细胞质膜翟中和细胞生物学.ppt

本章内容 细胞胞质膜的膜的结构模型构模型 生物膜基本特征与功能生物膜基本特征与功能 膜骨架膜骨架1.细胞胞质膜膜曾曾称称细胞胞膜膜：是是指指围绕在在细胞胞最最外外层，由脂，由脂质和蛋白和蛋白质组成的生物膜。成的生物膜。生生物物膜膜：真真核核细胞胞内内部部存存在在着着由由膜膜围绕构构建建的的各各种种细胞胞器器。细胞胞内内的的膜膜系系统与与细胞胞膜膜统称称为生物膜。生物膜。2.第一第一节 细胞胞质膜的膜的结构模型构模型 一、一、生物生物膜的膜的结构模型构模型 二、二、膜脂膜脂 三、三、膜蛋白膜蛋白 3.一、生物膜的一、生物膜的结构模型构模型戈特戈特(Gorter)和格和格兰戴戴尔(Grendel)(1925年年),脂双脂双层模型模型 戴夫森戴夫森(Davson)和丹尼利和丹尼利(Daniellie)(1935年年),三明治模型三明治模型罗伯逊(Robertson)(1959年年),单位膜位膜模型模型辛格(Singer)和和尼科尔森(Nicolson)(1972年年),流流动镶嵌模型嵌模型脂筏模型脂筏模型:在生物膜上富含胆固醇,形成有序的脂相，如同“脂筏”一样,并载有各种蛋白。研究简史4.目前目前对生物膜生物膜结构的构的认识可可归纳如下：如下：(1)膜脂主要由磷脂分子构成,磷脂分子具有极性头部和非极性尾部。在水相中以疏水性非极性尾部相对、极性头部朝向水相自发形成磷脂双分子层的封闭的膜系统。(2)蛋白分子以不同的方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面，蛋白的类型、分布的不对称性及其与脂分子的协同作用赋予生物膜具有各自的特性与功能。(3)在膜蛋白与膜脂之间、膜蛋白与膜蛋白之间以及膜蛋白与膜两侧其他生物大分子之间的相互作用，在不同程度上限制了膜蛋白和膜脂的流动性。5.二、膜二、膜 脂脂、成成 分分 膜脂是生物膜的基本组成成分。主要包括：磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。、膜脂的运膜脂的运动方式方式、脂脂质体体6.、膜脂成分、膜脂成分1、磷脂磷脂：膜脂的基本成分，占整个膜：膜脂的基本成分，占整个膜质的的5050以上。以上。1.1 1.1 类型型:分分为甘油磷脂和鞘磷脂二甘油磷脂和鞘磷脂二类甘油磷脂甘油磷脂磷脂酰胆碱（卵磷脂PC）磷脂酰乙醇胺（脑磷脂PE）磷脂酰丝氨酸(PS)磷脂酰肌醇（PI）鞘磷脂鞘磷脂磷脂磷脂7.1.2 1.2 主要特征主要特征 具有一个极性具有一个极性头和两个非极性的尾和两个非极性的尾(脂肪酸脂肪酸链)（心心磷脂磷脂双双磷脂磷脂酰甘油（甘油（DPGDPG）除外）；除外）；脂肪酸碳脂肪酸碳链碳原子碳原子为偶数偶数,多数碳多数碳链由由16,1816,18或或2020个个组成；成；除除饱和脂肪酸外，和脂肪酸外，还常含有常含有 不不饱和脂肪酸和脂肪酸(如油酸如油酸)，不，不饱 和脂肪酸多和脂肪酸多为顺式，式，顺式双式双键 在在烃链中中产生生约30弯曲。弯曲。8.2、糖脂（、糖脂（Sphingolipid）：普遍存在于原核和真核：普遍存在于原核和真核细胞胞膜上膜上,占膜脂的占膜脂的5%以下；如以下；如脑苷脂、神苷脂、神经节苷脂和人的苷脂和人的ABO血型抗原。血型抗原。（由糖残基与神（由糖残基与神经酰胺胺连接）接）、膜脂成分、膜脂成分9.、膜脂成分、膜脂成分 3 3、胆固醇、胆固醇v分布：分布：胆固醇存在于动物细胞和少数植物细胞质膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。v功能：功能：调节膜的流动性，增加膜的稳定性，降低水溶性物质的通透性10.11.、膜脂的运、膜脂的运动方式方式1.沿膜平面的侧向运动 其扩散系数为10-8cm2/s,相当于每秒移动2m的距离。