m-6A甲基化修饰在肿瘤免疫中的作用及干预策略_彭彦茜.pdf

专家综述基金项目:国家重点研发计划青年项目(2022YFC2601800);国家自然基金项目(32161143017,82173833,81973343)通信作者:王红胜,E-mail:whongsh m6A 甲基化修饰在肿瘤免疫中的作用及干预策略彭彦茜1 易 诚2 陶丽君2 王红胜21 湘南学院基础医学院(郴州 423000)2 中山大学药学院(广州 510006)王红胜,中山大学药学院教授、博导、副院长、教育部青年长江学者。目前主要研究 RNA 修饰在肿瘤中的作用及其靶向治疗策略。先后主持国家重点研发计划青年项目、广东省自然基金卓越青年团队项目、6 项国家自然基金(国际合作 1 项、面上 4 项、青年 1 项)、广东省自然科学基金杰出青年基金等 10 多项课题。获中国药理学会施维雅青年药理学家奖(2019)、中国药学会以岭生物医药奖青年奖(2019)、中国药理学会青年药理学家奖(2018)、中国药学会赛诺菲青年生物药物奖(2016)。近五年以通讯及第一作者在 Pro-ceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America、NatureCommunications 等 SCI 期刊发表论文 60 余篇。总计引用次数超过 5 500 次,h-index 为 45,入选全球顶尖前 10 万科学家,全球前 2%顶尖科学家榜单。【摘 要】N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核生物信使 RNA 中最丰富的表观遗传修饰,其失调会导致 mRNA 异常生物学行为如翻译和降解紊乱,从而调控肿瘤发生发展。近期研究表明 m6A 在免疫调控过程中可发挥重要作用,其不仅可调节免疫细胞的活化,还在肿瘤微环境中免疫应答发挥重要调控作用,从而影响免疫治疗效果。越来越多的证据表明 m6A 修饰可能是肿瘤免疫治疗的重要潜在干预靶点。本文阐述了免疫细胞中m6A 修饰调控及其在肿瘤免疫微环境中相关调节作用,并进一步探讨了靶向 m6A 调控蛋白在肿瘤免疫治疗中的干预策略及潜在治疗价值。【关键词】m6A 甲基化;肿瘤免疫;肿瘤微环境;靶向治疗 DOI:10.3969/j.issn.1000-8535.2023.02.001The roles of m6A methylation in tumor immunity and targeted therapy strategiesPENG Yanxi1,YI Cheng2,TAO Lijun2,WANG Hongsheng21 School of Basic Medical Sciences,Xiangnan University,Chenzhou 423000,China2 School of Pharmaceutical Sciences,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510006,China【Abstract】N6-methyladenosine(m6A)modification is the most abundant epigenetic modification in eukaryotic mes-senger RNA(messenger RNA).Its dysregulation drives abnormal transcription and translation processes,which promotes theoccurrence and development of tumors.Studies have shown that m6A modification can regulate the activation of immune cellsand their infiltration into the tumor microenvironment(TME),which may affect the efficiency of immunotherapy.Therefore,m6A modification may be a potential target for tumor immunotherapy.This paper describes the modification of m6A in immunecells and the antitumor immune response associated with TME,and explores the potential therapeutic value of targeting m6Aregulators in tumor immunotherapy.