Wnt5a激活c-Jun氨...KGN人颗粒细胞增殖和自噬_马亚博.pdf

论论著著文文章章编编号号：（）激激活活 氨氨基基末末端端激激酶酶（）促促进进 人人颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖和和自自噬噬马马亚亚博博，谢谢贤贤国国，原原筱筱潭潭，刘刘新新峰峰，徐徐金金瑞瑞，杨杨易易，（宁宁夏夏大大学学：西西部部特特色色生生物物资资源源保保护护与与利利用用教教育育部部重重点点实实验验室室，生生命命科科学学学学院院微微生生物物与与分分子子生生物物学学系系，宁宁夏夏 银银川川 ）收收稿稿日日期期：；接接受受日日期期：基基金金项项目目：国国家家重重点点研研发发计计划划（）；国国家家自自然然科科学学基基金金（）作作者者简简介介：马马亚亚博博（），女女，宁宁夏夏固固原原人人，硕硕士士研研究究生生 ：；：同同为为第第一一作作者者通通讯讯作作者者，杨杨易易，：摘摘 要要 目目的的 探探究究无无翅翅基基因因 （）对对 人人颗颗粒粒细细胞胞自自噬噬的的作作用用。方方法法 采采用用 重重组组蛋蛋白白（）、抑抑制制剂剂 和和 处处理理 人人颗颗粒粒细细胞胞并并设设置置对对照照组组，法法检检测测 蛋蛋白白表表达达水水平平，免免疫疫荧荧光光细细胞胞化化学学染染色色法法观观察察 组组和和抑抑制制剂剂 组组中中 蛋蛋白白和和颗颗粒粒细细胞胞特特异异性性标标志志物物叉叉头头盒盒 （）的的表表达达共共定定位位。法法检检测测 细细胞胞的的增增殖殖能能力力，法法检检测测 及及其其抑抑制制剂剂 对对 细细胞胞自自噬噬的的影影响响以以及及 氨氨基基末末端端激激酶酶（）和和活活化化 细细胞胞核核因因子子 （）蛋蛋白白的的表表达达变变化化。结结果果 与与对对照照组组相相比比，组组 蛋蛋白白水水平平增增加加，促促进进细细胞胞增增殖殖，微微管管相相关关蛋蛋白白 轻轻链链 （）、蛋蛋白白表表达达增增加加，核核孔孔蛋蛋白白 （）蛋蛋白白表表达达降降低低；组组 蛋蛋白白水水平平降降低低，抑抑制制人人颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖，、和和 蛋蛋白白表表达达降降低低，表表达达增增加加。结结论论 激激活活 促促进进 人人颗颗粒粒细细胞胞的的增增殖殖和和自自噬噬。关关键键词词 无无翅翅基基因因 （）；人人颗颗粒粒细细胞胞；细细胞胞自自噬噬；细细胞胞增增殖殖 中中图图分分类类号号 ，文文献献标标志志码码 ，：（），（），（），（）（），（），（），；家家族族（也也称称为为无无翅翅相相关关 整整合合家家族族）是是一一大大类类分分泌泌性性脂脂质质修修饰饰的的信信号号糖糖蛋蛋白白，它它们们在在物物种种间间高高度度保保守守，到到目目前前为为止止，已已在在人人类类和和小小鼠鼠中中鉴鉴定定出出 种种不不同同的的 配配体体 。胚胚胎胎发发育育的的许许多多方方面面，包包括括血血管管生生成成，都都受受到到 家家族族成成员员的的调调控控 。家家族族的的突突变变与与人人类类疾疾病病有有关关，如如癌癌症症、阿阿尔尔兹兹海海细胞与分子免疫学杂志（），（）DOI:10.13423/ki.cjcmi.009473默默症症等等。