毕业论文-大蒜及分蘖葱头对波斯菊的化感作用.doc

毕业论文（设计）课题名称大蒜及分蘖葱头对波斯菊的化感作用学 院专 业班 级指导教师学生姓名摘 要 采用不同浓度梯度的大蒜鳞茎溶液和分蘖葱头溶液对两种菊科种子和雏菊的种子的的浸泡处理，在种子萌发期间测定种子的发芽势，发芽率，发芽指数，活力指数及根活力等生理指标，研究其对波斯菊雏菊种子萌发的影响。结果显示：随着大蒜溶液浓度降低，波斯菊雏菊的各项生理指数均表现为先上升后下降的趋势，当溶液浓度为5mg/L的溶液浸种可提高波斯菊可提高他们种子的发芽率，发芽势，发芽指数和活力指数，提高幼苗的根长芽长和鲜重，而且根系活力较强，20mg/L溶液处理下的种子的各项生理指标均为最低.结果表明：大蒜溶液浓度较低的时候，波斯菊和雏菊种子在溶液处理下无明显变化，但是浓度过高会抑制种子萌发。 关键词：大蒜鳞茎；分蘖葱头；波斯菊；雏菊；AbstractAllelopathyiswidelyexistsinnaturalecologicalsystem,referstotheplantallelopathyofplant(includingmicrobiological)byreleasingchemicalsintotheenvironmenttootherplants(includingmicrobiological)asaresultofthedirectorindirectharmfuleffects.ThedefinitionofRICEshowedthatallelopathyofchemicalsubstanceisreleasedbyplants,allelopathyofresultsisharmfultootherplantsormicrobes.Now,however,researchhasshownthattheobjectoftheallelochemicalsroleismorethanotherplants,sometimeseventhesameplant.Theallelopathyincludesnotonlytheresultoftheharmful,alsoincludesomemutualpromotioneffect.Therefore,somebodycalledallelopathyofplant-based.Allelopathybetweenplantsisahotresearchtopicintodaysplants.Thistime,wetakethemarigoldandcloverscropsasreceptors,passedthetestoftheseedgerminationandseedlinggrowthtest,thepointsnieonionliquidandgarlic(AlliumfistulosumL.Var.CaespitosumMakino)ofrootsystemandabovegroundwaterimmersionallelopathyisstudied.Theresultsshowedthatthetilleronionandgarlicabovegroundliquidwaterimmersionofmarigoldandcloversallelopathy.Whentheconcentrationreachesacertaindegree,haveacertainroleinpromoting.Butonthecontrary,whentheconcentrationreachesapointalsocanhavecertaininhibition.Therefore,toexpandtheexperimentwesetaconcentrationgradient.Wehopethisresearchoftillersofonionandgarlicliquidconcentrationforthegrowthofchrysanthemumandallovertheskystar,cancontributestrengthforchrysanthemumgrowthsubject. Key words: Marigold;Clover;Tillering onion ;Garlic Allelopathy目 录摘要IAbstractII第1章 绪论11.1 化感作用（双击输入内容，下同）11.1.1 化感物质11.1.2 化感作用11.2 课题背景11.2.1 分蘖葱头11.2.2 大蒜11.2.3 波斯菊11.2.4 雏菊11.3 本课题研究的目的和意义21.3.1 研究分蘖葱头与大蒜化感作用的意义21.3.2 两种化感物质对园林花卉栽培的影响2第2章 材料和方法32.1 实验材料和仪器32.1.1 实验材料32.1.2 主要仪器设备32.2 实验方法32.2.1 