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实验动物学复习考试题.doc

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资源描述

1、实验动物科学的含义?实验动物科学(laboratory animal science)是研究实验动物和动物实验的一门新兴学科。前者是以实验动物本身为对象,专门研究其育种、繁殖生产、饲养管理、质量监测、疾病诊治和预防以及支撑条件的建立等等,即如何培育出标准化的实验动物。后者以实验动物为材料,采用各种手段和方法在实验动物身上进行实验,研究实验过程中实验动物的反应、表现及其发生机制和发展规律,确保动物实验的可靠性、准确性和可重复性。即如何使动物实验合理化、规范化。简而言之,实验动物科学就是关于实验动物标准化和动物实验规范化的科学实验用动物与实验动物的区别。答案:实验用动物是指所有用于动物实验的动物,

2、包括实验动物。而实验动物是为研究的需要而培育的。确定是否是实验动物,要经过一系列检测,如微生物和遗传基因等,经专家鉴定才能称其为实验动物。简述实验动物在食品等轻工领域的应用。人们的吃穿用,包括食品、食品添加剂、皮毛及化学纤维、日常生活用品,特别是化学制品有害成分的影响,都要用实验动物去试验。按照规定,食品、食品添加剂、皮毛制品、化妆品等上市销售,都要求必须先经国家指定的机构采用实验动物进行安全性试验,以证明其对人体无急慢性毒性,且无致癌、致畸、致突变作用,才能供应市场。简述什么是动物福利。动物福利是动物在整个生命过程中动物保护的具体体现,其基本原则是保证动物的康乐。动物康乐也就是指自身感受的状

3、态,“心中愉快”的感受。包括使动物身体健康,体质健壮,行为正常,无心理的紧张、压抑和痛苦等。从理论上讲,动物康乐的标准是对动物需求的满足。动物的需求包括三个方面。即维持生命的需要、维持健康的需要以及生活得舒适的需要。动物福利的目的是为了动物的康乐,是保证动物康乐的外部条件,而动物康乐的状态又反映了动物福利条件的状况。搞好动物福利的前提是提高对动物福利的认识,从各个环节保证为动物创造符合其要求的生存、居住、生活条件。维护动物的健康,对研究人员来说,还必须考虑通过优化设计,减少实验动物的用量。减轻动物的不安和疼痛,给予良好的术后护理,实验结束或实验过程中获取标本应采取安乐死的方法等等。实验动物(L

4、aboratory Animal,LA):指由人工培育,来源清楚,遗传背景明确,对其携带的微生物和寄生虫实行监控,用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定,以及其他科学研究的动物。实验动物追溯其祖先,可来源于野生动物、经济动物(家畜、家禽)、警卫动物和观赏动物等,但却有别于这类动物。实验动物一般具有以下三大特点:(1)必须是人工培育,来源清楚,遗传背景明确的动物。 (2)在实验动物繁育的全过程中,必须严格监控其携带的微生物和寄生虫。 (3)实验动物主要是应用于科学实验,使试验研究结果具有可靠性、精确性、可比性、可重复性和科学性。封闭群动物(Closed colony animals)是指一个

5、动物种群在五年以上不从外部引进其他任何品种的新血缘,由同一血缘品种的动物进行随意交配,在固定场所保持繁殖的动物群。一般对群的大小、封闭年月、繁殖结构等均有明确的规定。近交系近交系动物(Inbred strain animals):近交系动物一般称为之纯系动物。是采用兄妹交配(BXSbrother sister)或亲子交配(PXOparent xoffspring,父母与子女交配),连续繁殖20代以上而培育出来的纯品系动物。突变系动物(Maiant strain animals)是保持有特殊的突变基因的品系动物,也就是正常染色体的基因发生了变异的、具有各种遗传缺陷的品系动物。生物在长期繁殖过程中

6、,子代突变发生变异,其变异的遗传基因等位点可遗传下去,或即使没有明确的遗传基因等位点,但经过淘汰和选拔后,仍能维持稳定的遗传形质。杂交群动物(Hybrid animals)也称杂交一代动物或系统杂交动物。是指两个近交品系动物之间进行有计划交配所获得的第一代动物。简称F1动物。一般只用子一代F1,有时也用子二代F2。悉生动物(Gnotobiotes animals)是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。此种动物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如使大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌。SPF动物无特定病原体动物(Specefic pathoge

