1、微生物形态学检验微生物形态学检验邱邱 宗宗 文文第三军医大学附属新桥医院第三军医大学附属新桥医院细菌的形态与结构细菌的形态与结构细菌基本形态有三种:细菌基本形态有三种:球菌、杆菌、螺形菌球菌、杆菌、螺形菌细菌基本结构包括:细菌基本结构包括:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细菌的特殊结构有:细菌的特殊结构有:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢真菌的形态与结构真菌的形态与结构真菌形态有两种类型:真菌形态有两种类型:v单细胞型:呈圆形或卵圆形,常见于酵母菌和酵母样菌单细胞型:呈圆形或卵圆形,常见于酵母菌和酵母样菌v多细胞型:多呈丝状,分支交织成团、称为丝状菌,通称霉
2、菌多细胞型:多呈丝状,分支交织成团、称为丝状菌,通称霉菌真菌的基本结构:真菌的基本结构:v菌丝菌丝由孢子生出芽管,逐渐延长呈丝状由孢子生出芽管,逐渐延长呈丝状v孢子孢子是真菌的生殖结构,真菌繁殖的微小单位是真菌的生殖结构,真菌繁殖的微小单位细菌形态学检查细菌形态学检查不染色标本的检查:不染色标本的检查:v主要用于检查细菌动力及运动状况,包括湿片法、主要用于检查细菌动力及运动状况,包括湿片法、悬滴法、毛细吸管法悬滴法、毛细吸管法染色标本的检查:染色标本的检查:v观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚膜、鞭毛、芽孢、异染颗粒等结构,有助于细菌膜、鞭毛、
3、芽孢、异染颗粒等结构,有助于细菌的初步认识或诊断的初步认识或诊断细菌分离培养及鉴定细菌分离培养及鉴定细菌分离培养:使细菌在平板上分散生长,便细菌分离培养:使细菌在平板上分散生长,便于观察菌落特征,也易于挑取单个菌落进行生于观察菌落特征,也易于挑取单个菌落进行生化鉴定或血清学试验化鉴定或血清学试验细菌鉴定:形态与培养特性:形态、染色、培细菌鉴定:形态与培养特性:形态、染色、培养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据细菌形态与染色特点细菌形态与染色特点染色性:革兰阳性、阴性,抗酸染色阳性、阴性等染色性:革兰阳性、阴性,抗酸染色阳性、阴性等形状、大小和排列:球菌、杆菌
4、、螺形菌,菌体大小、形状、大小和排列:球菌、杆菌、螺形菌,菌体大小、单个、成双、短链、葡萄状等单个、成双、短链、葡萄状等细菌特殊结构:芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等细菌特殊结构:芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等细菌培养特性细菌培养特性营养要求:简单或复杂营养要求:简单或复杂生长特性:快或慢生长特性:快或慢气体环境:需氧、兼性厌氧或厌氧气体环境:需氧、兼性厌氧或厌氧适宜生长温度:适宜生长温度:2525、35-3735-37、4242 菌落特征菌落特征大小:一般可分为大大小:一般可分为大3 3mmmm、中中2-32-3mmmm、小小2 2mmmm表面:光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等表