由于侧向运动产生分子间的换位，其交换频率在106次/s以上。侧向运动是膜脂分子的基本运动方式，具有重要的生物学意义。2.脂分子围绕轴心的自旋运动 3.脂分子尾部的摆动 脂肪酸链靠近极性头部的摆动较小，尾部摆动较大。X射线衍射分析显示，在距头部第9个碳原子以后的脂肪酸链已由较为有序变成无序状态。4双层脂分子之间的翻转运动 一般情况下翻转运动极少发生。但在细胞某些膜系统中发生的频率很高，特别是在内质网膜上，新合成的磷脂分子经几分钟后，将有半数从双层脂分子的一侧通过翻转运动转向另一侧。脂分子的运动不仅与脂分子的类型有关，也与脂分子同膜蛋白及膜周围的生物大分子之间的相互作用以及温度等环境条件有关。12.、脂、脂 质 体体 脂脂质体体是根据磷脂分子可在水是根据磷脂分子可在水相中形成相中形成稳定的脂双定的脂双层膜的膜的趋势而制而制备的人工膜。的人工膜。脂脂质体的体的类型型 脂脂质体的体的应用用13.脂脂质体的体的类型型单层脂分子脂分子铺展在水面上展在水面上时，其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面。，其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面。搅动后形成乳后形成乳浊液，即形成极性端向外而非极性端在内部的脂分子液，即形成极性端向外而非极性端在内部的脂分子团(a)(a)或形成双或形成双层脂分子的球形脂脂分子的球形脂质体体(b)(b)。球形脂。球形脂质体直径体直径为251000nm不等，控制形成条不等，控制形成条件可件可获得大小均一的脂得大小均一的脂质体，同体，同样的原理的原理还可以制可以制备平面的脂平面的脂质体膜体膜(c)。用于用于疾病治疾病治疗的脂的脂质体的示意体的示意图(d）。）。14.脂脂质体的体的应用用研究膜脂与膜蛋白及其生物学性研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质；脂脂质体中裹入体中裹入DNADNA可用于基因可用于基因转移；移；在在临床治床治疗中中,脂脂质体作体作为药物或物或酶等等载体体15.三、膜三、膜 蛋蛋 白白、膜蛋白的膜蛋白的类型型、内在膜蛋白与膜脂内在膜蛋白与膜脂结合的方式合的方式、去垢去垢剂(detergent)(detergent)16.外在外在(外周外周)膜蛋白：膜蛋白：水水溶溶性性蛋蛋白白,靠靠离离子子键或或其其它它弱弱键与与膜膜表表面面的的膜膜蛋蛋白白分分子子或或膜膜脂脂分分子子极极性性头部部非非共共价价结合，易分离。合，易分离。内在（整合）膜蛋白内在（整合）膜蛋白：水水不不溶溶性性蛋蛋白白，形形成成跨跨膜膜螺螺旋旋，与与膜膜结合合紧密密,需用去垢需用去垢剂使膜崩解后才可分离。使膜崩解后才可分离。脂脂锚定蛋白：定蛋白：通通过与与之之共共价价相相连的的脂脂分分子子插插入入膜膜的的脂双分子中，从而脂双分子中，从而锚定在定在细胞胞质膜上。膜上。、膜蛋白的、膜蛋白的类型型17.、内在膜蛋白与膜脂内在膜蛋白与膜脂结合的方式合的方式膜蛋白的跨膜膜蛋白的跨膜结构域与脂双构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。分子的疏水核心的相互作用。跨膜跨膜结构域两端携构域两端携带正正电荷的氨基酸残基与磷脂分子荷的氨基酸残基与磷脂分子带 负电的极性的极性头形成离子形成离子键，或，或带负电的氨基酸残基通的氨基酸残基通过 CaCa2+2+、MgMg2+2+等阳离子与等阳离子与带负电的磷脂极性的磷脂极性头相互作用。相互作用。某些膜蛋白在某些膜蛋白在细胞胞质基基质一一侧的半胱氨酸残基上共价的半胱氨酸残基上共价结 合脂肪酸分子合脂肪酸分子,插入脂双插入脂双层之之间,进一步加一步加强膜蛋白与脂膜蛋白与脂 双双层的的结合力合力,还有少数蛋白与糖脂共价有少数蛋白与糖脂共价结合。