7、n-free animals)是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物。但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物。动物实验是以各学科的研究目的为目标,研究实验动物的选择、试验手段和方法、动物模型以及在实验中实验动物反应的观察、类比,以保证试验的质量和试验的可重复性的科学。3R原则即动物实验的减少、替代和优化。减少(Reduction):选用恰当的高质量的实验动物进行动物实验,改进实验设计,提高实验动物的利用率,从而减少动物的使用数量。替代(Replacement):以低等生物、微生物或细胞、组织、器官甚至电子计算机模拟、替代活动物实验。采用替代

8、的方法必须经过反复的验证,在保证实验结果科学、可靠、可比较的前提下,来替代动物实验。优化(Refinement):主要指实验技术路线和手段的精细设计和选择,减少实验动物的紧张与不适,减轻动物的痛苦,使动物实验有更好的结果,保证动物实验的可重复性。R=(A+B+C) D+E动物实验是对演出型施加一定的处理。为求得对处理结果的可重复性,就要求演出型稳定。动物对实验处理的反应可用以下结果表示:R=(A+B+C) D+ER实验动物的总反应A动物种的共同反应B品种及品系特有的反应C个体反应(个体差异)D环境影响E实验误差品种:种以下还可有进一步小的分类,如品种(stock)。品种一般系指具有一些容易识别

9、和人们所需要的性状,而且可以基本稳定的遗传的动物群体。如新西兰白兔、青紫兰兔、Wistar大鼠、KM小鼠等。品系:在实验动物学中把基因高度纯合的动物称作品系(strain)动物。 例如,C57BL/6是近交系动物中的一个品系,属低癌组、高补体活性的动物。 又如,肌萎缩症(dystrophia muscularis)小鼠是带有突变基因(dy/dy)的品系动物。按微生物和寄生虫感染将实验动物分为哪些等级,各自标准是什么?微生物和寄生虫的监控要求。在实验动物繁育的全过程中,必须严格监控其携带的微生物和寄生虫。目前,我国将对其微生物和寄生虫的控制程度划分为四个等级:即普通动物(Conventional

10、 animal,CV)、清洁动物(Clean animal,CL or Clean conventional animal,CCV)、无特定病原体动物(Specific pathogen free animal,SPF)、无菌动物(Germ free animal,GF),后者包括悉生动物(Gnotobiotes animal,GN)。SPF和GF动物不几仅人工监控其携带的微生物、寄生虫,而且是经剖腹产净化获得的。国际上是把实验动物的微生物和寄生虫控制分成普通动物,SPF动物和无菌动物(悉生动物)三个等级。简述无菌动物的概念,及人工获得方式?无菌动物(Germ free animals)是指机

11、体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后,立即浸泡在37灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行剖腹,切除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,禽类、鱼类、昆虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入无菌

12、隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。简述实验动物环境因素分类的分类及其对实验动物的影响。(补充影响部分)物理因素:温度、湿度、气流速度、光照、噪声等。化学因素:饲料、饮水、空气、臭气、消毒剂、有毒物质等。生物因素:饲养密度及各种病原体(病毒、细菌、寄生虫等)。人为因素:设施、饲养、管理、实验处理等。无论是哪种因素,都不是孤立的,而是相互联系而产生影响的。简述实验动物设施的基本要求。实验动物设施是作为饲养和管理实验动物场所中较大的居住因素。因此,在充分考虑到动物的同时,也要注意到从事实验的研究人员及实际操作的饲养技术人员的安全。实验动物设施一般应达到下列要求

13、: 1. 设施应尽量避免对动物有潜在危险。选址应远离疫区和公害污染地区。2. 建筑物要坚固耐用,并应留有一定的备用房间,为房屋的定期轮换消毒以及应急时使用。施工和建筑材料应严格要求。3. 实验动物设施应成为独立的区域,与其它建筑物分开;且各幢动物房之间最好有一定的自然间隔,以防止交叉感染。4. 有保障环境控制的设备和措施。如空气净化设备、消毒灭菌设备等。5. 注意清洁作业和污染作业的隔离,最好采用单行路线,即作业只允许由清洁作业区向污染作业区移动,不许逆转,以减少交叉感染的机会。6. 有适当的防灾和安全措施,以保证设备正常运转。如应急发电装置、防火、防生物污染设施等。简述近交系动物的优点 1)

