注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠血脂水平影响_郭婉琴.pdf

9第 2 5 卷 第 1 期 2023 年 1 月辽 宁 中 医 药 大 学 学 报JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCMVol.25 No.1 Jan.，2023 药理研究 注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠血脂水平影响郭婉琴，王语晴，任宇婷，刘欣欣，牛雯颖，肖洪彬（黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040）基金项目：国家自然科学基金项目（82074326，82274405）作者简介：郭婉琴（1993-），女，甘肃天水人，硕士在读，研究方向：方剂配伍规律及方剂疗效客观化的研究。通讯作者：牛雯颖（1982-），女，黑龙江哈尔滨人，研究员，博士，研究方向：活血化瘀方药药理学。摘要：目的 探究注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠血脂水平和氧化指标的影响。方法 SPF级健康ICR小鼠70只，适应性喂养7 d后，随机分为空白组15只和高脂组55只，高脂组采用灌胃脂乳剂的方法造模，造模成功后的动物，依据动物体质量随机分为模型组、非诺贝特组（非特组）、注射用红花黄色素高剂量组（红高组）、注射用红花黄色素低剂量组（红低组），每组12只。比较各组小鼠一般状况、进食量、体质量、肝脏湿质量、肝脏指数、血脂指标甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、葡萄糖（Glu）水平和氧化指标总超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）水平情况。结果 在造模期间，高脂组进食量略低于空白组。每周对高脂组和空白组小鼠的进食量进行比较发现，第3周高脂组和空白组比较差异有统计学意义（P0.05）。在进行造模的3周中，高脂组体质量略低于空白组，差异无统计学意义（P0.05）；分组给药之后统计比较，发现模型组和各给药组体质量仍稍低于空白组体质量，差异无统计学意义（P0.05）。在取材之前进行末次称重，取材过程中对每组肝脏进行称重，计算肝脏指数变化情况。与空白组小鼠相比，模型组肝脏湿质量较明显增加，肝脏指数增大，差异有统计学意义（P0.05）。与空白组比较，模型组小鼠血清中TG、CHO、LDL-C含量显著升高（P0.05或P0.05）。与模型组比较，非特组小鼠血清中TG、CHO、LDL-C含量显著降低（P0.05或P0.05）。与模型组比较，红高组、红低组小鼠血清TG含量差异无统计学意义（P0.05），CHO、LDL-C含量均显著降低（P0.05或P0.05）；红高组Glu含量显著降低（P0.05）。与空白组比较，模型组小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px含量显著下降，MDA含量显著升高（P0.05）。与模型组比较，非特组小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px含量显著升高，MDA含量显著降低（P0.05）；红低组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px含量显著升高（P0.05），MDA含量显著降低（P0.05）。结论 注射用红花黄色素能够改善高脂血症模型小鼠的血脂水平，降低血清中CHO、LDL-C、Glu水平，清除自由基，抑制脂质过氧化，对肝脏有一定的保护作用。关键词：高脂血症；非诺贝特；注射用红花黄色素；血脂；氧化中图分类号：R589.2 文献标志码：A 文章编号：1673-842X (2023)01-0009-06Effects of Safflower Yellow for Injection on Blood Lipid Levels in Hyperlipidemia Model MiceGUO Wanqin，WANG Yuqing，REN Yuting，LIU Xinxin，NIU Wenying，XIAO Hongbin（Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin 150040，Heilongjiang，China）Abstract：Objective To investigate the effect of safflower yellow for injection on blood lipid levels and oxidation indexes in hyperlipidemia model mice.Methods