【Key words】m6A methylation;tumor immunity;tumor microenvironment;targeted therapy1http:/N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是mRNA 上丰度最高的修饰,其广泛存在于原核和真核生物中1。m6A 已被证明对前体或成熟 mRNA的剪接、运输、定位、稳定性和翻译效率具有广泛的影响。此外,m6A 修饰还参与了小 RNA、lncRNA 和其他转录副产物的产生,是特异性调节mRNA 和 miRNA 基因功能的重要途径1-2。m6A 的动态修饰主要依赖于三类相关蛋白,分别是甲基化酶、去甲基化酶和识别蛋白3。这三类蛋白以协调一致的方式共同工作,保持细胞内 m6A 的稳态。RNA m6A 甲基化酶主要为 MET-TL3/14 及 WTAP,其功能是将甲基供体 S-腺苷甲硫氨酸上甲基转移到腺苷的 N-6 位置,并催化RNA 中形成 m6A4,见图 1。FTO 及同属 Alkb 家族的 ALKBH5 被证实为 RNA m6A 去甲基化酶,可高表达于大脑、肺、肌肉及睾丸5-6。m6A 识别蛋白主要是含有 YTH 结构域的蛋白家族7-8,分别是定位在细胞质的 YTHDF1/2/3 和定位于细胞核中的 YTHDC1/2 等2。此外,在哺乳动物细胞中发现与 m6A 关联的蛋白还有 IGF2BP、HuR 及HNRNP 等诸多识别蛋白1。近期研究表明,m6A 修饰可以调节肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中免疫细胞的浸润、存活、分化或极化,促进肿瘤细胞的增殖和转移,进而影响免疫治疗的效果2。此外,m6A修饰在调控免疫细胞效应功能及相关的抗肿瘤免疫反应中发挥着重要作用2。目前,肿瘤免疫调节疗法已发展成为一种癌症治疗的有效策略,基于表观遗传学的免疫治疗新策略也被提出用于癌症治疗2。因此,靶向 m6A 甲基化修饰的干预策略在肿瘤免疫治疗中具有重要潜在价值。本文将分别从 m6A 在免疫细胞及肿瘤免疫治疗中作用进行阐述,从而为基于 m6A 甲基化修饰的肿瘤免疫治疗提供新思路。图 1 m6A RNA 修饰及其介导功能1 m6A 修饰在免疫细胞中的作用研究表明 m6A 在细胞分化过程中发挥重要调控作用。细胞分化是免疫细胞成熟及发生作用的重要过程,近期研究表明 m6A 修饰在免疫细胞如 T细胞、B 细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、树突状细胞等分化过程中发挥重要调控作用,从而调控免疫系统功能及其在体内的作用。1.1 T 细胞T 细胞在胸腺中发育,当其成熟后可迁移到周围器官构成适应性免疫系统的基础,根据细胞表面受体 CD4 或 CD8 分为两大类,在发生病毒感染和肿瘤细胞侵袭起重要的保护作用9。研究表明m6A 修饰在 T 细胞分化和功能中具有重要调控作用。如 METTL3 的缺失会导致 CD4+T 细胞下调IL-7 介导的 STAT5 细胞因子信号抑制蛋白 SOCS的激活,破坏 T 细胞的稳态和分化10。滤泡辅助性 T 细胞(T follicular helper,Tfh)是一种特化的CD4+T 细胞亚群,对体液免疫至关重要11。在敲除 METTL3 的小鼠中,Tfh 分化会受到严重阻碍,这可能是因为 Tfh 的重要特征基因 Tcf7、Bcl6、Icos 和 CXCR5 等的 mRNA 稳定性受 METTL3 调控所导致12。同时,在敲除 METTL3 的小鼠中会导致 IL-2/STAT5 信号通路被抑制,调节性 T 细胞对效应 T 细胞的抑制功能丧失,从而增强 TME 中的抗肿瘤免疫应答13。此外,METTL3 介导的环状RNA circIGF2BP3 的 m6A 可通过与识别蛋白 YTH-DC1 结合增强其环化,从而上调 PKP3 表达并诱发2广州医药 2023 年 2 月第 54 卷第 2 期PD-L1 表达上调来抑制 CD8+T 细胞在肿瘤组织的浸润及促进肿瘤细胞免疫逃逸14。