5、面:光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等透明度:透明、半透明、不透明透明度:透明、半透明、不透明外形:圆形、不规则等外形:圆形、不规则等高度:扁平、凸起、脐形等高度:扁平、凸起、脐形等边缘:整齐、锯齿状等边缘:整齐、锯齿状等光泽:有光泽、无光泽等光泽:有光泽、无光泽等色素:金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等色素:金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等气味:酸味、生姜味、恶臭味气味:酸味、生姜味、恶臭味溶血性:完全溶血、不完全溶血、不溶血溶血性:完全溶血、不完全溶血、不溶血革兰阳性球菌革兰阳性球菌 Gram-positive cocci基本特征:在血琼脂平板上生长,在麦康凯、伊红基
6、本特征:在血琼脂平板上生长,在麦康凯、伊红亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上不生长亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上不生长基本鉴定试验要求:基本鉴定试验要求:v触酶试验:任何阳球先做触酶试验,挑取菌落时不宜碰到血触酶试验:任何阳球先做触酶试验,挑取菌落时不宜碰到血琼脂,因红细胞内含有过氧化物酶可致假阳性琼脂,因红细胞内含有过氧化物酶可致假阳性v凝固酶试验:是鉴定葡萄球菌的重要试验,少数金葡菌玻片凝固酶试验:是鉴定葡萄球菌的重要试验,少数金葡菌玻片法阴性,试管法阳性,是因该菌无结合凝固酶,有游离凝固法阴性,试管法阳性,是因该菌无结合凝固酶,有游离凝固酶;不能使用枸橼酸盐抗凝血浆,因有些细菌可分解枸橼酸酶;不能使用枸
7、橼酸盐抗凝血浆,因有些细菌可分解枸橼酸盐致假阳性盐致假阳性vOptochinOptochin试验:鉴别肺炎链球菌与甲型链球菌的重要试验试验:鉴别肺炎链球菌与甲型链球菌的重要试验vCAMPCAMP试验:鉴定试验:鉴定B B群链球菌群链球菌菌落特征:血平板上的溶血有助于一些细菌的初菌落特征:血平板上的溶血有助于一些细菌的初步鉴定,如金黄色葡萄球菌、链球菌属等步鉴定,如金黄色葡萄球菌、链球菌属等镜下形态:单个、成双矛头状、链状、四链状、镜下形态:单个、成双矛头状、链状、四链状、葡萄状葡萄状根据菌落特征及镜下形态,结合一些基本试验可根据菌落特征及镜下形态,结合一些基本试验可初步判断属于哪类细菌,再进一
8、步做相应的生化初步判断属于哪类细菌,再进一步做相应的生化试验即可确定细菌种属试验即可确定细菌种属金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 S.aureus形态与染色:阳性球菌、单个、双成、短链或形态与染色:阳性球菌、单个、双成、短链或不规则葡萄状排列不规则葡萄状排列培养特性:在血平板上典型菌落为金黄色,周围有培养特性:在血平板上典型菌落为金黄色,周围有明显明显溶血环,部分菌落也可以呈灰白色或柠檬色溶血环,部分菌落也可以呈灰白色或柠檬色化脓链球菌化脓链球菌S.pyogenes形态与染色:阳性球菌、形态与染色:阳性球菌、固体培养基上呈单个或成固体培养基上呈单个或成双排列,较少呈链状,肉双排列,较少呈链状,肉汤
9、中呈长链状排列,脓液汤中呈长链状排列,脓液标本直接涂片呈单个、成标本直接涂片呈单个、成双或短链状双或短链状脓液脓液纯培养纯培养增菌增菌培养特性:在血平板上形成较小、圆形、凸起、培养特性:在血平板上形成较小、圆形、凸起、溶血的灰白色菌落溶血的灰白色菌落杆菌肽敏感实验杆菌肽敏感实验10cm肺炎链球菌肺炎链球菌S.pneumoniae形态与染色:呈矛头状,形态与染色:呈矛头状,成双或链状,有荚膜成双或链状,有荚膜荚膜染色荚膜染色纯培养纯培养痰液痰液培养特性:在培养特性:在5-10%二氧化碳环境中生长良好,二氧化碳环境中生长良好,血平板上形成细小、圆形、中央呈血平板上形成细小、圆形、中央呈脐窝状,表面