Seventy healthy ICR mice of SPF grade were randomly divided into a blank group of 15 mice and a high-fat group of 55 mice after adaptive feeding for 7 days.The high-fat group was used to make the model by intragastric fat emulsion.The animals after successful modeling were randomly divided into a model group，a fenofibrate group，a high-dose group of safflower yellow for injection（red high group），and a low-dose group of safflower yellow for injection（red low group）according to their body mass，with 12 mice in each group.The general condition，food intake，body weight，wet weight of liver，liver index，blood lipid index triglyceride（TG），cholesterol（CHO），high-density lipoprotein（HDL-C），low-density lipoprotein（LDL-C），glucose（Glu）levels and oxidation index total superoxide dismutase（SOD），glutathione peroxidase（GSH-Px），malondialdehyde（MDA）levels of mice in each group were compared.Results During the modeling period，the food intake of the high-fat group was slightly lower than that of the blank group.By comparing the food intake of mice in the high-fat group and the blank group every week，it was found that there was a statistically significant difference between the high-fat group and the blank group in the third week（P0.05）.In the 3 weeks of modeling，the body mass of the high-fat group was slightly lower than that of the blank group，with no significant difference（P0.05）；DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2023.01.00310 辽宁中医药大学学报 25 卷高脂血症是公认的心血管疾病危险因素，会造成严重的心血管疾病，以高脂血症、高血压病、中枢性肥胖为特征的代谢综合征增加了心血管疾病和其他代谢性疾病的病死率和发病率1-2。现代医学认为，高脂血症通常是指血脂水平异常，由多种原因导致的脂质代谢紊乱的一种病理状态，血脂水平的异常，使其在血管壁中不断累积，形成粥样斑块，继而引发冠心病和脑卒中等心脑血管性危重疾病，因此调节血脂是预防早期心脑血管疾病的重要手段3。中医古代文献中并无关于高脂血症的具体病名，但对于“膏”和“脂”的论述与现代医学中血脂的概念较为相似。根据高脂血症的临床表现，通常将其归属为中医“痰浊”“瘀血”“胸痹”“眩晕”“中风”等范畴。血脂异常中西医结合诊疗专家共识4将血脂异常归属于“血浊”。认为痰浊、瘀血是导致高脂血症的重要致病因素。贝特类药物是临床常用的降血脂药物，研究表明贝特类药物对甘油三酯（triglyceride，TG）、胆固醇（cholesterol，CHO）均有明显的影响，但不良反应较严重，且耐受性较差，因此，研发更安全、有效的调血脂药物具有重要的意义。随着对中医药的重视，中药注射剂也得到了快速的发展，中药注射剂是国内独创的，以中医药理论为指导，采用现代科技从中药材中提取有效物质制成的可供注入人体内的制剂。近些年，活血化瘀注射液广泛地应用于抗动脉粥样硬化及高血压病等临床治疗中，不仅可以改善微循环，促进纤维蛋白溶解，降低全血黏滞度，大量文献5-8显示活血化瘀方具有调节血脂的作用。