodifytheMRLofpyraclostrobinandtosetaMRLforpicoxystrobininmangoes.Keywords:highperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry;strobilurin;triazole;mango;residue;dietaryexposureassessment杧果是我国四大热带水果之一，主要种植于海南、广西、云南、四川、广东、福建和台湾等地区。热带和亚热带湿热气候常导致杧果生产中病虫害频发，杧果炭疽病、细菌性角斑病和露水斑病等主要病害在果期的发生率分别高达 60%以上1-2，其中炭疽病尤为突出。杧果炭疽病是由胶孢炭疽菌 Colletorichum gloesporioidesPenz 侵染引起的真菌病害，主要为害杧果叶片、嫩梢、花和果实，造成生长期叶斑、梢枯、落花和落果，其潜伏性侵染特性也是导致果实贮藏期间腐烂的重要原因3。20192020 年实地调研了解，杧果炭疽病作为潜伏性病害在采前发病率较高，为减少经济损失，生产者通常会使用甲氧基丙烯酸酯、三唑类等杀菌剂进行防治。甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂是防治杧果炭疽病常用化学药剂，具有高效、广谱抗菌、内吸性强和持效期长等特点，是全球销售额(2014 年)居前 2 位的杀菌剂产品类型4。甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂作用机制是通过阻止电子从细胞色素 b 到细胞色素 c1之间的传递，阻碍三磷酸腺苷的产生，抑制线粒体的呼吸而产生抑菌作用5。三唑类杀菌剂是通过三唑环与病原菌中铁卟啉中心铁源176农药学学报Vol.25自配位，阻碍铁卟啉铁氧络合物的形成，影响病菌细胞膜的发育从而导致子囊菌、半知菌、担子菌等真菌异常生长，实现防病治病6-7。高度的化学稳定性和较长的半衰期，导致甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在食品中的质量安全隐患。研究表明，苯醚甲环唑在云南和海南两地杧果中的半衰期达 13.2d 和 10.6d8，戊唑醇在葡萄中的半衰期为 9.9d12.2d9。安徽、江苏、浙江和福建等 4 个省份芹菜和番茄中三唑类杀菌剂苯醚甲环唑的检出率分别为 23.1%和 20.4%，黄瓜中的抑霉唑检出率为 16.3%，其中黄瓜对三唑类杀菌剂累积暴露量贡献最大10。为探明甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在我国鲜食杧果中的残留水平及膳食摄入风险，本研究基于实地调研，以杧果生产上使用的 8 种甲氧基丙烯酸酯类和 5 种三唑类杀菌剂为对象，建立了高效液相色谱-串联质谱分析方法，应用于我国杧果主产区和消费市场 1056 份全果样品的残留分析，并运用点评估法对 13 种杀菌剂开展儿童和成人的长期和短期膳食摄入风险评估，旨在探明我国杧果产品中农药残留的潜在健康危害程度从而有针对性地开展质量安全监管和生产过程风险控制提供重要依据。1 材料与方法 1.1 试验材料1.1.1杧果样品20192020 年，在海南、广西、云南和四川等杧果主产区和消费城市(北京、上海、杭州、南京和西安等)采集杧果主栽品种(台农、贵妃、金煌、桂热 82 号和凯特等)果实，共计 1056 份。样品采集后立即置于聚乙烯封口袋中，24h 内进行全果去核、切块、匀浆，于20冷冻保存，备用。1.1.2药剂及试剂13 种杀菌剂标准品：吡唑醚菌酯、嘧菌酯、醚菌酯、肟菌酯和啶氧菌酯 5 种甲氧基丙烯酸酯杀菌剂，苯醚甲环唑、戊唑醇、丙环唑、腈菌唑、氟硅唑、腈苯唑、氟环唑和三唑醇 8 种三唑类杀菌剂，均为混标乙腈溶液 100g/mL，天津阿尔塔科技有限公司。QuEChERS前处理试剂盒盐包(含 1.5g 乙酸钠和 6.0g硫酸镁),QuEChERSExtractPouch,AOACMethod,美国 Agilent公司；色谱纯甲酸、甲醇和乙腈，美国Fisher 公司；Milli-Q 净化系统经 0.22m 滤膜过滤的纯净水。1.1.3主要仪器设备SCIEX高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪 TripleQuadTM6500 配备电喷雾离子源(ESI)和Analyst1.7 工作站、定量软件SCIEXOS-Q1.4.0.18067 版本，美国 ABSciex 公司；ZorbaxEclipsePlusC18(2.1mm50mm，1.8m)色谱柱，美国 Agilent 公司;TekmarAutoMate-Q40 全自动 QuEChERs 样品前处理平台，美国Tekmar 公司；电子分析天平(0.01g)，梅特勒-托利多国际贸易(上海)有限公司。