10、光脐窝状,表面光滑、灰色、扁平,周围有草绿色滑、灰色、扁平,周围有草绿色溶血环,部分菌株溶血环,部分菌株与典型菌落不同,不是中央凹陷,而是湿润、透明与典型菌落不同,不是中央凹陷,而是湿润、透明的粘液样菌落的粘液样菌落粪肠球菌粪肠球菌 E.faecalis形态与染色:阳性球菌、单个、成双或短链排列形态与染色:阳性球菌、单个、成双或短链排列培养特性:在血平板上形成较小、灰白色、湿润、培养特性:在血平板上形成较小、灰白色、湿润、凸起、有凸起、有或或溶血环的菌落,在麦康凯琼脂平板溶血环的菌落,在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落上形成较小、干燥、粉红色菌落脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌 N.meni
11、ngitidis形态与染色:阴性双球菌、肾形或咖啡豆状,常成形态与染色:阴性双球菌、肾形或咖啡豆状,常成双排列,凹面相对,在脑脊液直接涂片中常位于中双排列,凹面相对,在脑脊液直接涂片中常位于中性粒细胞内性粒细胞内培养特性:初次分离需在培养特性:初次分离需在5-10%二氧化碳环境中二氧化碳环境中生长,血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、生长,血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色的似露滴状菌落的似露滴状菌落淋病奈瑟菌淋病
12、奈瑟菌 N.gonorrhoeae形态与染色:阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道形态与染色:阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道分泌物直接涂片,急性期常位于白细胞内、慢性期分泌物直接涂片,急性期常位于白细胞内、慢性期位于白细胞外位于白细胞外培养特性:初次分离需在培养特性:初次分离需在5-10%二氧化碳环境中二氧化碳环境中生长,血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、生长,血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色菌落菌落白喉棒状菌白
13、喉棒状菌 C.diphteriae形态与染色:革兰阳性,细长微弯、菌体一端或两形态与染色:革兰阳性,细长微弯、菌体一端或两端粗大,呈棒状,排列不规则,菌体一端或两端可端粗大,呈棒状,排列不规则,菌体一端或两端可见异染颗粒见异染颗粒培养特性:在血平板上形成较小、圆形、凸起、光培养特性:在血平板上形成较小、圆形、凸起、光滑、灰白色菌落,似干酪状,易碎成两半,无或狭滑、灰白色菌落,似干酪状,易碎成两半,无或狭窄溶血环,在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰窄溶血环,在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰黑色菌落黑色菌落产单核细胞李斯特氏菌产单核细胞李斯特氏菌L.monocytogenes形态与染色:革兰阳性
14、小杆菌,直或微弯、无形态与染色:革兰阳性小杆菌,直或微弯、无芽孢、无荚膜芽孢、无荚膜培养特性:在血平板上形成较小、圆形、光滑、而培养特性:在血平板上形成较小、圆形、光滑、而有有溶血环的菌落,在液体培养基中呈均匀浑浊生溶血环的菌落,在液体培养基中呈均匀浑浊生长,在半固体培养基中,动力字穿刺线向四周蔓延长,在半固体培养基中,动力字穿刺线向四周蔓延生长,呈倒伞状生长,呈倒伞状红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌 E.rhusiopathiae形态与染色:革兰阳性杆菌,菌体细长,有时呈长形态与染色:革兰阳性杆菌,菌体细长,有时呈长丝状,易被脱色而呈革兰阴性的杆菌,其间夹着革丝状,易被脱色而呈革兰阴性的杆菌,其间夹