以上证据表明m6A 甲基转移酶 METTL3 对 T 细胞功能及分化具有重要调控作用。除 METTL3 外,多项研究表明 m6A 修饰的其它调控蛋白 METTL14、ALKBH5、YTHDF1 等的失调参与了对 T 细胞功能的调控。Dong 等人15的研究发现,肿瘤基质中 METTL14 的表达量与 m6A 修饰水平及 CD8+T 细胞的浸润呈正相关,METTL14的降低促使 CD8+T 细胞功能失调,最终促进肿瘤生长。小鼠模型中,T 细胞 METTL14 缺失可使得调节性 T 细胞功能紊乱,从而导致自发性肠炎的显著增加16。在 CD4+T 细胞中,m6A 去甲基化酶 ALKBH5 缺乏可导致 IFN-和 CXCL2 mRNA 的m6A 增加,从而降低其 mRNA 稳定性及蛋白表达,从而导致进入中枢神经系统的中性粒细胞减少并减缓自身免疫性脑脊髓炎症状17。T 细胞在黏膜组织稳态和免疫调节中起着至关重要的作用,近期研究发现淋巴细胞中 ALKBH5 缺失可导致 T 细胞显著扩增,从而抑制胃肠道沙门伤寒菌感染,其机制可能是通过增加 Notch 信号元件 Jag-ged1 和 Notch2 等 mRNA 的 m6A 从而抑制其表达18。此外,Han 等人报道了 YTHDF1 蛋白的缺失可以增强 T 细胞对肿瘤抗原的提呈作用,提高CD8+T 细胞反应性,从而抑制小鼠肿瘤生长17。以上证据表明,m6A 修饰在 T 细胞中的不同功能可能取决于细胞类型和细胞环境,其详细作用及机制仍待进一步深入研究。1.2 B 细胞B 细胞主要来源于骨髓中的造血干细胞,响应抗原刺激而分化为浆细胞,合成和分泌免疫球蛋白,主要进行体液免疫。生发中心反应对产生记忆 B 细胞和长寿命的抗体分泌浆细胞至关重要,近期研究发现 METTL14 对生发中心 B 细胞增殖及抗体反应至关重要,其主要机制是通过增加 m6A修饰来降解负性免疫调控因子如 Lax1 和 Tipe2 的mRNA19。同时,METTL14 的缺失可显著降低 B细胞 mRNA m6A 甲基化,从而阻碍 B 细胞发育,这一研究进一步证实了 RNA m6A 甲基化及其调节蛋白在早期 B 细胞发育中的重要调节作用20。利用 Cd19-Cre(METTL CKO)在 pro-B 阶段对 MET-TL3 进行条件性敲除,结果表明 pro-B 阶段敲除METTL3 对 B 细胞发育和功能以及肝纤维化中 B 细胞的前纤维化活性的影响极小,从而提示 METTL3介导的 B 细胞发育可能具有阶段依赖性21。1.3 巨噬细胞巨噬细胞是先天免疫的吞噬细胞系统主要参与病原体和肿瘤细胞的识别、吞噬和降解22。通过基于 CRISPR 文库系统筛选,结果发现 m6A 甲基转移酶在巨噬细胞活化过程发挥重要促进作用,METTL3 缺失的巨噬细胞其 LPS 诱导产生的 TNF-显著降低,其主要机制是通过抑制 Irakm 基因的mRNA 甲基化从而抑制 TLR 信号诱导的巨噬细胞活化23。同时,识别蛋白 IGF2BP2 可通过稳定TSC1 和 PPAR 从而调控巨噬细胞活化,其缺失可促进右旋糖酐硫酸钠诱导的结肠炎24。同时,干扰素调节因子 1(IFN regulatory factor-1,IRF1)可通过上调环状 RNA circ_0029589 的 m6A 甲基化从而抑制其表达,进而诱导巨噬细胞的焦亡25。在动脉粥样硬化过程中,RNA 结合蛋白 Matr3 可通过募集 METTL3/14 甲基复合物从而增加 MAPK mR-NA 甲基化并导致其降解,从而抑制巨噬细胞介导的炎症反应及动脉粥样硬化进程26。巨噬细胞高度参与肿瘤的发生和发展,特别是 TME 中的肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophages,TAMs)非常具有可塑性,通常分为两种功能相反的亚型即经典激活的 M1 样巨噬细胞和交替激活的 M2 样巨噬细胞。M1 样巨噬细胞能促炎和杀瘤,而 M2 样巨噬细胞发挥免疫抑制和促进肿瘤生长的功能27。最近研究发现,METTL3可直接甲基化 STAT1 的 mRNA 并上调其 mRNA 稳定性与蛋白表达,从而促进巨噬细胞的 M1 极化28。在肿瘤组织中,干扰巨噬细胞的 METTL3可增强重塑肿瘤微环境中 M1 样和 M2 样 TAMs 的浸润,使其功能紊乱并招募调节性 T 细胞到肿瘤发生部位,同时 METTL3 缺陷小鼠对 PD-1 的治疗响应程度显著降低29。