1.2 分析方法1.2.1样品前处理杧果匀浆样品解冻后，准确称取 10.0g 样品于 50mL 聚丙烯离心管中，依次加入 1 份 QuEChERS 试剂盒盐包(7.5g)和 20.0mL乙腈，置于全自动 QuEChERs 样品前处理平台上，上下振荡 10min 后，于 4000r/min 下离心5min；取 1mL 上清液与 50%甲醇水按体积比1:1 定容，经 0.22m 有机微孔滤膜过滤，待测。1.2.2检测条件色谱条件：AgilentZorbaxEclipsePlusC18色谱柱(2.1mm50mm，1.8m)，流动相为甲醇和 1mmol/L 甲酸水溶液二元梯度洗脱；柱温40；样品室温 25；流速 0.25mL/min；进样量 2L。梯度洗脱程序如表 1 所示质谱条件：正离子电离模式(ESI+)，多反应监测(MRM)模式;离子化(IS)电压 5.5kV；离子源温度550；气帘气(CUR)276kPa；碰撞气4kPa离子源气体 1 和气体 2 压力均为 345kPa；碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)等参数见表 2。1.3 标准溶液配制及标准曲线绘制准确量取 1.0mL标准品溶液，用乙腈稀释，表 1 梯度洗脱程序Table 1 Gradient elution program时间Time/min流速Flowrate/(mL/min)V(1mmol/L甲酸水溶液)V(1mmol/Lformicacidaqueoussolution)V(甲醇)V(methanol)00.25901010.25901030.25307050.25307070.2559590.25595100.259010110.259010No.1段云等:高效液相色谱-串联质谱法测定 13 种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在杧果中的177配制成 13 种农药的混合标准储备液 10g/mL，于18 避光保存。再用乙腈将混合标准储备液稀释，配制成 1、5、10、25、50 和 100ng/mL 的混合标准工作溶液。空白杧果样品按照 1.2.1 节方法进行前处理后作为基质液，加入不同体积的混合标准工作溶液，配制成基质匹配标准工作溶液，以基质标准工作溶液的质量浓度为横坐标，对应化合物定量离子对峰面积为纵坐标绘制标准曲线。1.4 添加回收试验和基质效应1.4.1添加回收试验称取 10.0g 杧果空白样品，分别加入 1、5、10、50 和 100L 质量浓度为 10g/mL 混合标准储备液，按照 1.2.1 节的方法进行前处理，每个浓度平行测定 5 次，计算平均回收率及相对标准偏差(RSD)。1.4.2基质效应杧果中存在有机酸、糖和色素等物质，可能与待测农药产生相互作用，对农药化合物在质谱离子源形成带电离子时产生增强或减弱的基质效应，从而影响定量分析的准确度和重现性。基质效应(Me)按公式(1)计算，通常正值表示基质增强，负值表示基质抑制。当基质效应在20%Me20%时，为较低程度的基质干扰；当50%Me20%或 20%Me50%时，为中等程度的基质干扰；当 Me50%时，为强烈程度的基质干扰11。Me/%=ABB100(1)其中，A 为某农药在基质溶液中的质谱响应值；B 为某农药在纯溶剂中的质谱响应值。1.5 膳食摄入风险评估1.5.1长期摄入风险长期暴露通常是指基于整个生命周期某物质低剂量的暴露，通过计算每日摄入的食物来源中某种物质摄入量，并将实际每日估算摄入量(EDI)与每日允许摄入量(ADI)进行比对，如果大于 100%ADI 则表示存在长期暴露风险，小于 100%ADI 表示长期暴露风险在可接受范围10。长期膳食暴露计算公式(2)和(3)：EDI=CONCiCONSiPFibw(2)RQ/%=EDIADI100(3)式(2)中 EDI 表示食品中某化合物的每日摄入量估计值 mg/kg(bw)；CONCi为第 i 种食品中某化合物的污染值，mg/kg；CONSi为第 i 种食品的平均消费量，g/d；PFi为第 i 种食品的加工因子，bw 为体重，kg，式(3)中 RQ 为长期暴露风险商。