15、着革兰阳性颗粒兰阳性颗粒培养特性:在血平板上形成的光滑型菌落细小、光培养特性:在血平板上形成的光滑型菌落细小、光滑圆形、凸起有光泽;粗糙型菌落较大、表面呈颗滑圆形、凸起有光泽;粗糙型菌落较大、表面呈颗粒状,周围有轻微溶血,在亚啼酸钾血琼脂平板上粒状,周围有轻微溶血,在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色菌落形成黑色菌落炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌 B.anthracis形态与染色:为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌,形态与染色:为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌,两端截平,体外培养后形成长链,排列呈竹节形。两端截平,体外培养后形成长链,排列呈竹节形。在体内常单个存在或短链,有荚膜,在人工培养基在体内常单个存在或短
16、链,有荚膜,在人工培养基上可见芽孢,卵圆形并位于菌体中央,菌体不膨大上可见芽孢,卵圆形并位于菌体中央,菌体不膨大培养特性:在血平板上形成较大、灰白边缘不整齐培养特性:在血平板上形成较大、灰白边缘不整齐菌落。在营养琼脂上形成灰白色、扁平、干燥而无菌落。在营养琼脂上形成灰白色、扁平、干燥而无光泽、不透明、边缘不整齐的菌落,对青霉素敏感光泽、不透明、边缘不整齐的菌落,对青霉素敏感蜡样芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌 B.cereus形态与染色:革兰阳性大杆菌,卵圆形芽孢,位于形态与染色:革兰阳性大杆菌,卵圆形芽孢,位于菌体中央,菌体不膨大菌体中央,菌体不膨大培养特性:在血平板上形成较大浅灰色、似毛玻璃培养特性:
17、在血平板上形成较大浅灰色、似毛玻璃样菌落。在营养琼脂上形成灰白色、不透明、圆形、样菌落。在营养琼脂上形成灰白色、不透明、圆形、凸起的较大菌落,边缘常呈扩展状,迎光看似白蜡凸起的较大菌落,边缘常呈扩展状,迎光看似白蜡状。故名蜡样芽孢杆菌状。故名蜡样芽孢杆菌枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 E.subtilis形态与染色:革兰阳性大杆菌、有芽孢、无荚膜形态与染色:革兰阳性大杆菌、有芽孢、无荚膜培养特性:在营养琼脂上形成较大、灰白色、不透培养特性:在营养琼脂上形成较大、灰白色、不透明、锯齿状粗糙菌落。血平板上形成较大、扁平、明、锯齿状粗糙菌落。血平板上形成较大、扁平、溶血的菌落溶血的菌落星型奴卡菌星型奴卡菌
18、 N.asteroides形态与染色:革兰阳性、菌体为丝状,在培养早期形态与染色:革兰阳性、菌体为丝状,在培养早期菌体裂解为较多的球菌或杆菌状,分之状菌丝较少;菌体裂解为较多的球菌或杆菌状,分之状菌丝较少;培养后期可见丰富菌丝体形成,在临床标本中为纤培养后期可见丰富菌丝体形成,在临床标本中为纤细分支状菌丝,抗酸弱阳性细分支状菌丝,抗酸弱阳性培养特性:在沙氏培养基或营养琼脂上培养培养特性:在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日日可见菌落,菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深可见菌落,菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深橙色;在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色橙色;在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