14、具有相同的基因型,表现型也一致,所以其反应是一致的,实验结果正确、可靠。由于连续近交繁殖,同一近交系的各个体具有相同的基因型,在相同的环境条件下又具有相同的表现型,故其性状即其各种生物学特性比较一致,对外来刺激反应也一致。 2)各品系均有其独特的特性,根据实验目的可选用不同品系来作实验,实验重复性好,所用动物少,实验周期短,节省人力、物力和时间。 3)国际上分布广泛,不同国家的科研单位由于使用同一近交系动物所取得的结果是相似的,便于国内和国际间学术交流和实验重复。 4)可以作为有价值的病理学模型,如有致癌品系、抗癌品系、致白血病品系,嗜酒性品系、易抽搐品系等,是研究人类疾病的重要实验材料。 5

15、)它是标准的实验材料,动物生长发育到一定时间就有一定的规格。 6)有大量的历史资料可查,每个品系均有其详细的遗传学资料,遗传背景明确,其生物学特性、生理生化特点、常见疾病(包括自发性疾病)等都有过系统的研究,便于研究者查阅和选择应用。近交系动物的特性。(一)纯合性和一致性:在一个近交品系内所有动物的基因位点都应该是纯合子,这样的个体与该品系中任何一个动物交配所产生的后代也应该是纯合子,在这些动物中没有暗藏的隐性基因。由于近交系动物是相同基因型的动物,因而任何可遗传的体征都完全一致,例如血型和组织型,形态学上的特征(体重,毛色等),甚至行为的类型也趋于一致。在同一品系内动物个体间进行皮肤和肿瘤移

16、植不被当做异物排斥。如能应用生化或免疫学的方法检测个体在各染色体上的基因标记,同一品系内不同个体间的基因标记完全一致。(二)遗传稳定性:已建立的近交系动物在遗传上具有高度稳定性,个体遗传变异仅发生在少量残留杂合基因和基因突变上,而这种机率非常低。如果品系在被确认为近交系后坚持近交,同时辅以遗传监测。及时地发现和清除遗传变异的动物,该品系的遗传特性可世代相传。(三)个体性:就整个近交系小鼠而言,每个品系在遗传上都是独特的, 几乎每个近交品系都建立了各自的遗传概貌,用遗传监测方法,可将两个外貌近似的品系分辨出来。有些品系可能自发某些疾病,成为研究人类疾病理想的动物模型。在某些情况下,品系间的差别显

17、示在量上,而不在质上,这一点在研究上也非常有用。因此可在众多的近交系中筛选出对某些因子敏感和非敏感的品系以达到不同的实验目的。(四)分布的广泛性:近交系动物个体具备品系的全能性,任何个体均可携带该品系全部基因库,引种非常方便,仅需12对动物。目前,大部分近交系动物分布在世界各地,这从理论上意味着不同国家的科学家有可能去验证和比较已取得的数据。五)背景资料和数据较为完善:由于近交系动物在培育和保种的过程中都有详细记录,加之这些动物分布广泛,经常使用,已有相当数量的文献记载着各个品系的生物学特征,这些基本数据对于设计新的实验和解释实验结果提供了便利条件。简述近交系动物的繁育方法一般采用以下三种方法

18、:单线法、平行法、选优法(1)单线法:从近交系原种选出35个兄妹对进行兄妹交配,从中选出生产能力最好的一对进行繁殖,然后从中选择一对作为下一代生产的双亲,如此一代代的延续下去。这个方法生产的个体比较均一,但选择的范围太小,由于只有单线的仔代,易发生断代危险。 (2)平行法:选35对兄妹对,每个兄妹对都选留下一代种鼠,一代代的延续下去,这个方法生产的个体不太均一,但选择范围大,易发生分化。 (3)选优法:这个方法保留了上述两个方法的优点克服了两个方法中的缺点,是个较好的保种方法。假定每代选6对,每对都选自同一双亲的仔代同胞兄妹,在繁殖过程中,每一代均保持6对,当某对出现不孕或生产能力降低,而不适

19、于继续繁殖时,则可从另一对所生的后代中选择优良者加以代替。简述杂交群动物的优点?1具有杂交优势,生命力强,适应性和抗病力强,繁殖旺盛等优点,在很大的程度上可以克服因近交繁殖所引起的近交衰退现象。 2具有纯系动物基本相似的遗传均质性。虽然它的基因不是纯合子,但基因型是整齐一致的,遗传性是稳定的,表现型也一致,因此它基本上具有近交系动物的特点。 3对各种实验结果重复性好。 4具有亲代双亲的特点。 5国际上分布广,已广泛用于各类实验研究,实验结果便于在国际间进行重复和交流。简述微生物和寄生虫对实验动物的主要影响。人畜共患病微生物:既可危害动物自身,还会传染给饲养人员( 如流行性出血热、狂犬病、布氏杆