巨噬细胞缺乏 METTL14 可抑制 CD8+T 细胞抗肿瘤功能,促进肿瘤生长30。LncRNA-PACERR 在胰导管腺癌中通过与 miR-671-3p 和 m6A 结合蛋白 IGF2BP2 相互作用诱导肿瘤相关巨噬细胞向 M2 极化,促进细胞增殖、侵袭和迁移,从而促进胰腺癌的恶性进展31。以上证据提示 m6A 调节的巨噬细胞分化是肿瘤免疫治疗重要潜在靶点。1.4 NK 细胞自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)是主要的固有免疫淋巴细胞,主要介导抗病毒和抗肿瘤免疫功能32-33。已有文献报道,YTHDF2 介导的3http:/m6A 甲基化在 NK 细胞免疫中的多面作用,对维持NK 细胞内稳态、成熟、IL-15 介导的生存以及抗肿瘤和抗病毒活性至关重要34。此外,Song 等人35观察到,METTL3 在肿瘤浸润 NK 细胞中的表达下降,其蛋白表达水平与 NK 细胞中效应分子呈正相关。m6A 甲基化酶 METTL3 和 m6A 结合蛋白YTHDF2 均正向调节 NK 细胞的抗肿瘤免疫,因此m6A 甲基化修饰可能是维持 NK 细胞抗肿瘤免疫和内稳态的重要调节因子。目前其它 m6A 调节蛋白对 NK 细胞的效应功能和调控机制尚不明确。1.5 树突状细胞树突状细胞(dendritic cells,DC)是重要的抗原递呈细胞(antigen presenting cells,APCs),在固有免疫和适应性免疫反应中有重要作用36。最近研究表明,METTL3 在 DC 中的特异性缺失导致DC 表型和功能成熟受损,表现为共刺激分子CD40、CD80 和细胞因子 IL-12 的表达减少,并降低体外和体内刺激 T 细胞应答的能力37。在小鼠的 DC 细胞中特异性敲除 METTL3 可降低 MHC-II、共刺激分子(CD80、CD86)和炎性因子(IFN-、IL-12)的表达水平,降低 T 细胞增殖激活能力,从而诱导小鼠心脏移植后的免疫耐受,并延长异体移植物存活时间38。以上证据表明 METTL3 有助于维持成熟 DC 表型特性。同时,Han 等人报道了 m6A 结合蛋白 YTHDF1 负向调控抗肿瘤树突状细胞的免疫应答39。与野生型小鼠相比,YTHDF1缺陷小鼠表现出更高的抗原特异性 CD8+T 细胞抗肿瘤反应,YTHDF1-/-小鼠中 PD-L1 检查点被阻断,免疫治疗效果增强,提示 YTHDF1 可能是抗肿瘤免疫治疗的潜在靶点39。对于 m6A 调控树突状细胞作用研究亟待进一步深入探索。2 m6A 在肿瘤免疫中的作用肿瘤微环境在肿瘤进展中起着重要作用并显著影响免疫治疗效果40-41。近期研究表明,m6A在肿瘤免疫及肿瘤微环境的重塑过程发挥重要调控作用,其可能是重要的肿瘤免疫治疗潜在靶点。2.1 m6A 在肿瘤固有免疫中的作用固有免疫指的是机体在种系发育和进化过程中形成的天然免疫防御功能,也称为非特异性免疫,其参与细胞主要有单核-巨噬细胞、DC 细胞、粒细胞、NK 细胞等。固有免疫细胞是肿瘤微环境的主要组成部分,它们在调节肿瘤的发生、生长、转移和对治疗的反应中起着复杂而多方面的作用。前期研究表明 m6A 修饰在体内固有免疫反应如抵抗病毒感染等过程中发挥重要作用42。其不仅参与外源 RNA 的感知,也参与固有免疫信号转导相关转录物的调控43。在人偏肺病毒(humanmetapneumovirus,HMPV)侵染的细胞中,HMPV的 RNA 可利用宿主细胞的甲基转移酶发生 m6A 甲基化修饰,从而帮助 HMPV 病毒逃避固有免疫检测及免疫攻击42。宿主细胞 m6A 甲基转移酶METTL3 的缺失可降低 SARS-CoV-2 病毒 m6A 修饰,从而减少 RNA 病毒感受器 RIG-I 的识别和结合,进而增强其免疫逃逸的能力44。在肿瘤微环境的固有免疫细胞中,m6A 修饰可对单核-巨噬细胞、DC 细胞、粒细胞、NK 细胞等分化及功能产生重要调节作用,从而调控肿瘤进展。在肿瘤组织中,敲低 METTL3 后可以抑制由YTHDF2 介导的 SPRED2 翻译,从而增加由 ERK介导的 NF-B and STAT3 活化,并促进 M1/M2 样肿瘤相关巨噬细胞向肿瘤组织的浸润以及肿瘤的生长转移29。同时,METTL3 介导的 m6A 可促进TRAF5 表达从而促进肿瘤微环境中巨噬细胞向 M2TAM 转化及结直肠癌的顺铂耐药45。