19、肠杆菌科肠杆菌科 Enterobacteriaceae基本特征:在血琼脂平板上生长,在麦康凯、伊红基本特征:在血琼脂平板上生长,在麦康凯、伊红亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖的菌落;在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产的菌落;在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产气、氧化酶试验阴性气、氧化酶试验阴性基本鉴定试验要求:基本鉴定试验要求:v氧化酶试验:用于鉴定肠杆菌科细菌,必做试验氧化酶试验:用于鉴定肠杆菌科细菌,必做试验大肠杆菌大肠杆菌 E.coli形态与染色:革兰阴性杆菌、粗短、多数有周鞭毛形态与染色:革兰阴性杆菌、粗短、多数有周鞭毛培养特
20、性:血平板上呈圆形、边缘整齐、灰白色、不透明的培养特性:血平板上呈圆形、边缘整齐、灰白色、不透明的菌落、少数菌株菌落、少数菌株溶血环。麦康凯上形成不透明、粉红色菌落,溶血环。麦康凯上形成不透明、粉红色菌落,部分不发酵乳糖菌株呈无色菌落,少数呈粘稠状菌落部分不发酵乳糖菌株呈无色菌落,少数呈粘稠状菌落伤寒沙门氏菌伤寒沙门氏菌 S.typhi形态与染色:革兰阴性杆菌,菌体细长,有周鞭毛形态与染色:革兰阴性杆菌,菌体细长,有周鞭毛培养特性:在麦康凯上形成无色、透明菌落,培养特性:在麦康凯上形成无色、透明菌落,SS平平板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑
21、色肺炎克雷伯氏菌肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae形态与染色:革兰阴性杆菌,单个、成双或短链排形态与染色:革兰阴性杆菌,单个、成双或短链排列,荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜列,荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜培养特性:在血平板上形成较大、圆形、凸起、灰白色、不培养特性:在血平板上形成较大、圆形、凸起、灰白色、不溶血菌落;血平板上极少数菌株可出现较大、粗糙型、野菊溶血菌落;血平板上极少数菌株可出现较大、粗糙型、野菊花状菌落。麦康凯上形成隆起、大而粘液样、易融合的粉红花状菌落。麦康凯上形成隆起、大而粘液样、易融合的粉红色菌落,接种环挑取呈丝状粘连色菌落,接种环挑取呈丝状粘连普通变形杆菌普通变
22、形杆菌 P.vulgaris形态与染色:革兰阴性杆菌,多数为单个存在、也形态与染色:革兰阴性杆菌,多数为单个存在、也可见成对或短链状排列,周身鞭毛可见成对或短链状排列,周身鞭毛培养特性:在血平板上蔓延生长、布满整个平板表培养特性:在血平板上蔓延生长、布满整个平板表面(纤徒现象),麦康凯上形成圆形、扁平、无色面(纤徒现象),麦康凯上形成圆形、扁平、无色(不发酵乳糖)半透明菌落(不发酵乳糖)半透明菌落霍乱弧菌霍乱弧菌 V.cholerae形态与染色:革兰阴性、菌体弯曲呈弧形或逗点状,形态与染色:革兰阴性、菌体弯曲呈弧形或逗点状,米泔样粪便直接涂片染色,可见头尾相接、平行排米泔样粪便直接涂片染色,可
