高中生物所有实验试剂作用归纳.doc

高中生物实验试剂归纳
1、斐林试剂：
成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。
用法：将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。
2、班氏糖定性试剂：为蓝色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。
3、双缩脲试剂：
成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。
用法：向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。
4、苏丹Ⅲ：
用法：取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。
用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。
5、二苯胺：
用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。
6、甲基绿：
用于鉴定DNA。
DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。
7、50%的酒精溶液：
在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。
8、75%的酒精溶液：
用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。
75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。
9、95%的酒精溶液：
冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。
10、15%的盐酸：
和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。
11、龙胆紫溶液：(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)
用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。（也可以用醋酸洋红染色）
12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：
用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶） 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液： 用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
14、碘液：
用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。
15、丙酮：
用于提取叶绿体中的色素。
16、层析液：（成分：20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93号汽油）可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。
17、二氧化硅：
在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。
18、碳酸钙：
研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。 19、0.3g/mL的蔗糖溶液：
相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分
离实验。
20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：
与鸡血混合，防凝血。
21、氯化钠溶液：
①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最高。
②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
22、胰蛋白酶：
用来分解蛋白质；②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散。
23、秋水仙素：
人工诱导多倍体试剂。用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。
24、氯化钙：
增加细菌细胞壁的通透性（用于基因工程的转化，使细胞处于感受态）

双缩脲试剂 鉴定蛋白质 紫色
斐林试剂 鉴定还原糖 砖红色沉淀
碘液 鉴定淀粉 蓝色
苏丹三 鉴定脂肪 橘黄色
苏丹四 鉴定脂肪 红色
龙胆紫、醋酸洋红 染色体染色
甲基绿 染DNA
吡罗红 染RNA
健那绿 染线粒体

一、常用仪器、试剂或药品的用途
1、NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH
2、Ca(OH)2：鉴定CO2
3、CaCl2：提高细菌细胞壁的通透性
4、HCl：解离（15%）或改变溶液的pH
5、NaHCO3：提供CO2、作为酸碱缓冲剂
6、酸碱缓冲剂（Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4）：用于调节溶液pH
7、NaCl：配制生理盐水（0.9%）或用于提取DNA（0.14M或2M)
8、琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基
9、酒精：用于消毒(75%)、提纯DNA（95%）、叶片脱色、配制解离液（95%的冷酒精）及洗去浮色（50%）
10、蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
11、二苯胺：用于DNA的鉴定（沸水浴，蓝色）
12、甲基绿：检测DNA，呈绿色
13、吡罗红：检测RNA，呈红色
15、斐林试剂（甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4）/班氏试剂：鉴定可溶性还原性糖（沸水浴。砖红色沉淀）
16、双缩脲试剂：用于蛋白质的鉴定（紫色）
17、苏丹Ⅲ染液(橘黄色）和苏丹Ⅳ染液(红色）：用于脂肪鉴定
18、碘液：用于鉴定淀粉（变蓝色）
19、龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色
20、改良苯酚品红染液：检测染色体，红色
21、健那绿B：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色
22、重铬酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色
23、溴麝香酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄
24、吲哚酚试剂：用于维生素C的鉴定
25、伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在
26、亚甲基蓝：用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌（细菌的氧化可使之褪色）
27、pH试纸：检验物质的酸碱性，如乳酸
28、卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定
29、解离液（5%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成）：有丝分裂中根尖的分离与固定
30、层析液：用于叶绿素的分离，主要类型：①由20份石油醚（在60～90℃下分馏出来的）、2份丙酮和1份苯混合而成；②95%的酒精；③93号汽油；④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合；⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。
31、20%新鲜肝脏研磨液：含有H2O2酶，可促进H2O2分解产生O2
32、无土营养液：用于植物无土栽培
33、柠檬酸钠：血液抗凝剂
35、秋水仙素（C22H25O6N）：用于单倍体育种，作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成，可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。
36、滤纸：过滤或纸层
37、纱布、尼龙布：过滤，遮光
38、云母片：阻止生长素传递
39、微电流计：测量神经元受刺激时，神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况