非非经经典典 分分子子 是是非非经经典典 信信号号的的代代 表表 性性 配配 体体，平平 面面 细细 胞胞 极极 性性 途途 径径（，）和和 途途径径是是 下下游游途途径径中中最最具具特特征征的的 。途途径径通通过过激激活活 氨氨基基末末端端激激酶酶（，）来来调调节节细细胞胞极极性性和和形形态态发发生生活活动动 。途途径径通通过过激激活活磷磷脂脂酶酶 、蛋蛋白白激激酶酶 （，）和和钙钙调调蛋蛋白白依依赖赖性性蛋蛋白白激激酶酶 （，），刺刺激激钙钙敏敏感感酶酶进进而而进进一一步步激激活活活活化化 细细胞胞核核因因子子（，）转转录录因因子子蛋蛋白白活活化化，从从而而调调节节细细胞胞黏黏附附和和运运动动 。自自噬噬是是一一种种降降解解过过程程，异异常常的的细细胞胞成成分分，如如蛋蛋白白质质聚聚集集和和损损坏坏的的细细胞胞器器，被被包包裹裹在在自自噬噬体体的的双双膜膜结结构构中中，与与溶溶酶酶体体融融合合形形成成自自噬噬溶溶酶酶体体，物物质质被被降降解解 。超超过过 个个自自噬噬相相关关基基因因（，）参参与与过过程程的的每每一一个个步步骤骤。其其中中微微管管相相关关蛋蛋白白 轻轻链链 （，）是是酵酵母母 的的哺哺乳乳动动物物同同源源物物，被被认认为为是是自自噬噬的的关关键键调调控控因因子子，参参与与自自噬噬膜膜的的生生长长、自自噬噬物物的的识识别别、自自噬噬体体与与溶溶酶酶体体的的融融合合等等几几个个步步骤骤 。核核孔孔蛋蛋白白 （，）也也是是常常见见的的自自噬噬蛋蛋白白，介介导导特特异异性性自自噬噬底底物物的的选选择择性性识识别别和和降降解解，包包括括蛋蛋白白聚聚集集物物、胞胞内内细细菌菌等等特特异异性性蛋蛋白白。底底物物运运送送到到溶溶酶酶体体后后，与与底底物物共共同同降降解解 。有有研研究究发发现现，高高 和和低低 联联蛋蛋白白（）会会导导致致黑黑素素瘤瘤细细胞胞自自噬噬增增加加 。近近年年来来，辅辅助助生生殖殖技技术术的的发发展展，在在一一定定程程度度上上缓缓解解了了不不孕孕不不育育率率，但但女女性性生生殖殖疾疾病病在在临临床床上上仍仍未未取取得得有有效效成成果果，如如何何利利用用 信信号号通通路路调调控控机机制制预预防防和和治治疗疗卵卵巢巢疾疾病病是是未未来来主主要要的的研研究究方方向向之之一一 。研研究究发发现现，典典型型的的 信信号号在在前前颗颗粒粒细细胞胞（，）向向颗颗粒粒细细胞胞（，）的的过过渡渡中中发发挥挥着着重重要要作作用用，这这是是支支持持卵卵母母细细胞胞生生长长的的重重要要步步骤骤 。等等 发发现现卵卵巢巢功功能能相相关关的的特特定定生生长长因因子子可可能能通通过过 在在卵卵巢巢中中发发挥挥作作用用。颗颗粒粒细细胞胞在在生生殖殖中中至至关关重重要要，原原始始卵卵泡泡的的形形成成需需要要卵卵母母细细胞胞和和颗颗粒粒细细胞胞的的参参与与，两两种种细细胞胞的的同同步步化化以以及及两两者者之之间间的的相相互互作作用用决决定定了了卵卵母母细细胞胞的的存存活活和和功功能能 。人人颗颗粒粒细细胞胞肿肿瘤瘤细细胞胞系系，保保持持了了 的的大大部部分分正正常常生生理理特特性性，由由于于其其在在培培养养过过程程中中良良好好的的生生长长能能力力，所所以以 细细胞胞通通常常被被用用于于研研究究 的的分分子子机机制制和和功功能能 。材材料料和和方方法法 材材料料 人人卵卵巢巢颗颗粒粒细细胞胞来来自自 细细胞胞库库。