23、见头尾相接、平行排列的弧菌,悬滴法直接镜检可见活泼的运动列的弧菌,悬滴法直接镜检可见活泼的运动培养特性:具有耐硷性,培养特性:具有耐硷性,pH9.2时仍能生长,硷时仍能生长,硷性蛋白胨水增菌时液体浑浊、表面形成菌膜;在性蛋白胨水增菌时液体浑浊、表面形成菌膜;在TCBS平板上形成较大、黄色菌落平板上形成较大、黄色菌落非发酵阴性杆菌非发酵阴性杆菌 Nonfermentative基本特征:在最初分离培养基上,如果有菌落生长基本特征:在最初分离培养基上,如果有菌落生长并有下列三种情况之一,可认为有非发酵菌存在并有下列三种情况之一,可认为有非发酵菌存在v在血平板上生长而在麦康凯上不生长或生长很差,菌落呈
24、无在血平板上生长而在麦康凯上不生长或生长很差,菌落呈无色、针尖大或完全看不到生长色、针尖大或完全看不到生长v麦康凯上生长的无色菌落(不发酵乳糖),氧化酶试验阳性麦康凯上生长的无色菌落(不发酵乳糖),氧化酶试验阳性v在三糖铁或克氏双糖培养基内,斜面与底层均不变色,表明在三糖铁或克氏双糖培养基内,斜面与底层均不变色,表明该菌不分解葡萄糖与乳糖,提示为非发酵菌该菌不分解葡萄糖与乳糖,提示为非发酵菌v注意:不能在麦康凯、注意:不能在麦康凯、SSSS及其他含糖培养基上作氧化酶试验,及其他含糖培养基上作氧化酶试验,而应在营养琼脂或半固体培养基上做氧化酶试验,因糖分解而应在营养琼脂或半固体培养基上做氧化酶试
25、验,因糖分解产酸会影响氧化酶试验结果产酸会影响氧化酶试验结果铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 P.aeruginosa形态与染色:阴性杆菌、细长,菌体一端有单鞭毛形态与染色:阴性杆菌、细长,菌体一端有单鞭毛培养特性:在血平板上形成扁平、湿润、有金属光培养特性:在血平板上形成扁平、湿润、有金属光泽、蓝绿色,透明溶血环的菌落,有生姜味。在麦泽、蓝绿色,透明溶血环的菌落,有生姜味。在麦康凯上可形成康凯上可形成5种不同菌落种不同菌落1、典型型:菌落不规、典型型:菌落不规则,边缘呈伞状伸展则,边缘呈伞状伸展2、大肠菌样型:菌落、大肠菌样型:菌落圆形、凸起、无色透明圆形、凸起、无色透明3、粗糙型:菌落呈纽、粗糙型
26、:菌落呈纽扣状,表面粗糙,或菌扣状,表面粗糙,或菌落中央隆起边缘扁平落中央隆起边缘扁平4、粘液样:菌落光滑、隆、粘液样:菌落光滑、隆起、呈粘液状,嵌入培养起、呈粘液状,嵌入培养基内,不易挑起,似肺克基内,不易挑起,似肺克q铜绿假单胞菌特征:蓝绿色或荧光色素,有生姜味,铜绿假单胞菌特征:蓝绿色或荧光色素,有生姜味,动力和氧化酶试验阳性动力和氧化酶试验阳性5、侏儒型:生长缓慢、培、侏儒型:生长缓慢、培养养24h后才有小菌落生长后才有小菌落生长荧光假单胞菌荧光假单胞菌 P.fluorescens形态与染色:阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛形态与染色:阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛培养特性:在麦康凯
27、上呈无色半透明菌落,在营养培养特性:在麦康凯上呈无色半透明菌落,在营养琼脂上形成荧光色的菌落琼脂上形成荧光色的菌落恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌 P.putida形态与染色:阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛形态与染色:阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛培养特性:在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落,在营培养特性:在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落,在营养琼脂上形成黄绿色菌落,紫外线下可见荧光养琼脂上形成黄绿色菌落,紫外线下可见荧光鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌 A.baumannii形态与染色:阴性杆菌、单个或呈双排列、有时呈形态与染色:阴性杆菌、单个或呈双排列、有时呈现丝状或链状现丝状或链状培养特性:在血平板上