由此可以推断活血化瘀类注射液与高脂血症有着密切的关系；同时由于中药因其多成分、多靶点特性，也为研究其治疗高脂血症可能机制提供了依据。临床上活血化瘀注射液包括丹参注射液、血塞通注射液、丹红注射液等，本研究选用注射用红花黄色素来研究，是因为在研究此类注射液对糖尿病的研究中发现了其具有降脂的作用9。注射用红花黄色素其成分为红花黄色素A，属于黄酮类，有通脉、活血化瘀之效，相关药理研究指出，红花黄色素可抑制血小板黏附，并具有一定的抗炎作用10。大量研究显示红花黄色素具有改善血管内皮细胞功能及通透性、改善血小板功能、抑制过度纤维蛋白原活化、抑制炎症反应和抑制氧化应激等多种药理学功能11-14。目前红花黄色素已广泛用于冠状动脉粥样硬化性心脏病、缺血性脑卒中、血栓栓塞性静脉炎等疾病的治疗。临床实践中也发现，注射用红花黄色素可调节血脂、提高机体抗缺氧能力，在延缓心脑血管疾病的同时改善高脂血症发生和发展15-17。因此，本研究通过给予小鼠灌胃脂乳剂，造成与人类高脂血症相类似的模型；选用非诺贝特作为阳性对照药，与注射用红花黄色素对高脂血症小鼠的血脂影响进行对比研究，以期为拓宽注射用红花黄色素临床应用及高脂血症相关的研究提供一定的实验和理论依据。1材料1.1 实验动物SPF级健康ICR小鼠，雄性，70只，体质量（262）g，由哈尔滨医科大学实验动物中心提供，实验动物合格证号：SCXK（辽）2018-0001，使用许可证书编号：SYXK（黑）2018-007。1.2 实验药品注射用红花黄色素浙江永宁药业股份有After grouping administration，statistical comparison showed that the body mass of the model group and each administration group was still slightly lower than that of the blank group，with no statistically significant difference（P0.05）.The last weighing was carried out before the material was taken，and the liver of each group was weighed during the material taking process to calculate the changes of liver index.Compared with the control group，the wet weight of liver and liver index in the model group increased significantly（P0.05）.Compared with the blank group，the contents of TG，CHO and LDL-C in the serum of the model group mice increased significantly（P0.05 or P0.05）.Compared with the model group，the contents of TG，CHO and LDL-C in serum of fenofibrate group mice decreased significantly（P0.05 or P0.05）.Compared with the model group，there was no significant difference in the serum TG content between the red high group and the red low group（P0.05），the CHO and LDL-C content were significantly reduced（P0.05 or P0.05）；Glu content in red high group decreased significantly（P0.05）.Compared with the blank group，the content of SOD and GSH-Px in the liver tissue of the model group decreased significantly，while the content of MDA increased significantly（P0.05）.Compared with the model group，the contents of SOD and GSH-Px in liver tissue of fenofibrate group mice increased significantly，while the contents of MDA decreased significantly（P0.05）；The content of SOD and