二、实验技术
2、临时装片、切片和涂片的制作：适用于显微镜观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片和涂片，如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片，在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制作花生种子的切片，在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等。
4、解离技术：适用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片。
5、恒温技术：适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱，根据题目要求选用。
6、层析技术：适用于溶液中物质的分离。主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、层析分离等。
7、植物叶片中淀粉的鉴定：适用于光合作用的有关实验，主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。
8、根尖培养技术：有丝分裂实验的材料
9、小动物饲养技术：饲养小白鼠等实验动物
10、无土栽培技术：用于植物必需元素与非必需元素的鉴定
11、微电流测量技术：用于刺激神经元细胞时，兴奋的传递情况。刺激神经元的某一点时，相对于该神经元的刺激点而言，其两侧均有电位变化（用两表则可在两侧任意位置，用一表测定则相对于受刺激点不等距位置有两次偏转）可证明在同一神经元内具有双向传递性；刺激突触前神经元时，突触后神经元可测得电位变化，刺激突触后神经元时，突触前神经元测不到电位变化，可证明突触传递具有单向传递性。
12、pH控制技术：利用缓冲液调节pH，确保实验环境的pH相对稳定。

三、实验方法
1、显微观察法：如“观察细胞有丝分裂”“观察叶绿体和细胞质流动”“用显微镜观察多种多样的细胞”等。

2、观色法：如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”“观察动物毛色和植物花色的遗传”“DNA和RNA的分布”等。

3、同位素标记法（元素示踪法）：如“噬菌体浸染细菌的实验”“恩格尔曼实验”等。

4、补充法：如用饲喂法研究甲状腺激素，用注射法研究动物胰岛素和生长激素，用移植法研究性激素等。

5、摘除法：如用“阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素或生长激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在发育着的种子”等。

6、杂交法：如植物的杂交、测交实验等。

7、化学分析法：如“番茄对Ca和Si的选择吸收”“叶绿体中色素的提取和分离”等。

8、理论分析法：如“大、小两种草履虫的竞争实验”“植物向性动物的研究”等。

9、模拟实验法：如“渗透作用的实验装置”“分离定律的模拟实验”等。

10、引流法：临时装片中液体的更换，用吸水纸在一侧吸引，于另一侧滴加换进的液体。

11、实验条件的控制方法
⑴增加水中O2：泵入空气或吹气或放入绿色植物；
⑵减少水中O2：容器密封或油膜覆盖或用凉开水；
⑶除去容器中CO2：NaOH溶液、Na2CO3溶液；
⑷除去叶中原有淀粉：置于黑暗环境（饥饿）；
⑸除去叶中叶绿素：酒精水浴加热（酒精脱色）；
⑹除去植物光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光；
⑺单色光的获得：棱镜色散或透明薄膜滤光；
⑻血液抗疑：加入柠檬酸钠（去掉血液中的Ca2+）；
⑼线粒体提取：细胞匀浆离心；
⑽骨无机盐的除去：HCl溶液；
⑾消除叶片中脱落酸的影响：去除成熟的叶片；
⑿消除植株本身的生长素：去掉生长旺盛的器官或组织（芽、生长点）；
⒀补充植物激素的方法：涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体； ⒁补充动物激素的方法：口服（饲喂）、注射；
⒂阻断植物激素传递：插云母片法。

12、实验结果的显示方法——实验现象的观测指标
⑴光合作用：O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。例：水生植物可依气泡的产生量或产生速率；离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；植物体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅。
⑵呼吸作用：O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量
⑶原子或分子转移途径：同位素标记法或元素示踪法
⑷细胞液浓度大小或植物细胞活性：质壁分离与复原
⑸溶液浓度的大小：U型管+半透膜
⑹甲状腺激素作用：动物耗氧量、发育速度等
⑺生长激素作用：生长速度(体重、体长变化)
⑻胰岛素作用：动物活动状态（是否出现低血糖症状——昏迷）
⑼胰高血糖素作用：尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀）
⑽菌量的多少：菌落数、亚甲基蓝褪色程度
⑾生长素作用及浓度高低的显示：可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断（弯曲、高度）
⑿淀粉：碘液（变蓝色）
⒀还原性糖：斐林试剂/班氏试剂（沸水浴后生成砖红色沉淀）
⒁CO2：Ca(OH)2溶液（澄清石灰水变浑浊)
⒂乳酸：pH试纸
⒃O2：余烬复燃
⒄蛋白质：双缩脲试剂（紫色）
⒅脂肪：苏丹Ⅲ染液(橘黄色）；苏丹Ⅳ染液(红色）
⒆DNA：二苯胺（沸水浴，蓝色）、甲基绿（染色后，呈绿色）
⒇RNA：吡罗红（呈红色）、苔黑酚乙醇溶液