1.5.2短期摄入风险短期暴露通常是针对已制定急性参考剂量(ARfD)的化合物，在特定人群中短期内(一餐或 24h 内)的膳食暴露。ARfD 表示短期内通过膳食和饮水摄入的化合物，不会对消费者产生可观察到健康风险的剂量12。自 1997 年JMPR(JointMeetingofPesticideResidues)引入了表 2 多反应监测模式下的质谱参数Table 2 Mass spectrum parameters in MRM mode杀菌剂Fungicide保留时间Retentiontime/min锥孔电压Declutteredpotential/V母离子Precursorion,m/z子离子Production,m/z碰撞能CE/eV吡唑醚菌酯pyraclostrobin12.0751388.2194.0*,163.019,29嘧菌酯azoxystrobin10.4460404.1372.1*,344.022,35醚菌酯kresoxim-methyl10.6964314.0267.1*,282.130,20肟菌酯trifloxystrobin11.440409.1186.1*,206.125,19啶氧菌酯picoxystrobin8.7730368.1145.2*,205.035,30苯醚甲环唑difenoconazole11.99120406.1251.0*,337.037,23戊唑醇tebuconazole9.0961308.070.0*,125.039,41丙环唑propiconazole10.5286342.1159.1*,69.143,33腈菌唑myclobutanil8.6971289.070.0*,125.033,41氟硅唑flusilazole9.5681316.0247.0*,165.025,35腈苯唑fenbuconazole9.9681337.0125.0*,70.037,33氟环唑epoxiconazole18.6090330.1121.1*,141.022,23三唑醇triadimenol8.6156296.170.1,227.2*19,15*为定量离子。*Quantitativeion.178农药学学报Vol.25评估农药残留的短期膳食暴露方法后，对评估的方法学进行了细化，将短期暴露评估分为 4 种情况13，其中鲜食杧果的短期暴露属于情形 2a，即每餐份原料食品单位可食部质量小于大份额食品质量12，也就是每餐份杧果可食部分质量小于杧果大份额消费量的情况。短期膳食暴露按公式(4)和(5)计算。IESTI=UeHRv+(LPUe)HRbw(4)%ARfD=IESTIARfD100(5)式(4)中，IESTI 表示食品中某化合物的短期膳食摄入估计值 mg/kg(bw)；LP(kg)为某食品的大份额消费量，指每日消费量的高(P97.5)百分位数；Ue(kg)是以可食部分计的产品单个平均质量由产品单个质量和可食部分百分比计算得到；HR(mg/kg)为基于规范田间残留试验得到的复合样品可食部分最高残留值或食品中某化合物监测数据的高残留值(97.5th百分位点)；v 为变异因子，表示一批产品中不同个体或同一个体中不同部位的平均残留值与最高残留值之间的差距，一般取 3。式(5)中，%ARfD 表示短期膳食暴露风险商，值越小风险越低，当%ARfD 大于 100%时风险不可接受13。2 结果与分析 2.1 方法有效性评价结果(表 3)显示：吡唑醚菌酯等 13 种杀菌剂在质量浓度 1100g/L 范围内其峰面积与对应化合物的质量浓度间呈现较好线性关系。添加回收试验结果表明：在 1、5、10、50 和 100g/kg 添加水平下，13 种杀菌剂的平均回收率在 76%122%之间，相对标准偏差 0.7%14%(n=5)。该方法的检出限(LOD)为 1g/kg，定量限(LOQ)为 5g/kg，符合农药残留检测要求14。杧果中 13 种杀菌剂的基质效应如表 4 所示：5 种甲氧丙烯酸酯类杀菌剂的 Me在16.6%23.6%，除吡唑醚菌酯在 1g/L 时(Me=23.6%)属于中等程度的基质干扰外，其余 4 种均为较低程度的基质干扰，8 种三唑类杀菌剂的 Me在13.1%17.5%之间，均属于较低程度的基质干扰。研究表明，当基质效应为较低程度时，可省去配制基质标准溶液的步骤，直接使用溶剂标准溶液进行定量15。2.2 杧果中甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂残留分析1056 份杧果样品中 13 种杀菌剂的检出率如图 1所示，其中吡唑醚菌酯(22.6%)和嘧菌酯(18.5%)在甲氧基丙烯酸酯类中检出率较高，苯醚甲环唑(15.5%)和戊唑醇(4.9%)在三唑类中检出率较高。