水浸液的制备72.2.2 种子与培养基的灭菌92.2.3 水浸液化感物质对种子萌发影响实验102.2.4 水浸液化感物质对幼苗生长影响实验102.2.5 水浸液化感物质对幼苗根系活力影响实验10第3章 结果73.1 大蒜化感物质对种子发芽率发芽势影响73.1.1 大蒜化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势影响73.1.2 大蒜化感物质对雏菊种子发芽率发芽势影响3.2 大蒜化感物质对种子幼苗生长的影响73.2.1 大蒜化感物质对波斯菊种子幼苗生长影响73.2.2 大蒜化感物质对雏菊种子幼苗生长影响3.3 大蒜化感物质对幼苗丙二醛(MDA)含量的影响73.3.1 大蒜化感物质对波斯菊幼苗丙二醛(MDA)含量的影响73.3.2 大蒜化感物质对雏菊幼苗丙二醛(MDA)含量的影响3.4 分蘖葱头化感物质对种子发芽率发芽势影响73.4.1 分蘖葱头化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势影响73.4.2 分蘖葱头化感物质对雏菊种子发芽率发芽势影响3.5 分蘖葱头化感物质对种子幼苗生长的影响73.5.1 分蘖葱头化感物质对波斯菊种子幼苗生长影响73.5.2 分蘖葱头化感物质对雏菊种子幼苗生长影响3.6 分蘖葱头化感物质对幼苗丙二醛(MDA)含量的影响73.6.1 分蘖葱头化感物质对波斯菊幼苗丙二醛(MDA)含量的影响73.6.2 分蘖葱头化感物质对雏菊幼苗丙二醛(MDA)含量的影响第4章 讨论104.1 浸提液浓度对化感作用的影响104.2 温度对化感作用的影响104.3 种子大小对实验效果化感作用的影响10结论11致谢12参考文献13附录117附录221附录328 第1章 绪论1.1 化感作用植物化感作用最开始的定义是指植物通过向环境释放特定的次生物质从而对邻近其它植物(含微生物及其自身)生长发育产生的有益和有害的影响。现在，植物化感作用研究事实上已扩展到以植物为中心的一切有机体及环境间通过化学物质为媒介的化学相互作用。化感作用是通过植物向环境中释放化感物质来实现的。因此，化感物质（Allelochemical）在认识和评价植物化感作用中占据中心位置。化感物质都是植物的次生代谢物质，植物产生和释放化感物质的理论基础是植物的次生代谢。植物化感物质主要包括酚类、萜类、生物碱等次生代谢物质。化感物质外界环境中可引起生物生理、生态、行为反应的生物的代谢产物。例如抗生素、引诱剂、信息素等。1.1.1 化感物质化感物质（Allelochemical）是生物体内产生的非营养性物质,能影响其他植物生长、健康、行为或群体关系，化感物质是化感作用的媒介，主要是植物的次生代谢物质.而本实验的化感物质为大蒜以及分蘖葱头。 1.1.2 化感作用化感作用(相生相克，异株克生,他感，Allelopathy)。化感作用是植物生态学新的分支学科生态生化学（Ecological Biochemistry）研究内容的一部分。植物化感作用最开始的定义是指植物通过向环境释放特定的次生物质从而对邻近其它植物(含微生物及其自身)生长发育产生的有益和有害的影响。现在，植物化感作用研究事实上已扩展到以植物为中心的一切有机体及环境间通过化学物质为媒介的化学相互作用。1.2 课题背景1.2.1 分蘖葱头分蘖葱头，东北黑龙江人叫毛葱，适宜黑土地生长生育期58天，不怕冻，每年的4月份栽植，出叶后根部呈614个葱头，属高产作物、在黑龙江中北部广大农民家庭的院里都能种植这种作物。毛葱中已被专家们发现至少有六种抗癌防衰老降脂作用的成份；对脑瘤、乳腺、前列腺等疾病都有很好的疗效作用特别是软化脂肪中的血管疗效更佳，世界各专业教授和性病专家们研究发现：把毛葱经过特殊加工后所取得的毛葱汁（学术界称之为毛葱油)，还可以阻断结肠、口腔、肺、肝脏胰腺、食管癌过程都有明显的治疗作用，在东南亚国家，各自家庭中把毛葱白然加工后取汁，经常食用还可刺激正常免疫，阻断宫颈癌和皮肤癌细胞的生长。1.2.2 大蒜 大蒜又叫蒜头、大蒜头、胡蒜、葫、独蒜、独头蒜，是蒜类植物的统称。半年生草本植物，百合科葱属，以鳞茎入药。春、夏采收，扎把，悬挂通风处，阴干备用。农谚说“种蒜不出九（月），出九长独头”，6月叶枯时采挖，除去泥沙，通风晾干或烘烤至外皮干燥。大蒜呈扁球形或短圆锥形，外面有灰白色或淡棕色膜质鳞皮，剥去鳞叶，内有610个蒜瓣，轮生于花茎的周围，茎基部盘状，生有多数须根。每一蒜瓣外包薄膜，剥去薄膜，即见白色、肥厚多汁的鳞片。有浓烈的蒜辣气，味辛辣。有刺激性气味，可食用或供调味，亦可入药。地下鳞茎分瓣，按皮色不同分为紫皮种和白皮种。大蒜是秦汉时从西域传入中国，经人工栽培繁育,具有抗癌功效，深受大众喜食。1.2. 3波斯菊波斯菊（学名：Cosmos bipinnataCav.），别名：大波斯菊、秋英。一年生或多年生草本，高1-2米。根纺锤状，多须根，或近茎基部有不定根。