Sysmex-XS-500i血液分析仪作业指导书.doc

(word完整版)Sysmex XS 500i血液分析仪作业指导书
Sysmex XS—500i血液分析仪作业指导书

Sysmex Automated Hematology Analyzer （XS 500i）血细胞分析仪是用于检测血细胞（红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。
1、检验目的
Sysmex Automated Hematology Analyzer （XS 500i)血细胞分析仪是用于检测血细胞（红细胞、白细胞和血小板）数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。

2、原理
2.1 XS 500i采用一束半导体激光照射标本，并依据每个细胞产生的三种信号来相互区分,即前向散射光,侧向射散光和侧向光和侧向荧光。前向散射光反映细胞体积，侧向散射光反映细胞内涵物,如核和颗粒，侧向荧光反映细胞脱氧核糖核酸（DNA)和核糖核酸（RNA）含量。

2.2． DIFF通道：表面活性剂可完全溶解红细胞和血小板，部分溶解白细胞。第2种试剂使核酸染上荧光染料。XS 500i的DIFF通道可将白细胞分成5类。在STROMATOLYSER-4DL试剂中的表面活性剂可溶解或破坏红细胞和血小板,并在白细胞膜上打出小孔。在STROMATOLYSER-4DS试剂中的聚次甲基染料可进入破损白细胞，与核酸和细胞器结合，经波长633nm的激光照射,所产生荧光强度与细胞核酸含量成一定比例。在STROMATOLYSER—4DL试剂中的有机酸能与嗜酸性颗粒特异结合,根据侧向散射光信号强度，能提高嗜酸性粒细胞从中性粒细胞区分出来能力。

3、仪器
SYSMEX XS—500i自动血液分析仪

4、试剂：
4。1 稀释液： CELLPACK(PK—30L)
氯化钠： 6.38g/L
硼酸： 1.0g/L
四硼酸钠 0.2g/L
EDTA—2K： 0。2g/L
4.2 Hb溶血素： SULFOLYSER （SLS-210A)
月桂洗硫酸钠： 1。7g/L
4.3 STORMATOLYSER 4DL（FFD—200A） ：
非离子表面活性剂：0.18％
有机季铵盐: 0。08％
4.4 WBC分类染液: STORMATOLYSER 4DS（FFS—800A）
聚次甲基染料: 0。002％
甲醇: 3.0％
1,2—亚乙基二醇： 96.9%

5。操作步骤：

5。1．打开电脑

5.2．双击“IPU”图标，出现IPU窗口和登陆对话框。输入用户名和密码.点击确认进入IPU。

5.3 检查废液是否已满，并倒空。打开主机电源，IPU与主机通信连接

5.4．主机初始化，然后做本底.

5。5 本底通过后，主机指示灯变绿，表示仪器处于待机状态，可以开始检测质控标本了。

5。6．质控检测：点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框,在“手工样本号”对话框再点击“质控”按钮，出现“选择质控文件”对话框,选择好质控文件后,点击确认打开所选质控文件，混匀质控标本，按“开始"键开始分析质控样本，分析完后跳出质控样本分析结果,观察结果是否在控，若在控按“接受”按钮退出，开始检测病人样本，若失控按“取消”退出，查找原因，继续检测质控样本,直到质控结果在控.

5.7．样本分析：点击“手动"按钮，出现“手工样本号"对话框，在“手工样本号”对话框输入样本号,选择分析模式“CBC+DIFF”，样本预稀释模式“是”或“否”。点击确认，混匀样本，按“开始”键开始分析样本。分析结束后在“浏览器”下的“主屏"界面，观看结果、直方图和散点图，判断是否需要复片。

5。8．关机：双击“菜单”下的“关机”按钮，跳出“关机”对话框，点击“执行”按钮，主机自动冲洗2分钟，之后提示关闭主机电源，然后关IPU窗口退出程序，最后关闭电脑。

5.9仪器维护:
5。9。1。每日维护：每天关机自动清洗，如24小时待机,则执行一次“菜单”下的“自动清洗”。
5。9。2．每周维护：在“控制器”“保养”下执行排空废液,堵孔去除，去除气泡。
5。9。3．每月维护：每月或1200次分析之后开展一次每月维护,在“控制器"“保养”“每月清洗"下执行,同时执行清洗废液瓶。