20、菌病、沙门氏菌等)。影响动物健康的动物传染性疾病微生物:虽然不引起人员发病,但可严重影响动物群体健康。如小鼠的脱脚病(ectromelia,又称鼠痘 mouse pox) 是由鼠痘病毒感染引起的烈性传染病,虽不是人畜共患病,但其传播快,使大批动物死亡或被迫全部淘汰,重新引种建群,给科研和生产带来很大的损失。有些动物貌似健康,实际上隐性感染某些微生物,如仙台病毒(sendai virus)感染的孕鼠,可使小鼠繁殖力降低,新生仔死亡率增加。潜在感染可使动物机体发生各种(包括反应性、体内代谢、功能等)变化,或导致体内微生物丛失衡。 进而引发显性疾病使实验动物机体发生病变或导致死亡。影响和干扰实验:

21、仙台病毒和绿脓杆菌存在时,如把动物用于放射或使用免疫抑制剂实验可引起发病死亡。多数细菌对动物无致病作用,并且有益无害。如普通大肠杆菌,乳酸杆菌和多种厌氧菌。而近年来微生态学研究表明,许多正常菌群当遇到内外环境的变化或在实验条件下可发生菌群失调,引发动物疾病。简述无菌动物的获得方式。无菌动物在自然界并不存在,必须用人为的方法养育而成。一般将临产前的健康动物用麻醉药品或拉断颈椎处死后,立即浸泡在37灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行剖腹,切除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并立即输送到另一只隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放入隔离器

22、内人工喂乳或用其他品系的无菌雌鼠作保姆代养。 如小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代养。而象豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,象禽类、鱼类、昆虫类等,因是在卵中无菌的前提下孵出的,故用药物将卵周围灭菌后移入灭菌隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物,一般在出生后就能自力采食,故较易育成。简述无菌动物在营养、代谢研究中的应用。1无菌动物是研究营养的好模型。很多营养成份是靠细菌降解的。正常动物的肠道可合成维生素B和维生素K。应用无菌动物可研究那些菌可合成维生素B或K。2代谢研究:如胆固醇代谢和微生物关系的研究。用已知菌动物研究指出:肠道微生物能使胆汁酸起化学变化,从而减少

23、其再吸收,而增加其排池。有些特殊的微生物种类和这种胆汁酸的代谢有关。这就为控制血清胆固醇含量和心血管疾病的研究,指出了新的课题。 动物模型的设计原则。生物医学科研设计中常要考虑如何建立动物模型的问题,因为很多阐明疾病及疗效机制的实验不可能或不应该在病人身上进行。常要依赖于复制动物模型,但一定要进行周密设计,设计时要遵循下列一些原则:(1)相似性在动物身上复制人类疾病模型。目的在于从中找出可以推广(外推)应用于病人的有关规律。外推法要冒风险,因为动物与人到底不是一种生物。例如在动物身上无效的药物不等于临床无效,反之也然。因此,设计动物疾病模型的一个重要原则是,所复制的模型应尽可能近似于人类疾病的

24、情况。 (2)重复性理想的动物模型应该是可重复的,甚至是可以标准化的。例如用一次定量放血法可百分之百造成出血性休克,百分之百死亡,这就符合可重复性和达到了标准化要求。又如用狗做心肌梗死模型照理很合适,因为它的冠状动脉循环与人相似,而且在实验动物中它最适宜做暴露心脏的剖胸手术,但狗结扎冠状动脉的后果差异太大,不同狗同一动脉同一部位的结扎,其后果很不一致,无法预测,无法标准化。相反,大小白鼠、地鼠和豚鼠结扎冠脉的后果就比较稳定一致,可以预测,因而可以标准化。为了增强动物模型复制时的重复性,必须在动物品种、品系、年龄、性别、体重、健康情况、饲养管理;实验及环境条件,季节、昼夜节律、应激、室温、湿度、