培培养养基基、胰胰蛋蛋白白酶酶、胎胎牛牛血血清清（，）购购自自 公公司司；青青霉霉素素、链链霉霉素素购购自自 公公司司；重重组组 （，）购购自自 公公司司；抑抑制制剂剂 分分子子式式 ，购购自自 公公司司；拮拮抗抗剂剂抑抑制制剂剂 即即 叔叔丁丁氧氧 羟羟 基基 六六 肽肽 ，分分子子式式 ，购购自自 公公司司；兔兔抗抗无无翅翅型型 整整合合位位点点家家族族成成员员 （，）抗抗体体、兔兔抗抗 抗抗体体、兔兔抗抗 抗抗体体、兔兔抗抗叉叉头头盒盒 （，）抗抗体体、兔兔抗抗 抗抗体体、异异硫硫氰氰酸酸荧荧光光素素（，）标标记记的的山山羊羊抗抗小小鼠鼠 （）、四四甲甲基基异异硫硫氰氰酸酸罗罗丹丹明明（，）标标记记的的山山羊羊抗抗兔兔 （）购购自自 公公司司；兔兔抗抗 抗抗体体、兔兔抗抗 抗抗体体购购自自 公公司司；小小鼠鼠抗抗 抗抗体体购购自自 公公司司；辣辣 根根 过过 氧氧 化化 物物 酶酶（，）标标记记的的山山羊羊抗抗兔兔 购购自自北北京京中中杉杉金金桥桥生生物物科科技技有有限限公公司司；购购自自 公公司司；二二辛辛可可宁宁酸酸（，）蛋蛋白白定定量量检检测测试试剂剂盒盒购购自自凯凯基基生生物物公公司司；多多聚聚甲甲醛醛固固定定液液购购自自北北京京索索莱莱宝宝科科技技有有限限公公司司；购购自自 公公司司；驴驴血血清清购购自自北北京京庄庄盟盟国国际际生生物物基基因因科科技技有有限限公公司司；试试剂剂盒盒购购自自 公公司司。方方法法 细细胞胞复复苏苏、培培养养、传传代代 冻冻存存的的 细细胞胞从从 取取出出，置置于于 温温水水中中快快速速摇摇晃晃直直至至完完全全溶溶解解。离离心心后后，用用 清清洗洗，置置于于 含含 、青青霉霉素素、链链霉霉素素的的 培培养养基基中中培培养养。当当细细胞胞生生长长至至 左左右右时时，用用 胰胰蛋蛋白白酶酶消消化化 细细胞胞，离离心心并并用用 清清洗洗，更更换换新新的的培培养养基基，于于 ，培培养养箱箱中中培培养养。法法检检测测 细细胞胞 、和和 蛋蛋白白表表达达水水平平 取取 细细胞胞，按按每每孔孔 个个细细胞胞接接种种 孔孔板板；待待细细胞胞贴贴壁壁，设设置置对对照照组组、组组、组组和和 组组 。培培养养 后后，弃弃去去培培养养基基并并用用 洗洗涤涤 次次，再再用用全全蛋蛋白白提提取取试试剂剂盒盒抽抽提提细细胞胞蛋蛋白白，、离离心心 期 马亚博，等 激活 氨基末端激酶（）促进 人颗粒细胞增殖和自噬 ，收收集集上上清清。用用 蛋蛋白白定定量量检检测测试试剂剂盒盒检检测测蛋蛋白白浓浓度度，向向上上述述蛋蛋白白样样品品中中加加入入 上上样样缓缓冲冲液液，沸沸水水浴浴 ，蛋蛋白白样样品品 保保存存。按按照照每每孔孔 蛋蛋白白样样品品进进行行电电泳泳，转转膜膜，室室温温下下封封闭闭 ，洗洗膜膜后后，分分别别加加入入兔兔抗抗 多多克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），孵孵育育过过夜夜；洗洗膜膜，加加入入 标标记记的的山山羊羊抗抗兔兔 （），室室温温孵孵育育 ；经经 洗洗膜膜后后，使使用用 显显色色液液（）进进行行显显色色。采采用用 软软件件分分析析蛋蛋白白吸吸光光度度（）值值，计计算算蛋蛋白白相相对对表表达达量量。