犊牛大肠杆菌病的诊断与防治_冯明祥.pdf

今日畜牧兽医103犊牛大肠杆菌病的诊断与防治冯明祥，徐 雨，韦登雄，图 雅，陈 颖（贵州省关岭县动物疫病预防与控制中心 561300）摘要：犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的消化道疾病，主要发生于初生犊牛中，临床主要以消瘦、腹泻、脱水为主要特征，严重者甚至死亡，对养牛业的发展造成经济损失。本病通常使用抗生素药物进行治疗，然而，近年来，随着抗生素广泛使用，细菌耐药性越来越强，常用药物对本病治疗效果不好甚至无效，本文通过对大肠杆菌病临床症状、病例解剖、实验室诊断和防治措施等几个方面的阐述，旨在为犊牛大肠杆菌病防治提供参考思路。关键词：犊牛大肠杆菌病；预防；治疗犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的消化道疾病，感染犊牛消瘦、腹泻、脱水甚至死亡，部分犊牛治疗不及时，恢复后生长发育迟缓，给养殖业造成严重的经济损失1。大肠杆菌分为非致病性大肠杆菌和致病性大肠杆菌，致病性大肠杆菌常在饲养环境不良、过度拥挤、营养不足等情况下引起犊牛发病，并常与其他致病菌混合感染，导致犊牛病情复杂，治疗不及时，甚至导致死亡。该病目前在全国各地均有发生，通常使用抗菌药物进行治疗，这也导致细菌耐药性不断加强，一方面是大肠杆菌自身的改变，如产生灭活或钝化抗菌药物的酶、抗菌药物靶基因改变、细胞浆膜的通透性改变以及代谢途径改变等；一方面是药物的选择压力，如联合使用药物、长期使用同类药物、低剂量使用药物等，不合理的使用药物导致治疗效果越来越差2-3。大肠杆菌病属于人畜共患病，病菌可以通过动物传染动物，动物传染人，人传染人，最终导致人类感染，其耐药质粒可以遗传，当人感染了耐药性高的细菌时，治疗费用过高，甚至无药可医4。因此，本文通过对大肠杆菌的流行特点、临床特点、诊断、预防和治疗等进行讨论，以期为制定科学合理的防治措施奠定基础。1 流行特点犊牛大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的消化道疾病，患病犊牛的主要临床表现为消瘦、腹泻和脱水。该病在初生犊牛中发病率较高，特别是 10 日龄内的犊牛，其余日龄的牛感染但不发病5。该病全年均可发生，但以冬春季发病率较高。全国各地均有发生，呈地方性流行。犊牛大肠杆菌病的传染源主要是患病犊牛以及带菌犊牛，主要通过消化道感染患病，也能够通过产道和脐带感染患病。2 临床症状根据临床症状将其分为败血症型、肠毒血症型和肠炎型三种6。2.1 败血症型多发于 2 3d 龄犊牛，精神萎靡、被毛凌乱、体温升高至 40以上，食欲下降甚至废绝，淡黄色水样腹泻，通常发病后 1d 内急性死亡，个别病犊还未出现临床症状就突然死亡，死亡率 50%80%。2.2 肠毒血症型多发于 1 周龄犊牛，此发病率和死亡率较高，达 70%100%，常无任何症状突然死亡。部分病程稍长的，有典型的中毒性神经症状，发病初期兴奋，后期沉郁，昏迷直至死亡，常有白色带气泡的腹泻。2.3 肠炎型又叫犊牛白痢，多发于 1 2 周龄犊牛，患病初期犊牛体温上升至 40以上，数小时后开始腹泻，初期粪便呈淡黄色、粥样，随病程发展，粪便颜色变为灰白色，水样，有时可见未消化的凝乳块、凝血块及泡沫，有酸败气味。发病末期，犊牛会出现肛门失禁，可因脱水或酸中毒死亡。如果及时治疗，通常能够治愈，但是康复后的犊牛生长发育迟缓，常继发脐炎、关节炎、肺炎的炎症。3 病理解剖败血症型、肠毒血症型病死的犊牛，通常剖检无明显的病理变化。肠炎型病死的犊牛胃黏膜充血、出血；小肠黏膜充血、出血，部分黏膜上皮脱落；肠系膜淋巴结肿大；心脏内膜出血；肝脏和肾脏苍白，可见出血点。