6.参考范围：
6.1。1.白细胞（WBC)计数： 成人（4 –10）×109/L
儿童(5 —12） ×109/L
新生儿(15—20) ×109/L
6。1.2.白细胞分类(成人）： 中性粒细胞（50—70)%
淋巴细胞(20-40)％
嗜酸性粒细胞(0。5—5）％
嗜碱性粒细胞（0—1）％
单核细胞（3-8）%
6。2．红细胞(RBC）： 男（4—5.5)×1012/L
女(3。5-5）×1012/L
新生儿（6—7）×1012/L
6.3 血红蛋白(HGB）: 男(120—160）g/L
女（110-150）g/L
新生儿（170—200）g/L
6。4．血小板(PLT）： （100—300)×109/L
6.5．血球压积(HCT)： 男 0.42—0。49
女 0。37—0.43
6.6．平均红细胞体积 （MCV)： （86-100）fl
6.7．平均红细胞血红蛋白含量（MCH)： （26-31 ）pg
6.8．平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）： （310-370）g/L
6。9．红细胞体积分布宽度变异系数（RDW-CV）： （11.6—14.0）%；
6。10．红细胞体积分布宽度标准差（RDW-SD)： （39。0-46。0)fL。
6.11．血小板体积分布宽度(PDW）： （15.5—18。1)％
6。12．平均血小板体积（MPV）： （9。4—12。5)fl；
6.13．大血小板比率（P—LCR）： （13—43)%。
7.临床意义:
7。1．白细胞
7.1.1. 白细胞计数
7。1.1。1 生理性增加 新生儿、运动、饭后、冷水浴后、疼痛、月经期、受寒、妊娠、分娩、阵发性心动过速、阳光或紫外光照射、抽搐、恶心、呕吐、麻醉等。

7.1.1。2。 病理性增加 类白血病、白血病、急性化脓性细菌感染、急性溶血、急性失血、单核细胞增多症、淋巴细胞增多症、真性红细胞增多症、腮腺炎、病毒性肝炎、淋巴瘤、组织坏死、手术后、肿瘤转移、药物中毒、代谢性酸中毒、过敏等.

7。1.1。3。 减少 伤寒、副伤寒、斑疹伤寒、兔热病、布鲁杆菌热、流感、麻疹、风疹、革登热、传染性肝炎（亦可增多）、疟疾、过敏性休克、系统性红斑狼疮、粟粒性结核、败学症、重症细菌感染、恶液质、放射治疗、肿瘤化疗。恶性贫血、非白细胞性贫血、再生障碍性贫血、脾功能亢进、戈谢病、Felty综合症、Che^diak—Higashi综合症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。

7。1。2白细胞分类计数：见下述各种白细胞增多、减少的临床意义

中性粒细胞（N）
1)生理性N增多：饱餐、激动、剧烈运动、高温、严寒可使N暂时性增高、新生儿、月经期、妊娠5个月以上可增高,生理性增多都是-过性的，不伴有白细胞质量变化
2）病理性中性粒细胞增高：
原因很多,大致归为反应性增多和异常增生性增多两大类：反应性增多是机体对各种病因刺激的应激反应，动员骨髓贮存池中的粒C释放或边缘池粒C进入血循环.因此，增多的粒C大多为成熟的分叶核粒C或较成熟的杆状核粒C,而异常增生性增多为造血组织中原始或幼稚粒C大量增生，释放至外周血中的主要是病理性粒C。
④急性失血,可能与大出血所致的缺氧和机体的应激反应，动员骨髓贮存池中的血细胞释放有关。
⑤急性中毒
⑥恶性肿瘤 非造血系统恶性肿瘤有时可出现持续性WBC增高，以N为主，可能的机制为:
a. 肿瘤组织坏死的分解产物刺激骨髓中的粒细胞释放
b。 某些肿瘤如肝Ca、肾Ca等肿瘤细胞可产生促粒细胞生成因子
c. 恶性肿瘤骨髓转移破坏骨髓对粒细胞释放的调控作用。
异常增生性增多：见于粒C白血病如AML、CML ，骨髓增殖性疾病。
中性粒细胞减少:
①感染性疾病
病毒感染：流感、麻诊、风诊、肝炎;细菌：伤寒，严重的细菌感染
年老：慢性消耗疾病或晚期恶性肿瘤伴感染→预后差
②血液系统疾病
非白血性白血病 恶性贫血
③物理 化学因素、放射线、核素、毒物、药物
④单核-巨噬C系统功能亢进,脾亢
⑤其它 过敏性休克

