DB14_T 1507-2017 大豆皂皂醇的测定方法(山西省).pdf

ICS 65.020.20 B 05 B 山西省抽出ETA、万标准DB 14/T 1507-2017 产-r 2017-12-10发布2018-02-10实施山西省质量技术监督局发布目UI=l1 范围2 规范性引用文件目、hlDB14/T 1507-2017 11 3 术语和定义14 5 6 7 8 9 10 化学结构测定原理试剂与标准品.仪器设备测定步骤结果计算重复性产-r I 2 2 2 3 3 DB14/T 1507-2017 11 目IJ口本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西农业大学提出并归口C本标准起草单位:山西农业大学。才又标准主要起草人:杜维俊、岳爱琴、赵晋忠、徐海军、王敏、张永坡、高春艳、高文梅。产-r DB14/T 1507-2017 大豆皂醇测定方法1 范围本标准规定了大豆皂醉的化学结构、测定原理、试剂与标准品、仪器设备、测是步骤、结果计算和重复性。本标准适用于大豆种子、根、茎、叶以及种皮中大豆皂醇的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用品摩盏而少的。凡是注日用国副斥性件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注明的引用文件，于前萨本色主所有的巴勒哥叶文件。GB/T 22464 大豆皂甘fNY/T 1252 大豆异黄fi3 术语和定义下列术语和定义适3.1 大豆皂醇大豆生长过程中形成自生得到，具有五环三市类典型J大型皂哥形式存在，可由大豆皂昔水解4 化学结构大豆皂醇主要成分为大豆皂醇A、大豆尊一OH O HO HO HO CH20H 大豆皂醇A大豆皂醇B大豆皂醇E图1大豆皂醇的化学结构5 测定原理DB14/T 1507-2017 大豆皂醇溶液在波长205nm处有最大吸收峰，在一定范围内，峰面积与大豆皂醇的浓度成正比关系。6 试剂与标准品6.1 试剂6.1.1 超纯水，冰乙酸(分析纯)，浓盐酸(分析纯)，正己炕(分析纯)，乙睛(色谱纯)，甲醇(色谱纯)，冰乙酸(色谱纯)0 6.1.2 提取液:含0.01%乙酸的70%乙醇溶液:取700mL无水乙醇加0.1mL冰乙酸，然后加水稀释至1 000 mLo 6.1.3 水解液:1 mol/L盐酸-甲醇溶液。6.2 标准品7 仪器设备所需仪器设备包括:a)高效液相色谱仪:阳极管阵b)振动球磨仪;c)电子天平:感应旦-.d)说涡震荡仪;e)台式离心机;f)数显恒温三用水箱:1.g)滤头:聚四氟乙烯滤气酶22h)旋转蒸发仪。8 测定步骤8.1 提取提取步骤如下:产-r 在量二三98%)各5mg置于5mL 醇标准品1mgo a)将大豆各材料置于震荡研磨仪中，1 600 rpm派涡震荡30s，材料备用;b)准确称取O.100 g样品，放入10mL的离心管中，加入5mL提取液(70%乙醇+0.01%乙酸);c)派涡震荡2min，浸提24h;d)放入离心机，室温下3000 r/min离心10min;e)取上清液2mL，用2倍体积的jf己炕萃取脱脂，用0.22 m滤膜过滤后密封保存备用o8.2 样品溶液的制备样品溶液的制备步骤如下:a)准确移取2mL大豆皂昔提取液于茄形瓶内，37 oc旋干;b)加入1mL的1mol/L盐酸-甲醇溶液，74 oc水解195mi川2 DB14/T 1507-2017 c)准确吸取水解液o.5 mL，经O.22 tJ m滤头过滤后密封保存备用O8.3 高效液相色谱分析条件高效液相色i着分析条件如下:a)色谱柱:Amide-80色谱柱，粒径5川，柱长250mm，内径4.6 mm;b)流动相:含0.1%冰乙酸的超纯水溶液，含0.1%冰乙酸的乙腊溶液:c)流速:1.0 mL/min;d)检测器:二极管阵列检测器，205 nm波长e)进样体积:10Lo 8.4 色谱测定在相同色谱条件下，分别将标准溶液和桂且善斗高效液相色谱仪分析，根据保留时间定性，外标峰面积定量C9 结果计算计算公式为:AU AV AU 式中:C一一待测样品中皂E苦回含量(mC1-用标准由线11蓓IIJ样品溶V1-试样为1mol)r耻.tk酸一V一一试样为1mol/呻A庭一无M一一称取试样的质量.0 10 重复性产-r.(1)算术平均值的5%。3