单份样品中的农药多残留情况能反映出生产者在种植过程中的农药使用习惯，也可以评估潜在的毒性累积效应10。杧果全果中两类杀菌剂的多残留情况如图 2 所示，单份样品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂检出 1 种占 26.3%，2 种占 8.2%，3 种及以上占 0.7%，最多检出 4 种，其中共残留比例最高的是吡唑醚菌酯与嘧菌酯组合，其次为吡唑醚菌酯与肟菌酯组合。单份样品中三唑类杀菌剂检出 1 种占 16.9%，2 种占 2.7%，3 种及以上占 0.6%，3 份样品中共检出 4 种，共残留比例最高的是苯醚甲环唑与戊唑醇组合。表 5 为杧果样品中 13 种杀菌剂的残留水平、我国杧果的残留限量(MRL)标准16、超标率和国表 3 13 种杀菌剂的线性方程、决定系数和定量限(线性范围：1100 ng/mL)Table 3 The linear equation,coefficient of determinationand LOQ of 13 fungicides(Linear range:1-100 ng/mL)杀菌剂Fungicide线性方程Linearequation决定系数R2定量限LOQ/(g/kg)吡唑醚菌酯pyraclostrobiny=901673x+13685.50.99955嘧菌酯azoxystrobiny=780992x+63009.50.99975醚菌酯kresoxim-methyly=8364.995x+7097.730.99995肟菌酯trifloxystrobiny=132345x+54552.10.99945啶氧菌酯picoxystrobiny=332220 x+31622.60.99975苯醚甲环唑Difenoconazoley=958975x+29341.10.99985戊唑醇tebuconazoley=321267x+44828.30.99995丙环唑propiconazoley=470545x+28190.30.99995腈菌唑myclobutanily=214045x+34772.50.99995氟硅唑flusilazoley=118437x+28667.10.99975腈苯唑fenbuconazoley=300024x+54329.70.99985氟环唑epoxiconazoley=470299x+75664.30.99975三唑醇triadimenoly=479230 x+19255.30.99985No.1段云等:高效液相色谱-串联质谱法测定 13 种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在杧果中的179表 4 13 种杀菌剂在杧果中的平均添加回收率、相对标准偏差和基质效应(n=5)Table 4 Recovery,RSD and Me of 13 fungicides in mangoes at 5 different spiked levels(n=5)杀菌剂Fungicide平均回收率/相对标准偏差/基质效应Averagerecovery/RSD/Me/%1g/kg5g/kg10g/kg20g/kg50g/kg吡唑醚菌酯pyraclostrobin88/2.5/63.491/2.2/10.485/1.2/5.4114/1.3/4.5100/2.6/8.7嘧菌酯azoxystrobin75/3.9/7.889/2.6/13.785/2.4/16.6109/3.0/11.893/2.8/4.7醚菌酯kresoxim-methyl96/9.2/6.294/5.1/0.197/8.3/0.599/3.9/12.385/3.2/11.8肟菌酯trifloxystrobin82/1.4/12.783/3.8/2.385/1.8/4.095/3.6/2.197/3.4/12.5啶氧菌酯picoxystrobin103/14/10.184/2.2/15.795/10/11.396/4.5/0.595/4.9/47.9苯醚甲环唑difenoconazole145/5.5/10.789/4.8/2.186/2.2/1.5104/3.7/3.5114/1.7/3.9戊唑醇tebuconazole156/1.2/4.2132/2.2/13.1103/8.7/1.0103/2.8/9.1101/2.3/3.0丙环唑propargite95/4.2/2.5115/6.5/7.048/7.3/7.3112