1、球菌及检验球菌及检验成都医学院成都医学院临床微生物学教研室临床微生物学教研室球菌(球菌(coccuscoccus)是引起人类化脓性感染主要细菌是引起人类化脓性感染主要细菌,又称又称化脓性球菌(化脓性球菌(pyogenicpyogenic coccuscoccus)。)。常见需氧和兼性厌氧球菌包括:常见需氧和兼性厌氧球菌包括:革兰阳性球菌 奈瑟菌属 Neisseria 卡他布兰汉菌 B.catarrhalis 葡萄球菌属 Staphylococcus链球菌属 Streptococcus肠球菌属 Enterococcus革兰阴性球菌葡萄球菌属葡萄球菌属Staphylococcus一、分类一、分类B
2、ergysBergys分类分类 3232种、种、1515亚种。常见金黄色葡萄球菌、表皮亚种。常见金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、头状葡萄球菌、人葡萄球菌等。葡萄球菌、腐生葡萄球菌、头状葡萄球菌、人葡萄球菌等。凝固酶分类凝固酶分类 凝固酶阳性:如金黄色葡萄球菌凝固酶阳性:如金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性凝固酶阴性:如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌等如表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌等噬菌体分型噬菌体分型 将金黄色葡萄球菌分为将金黄色葡萄球菌分为5 5群群2626型。型。二、细菌特性二、细菌特性(一)形态染色(一)形态染色 革兰阳性球菌,菌体呈球形,革兰阳性球菌,菌体呈球形,散在或呈葡萄状排列(图散
3、在或呈葡萄状排列(图1 1、图、图2 2),无鞭毛、无芽胞,少数菌),无鞭毛、无芽胞,少数菌株能形成荚膜。在青霉素等药物株能形成荚膜。在青霉素等药物诱导下可形成诱导下可形成L L型(图型(图3 3)。)。(图1)(图2)(图3)(二二)培养特性培养特性多多数数为为兼兼性性厌厌氧氧,少少数数为为专专性性厌厌氧氧菌菌;营营养养要要求求不不高高,最最适适生生长长温温度度3737,最最适适pH7.4pH7.4。多多数数菌菌株株具具有有耐耐盐盐性性,能能在在含含10%10%15%NaCl15%NaCl的培养基中生长。的培养基中生长。在肉汤培养基中生长迅速,呈均匀混浊生长在肉汤培养基中生长迅速,呈均匀混浊
4、生长血琼脂平板上:血琼脂平板上:血琼脂平板上:血琼脂平板上:菌落中等大小、圆形凸起、表菌落中等大小、圆形凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不面光滑、湿润、边缘整齐、不透明,呈金黄色、白色或柠檬透明,呈金黄色、白色或柠檬色。色。金黄色葡萄球菌(图金黄色葡萄球菌(图1 1)菌)菌落周围有明显落周围有明显的的-溶血环,腐溶血环,腐生葡萄球菌(图生葡萄球菌(图3 3)和大多数表)和大多数表皮葡萄球菌(图皮葡萄球菌(图2 2)无溶血环。)无溶血环。图1图2图3高盐甘露醇平板上:高盐甘露醇平板上:高盐甘露醇平板上:高盐甘露醇平板上:金黄色葡萄球菌分解甘露金黄色葡萄球菌分解甘露醇,呈黄色菌落。醇,呈黄色菌落。
5、高盐卵黄琼脂平板上:高盐卵黄琼脂平板上:高盐卵黄琼脂平板上:高盐卵黄琼脂平板上:金黄色葡萄球菌产生卵磷金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶,分解卵磷脂,在菌脂酶,分解卵磷脂,在菌落周围形成一圈白色沉淀落周围形成一圈白色沉淀环。环。(三)生化试验(三)生化试验 触酶试验阳性(图触酶试验阳性(图1 1)。)。分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气(图产酸不产气(图2 2)。)。金黄色葡萄球菌能分解甘露金黄色葡萄球菌能分解甘露醇,凝固酶试验及耐热醇,凝固酶试验及耐热DNADNA酶试验阳性。酶试验阳性。(图1)(图2)(四)(四)抗原结构抗原结构主要有两种抗原:主要有两种抗原:1.1.葡