茎无毛或稍被柔毛。叶二次羽状深裂，裂片线形或丝状线形。头状花序单生，径3-6厘米。总苞片外层披针形或线状披针形，近革质，淡绿色，具深紫色条纹。舌状花紫红色，粉红色或白色；舌片椭圆状倒卵形，长23cm，宽1.21.8cm，有3-5钝齿；管状花黄色，长6-8mm，管部短，上部圆柱形，有披针状裂片。瘦果黑紫色，无毛，上端具长喙，有2-3尖刺。花期6-8月，果期9-10月。1.3 本课题研究的目的和意义1.3.1 研究目的为菊类植物选择有益的伴生植物进行合理的间套混作，为建立菊类植物的高效栽培模式提供参考依据和技术支撑. 大蒜是百合科葱属植物，在我国东北地区栽种较多。近年来对大蒜鳞茎和分蘖葱头的化感作用研究较少。本实验通过研究大蒜鳞茎和分蘖葱头对菊科植物的发芽率影响。1.3.2 研究意义以前对分蘖葱头和大蒜了解的比较少，化感作用的含义以及实验原理都不是很了解。研究的意义在于为菊类植物选择有益的伴生植物进行合理的间套混作，为建立菊类植物的高效栽培模式提供参考依据和技术支撑。第2章 材料和方法2.1 实验材料和仪器2.1.1 实验材料 分蘖葱头 大蒜鳞茎 波斯菊种子 2.1.2 主要仪器设备美的冰箱BCD-516WKZM(E) 美的集团电热恒温培养箱HN-25S HN-25S 力辰科技 RE-52 旋转蒸发器 上海亚荣集团YXQ-LS-75S11高压蒸汽灭菌锅 上海博讯事业有限公司医疗设备厂 2.2 实验方法2.2.1 水浸液的制备（1）将大蒜和分蘖葱头进行剥皮处理，洗净晾干。用天平分别称量出其质量。将晾干的两种材料放在搅拌机中打碎，变成桨状即可。把桨液取出放入锥形瓶中，加入1000ml蒸馏水将其定容。用电子天平称取下列药品，分别放入烧杯。用少量蒸馏水将药品分别溶解，然后依次混合。表2-1 大蒜母液不同浓度浸提液的配置表水浸液DY0DY1DY2DY3DY4DY5浓度mg/mlC0C1C2C3C4C50.05.012.525.050.0100.0表2-1 分蘖葱头溶液不同浓度浸提液的配置表水浸液DY0DY1DY2DY3DY4DY5浓度mg/mlC0C1C2C3C4C50.05.012.525.050.0100.0大蒜液体母液1/2母液1/4母液1/8母液1/16母液重量/g16.5194.43.71.7表2-1 不同大蒜母液的浓度梯度表表2-2 微量元素母液的配制表分蘖葱头浓度梯度母液1/2母液1/4母液1/8母液1/16母液水（2）实验步骤1 大蒜鳞茎分蘖葱头浸提液母液制备（3） 取大蒜鳞茎分蘖葱头各500mg，洗净，粉碎后备用。（4） 分别取20g蒜桨于三角瓶中，添加500ml蒸馏水封口放置在摇床上，25160转min，浸提48小时后用四层纱布过滤，再用定性滤纸过滤，即得质量浓度为0.04g/ml的大蒜秸秆浸提液母液，4下保存备用。2.2.2 种子与培养基的灭菌（1）培养基的制备：实验器材有小烧杯、加热套、天平、牛角匙、玻璃棒、PH试纸、试管、分装漏斗、棉花、纱布、天平、记号笔、三角瓶、吸球、移液管（0.1、0.2、1、2、5、10ml）烧杯(300、500、1000、2000ml)等。（2）培养基的灭菌培养基的高压灭菌包括以下几个步骤：第一，码放锥形瓶，将装有培养基的锥形瓶直立于金属小筐中，再放入高压蒸气灭菌锅内，如果没有金属小筐，可以在两层锥形瓶之间放一块玻璃板隔开；第二，放置其他需要灭菌的物品，将其他需要灭菌的物品也放入高压蒸气灭菌锅内，如装有蒸馏水的锥形瓶、带螺口盖的玻璃瓶、烧杯、广口瓶(以上物品都要用牛皮纸封口)，用牛皮纸包裹的培养皿、剪刀、解剖刀、镊子、滤纸、铅笔等； 第三，灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕，盖上锅盖，在98 kPa、121.3 下，灭菌20 min灭菌后取出锥形瓶，让其中的培养基自然冷却凝固，最好放置1 d后再使用。 2.2.3 水浸液化感物质对种子萌发影响实验在铺有两张定性滤纸的培养容器中，以每培养皿50粒分别拨入经体积分数10%的过氧化氢消毒两分钟的植物种子。用不同大蒜品种的0.02g/ml浸提液做发芽试验，每个培养容器中加入浸提液8毫升，对照（CK）加入等量的蒸馏水，每个处理重复四次。每三天加处理液和蒸馏水5ml，每天记录各处理和发芽的情况。2.2.4水浸液化感物质对幼苗生长影响实验丙二醛(MDA)含量的测定：测定步骤称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。计算式中：CMDA的浓度，A450，A532和A600分别代表450、532和600nm波长下的吸光度值。2.2.5 水浸液化感物质对幼苗根系活力影响实验TCC法测定根系活力（一）药品：脯氨酸 甲苯 3磺基水杨酸 冰乙酸 酸性印三酮 磷酸（二）仪器设备：分光光度计；分析天平（感量0.1mg）；电子顶载天平（感量0.1g）；温箱；研钵；三角瓶50ml；漏斗；量筒100ml；吸量管10ml；刻度试管10ml；试管架；容量瓶10ml；药勺；石英砂适量；烧杯10ml、1000ml。