/1.9/0.186/3.2/2.0腈菌唑myclobutanil100/3.9/0.499/9.7/4.777/2.5/10.3115/1.9/3.194/3.1/4.9氟硅唑flusilazole100/5.5/9.5102/2.3/575/2.6/2.5113/1.2/2.294/2.1/1.7腈苯唑fenbuconazole101/7.0/7.982/0.7/5.984/2.9/1.5117/1.3/0.4100/1.9/3.5氟环唑epoxiconazole105/4.6/9.098/4.0/7.988/6.8/1.0102/0.8/6.199/2.0/17.5三唑醇triadimenol110/4.3/10.383/1.6/3.486/5.9/1.8114/2.4/4.489/2.4/1.20510152025 检出率 Frequency/%22.618.52.50.80.615.54.91.51.10.50.40.30.1pyraclostrobin 吡唑醚菌酯azoxystrobin 嘧菌酯trifloxystrobin 肟菌酯kresoxim-methyl 醚菌酯picoxystrobin 啶氧菌酯fenbuconazole 腈苯唑difenoconazole 苯醚甲环唑tebuconazole 戊唑醇propiconazole 丙环唑myclobutanil 腈菌唑flusilazole 氟硅唑epoxiconazole 氟环唑triadimenol 三唑醇三唑类杀菌剂 triazole fungicides甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂 strobilurin fungicides图 1 杧果中 13 种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂的检出率(20192020)Fig.1 The detection rate of 13 strobulurin and triazole fungicides in mango samples(2019-2020)64.8%未检出甲氧基丙烯酸酯 undetected for strobulurin26.3%1 种 1 kind8.2%2 种 2 kinds0.7%3 种及以上3 kinds and above(a)(b)79.8%未检出三唑undetected for triazole 16.9%1 种 1 kind2.7%2 种 2 kinds0.6%3 种及以上3 kinds and above图 2 杧果中甲氧基丙烯酸酯类(a)和三唑类(b)杀菌剂多残留情况Fig.2 The percentage of detected strobulurin(a)and trizole(b)fungicides in mangoes180农药学学报Vol.25际食品法典委员会(CAC)17、欧盟18及其他国家的残留限量(美国19、日本20、韩国21)。依据我国 GB27632021食品安全国家标准食品中农药最大残留限量16判定，吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑、戊唑醇、嘧菌酯和啶氧菌酯等 5 种杀菌剂在杧果样品中的超标率分别为 6.9%、2.1%、1.0%、0 和 0，另外 8 种杀菌剂因未制定 MRL 而无法判定。相比较，我国杧果吡唑醚菌酯残留限量较为严格(0.05mg/kg)，CAC 和欧盟已于 2019 年将吡唑醚菌酯制定临时参考限量(0.05mg/kg)，按照既定的程序，重新评估后为 0.6mg/kg，若参考 CAC限量对杧果中吡唑醚菌酯的残留再次判定，其超标率仅为 0.2%。另外，1056 份样品中检出的醚菌酯、氟硅唑和丙环唑 3 种杀菌剂在我国杧果中暂未制定限量，若参考 CAC、欧盟和韩国的限量标准判定，分别有 0.6%(醚菌酯，CAC0.1mg/kg)、0.3%(氟硅唑，欧盟 0.01mg/kg)和 0.2%(丙环唑，韩国 0.3mg/kg)超标。2.3 膳食摄入风险评估杧果中 13 种杀菌剂长期和短期膳食摄入风险评估结果如表 6 所示，5 种甲氧基丙烯酸酯和 8 种三唑类杀菌剂的 ADI 值在 0.010.4mg/kg(bw)21，已制定 ARfD 的 9 种杀菌剂急性参考剂量在 0.020.3mg/kg(bw)。当 13 种杀菌剂残留值低于 LOD时统一赋值 1/2LOD22-23。2.3.1长期膳食摄入风险评估基于点评估方法24。