6、萄球菌葡萄球菌A A蛋白蛋白(SPASPA)有有种、属特异性。种、属特异性。2.2.多糖抗原多糖抗原 有型特异性,有型特异性,存在于细胞壁存在于细胞壁。三、临床意义三、临床意义(一)致病物质(一)致病物质(一)致病物质(一)致病物质外毒素外毒素 葡萄球菌溶素、葡萄球菌溶素、杀白细胞素、肠毒素、杀白细胞素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素克综合征毒素-1-1等。等。侵袭性酶类侵袭性酶类 血浆凝固酶、血浆凝固酶、耐热核酸酶、透明质酸耐热核酸酶、透明质酸酶等酶等 2.2.所致疾病所致疾病所致疾病所致疾病皮肤软组织感染皮肤软组织感染 疖、痈、毛囊炎、蜂窝疖、痈、毛囊炎、蜂窝
7、组织炎、伤口化脓、脓肿组织炎、伤口化脓、脓肿等。等。组织器官及全身性感染组织器官及全身性感染 肺炎、心包炎、骨髓炎、脑膜肺炎、心包炎、骨髓炎、脑膜炎、肾盂肾炎、尿道感染、败血症、脓毒血症等。炎、肾盂肾炎、尿道感染、败血症、脓毒血症等。医院感染医院感染 伪膜性肠炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导伪膜性肠炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染等。管感染等。毒素性疾病毒素性疾病 食物中毒食物中毒 烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征毒性休克综合征四、微生物学检验四、微生物学检验(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序 (二)标本采集(二)标本采集 根据病变部位不同,采根据病变部
8、位不同,采集相应标本。集相应标本。(三)(三)(三)(三)检验方法检验方法检验方法检验方法 1 1显微镜检查显微镜检查 除血液除血液标本外,其他标本均可标本外,其他标本均可直接涂片作革兰染色检直接涂片作革兰染色检查。查。脓液直接涂片(革兰染色)血标本培养后涂片(革兰染色)2.2.分离培养分离培养 血液标本血液标本增菌培养增菌培养分离培养分离培养(血平板)(血平板)一般标本一般标本 分离培养分离培养(血平板)(血平板)污染标本污染标本(粪便、呕吐物等)(粪便、呕吐物等)分离培养分离培养(高盐甘露醇平板)(高盐甘露醇平板)3.3.鉴定鉴定(玻片法)(试管法)血浆凝固酶试验胶乳凝集试验新生霉素敏感试
9、验金黄色葡萄球菌与金黄色葡萄球菌与CNS 的鉴别的鉴别方法方法方法方法金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌血浆血浆血浆血浆 凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶甘露醇发酵甘露醇发酵甘露醇发酵甘露醇发酵SPASPA新生霉素敏感试验新生霉素敏感试验新生霉素敏感试验新生霉素敏感试验S SS SR R 葡萄球菌属与微球菌属的鉴别葡萄球菌属与微球菌属的鉴别葡萄球菌属与微球菌属的鉴别葡萄球菌属与微球菌属的鉴别方法方法方法方法葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属葡萄球菌属