GSH-Px in liver tissue of mice in red low group increased significantly（P0.05），while the content of MDA decreased significantly（P0.05）.Conclusion Safflower yellow for injection can improve the blood lipid level of hyperlipidemia model mice，reduce the levels of CHO，LDL-C and Glu in serum，scavenge free radicals，inhibit lipid peroxidation，and have a certain protective effect on the liver.Keywords：hyperlipidemia；fenofibrate；safflower yellow for injection；blood lipids；oxidation11 25 卷 辽宁中医药大学学报 限公司，规格：每瓶50 mg（含羟基红花黄色素A 42.4 mg），国药准字Z20050146；非诺贝特Abbott Laboratpories Limited公 司，规 格：10粒（每 粒 胶囊 含 非 诺 贝 特200 mg），进 口 药 品 注 册 证 号：H20160155；胆固醇（上海蓝季科技发展有限公司，规格：每瓶500 g，产品批号：210626）；胆酸钠（上海蓝季科技发展有限公司，规格：每瓶500 g，产品批号：20201018）；丙硫氧嘧啶（Meilune生物技术有限公司，规格：25 g，产品批号：MO316B）；吐温-80（天津市风船化学试剂有限公司，规格：500 mL，产品批号：20200420）。1.3 主要仪器HYQ-2121涡 旋 混 匀 器（SilentShake）；Tecan infinite M200 Pro多功能酶标仪（瑞士Tecan公司）；722型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；ISO 90C1电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；78HW-1型恒温磁力搅拌器（金坛市医疗仪器厂）；日立7600-020型全自动生化分析仪（日本株式会社日立高新技术）；HWS-150BX恒温恒湿箱（天津泰斯特仪器有限公司）；MIKRO 220R低温离心机（德国Hettich公司）等。1.4 主要试剂BCA蛋 白 浓 度 测 定 试 剂 盒（生 产 批 号：120720210702）购 自 碧 云 天 生 物 技 术 有 限 公司；CHO试 剂 盒（生 产 编 号：192061）、TG试 剂 盒（生 产 编 号：198021）、低 密 度 脂 蛋 白（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）试剂盒（生产编号：201441）、高 密 度 脂 蛋 白（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）试剂盒（生产编号：201461）、葡萄糖（glucose，Glu）试剂盒（生产编号：213761）均购自中生北控生物科技股份有限公司；谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）试剂盒（生产编号：20210707）、总超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试 剂 盒（生 产 编 号：20210630）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）测定试剂盒（生产编号：20210707）均由南京建成生物工程研究所生产。2方法2.1 脂乳剂的制备参照杨茂波18实验配方加以改进，脂乳剂制作方法如下：在1号烧杯中加入取少许蒸馏水，加入2 g胆酸钠、0.2 g丙硫氧嘧啶和1 mL的吐温-80进行混匀；在2号烧杯中取15 g猪油加热融化，用研钵将6 g胆固醇研磨之后加入到猪油中，再加入3 mL的吐温-80进行溶解，待溶解充分之后，将2号烧杯中的溶解物倒入到1号烧杯中，最后加蒸馏水定容到100 mL，并放于恒温磁悬搅拌器上一直搅拌，磁力搅拌器温度设置为40 左右。2.2 实验用药量及制备参考 药理实验方法学，按照人和小鼠间体表面积折算的等效剂量比值进行换算，小鼠每日最大给药体积为20 mL/kg，注射用红花黄色素以人的临床常用剂量转换为小鼠给药的低剂量（13 mg/kg，0.9%氯化钠溶液为溶剂），低剂量浓度的2倍作为小鼠的高剂量（26 mg/kg，0.9%氯化钠溶液为溶剂），用0.9%氯化钠溶液每天配制药物；非诺贝特以人的临床常用剂量转换为小鼠给药剂量（26 mg/kg，0.9%氯化钠溶液为溶剂）。