4 实验室诊断采集病死犊牛的内脏、血液和粪便等，其中对败血型和肠毒血型的采集内脏和血液，无菌划线与麦康凯培养基和伊红美蓝培养基，大肠杆菌麦康凯培养基中生长为圆形、表面光滑、粉红色，在伊红美蓝琼脂培养基中菌落为圆形、表明光滑带有金属光泽、深紫黑色，对符合分离特征的进行革兰氏染色镜检，显微镜下观察呈红色、短杆状，为革兰氏阴性菌；对符合染色特征的分离菌进行生化鉴定，大肠杆菌在靛基质、甲基红、动力、产气、山梨醇等实验中为阳性，在 VP、硫化氢、苯丙氨酸、枸橼酸盐、尿素等实验中为阴性，进一步确诊还可以使用聚合酶链式反应技术、酶免疫分析技术、免疫磁珠分离技术和血清学诊断技术等。在确定分离出的大肠杆菌后，还需要进一步进行动物致病性实验，分析分离株的致病力，还可以进行血清型鉴定，确定分离株血清型，以及耐药性实验，分析分离株耐药情况，为后续用药进行指导。5 防治措施5.1 预防措施5.1.1加强饲养管理基金项目：安顺市科技计划项目贵州关岭犊牛大肠杆菌和沙门氏菌流行病学调查及耐药性分析，安市科农 202005 号作者简介：冯明祥（1976-），男，本科，副高级兽医师，主要研究方向为动物疫病预防与控制*通讯作者：徐雨（1989-），女，硕士研究生，兽医师，主要研究方向为动物疫病预防与控制104Clinical veterinary online临床兽医管理不当导致犊牛腹泻的外在原因，如环境脏乱、圈舍阴冷潮湿、舍内过热或过冷、营养不足等都会引起犊牛腹泻，因此，加强饲养管理，保持圈舍干燥卫生、保温通风、合理饲养密度等都可以减低犊牛发病率。第一，妊娠母牛的饲养管理。逐渐增加精料，增强妊娠母牛的体质，保证每日定时运动，防止便秘，并根据不同孕期添加适当的蛋白质和电解多维等。分娩前一周消毒擦干后转入产房，保持产房干燥通风，每日更换垫料。第二，产后母牛的饲养管理。及时处理胎衣，促进排恶露，对阴道周围每天定时温水洗净消毒，定期清理牛舍内的粪污，保持干燥卫生，同时控制室温。产后以饲喂干草或青草为主，少喂精料，饮水使用温水。每日温水清洗消毒乳房一次，同时定时按摩挤压。产后一周内的母牛，如无其他问题，转出产房。第三，新生犊牛的饲养管理。犊牛出生后，应立即清除口鼻中的污物，剪断脐带，长度在 10 12cm，用碘酊消毒处理伤口，再包上纱布，同时尽快擦干身体。新生犊牛消化道系统如胃肠道黏膜尚未发育完全，对疾病的抵抗能力弱，而牛初乳可以有效保护胃肠黏膜，对犊牛抵抗疾病有很大作用，在犊牛出生后尽快饲喂初乳，获得被动抗体。后期保持环境卫生干燥，避免突然刺激犊牛，减少应激，可以降低疾病的发生。5.1.2清洗消毒大肠杆菌对外界的抵抗力不强，通常能在室温下存活数周，在土壤和水中能存活 120d，而一般 5030min 或者60 15min 即可被灭活，大部分的消毒药物也可以将其快速杀死，但是当其在黏液和粪便中，消毒药物的效果会减弱7，因此，在消毒之前，日常清洗至关重要。产房需要提前准备，先用消毒液喷湿地面后，再清扫场地，铲除污物，确保不留死角，清扫完成后，关闭好圈舍门窗，用消毒液对圈舍地面、四周墙壁、门窗、栏柱等进行喷洒消毒，饲槽、饮水槽用消毒液洗刷，待2h后打开门窗通风，用清水冲洗，干燥后备用。在妊娠母牛分娩前后对母牛乳房、外阴、肛门和后驱用温热水清洗消毒，接生相关工作人员做好接产相关器具和自身的消毒，全程进行无菌操作，避免脐带感染，后续做好日常清洗消毒工作。圈舍消毒可选用氢氧化钠、戊二醛类、氯制剂类等；器具消毒可选用季铵盐类、复方含碘类（碘、磷酸、硫酸复合物）、过硫酸氢钾类；皮肤消毒可选用含碘类、来苏儿、高锰酸钾等。5.1.3疫苗免疫对于常有犊牛大肠杆菌病发病的牛场，推荐接种大肠杆菌疫苗，目前，已经研究出 O78、O26 和 O15 三价苗、O2、O86、O101 三价苗、K99-F41 二价灭活苗以及亚单位疫苗和基因疫苗等8-11，这些疫苗通常在产前 1545d 注射，因此，注射时要注意动作迅速轻柔，避免母牛受惊，同时，大肠杆菌的血清型多达几百种，并存在交叉性，因此，不同地区、不同场流行的血清型差异很大，当市场上的疫苗不能满足养殖场防疫需求的时候，可以考虑制备该场分离株的灭活疫苗。