10、微球菌属微球菌属微球菌属微球菌属形态形态形态形态葡萄状排列为主,葡萄状排列为主,葡萄状排列为主,葡萄状排列为主,菌体较小菌体较小菌体较小菌体较小四联四联四联四联排列为主,排列为主,排列为主,排列为主,菌体较大菌体较大菌体较大菌体较大O-FO-F试验试验试验试验发酵型发酵型发酵型发酵型氧化型氧化型氧化型氧化型链球菌属链球菌属Streptococcus一、分类一、分类BergysBergys分类分类 4040个种和亚种个种和亚种溶血现象分类溶血现象分类 甲型甲型溶血性溶血性链球菌链球菌 溶血。草绿色链球菌、肺炎链球菌等溶血。草绿色链球菌、肺炎链球菌等 乙型乙型溶血性溶血性链球菌链球菌 溶血。化脓性
11、链球菌、无乳链球菌等溶血。化脓性链球菌、无乳链球菌等 丙型链球菌丙型链球菌 溶血。牛链球菌溶血。牛链球菌 LancefieldLancefield血清学分类血清学分类 A A、B B、C C、D20D20群,最常见群,最常见A A群群三、微生物特性三、微生物特性 (一)形态染色(一)形态染色 革兰阳性球菌,菌体呈球型或卵圆性,链状排列,无鞭毛、无芽胞,幼龄菌可形成荚膜。肺炎链球菌常呈瓜仁状或矛头状,呈双排列。兼性厌氧,营养要求较高,普通培养基中不能生长,在血琼脂平板上生长良好。最适温度37,最适pH7.47.6。菌落小、圆形、凸起,表面光滑湿润,边缘整齐,灰白色、半透明或不透明,周围有、三种不
12、同的溶血。(二二)培养特性培养特性肺炎链球菌:菌落扁平,中央呈脐状凹陷,溶血。(三)生化试验(三)生化试验 触酶触酶,能分解多种糖类和蛋白质。能分解多种糖类和蛋白质。肺炎链球菌分解菊糖,胆盐溶解试验阳性和肺炎链球菌分解菊糖,胆盐溶解试验阳性和optochinoptochin敏敏感试验阳性,籍此可与草绿色链球菌相区别。感试验阳性,籍此可与草绿色链球菌相区别。(四)(四)抗原结构抗原结构1.1.多糖抗原:群特异性抗原,将多糖抗原:群特异性抗原,将链球菌分为链球菌分为2020群。对人致病的群。对人致病的9090属属A A群。群。2.2.蛋白质抗原:具型特异性,与蛋白质抗原:具型特异性,与致病性有关的
13、是致病性有关的是MM抗原。抗原。3.3.荚膜多糖抗原荚膜多糖抗原 根据荚膜多糖抗根据荚膜多糖抗原不同,将肺炎链球菌分为原不同,将肺炎链球菌分为8585个血清个血清型。型。三、临床意义三、临床意义(一)致病物质(一)致病物质(一)致病物质(一)致病物质 细菌表面结构细菌表面结构 MM蛋白、脂磷壁酸、荚膜蛋白、脂磷壁酸、荚膜 外外毒毒素素 链链球球菌菌溶溶血血素素O O(SLOSLO)、链链球球菌菌溶溶血血素素S S(SLSSLS)、致热外毒素(红疹毒素)致热外毒素(红疹毒素)侵袭性酶类侵袭性酶类 链激酶、链道酶、透明质酸酶等链激酶、链道酶、透明质酸酶等1.A A群链球菌群链球菌(化脓性链球菌化脓
14、性链球菌)约占临床上链球菌感染的约占临床上链球菌感染的90%90%。(1 1)化脓性感染)化脓性感染皮皮肤肤软软组组织织感感染染 痈痈、蜂蜂窝窝织织炎炎、脓脓疱疱疮疮、丹丹毒毒、淋淋巴巴结结炎炎、医医源源性性伤伤口感染口感染 (二)所致疾病(二)所致疾病组织器官及全身性感染组织器官及全身性感染 扁桃体炎、扁桃体炎、急性咽炎、咽峡炎、中耳炎、乳突急性咽炎、咽峡炎、中耳炎、乳突炎和产后感染等。炎和产后感染等。(2 2)毒素性疾病毒素性疾病 猩红热猩红热(3 3)变变态态反反应应性性疾疾病病 急急、慢慢性性风风湿湿热热和和急急性性肾肾小小球球肾肾炎炎等等。以以A A群群1212型多见。型多见。扁桃体