运用 1.5.1 节公式(2)分别将 13 种杀菌剂 50th百分位数的残留值，参照 WHOCiFoCoss(ChronicIndividualFoodConsumptionDatabase-SummaryStatistics)数据取我国不同人群杧果的平均消费量25，加工因子设为 1，成人和儿童体重分别按照 60kg 和 15kg 计，计算杧果中杀菌剂残留的长期摄入风险。值得一提的是，开展长期膳食上风险评估需考虑某农药化合物从所有摄入食品中的来源，而不仅是某一种食品，因此运用杧果中13 种杀菌剂的残留数据代入公式(2)计算，并不能代表杀菌剂残留的长期摄入风险评估结果，仅表示杧果摄入吡唑醚菌酯等 13 种杀菌剂的残留对长期膳食摄入风险商 RQ 的贡献率(RQ%)24。评估结果显示，通过杧果摄入甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量对长期膳食摄入风险商的贡献率在儿童和成人中分别为 0.01%0.1%和 0.01%0.2%，三唑类杀菌剂分别为 0.01%0.3%和 0.1%0.5%。2.3.2短期膳食摄入风险评估运用 1.5.2 节公式(4)，杧果中杀菌剂残留值数据的 97.5th百分位数作为 HR(杧果监测数据量充足)，参考荷兰一般人群(1岁)杧果 LP 膳食数据 0.4320(kg/d)和 Ue值(以可食部分计的产品单个质量)0.2888(kg)26(我国暂无杧果 LP 膳食数据)，成人和儿童体重分别按照 60kg 和 15kg 计，计算杧果中 9 种杀菌剂的短期摄入风险。评估结果显示，杧果中 2 种甲氧基丙烯酸酯杀菌剂残留在儿童和成人中的短期膳表 5 杧果中甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂的残留和超标情况Table 5 The residue level and violation rate of strobilurin and triazole fungicides in mangoes杀菌剂Fungicide残留水平Residuelevel/(mg/kg)我国限量MRLinChina/(mg/kg)超标率Violationrate/%其他国参考限量MRLofothercountries/(mg/kg)吡唑醚菌酯pyraclostrobin0.0050.8640.056.90.6(CAC17)嘧菌酯azoxystrobin0.0050.883104(欧盟EU18)，2(美国America19)，1(日本Japan20)醚菌酯kresoxim-methyl0.0190.182NA*0.1(CAC17)，0.3(日本Japan20)肟菌酯trifloxystrobin0.0110.699NA0.7(日本Japan20)啶氧菌酯picoxystrobin0.0050.4420.500.01(欧盟EU18)苯醚甲环唑difenoconazole0.0050.9420.22.10.1(欧盟EU18)戊唑醇tebuconazole0.0050.6960.051.00.15(美国America19)丙环唑propiconazole0.0050.516NA0.3(韩国Korea21)腈菌唑myclobutanil0.0050.313NA3(美国America19)氟硅唑flusilazole0.0050.488NA0.01(欧盟EU18)腈苯唑fenbuconazole0.0050.016NA0.5(日本Japan20)氟环唑epoxiconazole0.0050.655NA三唑醇triadimenol0.0050.738NA注：*表示目前我国该农药在杧果中未制定 MRL，以 NA 表示；表示无参考 MRL，暂无超标率数据。Note:*NA(notavailable)forMRL;suggestsviolationratecannotbeobtainedduetothelackofMRL.No.1段云等:高效液相色谱-串联质谱法测定 13 种甲氧基丙烯酸酯和三唑类杀菌剂在杧果中的181食摄入风险商(%ARfD)分别为 0.128.9 和 0.027.2，7 种三唑类杀菌剂分别为 0.024.1 和 0.011.0。嘧菌酯、醚菌酯、肟菌酯和氟环唑 4 种杀菌剂属于没有必要制定 ARfD 的化合物，无需计算其短期摄入风险。3 讨论与结论 3.1 13种杀菌剂在杧果上的登记和残留限量制定情况截至 2022 年 7 月，经查询中国农药信息网(http:/ 61个。本文验证分析的 13 种杀菌剂中未登记的