免免疫疫荧荧光光细细胞胞化化学学染染色色检检测测不不同同处处理理下下 细细胞胞的的 表表达达 取取 细细胞胞，按按每每孔孔 个个细细胞胞接接种种 孔孔板板。待待细细胞胞贴贴壁壁，设设置置对对照照 组组、组组、组组。培培养养 ，弃弃去去培培养养基基并并用用 洗洗涤涤 次次，每每次次 ；用用 多多聚聚甲甲醛醛固固定定液液固固定定细细胞胞 ；洗洗涤涤 次次，每每次次 ，使使用用 通通透透细细胞胞约约 ；经经 洗洗涤涤后后，加加入入 驴驴血血清清室室温温封封闭闭 ；移移去去封封闭闭液液后后加加入入小小鼠鼠抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），兔兔抗抗 单单克克隆隆抗抗体体（），湿湿盒盒 孵孵育育过过夜夜；经经 洗洗涤涤后后，分分别别加加入入 标标记记的的山山羊羊抗抗小小鼠鼠 （）（）或或 标标记记的的山山羊羊抗抗兔兔 （）（），避避 光光 孵孵 育育 ；洗洗 涤涤 后后，加加 入入 （），室室温温避避光光孵孵育育 ，洗洗涤涤后后，荧荧光光显显微微镜镜下下观观察察并并拍拍照照。法法检检测测 对对 细细胞胞增增殖殖的的影影响响 胰胰蛋蛋白白酶酶消消化化 细细胞胞，细细胞胞悬悬液液用用 清清洗洗 次次，将将细细胞胞接接种种于于 孔孔板板，每每孔孔 完完全全培培养养基基，加加入入 个个颗颗粒粒细细胞胞，放放入入培培养养箱箱中中培培养养。待待细细胞胞贴贴壁壁后后（），设设置置 组组、处处理理组组、对对照照组组、空空白白组组；对对照照组组加加入入细细胞胞悬悬液液和和 试试剂剂，空空白白组组只只加加入入完完全全培培养养基基，每每组组设设 个个复复孔孔。培培养养箱箱培培养养 ，取取出出细细胞胞每每孔孔加加入入 溶溶液液，孵孵育育 ，酶酶标标仪仪测测定定 处处的的吸吸光光度度（）值值。统统计计学学分分析析 采采用用 软软件件分分析析蛋蛋白白吸吸光光度度（）值值，所所有有数数据据均均采采用用 统统计计软软件件进进行行统统计计学学分分析析。颗颗粒粒细细胞胞中中 、和和 蛋蛋白白表表达达水水平平均均以以 表表示示，多多组组间间样样本本均均数数比比较较采采用用单单因因素素方方差差分分析析，组组间间均均数数两两两两比比较较采采用用 法法，表表示示差差异异有有统统计计学学意意义义。结结果果 处处理理增增加加 细细胞胞 表表达达，抑抑制制剂剂处处理理则则降降低低人人颗颗粒粒细细胞胞 表表达达 （）及及其其抑抑制制剂剂 （）和和 （）处处理理相相同同数数 个个 人人颗颗粒粒细细胞胞，处处理理时时间间为为 ，法法检检测测 蛋蛋白白表表达达结结果果，处处理理组组蛋蛋白白表表达达水水平平高高于于对对照照组组，和和 组组均均低低于于对对照照组组（，图图 、）。处处理理组组 蛋蛋白白表表达达水水平平较较高高，处处理理组组蛋蛋白白表表达达水水平平降降低低，所所以以，本本研研究究采采用用免免疫疫荧荧光光细细胞胞化化学学染染色色法法验验证证。是是颗颗粒粒细细胞胞的的特特异异性性标标志志物物，本本研研究究采采用用 与与 的的共共定定位位显显示示颗颗粒粒细细胞胞 的的表表达达。结结果果显显示示，处处理理的的 细细胞胞数数为为 个个，蛋蛋白白表表达达 增增 加加，处处 理理 组组 蛋蛋 白白 表表 达达 减减 少少（图图 ），与与 结结果果一一致致。