25、气压、消毒灭菌;实验方法步骤;药品生产厂家、批号、纯度规格、给药剂型、剂量、途径、方法;麻醉、镇静、镇痛等用药情况;仪器型号、灵敏度、精确度;实验者操作技术熟练程度等方面保持一致,因为一致性是重现性的可靠保证。(3)可靠性复制的动物模型来应该力求可靠地反映人类疾病,即可特异地、可靠地反映某种疾病或某种机能、代谢、结构变化,应具备该种疾病的主要症状和体征,经化验或X光照片、心电图、病理切片等证实。若易自发地出现某些相应病变的动物,就不应加以选用,易产生与复制疾病相混淆的疾病者也不宜选用。例如铅中毒可用大白鼠做模型,但有缺点,因为它本身容易患动物地方性肺炎及进行性肾病,后者容易与铅中毒所致的肾病相

26、混淆,不易确定该肾病是铅中毒所致还是它本身的疾病所致。用蒙古沙土鼠就比较容易确定,因为一般只有铅中毒才会使它出现相应的肾病变。(4)适用性和可控性供医学实验研究用的动物模型,在复制时,应尽量考虑到今后临床应用和便于控制其疾病的发展,以利于研究的开展。如雌激素能终止大鼠和小鼠的早期妊娠,但不能终止人的妊娠。因此,选用雌激素复制大鼠和小鼠终止早期妊娠的模型是不适用的,因为在大鼠和小鼠筛选带有雌激素活性的药物时,常常会发现这些药物能终止妊娠,似乎可能是有效的避孕药,但一旦用于人则并不成功。所以,如果知道一个化合物具有雌激素活性,用这个化合物在大鼠或小鼠观察终止妊娠的作用是没有意义的。 (5)易行性和

27、经济性在复制动物模型时,所采用的方法应尽量做到容易执行和合乎经济原则。灵长类动物与人最近似,复制的疾病模型相似性好,但稀少昂贵,即使猕猴也不可多得,更不用说猩猩、长臂猿。幸好很多小动物如大小鼠、地鼠、豚鼠等也可以复制出十分近似的人类疾病模型。它们容易作到遗传背景明确,体内微生物可加控制、模型性显著且稳定,年龄、性别、体重等可任意选择,而且价谦易得、便于饲养管理,因此可尽量采用。 简述小鼠的抓取固定方法。小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后

28、腿即可。小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。简述大鼠的抓取固定方法。大鼠的抓取斯基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指,抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和

29、灌胃时,同样可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,这样右手即可进行各种实验操作。也可伸开左手之虎口,敏捷地从后,一把抓住。若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处死,然后用细棉线绳活缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上。大鼠的门齿很长,在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤,所以,不要突然袭击式地去抓它,取用时应轻轻抓住其尾巴后提起,置于实验台上,用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内,这样即可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作时,实验者应戴上棉纱手套(有经验者也可不戴),右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以防尾巴尖端皮肤脱落,左手

30、抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。简述蛙类的抓取固定方法。蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定,以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢,拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。在抓取蟾蜍时,注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺,以免毒液射进眼中。实验如需长时间观察,可破坏其脑脊髓(观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓)或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。实验动物设施分为哪几类?请比对各类型实验设施的特点。实验动物设施可分为隔离系统、屏障系统和开放系统三种类型。 1. 隔离系统(Insulation system) 是以隔离器(Isol

31、ator)为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养无菌动物和已知菌动物。工作人员通过隔离器上组装的无菌手套进行操作,不直接接触动物。送入隔离器的空气需经超高效过滤,洁净度达到100级,饲料、饮水、垫料、笼具等都应高压高温灭菌。一切物品的移入均需通过灭菌渡舱,并事先包装消毒。2. 屏障系统(Barrier system) 这是饲养SPF动物的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进行严格的微生物控制。送入的空气需经初、中、高效三级过滤,洁净度达到10000级,饲料、饮水、垫料经灭菌后方可使用。 饲养人员进入屏障系统需经充分淋浴,然后穿上无菌工作服、戴口罩和手套。要利用空气压力

32、差防止污染,即清洁区域(如清洁走廊、SPF动物饲养室、清洁消毒用品贮存室等)空气压力要大于污染区域。在屏障设施内一切操作要实行严格的微生物控制,因为屏障系统内要长期饲养SPF动物,保持不被污染,而人员、物品要经常出入,其中人员又不能彻底灭菌,所以人是最大可能的污染源,因此,对人员的要求要特别严格,要有严密的操作细则。3. 开放系统(Open system) 只能饲养普通级实验动物。它是无空气净化装置的饲养系统,但并非不需要进行严格的环境控制和积极的微生物控制,仍需维持对环境条件的基本要求。饲料、饮水和垫料要求不被污染,饲养室内要有防鼠、防昆虫等措施。开放系统的各动物室的笼具可以集中洗刷和消毒。