Song 等人35观察到肿瘤微环境通过 TGF-降低 METTL3表达,从而导致 NK 细胞的 m6A 水平下降,导致SHP-2 活性降低,从而导致 NK 细胞增殖和分化受限、效应功能受损,对肿瘤细胞反应降低。YTH-DF2 缺失可抑制肿瘤微环境中 NK 细胞的稳态及成熟,从而抑制其抗肿瘤作用,其主要机制是通过调控 Tardbp 从而调控 NK 细胞的增殖34。在肝癌中,Shen 等人46分析了来自 TCGA 数据库的 433个肝癌样本,发现 METTL3 表达与 DC 细胞浸润肿瘤呈负相关。以上研究揭示 m6A 可调控肿瘤微环境中固有免疫细胞的分化及免疫应答从而调控肿瘤生长。2.2 m6A 在肿瘤特异性免疫中的作用特异性免疫又称获得性免疫或适应性免疫,人体经后天感染或者预防接种而使机体获得的抵抗感染能力,专门用于清除特定的病原体和建立持久的免疫记忆,包括多种细胞类型之间复杂的通信,如参与细胞免疫的 T 细胞及体液免疫的 B细胞等。肿瘤部位的适应性免疫抗性是指肿瘤通过各种策略来适应并最终逃逸机体免疫系统攻击,从而使得肿瘤细胞在体内生长转移。m6A 调节适应性免疫的机制是一个新兴的研究领域,近期研究表明其在肿瘤发生发展过程中4广州医药 2023 年 2 月第 54 卷第 2 期起着关键作用。在睾丸生殖细胞肿瘤(testiculargerm cell tumors,TGCTs)中,研究者发现肿瘤细胞中 METTL3 的异常表达影响免疫细胞的浸润,METTL3 的表达在 TGCT 组织中显著下调,且其表达水平 与 患 者 生 存 率、肿 瘤 中 CD8+T 细 胞、CD4+T 细胞和 NK 细胞浸润水平呈正相关,提示其可能在 TGCT 中发挥激活肿瘤免疫应答的作用47。特异性敲除 METTL14 会诱导 CD8+T 细胞沿功能障碍方向分化,破坏 CD8+T 细胞会影响巨噬细胞清除肿瘤的功能15。METTL3 在结直肠癌肿瘤细胞中高表达,METTL3 或 METTL14 的缺失增加了细胞毒性 CD8+T 细胞,并增加了 TME 中IFN-、CXCL9 和 CXCL10 的分泌,从而增强了肿瘤细 胞 对 PD-1 治 疗 的 响 应48。在 宫 颈 癌 中,METTL3 在肿瘤组织中的表达远高于癌旁组织,且其表达水平与 CD33+髓系衍生抑制细胞的密度呈正相关,而 CD33+髓系来源的抑制细胞的密度与患者生存率差相关49。乳腺癌中 METTL3 的表达水平与患者的生存率和肿瘤内注入的 CD8+T 细胞、辅助性 T 细胞和激活的 NK 细胞呈负相关50。在头颈部鳞状细胞癌中,METTL3 和 HNRNPC 在肿瘤组织中的高表达量比正常组织高 1 倍,HNRNPC与 CD4 naive T 细胞、CD4 记忆激活 T 细胞和嗜酸性粒细胞浸润呈正相关51。以上研究提示甲基转移酶 METTL3 在 T 细胞介导的肿瘤特异性免疫中发挥重要调控作用。肿瘤细胞 METTL14 对 TME 免疫细胞的影响研究处于起步阶段。METTL14 表达水平低预示了乳腺癌预后不良,METTL14 表达水平与肿瘤中 CD4+T 细胞、CD8+T 细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和DC 的浸润水平呈显著正相关,而与肿瘤中调节性T 细胞的浸润水平呈显著负相关,提示 METTL14能激活肿瘤免疫应答52。该研究表明,METTL14的异常表达可通过影响免疫细胞浸润介导免疫抑制来促进肿瘤的侵袭。3 靶向 RNA m6A 在肿瘤免疫治疗中的作用在肿瘤细胞中 m6A 及其调控蛋白表达异常从而调控肿瘤免疫微环境及肿瘤免疫应答。目前基于 m6A 及其调控蛋白在肿瘤免疫治疗中的作用主要包括利用 m6A 调控蛋白特异性抑制剂提高免疫应答、诱导 TME 中免疫相关细胞增强免疫应答等策略。3.1 开发 m6A 调节蛋白特异性抑制剂提高肿瘤免疫应答近年来,一系列靶向 m6A 调控蛋白如去甲基化酶 FTO、ALKBH5 及甲基转移酶 METTL3 的小分子抑制剂等被开发出来,其中 FTO 是抑制剂开发较多的靶点。在 2012 年至 2019 年期间,研究人员开发并研究了一系列 FTO 抑制剂,如大黄酸、甲氯芬肟酸、Radicicol、N-CDPCB、CHTB、Entaca-pone、2-羟 基 谷 氨 酸-酒 酸(R-2HG)、FB23、FB23-2、CS1/CS2、Dac51 等(表 1)。