鉴鉴于于 和和 均均作作为为 的的抑抑制制剂剂，能能有有效效的的抑抑制制 的的活活性性，抑抑制制效效果果比比 更更强强，所所以以后后续续没没有有再再使使用用 。：法法检检测测 细细胞胞 的的蛋蛋白白表表达达；：细细胞胞 的的 蛋蛋 白白 水水 平平 的的 半半 定定 量量 分分 析析 ：组组；：对对照照组组；：处处理理组组；：处处理理组组 ：颗颗粒粒细细胞胞 与与 的的表表达达（免免疫疫荧荧光光细细胞胞化化学学染染色色，）图图 蛋蛋白白和和抑抑制制剂剂处处理理对对 人人颗颗粒粒细细胞胞 蛋蛋白白表表达达的的影影响响细胞与分子免疫学杂志（），（）促促进进人人颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖和和自自噬噬，抑抑制制剂剂处处理理则则结结果果相相反反 促促进进人人颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖，相相反反，抑抑制制剂剂 抑抑制制该该细细胞胞增增殖殖（图图 ）。和和抑抑制制剂剂 处处理理相相同同细细胞胞数数（个个）的的 人人颗颗粒粒细细胞胞 ，法法检检测测自自噬噬蛋蛋白白 表表达达，与与对对照照组组相相比比，处处理理组组 蛋蛋白白表表达达增增加加、表表达达降降低低，处处理理则则结结果果相相反反（，图图 、）。说说明明 促促进进 人人颗颗粒粒细细胞胞自自噬噬，抑抑制制剂剂 则则抑抑制制颗颗粒粒细细胞胞自自噬噬。：法法检检测测 和和抑抑制制剂剂对对 人人卵卵巢巢颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖的的影影响响；：法法检检测测 细细胞胞 和和 蛋蛋白白表表达达；：细细胞胞 和和 蛋蛋白白水水平平的的半半定定量量分分析析 ：处处理理组组；：对对照照组组；：处处理理组组 图图 和和抑抑制制剂剂处处理理对对 细细胞胞增增殖殖和和自自噬噬的的影影响响 和和抑抑制制剂剂处处理理人人颗颗粒粒细细胞胞对对 表表达达的的影影响响 及及其其抑抑制制剂剂 和和 处处理理相相同同细细胞胞数数（个个）的的 人人颗颗粒粒细细胞胞 ，法法检检测测 、蛋蛋白白表表达达。结结果果显显示示，与与对对照照组组相相比比，处处理理组组 蛋蛋白白表表达达增增加加，和和 组组 、蛋蛋白白表表达达均均降降低低（，图图 ）。：法法检检测测 细细胞胞 、蛋蛋白白表表达达；：细细胞胞 、蛋蛋白白水水平平的的半半定定量量分分析析 ：处处理理组组；：对对照照组组；：处处理理组组；：处处理理组组 ，图图 和和抑抑制制剂剂处处理理对对 人人颗颗粒粒细细胞胞 、蛋蛋白白表表达达的的影影响响 讨讨论论 基基因因编编码码一一大大家家族族富富含含半半胱胱氨氨酸酸的的分分泌泌糖糖蛋蛋白白，具具有有脂脂质质修修饰饰作作用用。在在人人类类和和小小鼠鼠，家家族族蛋蛋白白包包含含至至少少 个个高高度度保保守守的的成成员员，并并在在身身体体发发育育和和稳稳态态中中发发挥挥重重要要作作用用 。信信号号可可大大致致分分为为两两类类：经经典典的的 联联蛋蛋白白（，）途途径径和和非非典典型型途途径径。是是 家家族族的的一一个个非非经经典典信信号号成成员员。