合。18.内在膜蛋白跨膜结构域是与膜脂结合的主要部位，具体作用方式如下：(1)跨膜结构域形成螺旋，其外部疏水侧链通过范德华力与脂双层分子脂肪酸链相互作用。(2)某些螺旋既具有极性侧链又具有非极性侧链，螺旋的外侧是非极性链，内侧是极性链，形成特异极性分子的跨膜通道。(3)某些跨膜蛋白(如大肠杆菌外膜上的孔蛋白和线粒体内膜上的孔蛋白)，其跨膜结构域常常仅有1012个氨基酸残基，形成折叠片结构。螺旋中相邻二个氨基酸残基的轴向距离为0.15nm，而在折叠片中为0.35nm。反向平行的折叠片相互作用形成非特异的跨膜通道，可允许相对分子质量小于104的小分子自由通过。19.、去垢、去垢剂去去垢垢剂是是一一端端亲水水、另另一一端端疏疏水水的的两两性性小小分分子子,是是分分离离与研究膜蛋白的常用与研究膜蛋白的常用试剂。离离子子型型去去垢垢剂(十十二二烷基基磺磺酸酸钠SDS)SDS)：它它可可使使细胞胞膜膜崩崩解解，与与膜膜蛋蛋白白疏疏水水部部分分结合合使使其其分分离离，还可可破破坏坏蛋蛋白白内内部部非非共共价价键，甚甚至改至改变亲水部分的构象。水部分的构象。非非离离子子型型去去垢垢剂（Triton Triton X-100X-100）：也也可可使使细胞胞膜膜崩崩解解，但但对蛋蛋白白作作用用较温温和和，用用于于膜膜蛋蛋白白的的分分离离与与纯化化，也也用用于于除除去去细胞胞膜系膜系统，以便，以便对细胞骨架蛋白和其他蛋白胞骨架蛋白和其他蛋白进行研究。行研究。20.第二第二节 生物膜生物膜结构的特征与功能构的特征与功能膜的膜的流流动性性：生物膜的基本特征之一：生物膜的基本特征之一,细胞胞进行生命活行生命活动的必要条件。的必要条件。膜的膜的不不对称性称性21.一、膜的流一、膜的流动性性、膜脂的流膜脂的流动性性膜膜脂脂的的流流动性性主主要要指指脂脂分分子子的的侧向向运运动，它它主主要要是是由由脂脂分子本身的性分子本身的性质决定的决定的 。脂肪酸脂肪酸链越短越短,不不饱和程度越高和程度越高,膜脂的流膜脂的流动性越大。性越大。温温度度对膜膜脂脂的的运运动有有明明显的的影影响响。在在细菌菌和和动物物细胞胞中中常常通通过增增加加不不饱和和脂脂肪肪酸酸的的含含量量来来调节膜膜脂脂的的相相变温温度度以以维持膜脂的流持膜脂的流动性。性。在在动物物细胞胞中中，胆胆固固醇醇对膜膜的的流流动性性起起重重要要的的双双向向调节作用。作用。22.一、膜的流一、膜的流动性性、膜蛋白的流膜蛋白的流动性性荧光抗体免疫光抗体免疫标记实验 成斑成斑现象象(patching)(patching)或成帽或成帽现象象(capping)(capping)膜膜的的流流动性性受受多多种种因因素素影影响响；细胞胞骨骨架架不不但但影影响响膜膜蛋蛋白白的的运运动，也也影影响响其其周周围的的膜膜脂脂的的流流动。膜膜蛋蛋白白与与膜膜脂脂分分子子的的相相互互作作用用也也是是影影响响膜膜流流动性性的重要因素。的重要因素。23.、荧光漂白恢复技光漂白恢复技术 程序程序：用用荧光光素素标记膜膜蛋蛋白白或或膜膜质，然然后后用用激激光光束束照照射射细胞胞表表面面某某一一区区域域，使使被被照照射射区区的的荧光光淬淬灭变暗暗。由由于于膜膜的的流流动性性，变暗暗区区域域的的亮亮度度逐逐渐增增加加，最最后后恢恢复复到到与与周周围的的荧光光强度相等。度相等。根根据据荧光光恢恢复复的的速速度度可可推推算出膜蛋白或膜脂算出膜蛋白或膜脂扩散速度。散速度。一、膜的流一、膜的流动性性研研究究膜膜蛋蛋白白或或膜膜脂脂流流动性性的的基基本本实验技技术之一。之一。24.、细胞胞质膜各部分名称膜各部分名称与细胞外环境接触的膜面称质膜的细胞外表面(ES)与细胞质基质接触的膜面称质膜的原生质表面(PS)。