5.2 治疗措施5.2.1抗菌消炎：对刚养殖的发病牛场主要采用常用抗生素药物进行治疗，如链霉素、庆大霉素、氧氟沙星等，应严格按照说明书进行使用，不要过量或者少量，精准用药，尽量避免联合使用抗生素。对于老场或是耐药性严重的养殖场不要盲目用药，因立刻采样送实验室检测，根据药敏实验针对性用药，避免耐药性的进一步加重。对于抗菌药物的使用，严禁使用禁止药物和假冒伪劣的药物，根据抗菌药物分级分类使用，从低到高，从窄到广，谨慎联合使用抗菌药物。可选用高效、休药期短和低残留的品种以及中药、微生态制剂等绿色兽药。5.2.2补液：腹泻导致大量水分流失，可根据脱水量进行补水。针对脱水不严重的，犊牛仍具有食欲能够自己吮吸的情况，可以服补充温热的糖盐水。对脱水严重的，犊牛不能吮吸的情况，可以静脉注射 5%葡萄糖生理盐水。一旦犊牛出现酸中毒症状，缓慢静脉注射 5%的碳酸氢钠。5.2.3调节肠胃机能：可使用乳酸和鱼石脂，用温热水混匀后灌服，连续使用 3 次。也可以口服吸附剂，保护胃肠黏膜，如硝酸铋、活性炭等，避免犊牛吸收大量的毒素。5.2.4调节肠道的微生态平衡：口服生态制剂，补充益生菌群，如促菌生、乳酶生或者其他乳杆菌制剂，让肠道的菌群尽快恢复到正常微生态平衡的状态。6 讨论犊牛大肠杆菌病在牛场养殖中时有发生，败血症型和肠毒血症型通突然发病，还未进行治疗就已死亡，死亡率高，肠炎型通常使用敏感抗生素药物治疗即可控制痊愈。然而，不规范的使用药物，导致大肠杆菌的耐药性不断增强。目前，大多数规模牛场主、散养户还没意识到细菌耐药性对养殖场的危害，而越来越多的文献报道，大肠杆菌多重耐药性的普遍性，韩和祥在四川部分规模化肉牛场中分离的 50 株致病性大肠杆菌进行耐药性实验，结果表明对强力霉素、多粘菌素、庆大霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氨苄西林、阿莫西林和青霉素的耐药率分别为 72%、78%、78%、84%、92%、94%和 96%，并且有多重耐药现象12。肖跃强等在黄河三角洲部分地区肉牛场中分离出33 株大肠杆菌，对强力霉素、阿莫西林、红霉素、磺胺甲基唑84.8%、81.8%、75.8%和 81.85%，也有多重耐药现象13。有的病例甚至出现无药可以的状态，王海瑞对分离菌进行药敏实验，结果表明部分分离株对使用药物全部耐药14。因此，作为基层兽医部门必须提高对细菌耐药性的警惕，引导和培训规模养殖场主和散养户对细菌耐药性的防范意识，根据当地流行情况结合各场自身条件制定合理长期可行的用药制度，逐步降低细菌耐药性，减少耐药性对养殖业造成的危害，为百姓带来更大的经济效益。大肠杆菌的耐药性，不单单影响养殖业的发展，同时对食品安全和公共卫生安全产生重大隐患，耐药菌株随着粪便、尿液等排出体外，进入外界环境中，对环境和人类造成严重危害，世界各国每年都有人通过不同途径感染致病性大肠杆菌，如饮用污染的食物等，最终导致发病或死亡的报道15。而且，大肠杆菌病是人畜共患病，致病菌株可以在人和动物，动物和动物之间传播，耐药基因可以遗传，可以不断转移，耐药基因的传播范围不断扩大，最直接反应在人类医疗上，新药物的研发速（后转第 107 页）今日畜牧兽医107吸极度困难的患病鸡应当先将喉部的栓塞物去除，确保鸡只呼吸舒畅，而后口服氯化铵等能够对痰液进行稀释的药物，帮助分泌物通过咳嗽或甩头的方式顺利的排出体外，避免在喉头聚集，再次形成栓塞物。在确诊后应当立刻将患病鸡隔离后治疗，病死鸡只及其污染物应当进行无害化处理，对圈舍和周围环境也要彻底消毒，杜绝疾病的进一步蔓延。在预防方面，较好的方案是进行免疫接种，在雏鸡 4050d龄时进行滴鼻点眼免疫，免疫前，需要将疫苗稀释，并加入青链霉素抗菌，间隔 20d 后进行二次免疫，再间隔 20d 进行第三次免疫，通常情况下，三次免疫后，鸡只体内的抗体含量能够长时间维持在较高水平，也可通过强毒株擦肛免疫的方法对本病进行预防。另外，各个养殖场应当尽可能的坚持自繁自养，避免从场外引入鸡只，如果必须引入，应当进行抗原检测，结果为阴性时方可引入，引入后要隔离饲养一段时间，期间再次进行抗原检测，以确保新进场的鸡只健康。