2.3 动物造模实验小鼠共70只，适应性喂养7 d后，随机分为空白组15只和高脂组55只，所有小鼠喂食基础饲料，正常饮水，自由进食。高脂组灌胃脂乳剂3周后，随机选取高脂组小鼠7只和空白组小鼠3只，用戊巴比妥钠腹腔注射进行麻醉，眼底静脉丛取血，检测动物血脂水平，依据 药理实验方法学 和前期实验确定成模标准为检测动物TG、CHO、LDL-C含量，三者均显著升高视为造模成功，确认高脂血症小鼠模型造模成功后，用于本实验研究。2.4 动物分组与给药空白组动物，作为本研究正常空白对照组。造模成功后的动物，依据动物体质量随机分为模型组、非诺贝特组（非特组）、注射用红花黄色素高剂量组（红高组）、注射用红花黄色素低剂量组（红低组），每组12只（n=12）。造模和给药期间各组均采用普通饲料喂养，并且在整个实验期间，空白组每天上午灌胃同体积的生理盐水，其余组均灌胃同体积的脂乳剂。实验分组后，空白组、模型组和各给药组均按20 mL/kg体质量给予实验干预。空白组、模型组每天下午同时进行腹腔注射与灌胃同体积的生理盐水；非诺贝特组按26 mg/kg给药剂量进行灌胃并同时腹腔注射同体积的生理盐水；注射用红花黄色素高、低剂量组分别按26 mg/kg、13 mg/kg给药剂量进行腹腔注射并同时灌胃同体积的生理盐水。连续给药21 d，每日1次。2.5 取材和指标测定整个实验期间，每日对小鼠精神状况、活动情况、毛色、进食、饮水量等进行观察。测量每日进食量、每周小鼠体质量。连续给药21 d后，小鼠禁食不禁水12 h，测量空腹体质量，末次给药2 h后，用戊巴比妥钠腹腔注射进行麻醉，眼底静脉丛取血，装入EP管中，室温静置2 h后，3000 r/min离心10 min，分离血清备用。小鼠颈椎脱臼处死后，取出肝脏称重，随后切取同一部位的部分肝脏于-80 冰箱保存备用；依据计算公式，肝脏指数=肝脏湿质量（g）/体质量（g）100%，计算肝脏指数变化情况。2.6 相关血液指标测定取材后分离的血清样本，一部分保存至-80 备用，另一部分应用全自动生化仪检测TG、CHO、LDL-C、HDL-C、Glu等指标水平；用BCA蛋白检测试剂盒测定血清蛋白质浓度，按试剂盒说明书具体操作。2.7 肝组织氧化应激指标测定从-80 冰箱取出冻存的肝脏组织，在同一部位切取肝脏约200 mg，剪碎，按19比例加入预冷的生理盐水。放入匀浆机研磨2 min，以上所有操作均在冰上进行。在4 离心机3000 r/min，离心10 min后取上清液，应用试剂盒检测肝组织中的SOD、MDA、GSH-Px等指标水平；用BCA蛋白检测试剂盒测定肝组织蛋白质浓度，按试剂盒说明书具体操作。2.8 统计学方法应用Excel 2019建立各测试指标的信息采集，12 辽宁中医药大学学报 25 卷采用SPSS Statistics 22.0统计分析软件对数据进行统计分析，选用One-Way ANOVA和进行统计分析，数据用xs表示。以P0.05为差异有统计学意义。3结果3.1 各组小鼠存活率比较在给药3周后，取材前1 d统计鼠的存活率，空白组小鼠共12只，在灌胃过程中死亡2只，剩余10只；造模小鼠共48只，模型灌胃过程中死亡8只，存活39只，模型存活率为81.3%。3.2 各组小鼠一般状况比较空白组小鼠毛发光泽，活动灵敏，饮水量和饮食量正常，二便正常，体质量呈较规律地增长，除由于灌胃手法不当引起的死亡，无其他死亡情况；而高脂饮食组小鼠随实验周期延长，活动量明显减少，反应迟钝，大便稍见稀软，其他状态正常，除由于灌胃手法不当引起的死亡，无其他死亡；药物干预后小鼠活动量逐渐增加，各给药组小鼠进食饮水情况、排便情况以及生长情况均正常。3.3 各组小鼠进食量变化情况比较在整个造模和给药期间测量每天的进食量，比较各组进食量的变化情况。在造模期间，高脂组进食量略低于空白组。见图1。每周对高脂组和空白组小鼠的进食量进行比较发现，第3周高脂组和空白组比较差异有统计学意义（P0.05）。见表1。图1 空白组和高脂组进食量变化趋势3.4 各组小鼠体质量、肝脏湿质量、肝脏指数变化情况比较在整个实验过程中，每周测量小鼠体质量并进行记录，统计发现在进行造模的3周中，高脂组体质量略低于空白组，差异无统计学意义（P0.05）；分组给药之后统计比较，发现模型组和各给药组体质量仍稍低于空白组体质量，差异无统计学意义（P0.05）。在取材之前进行末次称重，取材过程中对每组肝脏进行称重，计算肝脏指数变化情况。与空白组小鼠相比，模型组肝脏湿质量明显增加，肝脏指数增大，差异有统计学意义（P0.05）。见表2。3.5 各组小鼠血清血脂指标水平比较与空白组比较，模型组小鼠血清中TG、CHO和LDL-C含 量 显 著 升 高（P0.05或P0.05）。与模型组比较，非特组小鼠血清中TG、CHO、LDL-C含 量 显 著 降 低（P0.05或P0.05）。