这些 FTO抑制剂在体内外均表现出显著的抗肿瘤作用,不仅抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤干细胞的自我更新,而且还可以抑制肿瘤干细胞的抗肿瘤免疫。如 FTO小分子抑制剂 Dac51 与 PD-L1 单抗联用显著抑制了小鼠黑色素瘤细胞、肺癌细胞以及结肠癌细胞的成瘤性,且肿瘤完全消失的小鼠激发免疫记忆细胞应答,可抵抗 10 倍移植数量的小鼠结肠癌细胞的再次成瘤。其能够抑制肿瘤细胞的糖代谢途径,进而增强肿瘤浸润免疫 T 细胞的抗肿瘤功能,具有潜在的临床应用价值53。2021 年,英国剑桥大学、英国 Storm Therapeu-tics 公司等开发在体内具有活性的 m6A 甲基化酶METTL3 小分子抑制剂 STM2457,并进一步证实该抑制剂能够有效抑制急性髓系白血病发展54。鉴于 METTL3 在 T 细胞及多种免疫细胞中的发挥重要调控作用,其小分子抑制剂在肿瘤免疫应答中的作用亟待深入研究。表 1 m6A 甲基化酶抑制剂抑制剂靶点生物学功能参考文献RheinFTOInhibits FTO activity on m6A demethylation55MAFTOBind and stabilize FTO but had minimal influence on ALKBH556RadicicolFTORadicicol,as an FTO inhibitor in vitro,provided new information on de-signing more potent compounds to inhibit the activity of the enzyme57N-CDPCBFTOInhibitory activityonFTOdemethylationofthe 15-merssRNA,significantly decreased the level of m6A of mRNA in preadipocytes585http:/抑制剂靶点生物学功能参考文献CHTBFTOCHTB complexed with human FTO reveals that the novel small moleculebinds to FTO in a specific manner,regulation of mRNA splicing and adi-pogenesis by modulating m6A levels58EntacaponeFTOEntacapone as a chemical inhibitor of FTO mediating metabolic regula-tion through FOXO159R-2HGFTOAnti-leukemia and anti-glioma60FB23/FB23-2FTOInhibits the proliferation and promotes cell diferentiation/apoptosis of hu-man acute myeloid leukemia cells61CS1/CS2FTOInhibits cancer cell proliferation,cancer stem cell self-renewal and im-mune evasion62Dac51FTOPromotes T cell response and enhances the anti-PD-1 therapy53IOX3FTO/ALKBH5An inhibitor of the HIF prolyl hydroxylases,decreased cellular proteinexpression of FTO,failed to alter the m6A level inside of cells.IOX3 al-so could bind to ALKBH5 in a covalent attachment63FMNNucleosideCombined with blue-light irradiation substantially decreases m6A levelsin cells by directly targeting the nucleoside modification64STM2457METTL3/METTL14events AML expansion and reduces the number of leukemia stem cells invivo543.2 TAM 是肿瘤免疫治疗的重要潜在靶点TAMs 是肿瘤微环境中促肿瘤作用中的关键成分,可在肿瘤起始、生长、血管生成、淋巴管生成、局部和远处转移发挥重要促进作用65。