28、形成圆形、光滑、边缘整齐培养特性:在血平板上形成圆形、光滑、边缘整齐的菌落,部分菌落呈粘液状;在麦康凯上形成粉红的菌落,部分菌落呈粘液状;在麦康凯上形成粉红色菌落,色菌落,4848h h后菌落呈深红色,部分菌落呈粘液型后菌落呈深红色,部分菌落呈粘液型紫色杆菌紫色杆菌 C.violaceum形态与染色:阴性杆菌、具有极端鞭毛和周鞭毛形态与染色:阴性杆菌、具有极端鞭毛和周鞭毛培养特性:在血平板上形成圆形、光滑、培养特性:在血平板上形成圆形、光滑、溶血、溶血、紫黑色菌落,在麦康凯上呈紫色菌落紫黑色菌落,在麦康凯上呈紫色菌落放射根瘤菌放射根瘤菌R.radiobacter形态与染色:阴性杆菌、单个或成双
29、、有周鞭毛形态与染色:阴性杆菌、单个或成双、有周鞭毛培养特性:在血平板上形成灰白色、光滑、湿润、培养特性:在血平板上形成灰白色、光滑、湿润、凸起、无溶血环的菌落,在麦康凯上呈无色、湿润、凸起、无溶血环的菌落,在麦康凯上呈无色、湿润、粘液样菌落、时间延长时呈淡粉红色粘液样菌落、时间延长时呈淡粉红色流感嗜血菌流感嗜血菌Haemophilus形态与染色:阴性短小杆菌、两端钝圆,粘液型菌株有荚膜形态与染色:阴性短小杆菌、两端钝圆,粘液型菌株有荚膜培养特性:在培养特性:在5-10%5-10%二氧化碳中可促进生长,生长需二氧化碳中可促进生长,生长需、两两种因子,适宜培养基是巧克力平板。在巧克力平板上形成微
30、种因子,适宜培养基是巧克力平板。在巧克力平板上形成微小、无色透明似露滴状菌落,在血平板上形成极小、圆形、小、无色透明似露滴状菌落,在血平板上形成极小、圆形、透明菌落,并有透明菌落,并有“卫星现象卫星现象”产气荚膜杆菌产气荚膜杆菌 C.perfingens形态与染色:革兰阳性粗大杆菌、两端钝圆、单个形态与染色:革兰阳性粗大杆菌、两端钝圆、单个或成双,芽孢卵圆形、位于菌体中央或次极端、有或成双,芽孢卵圆形、位于菌体中央或次极端、有荚膜、无鞭毛荚膜、无鞭毛培养特性:在厌氧血平板上形成圆形、光滑、边缘培养特性:在厌氧血平板上形成圆形、光滑、边缘整齐的菌落,多数菌株有双圈溶血环,内圈完全溶整齐的菌落,多
31、数菌株有双圈溶血环,内圈完全溶血、外圈不完全溶血。卵黄琼脂平板上菌落周围出血、外圈不完全溶血。卵黄琼脂平板上菌落周围出现乳白色浑浊圈,为卵磷脂酶分解卵磷脂所致。现乳白色浑浊圈,为卵磷脂酶分解卵磷脂所致。疱肉培养基中产生大量气体、疱肉培养基中产生大量气体、肉渣呈粉红色、不被消化肉渣呈粉红色、不被消化牛乳培养基中分解乳糖产酸,牛乳培养基中分解乳糖产酸,使酪蛋白凝固并产生大量气使酪蛋白凝固并产生大量气体,称为体,称为“汹涌发酵汹涌发酵”产气荚膜杆菌特征:阳性粗大杆菌、芽孢位于菌体中央或产气荚膜杆菌特征:阳性粗大杆菌、芽孢位于菌体中央或次极端,厌氧血琼脂平板出现双圈溶血,牛乳中次极端,厌氧血琼脂平板出
32、现双圈溶血,牛乳中“汹涌发酵汹涌发酵”真菌真菌按菌落形态分为三类按菌落形态分为三类酵母菌:由圆形、卵圆形或长形的细胞组成,如念酵母菌:由圆形、卵圆形或长形的细胞组成,如念珠菌、隐球菌。珠菌、隐球菌。霉菌:由多核菌丝组成,如曲霉菌、白霉菌。霉菌:由多核菌丝组成,如曲霉菌、白霉菌。双相真菌:能够以菌丝双相真菌:能够以菌丝/酵母菌样的单细胞形式存酵母菌样的单细胞形式存在,如组织胞浆菌、申克孢子丝菌。在,如组织胞浆菌、申克孢子丝菌。按致病特点分为两类按致病特点分为两类念珠菌病、曲霉病、念珠菌病、曲霉病、念珠菌病、曲霉病、念珠菌病、曲霉病、隐球菌病、毛霉病等隐球菌病、毛霉病等隐球菌病、毛霉病等隐球菌病、