与模型组比较，红高组、红低组小鼠血清TG含量差异无统计学意义（P0.05），CHO、LDL-C含量均显著降低（P0.05或P0.05）；红高组Glu含量显著降低（P0.05）。见表3。表2 各组小鼠体质量、肝脏湿质量、肝脏指数变化情况比较（xs）组别n体质量/g肝脏湿质量/g肝脏指数/%空白组1036.554.611.520.214.180.52模型组1034.822.191.860.18#5.350.38#非特组 834.362.691.860.175.460.86红高组1135.242.641.820.345.150.68红低组1035.332.251.850.105.260.37注：非特组：非诺贝特组；红高组：注射用红花黄色素高剂量组；红低组：注射用红花黄色素低剂量组。#与空白组相比，P0.01。表1 高脂组和空白组小鼠进食量比较（xs）单位：g组别n7 d14 d21 d28 d35 d42 d高脂组485.570.944.890.904.670.56#4.620.914.170.504.570.66空白组126.030.535.740.875.310.505.430.984.450.824.760.77注：#与空白组相比，P0.05。表3 各组小鼠血清血脂指标水平比较（xs）单位：mmol/L组别nTGCHOHDL-CLDL-CGlu空白组101.180.312.830.667.031.620.430.208.682.65模型组101.930.43#3.390.71#5.991.200.620.20#10.092.02非特组 81.570.42*2.510.24*6.520.630.410.17*9.811.51红高组111.860.692.670.38*6.490.830.470.16*8.900.56*红低组102.000.452.740.32*6.170.670.490.11*9.891.09注：非特组：非诺贝特组；红高组：注射用红花黄色素高剂量组；红低组：注射用红花黄色素低剂量组。#与空白组相比，P0.05；#与空白组相比，P0.01；*与模型组相比，P0.05；*与模型组相比，P0.01。3.6 各组小鼠肝脏组织中氧化指标水平比较与空白组比较，模型组小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px含 量 显 著 下 降，MDA含 量 显 著 升 高（P0.05）。与模型组比较，非特组小鼠肝脏组织中SOD和GSH-Px含量显著升高，MDA含量显著降低（P0.05）；红低组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px含量显著升高（P0.05），MDA含量显著降低（P0.05）。见表4。表4 各组小鼠肝脏组织中氧化指标水平比较（xs）组别nSOD/（U/mgprot）GSH-Px/（U/mgprot）MDA/（nmol/mgprot）空白组1050.748.98432.6241.191.650.20模型组1044.606.10#390.3044.94#1.900.29#非特组851.428.89*430.5942.49*1.660.27*红高组1147.399.37419.0143.101.790.23红低组1053.649.59*424.9939.63*1.670.30*注：非特组：非诺贝特组；红高组：注射用红花黄色素高剂量组；红低组：注射用红花黄色素低剂量组。#与空白组相比，P0.05；*与模型组相比，P0.05。13 25 卷 辽宁中医药大学学报 4讨论4.1 脂乳剂诱导的高脂血症动物模型的效果评价建立准确可靠的高脂血症模型，是实验成功的重要基础。常用的方法有高脂饲料喂养法和脂乳剂灌胃法，高脂血症动物模型制备研究中发现直接给予动物灌胃脂肪乳剂是一种简便、周期短、比较符合人体产生高脂血症过程的制备方法19，具有定量、造模效果肯定的特点。该方法最初主要用于家兔和大鼠，目前也应用于小鼠，并且由于饲养方便、成本低廉、遗传背景明确，实验操作简便、易于造模、模型稳定性好、易于控制各项实验条件、取材方便、可满足大量指标检测等优点，被广泛用于降脂药物的研究开发。同时研究发现在脂乳剂配置中加入胆酸钠、丙硫氧嘧啶，可抑制甲状腺激素的分泌，从而抑制脂肪的代谢20。在进行造模的3周后，随机抽取不同组小鼠检测发现，空白组和高脂组在脂质水平方面存在明显的不同，且差异具有统计学意义，表明脂乳剂诱导的高脂血症模型建立成功。在给药3周后取材，对肝脏湿质量、血清血脂水平分别进行检测发现，空白组、模型组和给药组之间存在差异，表明脂乳剂诱导的高脂血症小鼠在取材时，高脂模型成功且一直维持在高脂状态且血脂未自行下降，说明血脂的下降与药物有关。4.2 对进食量的影响从造模开始到实验结束，空白组同高脂组比较，模型组整体进食量略低于空白组，但整体无明显差异，因此灌胃脂乳剂会造成小鼠基础饲料的进食量减少，其减少的原因可能与脂乳剂配方中的猪油、丙硫氧嘧啶有关。丙硫氧嘧啶可抑制甲状腺激素的分泌，易出现食欲减退、体质量下降的表现。