淋巴细胞
增高:
生理性增高：儿童，出生4-6天的可达50%,4-6岁后逐渐减低
病理性增高：百日咳、传染性单核细胞增多症、淋巴细胞性白血病、传染淋巴细胞增多症、病毒性肝炎、弓形虫病
减低：
急性感染、粟粒性结核、晚期肿瘤、艾滋病、伴T淋巴细胞减少的免性缺陷

单核细胞
增高:
单核细胞性白血病、系统性红斑狼疮、亚急性细菌性心内膜炎、活动性结核、急性感染恢复期、原虫感染
减低：
使用皮质类固醇激素、再生障碍性 贫血、多毛细胞白血病
嗜碱性粒细胞
增高：慢粒、何杰金病、癌转移、铅和铋中毒等;减低无意义。
嗜酸性粒细胞
增高：
①变态反应性疾病 哮喘 荨麻诊 药物过敏
②寄生虫病 血吸虫、丝虫、囊虫
③皮肤病：湿诊 剥脱性皮、银屑病
④血液病：CML、Lyphoma E白血病
⑤某些急性肿瘤：肿瘤转移或有坏死灶的恶性肿瘤
⑥某些传染病，传染病感染期，E常减低，唯有猩红热急性期E增加
⑦其它,风湿性疾病,垂体前叶功能减退,肾上腺皮质功能减退
⑧高E综合征，少见，这组疾病包括肺浸润和E增高，过敏性肉芽肿，E心内膜炎
减低：
临床意义较小，长期应用皮质激素后

7.2．红细胞(RBC):
7.2.1. 生理性减少:见于妊娠中后期、6个月至2岁的婴儿等。
7。2。2. 病理性减少:造血原料不足、造血功能障碍、红细胞破坏过多 或失血所引起的各种贫血.
7。2.3. 相对性增多:主要因血浆容量减少所致，见于脱水、呕吐、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤、吸烟、高血压、肥胖等。
7。2。4。 代偿性增多 主要见于缺氧、新生儿、高原环境、CO中毒、严重肺气肿、肺源性心脏病、先天性心脏病、心衰等.
7。2。5. 绝对性增多 克隆性真性红细胞增多;非隆性红细胞增多，与促红细胞生成素产生过多有关,见于肾癌、肝细胞癌、雄激素分泌细胞肿瘤、肾囊肿、肾盂积水、肾移植、小脑血管瘤、子宫肌瘤。
7。3 血红蛋白(HCG）：
生理性增加：新生儿、高原居住者。
病理性增加：真性红细胞增多症、代偿性红细胞增多症（如先天性青紫性心脏病、慢性肺性疾病、脱水）。
减少:各种贫血、白血病、产后、手术后、大量失血.
7。4 红细胞比积（HCT) ：
与红细胞计数、血红蛋白测定的意义类同7。5 .
7。5 血小板(PLT)：
7。5。1。 生理性 正常人血小板在一天内可有6%-10%变化；表现为早晨低,午后较高；春季低，冬季略高；平原较低，高原较高；静脉血比毛细血管血高10%;月经前低，后升高;妊娠中晚期升高,分娩后减低；运动后升高，休息后恢复。
7。5.2 病理性
减少：除创伤之外，血小板减少是引起出血的常见原因。常见疾病有:①、血小板生成障碍，如急性白血病、再生障碍性贫血;②、血小板破坏过多，如ITP、脾功能亢进，系统性红斑狼疮;③、血小板消耗过多，如DIC、血栓性血小板减少性紫癜。
增多（血小板大于400×109/L)：①、骨髓增生性疾病：慢性粒细胞白血病,真性红细胞增多症；②、原发性血小板增多症；③、急性大出血，急性溶血，急性化脓性感染；④、脾切除手术后。
7。6．MCV、MCH、MCHC
主要用于贫血的形态学分类，见下表

贫血的形态学分类

贫血的形态学分类 MCV(fL） MCH（pg） MCHC(g/L）
大红细胞性贫血 100—160 35-50 310—370
正红细胞性贫血 80—100 27-35 310-370
单纯小细胞性贫血 72—80 21-26 300—370
小细胞低色素性贫血 50—80 12—30 240—300

7.7．RDW—CV、RDW-SD：
7.7.1。 用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW增大，经治疗后可恢复正常。
7.7。2。 用于小细胞低色素性贫血的鉴别,缺铁性贫血时RDW增大，而轻型珠蛋白生成障碍性贫血时RDW正常.