通过将肿瘤 M2 巨噬细胞转化为抗肿瘤 M1 样表型是重要的潜在抗肿瘤治疗方式27。前期研究抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 1 可以将 TAMs 重编程为 MH-CIIhiTNF+IFN+STAT1 依赖的免疫原性表型从而获得抗肿瘤效应66。前期研究提示干扰巨噬细胞的 METTL3 可增强重塑肿瘤微环境中 M1 样和M2 样 TAMs 的浸润并降低 PD-1 的治疗响应程度显著降低29,因此活化细胞内 m6A 相关调控蛋白可能是提高免疫应答的有效策略。4 总结与展望随着研究的深入,m6A 甲基化修饰及其调控相关蛋白的作用和生物学意义以及在恶性肿瘤中的调控机制均得到了较为深入的研究。研究发现 m6A修饰可调节免疫细胞的激活和进入肿瘤微环境,从而影响免疫治疗的效果。因此,m6A 修饰可能是肿瘤免疫治疗的重要潜在靶点。在接下来的研究中,针对 m6A 修饰开发肿瘤免疫治疗相关策略方向有:针对 m6A 调节剂的特异性高效抑制剂与免疫检查点阻滞剂相结合,开发有效的免疫治疗途径;开发针对单基因或者多基因 m6A 基因编辑系统,可用于增强 T 细胞或自然杀伤细胞的抗肿瘤免疫应答;深入阐析不同调控蛋白在肿瘤免疫微环境各类细胞分化及免疫应答阶段的特点,做到更为精准的肿瘤免疫调控及干预。靶向 DNA 甲基化酶或者组蛋白修饰酶的数个新药获批用于治疗肿瘤并获得良好的治疗效果和巨大的经济效益。基于表观遗传的化学干预研究已经成为国际上药物新靶标研究的活跃领域。靶向性干预 m6A 修饰,不仅可推动相关领域的基础研究,也可在肿瘤治疗等疾病相关领域展现出巨大的应用前景,在生命科学和新药发现领域同时展现重要科学意义。【参考文献】1 ROUNDTREE I A,EVANS M E,PAN T,et al.Dy-namic RNA modifications in gene expression regulationJ.Cell,2017,169(7):1187-1200.2 ZHAO B S,ROUNDTREE I A,HE C.Post-transcrip-tional gene regulation by mRNA modifications J.Nat6广州医药 2023 年 2 月第 54 卷第 2 期 续表Rev Mol Cell Biol,2017,18(1):31-42.3 FU Y,DOMINISSINI D,RECHAVI G,et al.Geneexpression regulation mediated through reversible m6ARNA methylation J.Nat Rev Genet,2014,15(5):293-306.4 LIU J,YUE Y,HAN D,et al.A METTL3-METTL14complex mediates mammalian nuclear RNA N6-adenosinemethylation J.Nat Chem Biol,2014,10(2):93-95.5 JIA G,FU Y,ZHAO X,et al.N6-methyladenosine innuclear RNA is a major substrate of the obesity-associatedFTO J.Nat Chem Biol,2011,7(12):885-887.6 ZHENG G,DAHL J A,NIU Y,et al.ALKBH5 is amammalian RNA demethylase that impacts RNA metabo-lism and mouse fertility J.Mol Cell,2013,49(1):18-29.7 WANG X,LU Z,GOMEZ A,et al.N6-methylade-nosine-dependent regulation of 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