猪油性凉味甘，具有滋补之效。医宗金鉴 载：“过食腻冷并肥甘，湿热生蛔腹内缠易生脾疳，饮食减少”，外台秘要 中也提到：“若食犬、猪、羊肉，并肠血及肥鱼久脂腻，必大下痢则不能消化，停积在于肠胃”。因此在造模过程中出现进食量降低、大便轻微不成形可能与猪油有密切关系。4.3 对体质量及肝脏湿质量的影响实验结果显示，各组之间体质量比较差异无统计学意义，空白组体质量略高于高脂组，高脂组体质量较轻的原因可能与脂乳剂对食欲和大便的影响有关。肝组织作为脂质代谢过程中的重要器官，体内过量脂肪、能量等堆积都易加重肝脏工作负荷，引起肝脏指数的异常。研究发现，模型组肝脏指数显著增大，模型组肝脏指数的增加与高脂血症的形成有关，与相关文献显示一致21-23；其原因可能与脂乳剂中的丙硫氧嘧啶有关，丙硫氧嘧啶作为抗甲状腺药物，特异质性肝损伤是其典型的临床表现，因此出现肝脏指数增大的原因；红高组、红低组肝脏指数有下降的趋势，对高脂血症造成的肝脏指数增大有一定的缓解，说明注射用红花黄色素具有一定保护肝脏的作用。4.4 对血脂水平和氧化指标的影响血脂是血浆中的中性脂肪（胆固醇和甘油三酯）和磷脂等的总称，其中胆固醇和甘油三酯水平与临床疾病密切相关。CHO是血浆中胆固醇总含量，它的升高可能直接导致动脉粥样硬化。血浆TG有两个来源：外源性脂肪来源于膳食脂质，以乳糜微粒方式携带；内源性脂肪来自肝脏脂肪合成，并携带在极低密度脂蛋白（VLDL）颗粒中。血液中的脂类必须与载脂蛋白结合形成脂蛋白后才能被运输到组织中进行代谢。血浆中的脂蛋白主要分为乳糜微粒（CM）、中间密度脂蛋白（IDL）、LDL-C和HDL-C。其中当低密度脂蛋白，尤其是氧化修饰的低密度脂蛋白（OX-LDL）过量时，它携带的胆固醇便积存在动脉壁上，长时间容易引起动脉硬化。因此，降低LDL-C是预防心血管疾病的基础。本实验血脂水平结果可知，模型组小鼠血浆TG、CHO、LDL-C水平较空白组显著上升，证明小鼠高脂血症模型造模成功；非诺贝特对TG、CHO、LDL-C均有降低作用，实验结果与文献阐述一致24。注射用红花黄色素使CHO、LDL-C、Glu水平显著降低，可改善血脂水平。何其胜等25研究发现，红花黄色素可有效调节糖代谢及C肽水平，改善凝血功能及血液流变学。因此，注射用红花黄色素是一味较安全、理想且可降低血糖的活血化瘀药物。高脂血症与氧化应激密切相关，当机体脂质代谢紊乱时使得体内活性氧的产生和清除失衡，产生过多的氧自由基。SOD和GSH-Px属于酶抗氧化系统，其含量降低表明机体受到氧化应激反应。MDA属于非酶系统产生氧自由基，MDA过多会引发脂质过氧化作用，因此可以反映机体内脂质过氧化的程度，从而间接反映机体受自由基攻击的严重程度。本实验结果表明，模型组SOD、GSH-Px含量明显降低，MDA含量明显升高，而给药组SOD、GSH-Px含量较模型对照组增加，MDA含量有所降低，表明注射用红花黄色素具有一定的抗氧化作用。红花黄色素可以清除羟自由基、抑制脂质过氧化26。张欢等27研究证实红花黄色素中抗氧化的两个主要有效成分是红花黄色素B（SYB）和羟基红花黄色素A（HSYA），它们可有效清除自由基从而达到抗氧化作用。5结论因此研究发现，注射用红花黄色素对脂乳剂诱导的高脂血症小鼠具有降血脂作用，可降低血清中CHO、LDL-C、Glu水平，能够减轻氧化应激反应及脂质过氧化损伤，对肝脏有一定的保护作用，为临床应用活血化瘀药改善心血管病合并高脂血症的适应证奠定了科学依据，并且为治疗高脂血症药物的剂型研究提供一定的实验和理论依据。参考文献 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230012）基金项目：国家自然科学基金项目（81703826）；安徽省自然科学基金项目（1808085MH301）作者简介：程金妞（1997-），女，河南信阳人，硕士在读，研究方向：中西医结合基础。通讯作者：李璐（1979-），女，安徽马鞍山人，教授，博士，研究方向：中西医结合基础。E-mail：。摘要：目的 探讨大黄（Rhubarb）对二乙基亚硝胺致大鼠肝癌癌前损伤的作用及机制。方法 将SD大鼠分为正常对照组、大黄处理组、DEN处理组和大黄+DEN处理组4组。采用酶活性检测谷丙转氨酶（SGPT）活性、HE染色观察各组肝组织病理变化、Western blot法检测细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases，Erk1/2）、细胞外调节蛋白激酶磷酸化（p-Erk1/2）、缺氧诱导因子1（hypoxia inducible factor-1，HIF-1）、丙酮酸激酶同工酶M2型（pyruvate kinase M2，PKM2）等蛋白的表达。结果 与正常对照组、大黄处理组、DEN处理组相比，大黄+DEN组血清SGPT活性显著升高。病理切片HE染色显示，正常对照组大鼠和大黄处理组大鼠的肝细胞形态正常。DEN处理组