人人类类 基基因因位位于于 ，在在氨氨基基酸酸水水平平上上与与小小鼠鼠 的的同同源源性性超超过过 ，与与爪爪蟾蟾 的的同同源源性性超超过过 。在在发发育育过过程程中中发发挥挥重重要要作作用用 。信信号号失失调调与与癌癌细细胞胞的的迁迁移移和和侵侵袭袭性性增增加加有有关关，也也与与胃胃癌癌、乳乳腺腺癌癌和和鼻鼻咽咽癌癌的的转转移移潜潜能能有有关关 。卵卵泡泡是是卵卵巢巢的的基基本本功功能能单单位位，由由卵卵泡泡膜膜细细胞胞和和颗颗粒粒细细胞胞组组成成，颗颗粒粒细细胞胞在在卵卵泡泡期期产产生生雌雌激激素素，在在排排卵卵后后产产生生孕孕激激素素，其其紧紧紧紧围围绕绕卵卵母母细细胞胞并并形形成成卵卵丘丘和和放放射射冠冠内内细细胞胞层层，颗颗粒粒细细胞胞还还参参与与卵卵母母细细胞胞的的双双向向代代谢谢物物交交换换，形形成成缝缝隙隙连连接接，这这对对于于卵卵母母细细胞胞的的适适当当成成熟熟和和颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖都都至至关关重重要要 。女女性性不不孕孕症症是是一一个个世世界界性性的的问问题题，影影响响着着数数以以百百万万计计的的女女性性。它它可可能能由由各各种种因因素素和和生生殖殖系系统统疾疾病病引引起起，尤尤其其是是影影响响卵卵巢巢的的疾疾病病，包包括括多多囊囊卵卵巢巢综综合合征征、卵卵巢巢癌癌和和卵卵巢巢早早衰衰等等。信信号号已已被被发发现现在在妇妇科科恶恶性性肿肿瘤瘤的的许许多多致致癌癌过过程程中中发发挥挥重重要要作作用用，包包括括肿肿瘤瘤发发生生、转转移移、复复发发和和化化疗疗耐耐药药，信信号号通通路路有有可可能能成成为为有有效效治治疗疗的的目目标标，从从而而改改善善患患者者的的预预后后 。研研究究发发现现，期 马亚博，等 激活 氨基末端激酶（）促进 人颗粒细胞增殖和自噬 脊脊椎椎蛋蛋白白 （，）在在卵卵母母细细胞胞成成熟熟过过程程中中，通通过过调调节节 信信号号传传导导来来促促进进卵卵母母细细胞胞的的成成熟熟。表表明明 和和 信信号号通通路路是是卵卵泡泡发发育育所所必必需需的的 。等等 发发现现 蛋蛋白白（，）和和 信信号号显显著著干干预预猪猪卵卵母母细细胞胞的的成成熟熟，信信号号机机制制可可能能是是猪猪卵卵母母细细胞胞成成熟熟和和发发育育的的重重要要调调节节器器。自自噬噬是是一一个个进进化化上上保保守守的的过过程程，通通过过向向溶溶酶酶体体传传递递降降解解货货物物如如易易聚聚集集的的蛋蛋白白质质、病病原原体体、受受损损的的细细胞胞器器和和大大分分子子。这这个个过过程程涉涉及及到到被被称称为为自自噬噬体体的的双双膜膜结结构构的的形形成成，细细胞胞自自噬噬体体数数量量是是通通过过对对细细胞胞内内 点点状状点点数数进进行行定定量量，或或用用免免疫疫细细胞胞化化学学或或免免疫疫组组织织化化学学法法对对内内源源性性 进进行行定定量量，或或荧荧光光标标记记 的的免免疫疫荧荧光光。这这些些类类型型的的分分析析方方法法已已用用于于化化学学和和遗遗传传筛筛选选，并并用用于于评评估估细细胞胞和和体体内内在在不不同同条条件件下下的的自自噬噬状状态态。通通过过这这种种分分析析，如如果果自自噬噬体体形形成成增增加加或或降降解解受受损损，阳阳性性信信号号的的数数量量或或总总面面积积可可能能增增加加。