15、炎猩红热乳突炎2.B2.B群群链链球球菌菌(无无乳乳链链球球菌菌)新新生生儿儿败血症和脑膜炎的主要病原菌。败血症和脑膜炎的主要病原菌。3.3.草草绿绿色色链链球球菌菌(链链球球菌菌)亚亚急急性性细菌性心内膜炎的常见病原菌。细菌性心内膜炎的常见病原菌。4.4.肺肺炎炎链链球球菌菌 大大叶叶性性肺肺炎炎、支支气气管管肺肺炎炎、化化脓脓性性脑脑膜膜炎炎、鼻鼻窦窦炎炎、中中耳炎等。耳炎等。四、微生物检验四、微生物检验(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序 (二)标本采集(二)标本采集(二)标本采集(二)标本采集 根据病变部位不同,采集相应根据病变部位不同,采集相应标本。痰液、血液、脑
16、脊液等标本。痰液、血液、脑脊液等(三)检验方法(三)检验方法(三)检验方法(三)检验方法 1.1.显微镜检查显微镜检查 除血液标本外,除血液标本外,其他标本均可直接涂片作革兰其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。染色检查。肺炎链球菌脑脊液涂片化脓性链球菌脓汁涂片 2.2.分离培养分离培养分离培养分离培养 血液标本血液标本增菌培养增菌培养分离培养(血平板)分离培养(血平板)3737181824h 24h 一般标本一般标本 分离培养(血平板)分离培养(血平板)3.鉴定鉴定(1 1)LancefieldLancefield血清学分群血清学分群(2 2)化脓性链球菌鉴定化脓性链球菌鉴定 杆菌肽敏感杆菌肽
17、敏感 (3 3)无乳链球菌鉴定无乳链球菌鉴定 CAMPCAMP试验试验马尿酸钠试验马尿酸钠试验 (4 4)D D群链球菌群链球菌 胆汁七叶苷试验胆汁七叶苷试验65g65gL L NaClNaCl耐盐试验耐盐试验(5 5)肺炎链球菌鉴别)肺炎链球菌鉴别菊糖菊糖OptochinOptochin敏感试验敏感试验胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验荚膜肿胀试验荚膜肿胀试验草绿色链球菌与肺炎链球菌的鉴别草绿色链球菌与肺炎链球菌的鉴别草绿色链球菌与肺炎链球菌的鉴别草绿色链球菌与肺炎链球菌的鉴别菌名菌名细菌形态细菌形态菌落菌落胆汁溶胆汁溶菌试验菌试验OptochinOptochin敏感试验敏感试验菊糖菊糖分解分解荚膜荚
18、膜肿胀肿胀小鼠小鼠毒力毒力 肺炎肺炎链球菌链球菌矛头状,成矛头状,成双,有荚膜双,有荚膜梢大,扁平,梢大,扁平,湿润,脐状湿润,脐状+草绿色草绿色链球菌链球菌圆形,链状,圆形,链状,无荚膜无荚膜较小,凸起,较小,凸起,稍干,圆形稍干,圆形肠球菌肠球菌Enterococcus一一、分类、分类19841984年从链球菌属分离出来年从链球菌属分离出来。BergysBergys分类分类 1919种种 粪肠球菌粪肠球菌、鸟肠球菌鸟肠球菌、屎肠球菌等屎肠球菌等LancefieldLancefield血清学分群血清学分群 D D群群二、细菌特性二、细菌特性(一一)形态染色形态染色 革兰阳性球菌,单个、成双或
19、呈短链状排列。无芽革兰阳性球菌,单个、成双或呈短链状排列。无芽胞、无荚膜,个别菌种有稀疏鞭毛。胞、无荚膜,个别菌种有稀疏鞭毛。(二二)培养特性培养特性 与链球菌相似。兼性厌氧,厌氧要求较高,在血琼脂平与链球菌相似。兼性厌氧,厌氧要求较高,在血琼脂平板上形成较小、灰白色、湿润、凸起板上形成较小、灰白色、湿润、凸起、或或溶血。溶血。(三三三三)生化反应生化反应生化反应生化反应触酶试验触酶试验胆汁七叶苷试验胆汁七叶苷试验65g/L65g/L氯化钠生长试验氯化钠生长试验吡咯烷酮芳基酰胺酶吡咯烷酮芳基酰胺酶(PYRPYR)试验试验二、临床意义二、临床意义 人类肠道和女性生殖道的正常菌群。人类肠道和女性生