33、经过消毒处理的物品与污染的物品的进出要通过不同路线,并要分开堆放,杜绝交叉。国际通用的近交系动物的命名方法,及其标准。1.近交系的命名法:a一般均用一个或几个大写英文字母表示,如A、AE、BA、AKR、DBA、NZB、STAR、NMRT、NYLR、NZBR等。b有些品系可在大写英文字母间加入一些阿拉拍数字来表示,如C3H、C57BL、C57BR、C57L、CC57W、CC57BR等。c非正规的命名,如果已广泛为国际所共知者,则可保留沿用,如:“129”、“101”、“615”等。d近交代数表示,一般是在品系符号后括号里写上代数,并在代数前加写“F”(Filial的缩写),例如A(F78)。如果

34、由于资料不全,可以写上已知代数,在代数前面加下问号,如AKR(F?+10)如系从其它实验室引入的近交系或亚系,又经自己实验室若干代的繁殖,其近交代数的表示方法是在F符号后,先标明引入时的子代数,再加上自己实验室繁殖的代数,如C57BL/Jnga(F73+26),即表示此亚系是73代时引入的,又经自己培育了26代。2命名标准:书写品系命名符号要写全,应使用公布的全称,不能随便缩写(这里指的是写论文报告,在材料方法一栏里一定要把品系命名符号写全。这样才能说明所指的是哪个品系或亚系)。例如,C57这个缩写可意味着七、八个特征不同的品系(如C57BL及其亚系6个,C57BR/cdJ,C57L)。只写C

35、57BL就包括有几个特征不同的亚系(如C57BL/1,C57B/6J、C57BL/6N、C57BL/10J等)。所以,若只写C57或C57BL都是品系名称未书写完全。同样,只写CBA亦为不确切的书写法,因为它也有若干个特性不同的亚系,如CBA/J是有视网膜退变基因的,而CAB/ca则没有这种基因,两者对放射线的敏感性也不一样,组织相容性也不同,至少有5个位点不同的。国际上公认的品系缩写:已公布的品系缩写有:AKR-AK,BALB/c-C,CBA-CB,C3H-C3,C57BL-B,C57BL/6-B6,C57BL/10-B10,C57BR-BR,C57L-L,DBA/1-D1,DBA/2-D2

36、,HRS/J-HR,R-R3。 品系符号的优先权:任何品系或亚系命名均应参照国际命名委员会的规则命名,如果出现两品系命名符号相同,则保留先正式公布者,并以发表Mouse News Letter(小鼠新闻通讯)或Inbred Strani of Mice(近交系小鼠)两个刊物上的品系灵为准。但一些著名的、国际广泛使用的品系则不在此限。 亚亚系的命名法:A亚系(Substrain)是由同一个近交系分离出来的具有各不相同特性的品系。亚系可由下列途径形成: a在同一研究室里,从近交品系中分离出来,从兄妹交配繁殖达819代之后分开饲养,分开后不与其它品系混交,再继续兄妹或亲子近交12代以上者。如此可获得

37、具有一定特殊性状的品系。b一个近交品系从一个研究机构或研究者转送到另一个机构或研究者哪里,经相当代数饲养,并与其它品系混交者。c当发现有某些基因变异时,可培育成具有某些特殊性状的亚系动物。B亚系的命名表示方法: a在原亲本品系名称的后面加一条斜线“/”,再在斜线下标上适当的亚系符号,亚系符号可分为两类。b一类亚系符号是用研究人员或研究机构名称的缩写英文字母,第一个字母须大写,随后字母要小写。(a)用研究人员名称的缩写字母表示,如A/He,这里,He即做为亚系符号,He是人名Heston的缩写,即美国国立肿瘤研究所WEHeston博士,A/He可称为A系的Heston亚系。(b)用研究机构名称的

38、缩写字母表示,如A/jax或J,Jax或J为美国著名的肿瘤研究机构Jakson实验室。(c)老亚系中出现新亚系,即当一个亚系从一地方迁移到另一个地方,即被另外一个人培育而成新的亚系时,最好老名也保留,可在老亚系符号后面加一新亚系符号。如YBR/HeW;就是将YBR小鼠的Heston亚系,迁移到Wilson处而成的一个新亚系。这样就能通过命名表示系发展的历史和变迁顺序。 c另一类亚系符号是用阿拉拍数或小写英文字母作为亚系的符号。 (a)用阿拉拍数字表示:一般用于一个品系或亚系分离形成两个亚系或两个新亚系,并仍在一个实验室饲养,可在原品系符号末尾用数字作为亚系符号,其前可加(也可不加)斜线,但一般