但但是是，假假如如自自噬噬体体生生物物发发生生受受损损时时，阳阳性性信信号号及及其其面面积积相相应应减减少少 。作作为为选选择择性性自自噬噬受受体体和和信信号号支支架架，参参与与多多种种生生理理过过程程的的调调节节，包包括括氧氧化化应应激激防防御御和和细细胞胞代代谢谢。作作为为一一种种自自噬噬受受体体，通通过过自自噬噬溶溶酶酶体体途途径径将将错错误误折折叠叠和和受受损损的的蛋蛋白白质质组组装装成成聚聚集集体体进进行行大大量量降降解解。自自噬噬及及其其相相关关基基因因和和蛋蛋白白质质在在卵卵泡泡发发育育中中起起着着至至关关重重要要的的作作用用，证证明明调调控控颗颗粒粒细细胞胞增增殖殖与与自自噬噬的的机机制制是是提提高高生生育育力力的的重重要要手手段段 。在在颗颗粒粒细细胞胞中中的的自自噬噬与与增增殖殖情情况况尚尚不不清清楚楚，但但其其在在其其他他细细胞胞中中的的自自噬噬情情况况已已有有所所研研究究。张张婵婵娟娟等等 研研究究证证明明，氧氧化化型型低低密密度度脂脂蛋蛋白白（，）可可激激活活巨巨噬噬细细胞胞自自噬噬，其其主主要要受受 蛋蛋白白激激酶酶 （，）信信号号通通路路调调控控。研研究究发发现现，高高 和和低低 的的黑黑素素瘤瘤细细胞胞中中自自噬噬增增强强 。研研究究显显示示，微微小小 （，）通通过过调调节节 信信号号通通路路促促进进肺肺鳞鳞癌癌（，）细细胞胞增增殖殖和和细细胞胞周周期期转转变变 。颗颗粒粒细细胞胞在在原原始始卵卵泡泡形形成成和和卵卵泡泡发发育育等等生生理理作作用用中中起起着着至至关关重重要要的的作作用用。本本实实验验以以此此为为切切入入点点，利利用用免免疫疫印印迹迹和和免免疫疫荧荧光光实实验验探探究究 对对人人卵卵巢巢颗颗粒粒细细胞胞的的自自噬噬与与增增殖殖作作用用。自自噬噬蛋蛋白白 表表达达量量增增加加，蛋蛋白白表表达达量量下下降降，表表明明 促促进进人人颗颗粒粒细细胞胞 自自噬噬，该该过过程程可可能能通通过过激激活活 通通路路来来完完成成。参参考考文文献献：，（）：，（），（）：，（）：，：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：马马亚亚博博，吴吴霜霜，马马慧慧，等等 信信号号通通路路在在卵卵泡泡发发育育中中的的调调控控研研究究 宁宁夏夏大大学学学学报报（自自然然科科学学版版），（）：，细胞与分子免疫学杂志（），（）（），（）：，（）：，（）：蔡蔡晗晗 转转录录因因子子 调调控控小小鼠鼠原原始始卵卵泡泡形形成成的的机机制制研研究究 中中国国农农业业大大学学，（）：，（）：陈陈琪琪，郑郑雪雪迪迪，聂聂雪雪伊伊，等等 调调节节 感感染染肺肺泡泡上上皮皮细细胞胞自自噬噬的的作作用用研研究究 中中国国病病原原生生物物学学杂杂志志，（）：，（）：，（）：，：，：，（）：，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：张张婵婵娟娟，杜杜可可，敖敖宝宝学学，等等 信信号号通通路路介介导导氧氧化化低低密密度度脂脂蛋蛋白白诱诱导导的的巨巨噬噬细细胞胞自自噬噬 生生物物化化学学与与生生物物物物理理进进展展，（）：，（）：，（）：期 马亚博，等 激活 氨基末端激酶（）促进 人颗粒细胞增殖和自噬