20、殖道的正常菌群。医医院院感感染染最最常常见见的的革革兰兰阳阳性性球球菌菌,仅仅次次于于金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌。最最多多见见于于尿尿路路感感染染,其其次次为为腹腹腔腔和和盆盆腔腔等等部部位位的的创创伤伤和和外科手术后感染。外科手术后感染。四、微生物检验四、微生物检验(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序(一)检验程序 脓液、尿液、穿刺液 初报 挑选可疑菌落 血液涂片染色 分离培养 增菌培养(5CO2)(血平板、5CO2)(葡萄糖肉汤等)鉴定试验 PYR 试验 胆汁七叶苷试验 6.5NaCl生长试验 血清学试验(二)标本采集(二)标本采集(二)标本采集(二)标本采集 血、尿、创伤标本和其
21、他拭子。血、尿、创伤标本和其他拭子。(三)检验方法(三)检验方法(三)检验方法(三)检验方法1.1.显显微微镜镜检检查查 除除血血液液标标本本外外,其其他他标标本本均均可可直直接接涂涂片片作革兰染色检查。作革兰染色检查。2.2.分离培养分离培养 血液标本血液标本增菌培养增菌培养分离培养(血平板分离培养(血平板)3737181824h 24h 一般标本一般标本 分离培养(血平板)分离培养(血平板)3.3.鉴定鉴定 肠球菌肠球菌肠球菌肠球菌与与与与D D群链球菌的鉴别群链球菌的鉴别群链球菌的鉴别群链球菌的鉴别LancefieldLancefield血清学鉴定血清学鉴定胆汁七叶苷胆汁七叶苷65g/L
22、65g/L氯化钠生长氯化钠生长PYRPYR4545生长生长肠球菌属肠球菌属D D群群D D群链球菌群链球菌D D群群奈瑟菌属和布兰汉菌属奈瑟菌属和布兰汉菌属一、分类一、分类(一)奈瑟菌属(一)奈瑟菌属(Neisseria)共1111个种,脑膜炎奈瑟菌个种,脑膜炎奈瑟菌(N.N.merningitidismerningitidis)和淋病奈和淋病奈瑟菌瑟菌(N.gonorrhoeaeN.gonorrhoeae)为最重要的病原菌。为最重要的病原菌。(二)布兰汉菌亚属(二)布兰汉菌亚属(subgenus Branhamella)莫拉菌属(莫拉菌属(MoraxellaMoraxella)布兰汉菌亚属布
23、兰汉菌亚属(subgenus subgenus BranhamellaBranhamella)共共4 4个种,仅卡他布兰汉个种,仅卡他布兰汉菌菌(M.(B.)catarrhalisM.(B.)catarrhalis)对)对人类有致病性。人类有致病性。二、细菌特性二、细菌特性(一)形态染色(一)形态染色(一)形态染色(一)形态染色 革革兰兰阴阴性性球球菌菌,肾肾形形、成成双双排排列列,凹凹面面相相对对。标标本本直直接接涂涂片片镜镜检检,可可位位于于中中性性粒粒细细胞胞细细胞胞内内、外外。无无鞭鞭毛毛、无无芽芽胞胞,新分离株多有荚膜和菌毛。新分离株多有荚膜和菌毛。脑膜炎奈瑟菌卡他布兰汉菌淋病奈瑟菌
24、(二二)培养特性培养特性1.1.脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌 专专性性需需氧氧,初初次次分分离离培培养养需需要要5 51010COCO2 2。营营养养要要求求高高,最最适适培培养养基基为为巧克力琼脂平板巧克力琼脂平板。菌菌落落较较小小,圆圆形形凸凸起起、表表面面光光滑滑湿湿润润、边边缘缘整整齐齐、透透明明或或半半透透明明、无无色色或或呈呈灰灰白色,似露滴状,不溶血。白色,似露滴状,不溶血。有自溶酶。有自溶酶。脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌专性需氧,营养要求不高,普通培养基上即可生长。专性需氧,营养要求不高,普通培养基上即可生长。菌菌落落灰灰白白色色或或红红棕棕色色、光光滑滑、圆圆形