39、都加斜线,如A/HeCrgl/1及A/HeCrgl/2,这是美国加利福尼亚大学癌肿研究遗传实验室在同一研究室里形成的两个亚系,以1和2为新亚系的区分。 (b)用小写英文字母表示:当一个品系(或亚系),分离成两个亚系(或新系)而远未达到基本近交繁殖以前,其符号可用小写英文字母表示。如C57BR/a和C57BR/cd,这两个亚系分别是在全同胞交配到第9代和第13代分离时而命名的,如果一个品系(或亚系)分离形成的两个亚系(或两个新亚系),兄妹交配达20代以上者,就不要用数字或小写字母来命名。纵然有少数例子,如DBA/1和DBA/2,因其在国际上已被广泛沿用,算是例外。小鼠的生物学和解剖学特性一、生物

40、学特性和解剖生理特点及其在生物1小鼠属于脊椎动物门,哺乳纲,啮齿目,鼠科,小鼠属动物。2成熟早,繁殖力强。小鼠67周龄时性成熟,雌性3550日龄,雄性4560日龄;体成熟雌性为6575日龄,雄性为7080日龄;性周期为45天,妊娠期为1921天;哺乳期为2022天;特别有产后发情(Post Partum Oestrus)便于繁殖的特点,一次排卵1023个(视品种而定),每胎产仔数为815头,一年产仔胎数610胎,属全年、多发情性动物,繁殖率很高,生育期为一年。3体形小,易于饲养管理。小鼠是啮齿目实验动物中较小型的动物,一只小鼠出生时1.5克左右,哺乳一月后可达1215克,哺乳、饲养1.52月即

41、可达20克以上,可供实验需要,在短时间内可提供大量的实验动物。饲料消耗量少,一只成年小鼠的食料量为48克/天,饮水量47毫升/天,排粪量1.42.8克/天,排尿量13毫升/天,需要的饲养条件也较简单,因个体小,可节省饲养场地。4性情温顺,胆小怕惊。小鼠经长期的培育,在用于实验研究时,性情温顺,易于抓捕,不会主动咬人,但在雌鼠哺乳期间或雄鼠打架时“捉弄”则会咬人,一般很少相互斗架,操作起来很方便,是理想的实验动物。小鼠在罐、盒内饲养时,是很温顺的,但让其到罐外,很快就恢复到处乱窜的野性。雌鼠吃食仔鼠与其胆小怕惊有关。5对外来刺激极为敏感。对于多种毒素和病原体具有易感性,反应极为灵敏,如百万分之一

42、的破伤风毒素能使小鼠死亡,这是其他实验动物所不能比拟的。对致癌物质也很敏感,自发性肿瘤多。6便于提供同胎和不同品系动物。可根据实验要求选择不同品系或同胎小鼠做实验,也可选择同一品种(或品系)、同年龄、同体重、同性别的小鼠做实验,由于动物遗传均一,个体差异小,实验结果精确可靠。7喜居于光线暗的安静环境,习于昼状夜动,喜欢啃咬。小鼠白天活动较少,夜间却十分活跃,互相追逐配种,忙于觅食饮水,为此夜间应备有饲料和饮水。8体小娇嫩,不耐饥饿,不耐冷热,对环境的适应性差。对疾病的抵抗力也差,因而遇到传染病时往往会发生成群死亡。如果饲料中断和饮水中断会发生休克,恢复后对体质会带来严重损害。特别怕热,一出汗就

43、易得病死亡,如果饲料温度32时,常会造成小鼠死亡。9成雌鼠在动情周期不同级段,阴道粘膜可发生典型变化,根据阴道涂片的细胞学改变,可以推断卵巢功能的周期性变化。成年雌鼠交配后1012小时阴道口有白色的阴道栓,这是受孕的标志,小鼠较为明显、大鼠和豚鼠不明显。小鼠的动情期往往开始于晚间,最普遍的是在晚10点到晨1点,偶尔在早晨17点,很少在白天,大鼠也类似,但较小鼠稍早,一般在下午410点。10小鼠面部尖突,嘴脸前部有长长的触手,耳耸立呈半圆形,眼大鲜红,生有较长的尾,尾部有模列并覆有环状角质的小表皮鳞,其数量小于200片。11小鼠发育成熟时体长小于15.5cm,体重雌性为1840克,雄性为2049