5 结语鸡病毒性疾病在养殖的过程中危害比较大，所以应当坚持预防为主的原则，做好流行病学调查和周围疫情的监测工作，当出现异常时应当及时地分析，有针对性地制定预防方案。养殖场发生病毒性疾病后，要先进行确诊，而后根据不同疾病的防治原则，做好综合防治工作，从而实现对鸡病毒性疾病的有效预防和科学治疗，提高养殖环节的经济效益。参考文献1 逯永强，周校国.鸡传染性法氏囊病的临床特征，实验室诊断与防控措施 J.现代畜牧科技，2021(9):147-148.2 张卓，李爽，甘一迪.鸡传染性法氏囊的流行特点与防制现状 J.养殖技术顾问，2009(4):148.3 赵玉环.鸡新城疫的流行病学，临床症状，剖检变化与防控 J.现代畜牧科技，2020(7):147-148.4 徐萍，郑玉姝，李任峰，等.我国新城疫疫苗研究进展J.黑龙江畜牧兽医，2017(11):78-81.度赶不上细菌耐药性的增强速度，最终一起常见细菌病的感染，也可能会无药可医4。因此，制定合理的用药规章制度，减缓耐药性产生的速度，以延长抗菌药物的使用时间，对全世界都至关重要。2021 年 10 月，为遏制细菌的耐药，维护国家的公共卫生安全以及生物安全，我国农业农村部发布全国兽用抗菌药使用减量化行动方案（2021 年2025 年），方案中要求到 2025年末，50%以上的规模养殖场将从饲养管理、生物安全防护、规范用药、谨慎用药、替代用药五个方面进行兽药减量化行动16。因此，抗菌药物的减量行动势在必行，各部门和机构都应该提前做好准备工作。目前，发达国家对致病性大肠杆菌高度重视，并形成规范的国家监测网络，而我国在该病监测和研究等方面还有不足，但建立致病性大肠杆菌的监测网已成为大趋势，各地区提前做好流行病学调查，建立监测网络，并根据地方实际情况制定健康监测检测方案，以期为指导后续行动做好准备工作。参考文献1 李而珍,黄觉.犊牛大肠杆菌病的防治措施 J.兽医导刊,2016(22):66.2 赫呜睿.某牛场犊牛大肠杆菌病的实验室诊断与药敏试验 J.现代畜牧兽医,2019(1):39-43 3 陈虹豆,张伟锋,徐智亮,等.2 株致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验J.畜牧与饲料科学,2019,40(2):108-112.4Yang H,Chen S,White D G,et al.Characterization of multiple-antimicrobial-resistant Escherichia coli isolates from diseased chickens and swine in ChinaJ.Journal of clinical Microbiology,2004(42):3483-3489.5 古丽努尔吾森.犊牛大肠杆菌病诊断及治疗 J.畜牧兽医科学,2021(13):70-71.6 杨 振 杰.犊 牛 大 肠 杆 菌 病 的 防 治 J.今 日 畜 牧 兽医,2019(1):103.7 韩和祥.四川省部分规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型鉴定与耐药性分析 J.黑龙江畜牧兽医,2019(4):107-109.8 方光远,张姝,樊婕,等.犊牛腹泻大肠杆菌疫苗的研制与应用 J.中国奶牛,2008(8):36-38.9 高睿,杨慧萍,薛增迪,等.犊牛大肠杆菌性腹泻多价疫苗的制备及初步免疫试验 J.黑龙江畜牧兽医,2010(23):140-142.10 邝 佳 丽,剡 根 强,土 静 梅,等.犊 牛 大 肠 杆 菌K-(99)-F(41）二价菌毛疫苗的制备及免疫效果的测定 J.黑龙江畜牧兽医,2016(1):175-178.11 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