25、形凸凸起起、不不透透明明、不不溶溶血血;培培养养48h48h,菌菌落落表表面面干干燥燥,坚坚韧韧,不不平平,边边缘缘不不繁繁齐齐;如如用用接接种环推移,整个菌落可移动。种环推移,整个菌落可移动。2.卡他布兰汉菌(三)生化反应(三)生化反应 三种细菌均为氧化酶三种细菌均为氧化酶 、触酶。、触酶。奈瑟菌和卡他布兰汉菌的主要生化反应奈瑟菌和卡他布兰汉菌的主要生化反应 菌种菌种 氧化酶氧化酶 触酶触酶 葡萄糖葡萄糖 麦芽糖麦芽糖 蔗糖蔗糖 硝酸盐还原硝酸盐还原 DNADNA酶酶脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌 (四)抗原结构(四)抗原结构脑膜炎奈瑟菌抗原结构模式
26、图淋病奈瑟菌抗原结构模式图(五)抵抗力(五)抵抗力 奈瑟菌的抵抗力非常弱,对冷热、干燥、化学消毒奈瑟菌的抵抗力非常弱,对冷热、干燥、化学消毒剂均非常敏感。剂均非常敏感。卡他布兰汉菌的抵抗力较强卡他布兰汉菌的抵抗力较强二、临床意义二、临床意义(一)淋病奈瑟菌(一)淋病奈瑟菌1.1.致病物质:菌毛、外膜蛋白、内毒素致病物质:菌毛、外膜蛋白、内毒素等。等。2.2.所致疾病所致疾病 人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。性传播疾病性传播疾病淋病淋病 淋球菌性结膜炎淋球菌性结膜炎淋菌性关节炎、败血症、脑膜炎(偶见)淋菌性关节炎、败血症、脑膜炎(偶见)(二)脑膜炎奈瑟菌(二)脑膜炎奈瑟菌
27、1.1.致病物质:致病物质:荚膜、菌毛、内毒荚膜、菌毛、内毒素素2.2.所致疾病所致疾病 流行性脑脊髓膜炎流行性脑脊髓膜炎皮下出血(出血性紫癜)皮下出血(出血性紫癜)败血症败血症休克和休克和DICDIC(三)卡他布兰(三)卡他布兰汉菌汉菌 1.致病物质:内毒素2.所致疾病 人类和其他动物上呼吸道的正常寄生菌之一,当机体抵抗力下降时,引起下呼吸道感染和结膜炎、中耳炎、鼻窦炎、支气管炎,偶尔引起菌血症、心内膜炎、脓胸、脑膜炎、尿道炎等。(一)检验程序(一)检验程序 四、微生物检验四、微生物检验(二)标本采集二)标本采集标本采集后立即送检,最好床边接种。标本采集后立即送检,最好床边接种。1.脑膜炎奈
28、瑟菌脑膜炎奈瑟菌 咽拭子、血液、脑脊液、皮肤出血淤斑咽拭子、血液、脑脊液、皮肤出血淤斑渗出物渗出物2.淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 女性:尿道或阴道分泌物;女性:尿道或阴道分泌物;男性:尿道分泌物男性:尿道分泌物3.3.卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌 痰液或支气管灌洗液痰液或支气管灌洗液1.1.显微镜检查显微镜检查 除血液标本外,除血液标本外,其他标本均可直接涂片作革其他标本均可直接涂片作革兰染色检查。兰染色检查。脑脊液标本直接涂片男性淋病患者的尿道分泌物涂片急性淋病慢性淋病女性淋病患者阴道分泌物涂片(三)检验方法(三)检验方法2.2.分离培养分离培养脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 血液标本血液标本增菌培养增菌培养分离培养(血平板巧克力平板)分离培养(血平板巧克力平板)5%5%10%CO10%CO2 2 37 37242448h 48h 一般标本一般标本 分离培养(血平板巧克力平板)分离培养(血平板巧克力平板)淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌 巧克力平板、选择培养基(巧克力平板、选择培养基(MTMMTM、MLML、NYCNYC等等)卡他布兰汉菌卡他布兰汉菌 血平板血平板3.3.鉴定鉴定 氧化酶氧化酶 淋病奈瑟菌仅分解葡萄糖脑膜炎奈瑟菌分解葡萄糖和麦芽糖卡他布兰汉菌不分解糖