33、毛霉病等真菌病真菌病浅部浅部浅部浅部深部深部深部深部皮肤、粘膜皮肤、粘膜皮肤、粘膜皮肤、粘膜指甲、毛发指甲、毛发指甲、毛发指甲、毛发皮下组织:皮下组织:皮下组织:皮下组织:孢子丝菌病、着色真菌病、孢子丝菌病、着色真菌病、孢子丝菌病、着色真菌病、孢子丝菌病、着色真菌病、足菌肿等足菌肿等足菌肿等足菌肿等原发性:原发性:原发性:原发性:组织胞浆菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、球孢子菌病、组织胞浆菌病、球孢子菌病、芽生菌病、副球孢子菌病等芽生菌病、副球孢子菌病等芽生菌病、副球孢子菌病等芽生菌病、副球孢子菌病等继发性:继发性:继发性:继发性:白色念珠菌白色念珠菌镜镜下下形形态态
34、:呈革兰氏阳性,但着色不均,菌体呈卵圆形、薄壁,在玉米-吐温80培养基上培养3日,可见顶端圆形厚壁孢子,糖原染色、菌丝、孢子均为红色。SDASDA上培养,革兰染色上培养,革兰染色吐温吐温8080培养基,亚甲蓝染色培养基,亚甲蓝染色阴道分泌物中白念珠菌阴道分泌物中白念珠菌菌丝与芽孢菌丝与芽孢念珠菌属念珠菌属白色念珠菌白色念珠菌 培培养养特特性性:25或37时均可生长,在SDA培养基上37培养,形成奶油色、表面光滑菌落,带有酵母气味,在血琼脂平板上2448h呈乳白色、凸起、表面光滑、边缘整齐菌落,在显色培养基上呈绿色菌落。SDA上菌落显色平板上菌落念珠菌属念珠菌属白色念珠菌白色念珠菌芽芽管管试试验
35、验:于0.5ml人或兔血清中,加入少许菌落,混匀、置37水浴23h,取出一接种环菌液湿片镜检,有芽管产生为白念珠菌。念珠菌属念珠菌属克柔念珠菌克柔念珠菌镜下形态:镜下形态:在玉米粉-吐温80培养基上培养3日,假菌丝对称分枝,有细长的芽生孢子,可见圆柱形或卵圆形细胞临床意义:临床意义:克柔念珠菌可引起致死性系统性念珠菌病,常威胁先天性免疫缺陷患者,也可发生在大量接受抗生素治疗患者,该菌对氟康唑天然耐药!对氟康唑天然耐药!念珠菌属念珠菌属克柔念珠菌克柔念珠菌 培养特性培养特性:在SDA培养基上25培养1周,呈柔软、光滑灰黄色菌落,在血琼脂平板上菌落较小、不规则、呈灰白色,在显色培养基上菌落呈粉红色
36、。SDASDA上菌落特征上菌落特征显色平板上菌落特征显色平板上菌落特征念珠菌属念珠菌属近平滑念珠菌近平滑念珠菌 镜下形态镜下形态:在不同培养基上显示不同形状,通常呈卵圆形或长倒卵形。在玉米粉-吐温80琼脂上形成细长假菌丝和小分生孢子。培养特性培养特性:在SDA培养基上形成菌落为奶油色至黄色、光滑、可起皱。SDASDA上菌落特征上菌落特征纯培养物镜下形态纯培养物镜下形态念珠菌属念珠菌属新型隐球菌新型隐球菌镜下形态:镜下形态:菌体球形、较大,周围有肥厚的荚膜,折光性强,墨汁负染色,可见圆形菌体,周围有一较宽的空白带(荚膜),菌细胞常有出芽,但无菌丝或假菌丝。新隐球菌荚膜新隐球菌荚膜脑脊液墨汁染色脑脊液墨汁染色新隐球菌出芽繁殖新隐球菌出芽繁殖脑脊液墨汁染色脑脊液墨汁染色具有多糖荚膜具有多糖荚膜新隐球菌荚膜新隐球菌荚膜脑脊液墨汁染色脑脊液墨汁染色隐珠菌属隐珠菌属新型隐球菌新型隐球菌肺新隐球菌感染肺新隐球菌感染(H-EH-E染色)染色)肺新隐球菌感染肺新隐球菌感染(PASPAS染色)染色)隐珠菌属隐珠菌属新型隐球菌新型隐球菌培养特性:培养特性:在SDA培养基上25和37均可生长,其中3031 时生长良好,菌落白色或奶白色、粘稠、不透明。SDASDA上菌落特征上菌落特征隐珠菌属隐珠菌属