7.7。3. RDW与MCV结合可将贫血分为6种。①小细胞均一性:MCV下降，RDW正常，如轻型珠蛋白生成障碍性贫血.②小细胞不均一性:MCV下降，RDW增大，如缺铁性贫血.③正常细胞均一性:MCV、RDW均正常，如某些慢性疾病。④MCV正常，RDW增大,如早期缺铁性贫血。⑤大细胞均一性：MCV增大，RDW正常,如再生障碍性贫血。⑥大细胞不均一性:MCV、RDW均增大,如巨幼细胞性贫血。

7。8．MPV、PDW、P—LCR
7.8.1。 MPV 其临床意义要结合PLT的变化才二价值。①、鉴别血小板减少的原因：当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少;当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；血小板分布异常致血小板减少时，MPC正常.②、MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，MPV越小；当造血功能恢复时，MPV增大常先于PLT升高。③、其它：MPV增大见于骨髓纤维化、ITP、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、镰刀细胞性贫血；MPV减小见于脾亢、化疗后、AA、巨幼细胞性贫血等。

7。8。2. PDW 是反映血小板体积大小的异质性参数，增大见于急淋化疗后、巨幼细胞性贫血、脾切除、慢粒、巨大血小板综合症、血栓性疾病等；可用于鉴别原发性血小板增多症和反应性血小板增多症，前者PDW增加，后者PDW正常。

7.8.3。 P-LCR 代表血小板计数中体积 〉12fL的血小板的比值或数量，有助于识别堆集血小板、大血小板和细胞碎片，并可监测骨髓的造血功能
8. 标本采集：
随机采取病人静脉血或末梢血数滴，用100g/L EDTA-K2 抗凝（20ul抗凝1ml血，相当于2mgEDTAK2/1ml血）。
9. 注意事项：
9.1。 血细胞计数应用EDTA—K2为抗凝剂,用量为EDTA—K2*2H2O1。5-2.0mg
可抗凝1ml血不能用肝素或枸橼酸钠等抗凝剂.
9.2. 采集后在室温中贮存不应超出6h；如需制用血涂片应在2h内完成。
9。3。 测定前抗凝血应充混匀，任何小凝块或血小板聚集均会影响血细胞计数.
9。4。 注意病理因素对血液分析仪使用的影响,特别是各系统的报警提示.如是否有大血小板对血小板计数的影响；有无有核红细胞对白细胞计数的影响等等。
9。5。 如有冷凝集现象，将血置37℃水浴箱10min后立即测试。
10. 质量控制：
10.1。 每日工作开始应先做上海市临床检验中心的全血质控品，.
10。2。 出现失控,应校正后并重做质控，直至符合质控要求。
10.3。 按要求做好仪器校正和仪器对比工作。
10。4. 做好质控、失控和校正登记。
11。 报告复查:
对以下情况的样本进行复查(仪器及手工）
（1）白细胞不分类或者分类不完全（初检、复检);
（2)白细胞计数不出结果：-—(初检、复检）;
（3）单核细胞≥15％（初检）
(4）淋巴细胞≥50％(初检）
（5）Blast？报警信息(初检、复检)，Immature Gran？ (初检、复检）
(6）血液科标本(初检、复检)及临床要求手工镜检标本
（7)MCHC〉380g/L(初检、复检）
协商后设定（经临床检验科讨论后)
（8）WBC总数(WBC<3×109/L或WBC〉30×109/L）（初检）
（9)PLT计数（PLT<80×109/L或PLT>600×109/L）（初检）
NRBC（有核红细胞）？与Atypical Lympho？（异淋？）,PLT Clumps