44、克,双子宫型,胸部有3对乳头,鼠蹊部有2对乳头,有胆囊,胃容量小,肠内能合成维生素C,小鼠的染色体为20对,寿命23年。12小鼠的体温38(3739),呼吸频率163(84230)次/分,心跳频率625(470780)次/分,耗氧量1530mm2/g活体重,通气量24(1136)ml/分,潮气量0.15(0.090.23)ml,收缩压113(95125)mmHg、舒张压81(6790)mmHg,红细胞总数9.3(7.712.5)百万/mm3,血红蛋白14.8(1019)g/100ml,白细胞总数8.0(612)千/mm3,总蛋白4.8(4.25.5)g%。13小鼠有多种手色,不能都叫小白鼠,一

45、般通称为小鼠。小鼠手色有白色(albino),鼠灰色(ayouti)、黑色(black)、棕色(brown)、黄色(yellow)、巧克力色(chocolate)、肉桂色(cinnamon)、淡色(dilution)、白斑(piebeld)等。大鼠的生物学特性和解剖生理特点1大鼠性哺乳钢,啮齿目,鼠科,大鼠属动物。2繁殖快。大鼠2月龄时性成熟,性周期4天左右,妊娠期20(1922),哺乳期21天,每天产仔平均8只,为全年、多发情性动物。3喜啃咬、夜间活动、肉食,白天喜欢挤在一起休息,晚上活动大,吃食多,因此白天除实验必须抓取外,一般不要抓弄它。食性广泛,喜吃各种煮熟的动物肉。对光照较敏感。4性

46、情较凶猛、抗病力强。大鼠门齿较长,激恕、袭击抓捕时易咬手,尤其是哺乳期的母鼠更凶些,常会主动咬工作人员喂饲时伸入鼠笼的手。对外环境适应性强,成年鼠很少患病。一般情况下侵袭性不强,可在一笼内大批饲养,也不会咬人。5无胆囊:大鼠、鸽、鹿、马、驴、象等动物没有胆囊,它们的总胆肝管括约肌的阻力很少,肝分泌的胆汁通过总胆管进入十二指肠,受十二指肠端括约肌的控制。6不能呕吐:因此药理实验时应予注意。7垂体一肾上腺系统功能发达,应激反应灵敏。行为表现多样,情绪敏感。8视觉、嗅觉较灵敏,做条件反射等实验反应良好,但对许多药物易产生耐药性。9大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感,但对强心甙的作用较猫敏感性低671倍

47、。10肝脏再生能力强,切除6070%的肝叶仍有再生能力。11对营养、维生素、氨基酸缺乏敏感,可发生典型的缺乏症状。体内可以合成维生素。12对炎症反应灵敏。它的眼角膜无血管。13生长发育期长,长骨长期有骨骺线存在,不骨化。14成年雌鼠在动情周期不同阶段,阴道粘膜可发生典型变化,采用阴道涂片法(Yaginal Smear Test)来观察性周期中阴道上皮细胞的变化,可推知性周期各个时期中卵巢、子宫状态与垂体激素的变动。动情周期:大鼠96120小时15大鼠心电图中没有S-T段,甚至有的导联也不见T波,如有T波也是与S波紧挨着,或在R波降支上即开始,以致看不到等电线的S-T段。但心电图其他成分稳定,重

48、复性好。豚鼠以上较大的动物均有明显的S-T段,在选择动物品种时应以注意。16大鼠垂体较脆弱地附着在漏斗下部,不需要很大的吸力就可以除去而不破坏鞍膈和脑膜,适宜于制作去垂体模型。大鼠也很适于作肾上腺和卵巢等内分泌腺切除手术。17大鼠肠道较短,盲肠较大,但盲肠功能不发达。不耐饥饿,肠内能合成维生素C。双子宫。胸部和鼠蹊部各有三对乳头。胰腺十分分散,位于胃和十二指肠弯曲处。染色体为21对,寿命34年。18大鼠的体温39(38.539.5),心跳频率475(370580)次/分,呼吸频率85.5(66114)次/分,通气量7.3(5-10.1)ml/分,潮气量0.86(0.61.25)ml,耗氧量2000mm3/g体重,麻醉时收缩压116(88138)mmHg红

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