冷冻蚀刻技术制样过程中，膜结构常常从双层脂分子疏水端断裂，这样又产生了质膜的细胞外小页断裂面(EF)和原生质小页断裂面(PF)。二、膜的不二、膜的不对称性称性25.、膜脂的不、膜脂的不对称性称性膜质的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布。糖脂仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础。磷脂分子不对称分布的生物学意义还不清楚，有人推测可能与其合成部位有关，还有可能与膜蛋白的不对称分布有关。磷脂在红细胞质膜上的分布SM：鞘磷脂；PC:卵磷脂；PS：磷脂酰丝氨酸；PE：磷脂酰乙醇胺；PI：磷脂酰肌醇；CI：胆固醇二、膜的不二、膜的不对称性称性质膜外小膜外小页质膜内小膜内小页占占膜膜质总量量的的百百分分数数26.二、膜的不二、膜的不对称性称性、膜蛋白的不、膜蛋白的不对称性称性 膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有确定的方向性；例如：糖蛋白糖残基均分布在质膜的ES面；膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间与空间上 有序的各种生理功能的保证。27.三、三、细胞胞质膜的功能膜的功能 为细胞的生命活胞的生命活动提供相提供相对稳定的内定的内环境境;选择性性的的物物质运运输,包包括括代代谢底底物物的的输入入与与代代谢产物物的的排排除除,其其中中伴伴随随着能量的着能量的传递;提供提供细胞胞识别位点位点,并完成并完成细胞内外信息跨膜胞内外信息跨膜转导;为多种多种酶提供提供结合位点合位点,使使酶促反促反应高效而有序地高效而有序地进行行;介介导细胞与胞与细胞、胞、细胞与胞外基胞与胞外基质之之间的的连接接;参与形成具有不同功能的参与形成具有不同功能的细胞表面特化胞表面特化结构；构；膜膜蛋蛋白白的的遗传与与某某些些遗传病病、恶性性肿瘤瘤，甚甚至至神神经退退行行性性疾疾病病相相关关，很多膜蛋白可作很多膜蛋白可作为疾病治疾病治疗的的药物靶物靶标。28.第三第三节 膜骨架膜骨架 细胞胞质膜常常与膜下膜常常与膜下结构构(主要是主要是细胞骨架系胞骨架系统)相互相互联系、系、协同作用同作用,并形成并形成细胞表面的某些特化胞表面的某些特化结构以完成特定的功能。构以完成特定的功能。一、膜骨架膜骨架膜骨架的概念膜骨架的概念指指细胞胞质膜下与膜蛋白相膜下与膜蛋白相连的由的由纤维蛋白蛋白组成的网架成的网架结构构,它参与它参与维持持细胞胞质膜的形状并膜的形状并协助助质膜完成多种生理功能。膜完成多种生理功能。二、红细胞的生物学特性胞的生物学特性三、红细胞胞质膜蛋白及膜骨架膜蛋白及膜骨架29.v哺乳哺乳动物成熟的物成熟的红细胞没有胞没有细胞核胞核和和内膜系内膜系统，细胞膜既有良好的胞膜既有良好的弹性又有性又有较高的高的强度，并且度，并且细胞膜和膜骨架的蛋白比胞膜和膜骨架的蛋白比较容易容易纯化、分析。化、分析。v当当细胞胞经低渗低渗处理后，理后，质膜破裂，同膜破裂，同时释放出血放出血红蛋白和胞内其他可蛋白和胞内其他可溶性蛋白。溶性蛋白。这时红细胞仍然保持原来的形状和大小，胞仍然保持原来的形状和大小，这种种结构称构称为红细胞影（又称血影）。因此胞影（又称血影）。因此红细胞胞为研究研究质膜的膜的结构及其与膜骨架的构及其与膜骨架的关系提供了理想的材料。关系提供了理想的材料。二、红细胞的生物学特性胞的生物学特性30.红细胞膜蛋白胞膜蛋白 (包括膜骨架蛋白包括膜骨架蛋白)SDS-聚丙聚丙烯酰胺胺凝胶凝胶电泳分析泳分析显示示约有有15种主要种主要的蛋白的蛋白带:三、三、红细胞胞质膜蛋白及膜骨架膜蛋白及膜骨架血影蛋白血影蛋白血型糖蛋白血型糖蛋白A带3蛋白蛋白 锚蛋白蛋白肌肌动蛋白蛋白带4.1蛋白蛋白31.