（三）试剂：乙酸乙酯（分析纯）；次硫酸钠（Na2S2O4）；分析纯粉末。3.1TTC溶液；磷酸缓冲液（115mol/L，pH7）；1mol/L硫酸；0.4mol/L琥珀酸。实验步骤（1）TTC标准曲线的制作取0.4TTC溶液0.2ml放入10ml量瓶中，加少许Na2S2O4粉摇匀后立即产生红色的甲月替。再用乙酸乙酯定容至刻度，摇匀。然后分别取此液0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml置10ml容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲月替25g、50g、100g、150g、200g的标准比色系列，以空白作参比，在485nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。（2）称取根尖样品0.5g，放入10ml烧杯中，加入0.4TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml，把根充分浸没在溶液内，在37下暗保温13h，此后加入1mol/L硫酸2ml，以停止反应。（与此同时做一空白实验，先加硫酸，再加根样品，其他操作同上）。（3）把根取出，吸干水分后与乙酸乙酯34ml和少量石英砂一起在研钵内磨碎，以提出甲月替。红色提取液移入试管，并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤二、三次，皆移入试管，最后加乙酸乙酯使总量为10ml，用分光光度计在波长485nm下比色，以空白试验作参比测出吸光度，查标准曲线，即可求出四氮唑还原量。第3章 结果3.1 不同浓度大蒜化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势的影响浓度/gL-1发芽率/%发芽势/%092. 4 2. 0b 94. 3 0. 9b197. 2 1. 0a98. 2 1. 3a269. 7 1. 8d74. 4 1. 2d476. 4 1. 8c86. 8 1. 6c869. 3 1. 2d75. 2 1. 3d1600表3-1 不同浓度大蒜化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势的影响图3-1 不同浓度大蒜化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势的影响3.2大蒜化感物质对种子幼苗生长的影响 3.2.1不同大蒜浓度对幼苗鲜重的影响浓度/gL-1鲜重/mg0616.1 a1594.9 a2462.9 b4331.5 c8262.5 c160表3-2 不同大蒜浓度对幼苗鲜重的影响图3-2 不同大蒜浓度对幼苗鲜重的影响3.3大蒜化感物质对幼苗丙二醛（MDA）含量的影响浓度/gL-1MDA含量/molg-104.970.42 a16.890.40 b28.320.28 c49.190.21 d810.20.26 e160表3-3 大蒜化感物质对幼苗丙二醛（MDA）含量的影响图3-3 大蒜化感物质对幼苗丙二醛（MDA）含量的影响丙二醛在532和450下的吸光度首先是分蘖葱头植株的；四分之一分蘖葱头母液在532nm下是0.091，在450下是0.227；八分之一葱头在532下是0.112，在450下0.331；十六分之一葱头在532下是0.122，在450下面是0.360.其次是大蒜母液植株的，二分之一的大蒜母液在532下是0.088，在450下时候是0.269；四分之一大蒜在532下时0.072，在450下面是0.216；八分之一在532下面是0.103，在450下面是0.345；十六分之一在532下面是0.107，在450下面的是0.311。再有一个就是我们的对照组 水 在532下面0.046，在450下面时候是0.067。3.4分蘖葱头化感物质对种子发芽率发芽势影响3.4.1分蘖葱头化感物质对波斯菊种子发芽率发芽势影响表3-2 不同大蒜浓度化感物质对波斯菊发芽率的影响3.5分蘖葱头化感物质对幼苗丙二醛（MDA）含量的影响3.5.1不同浓度分蘖葱头化感物质对波斯菊幼苗丙二醛（MDA）含量的影响NAA/mgL-1接种有效苗数/个生根苗数/个生根率/%根系质量020420最差0.1282796.4最好0.5242291.6较好1.0261557.7一般第4章 讨论4.1 浸提液浓度对化感作用的影响当溶液浓度为4mg/L的溶液浸种可提高波斯菊可提高他们种子的发芽率，发芽势，发芽指数和活力指数，提高幼苗的根长芽长和鲜重，而且根系活力较强，16mg/L溶液处理下的种子的各项生理指标均为最低.结果表明：大蒜溶液浓度较低的时候，波斯菊和雏菊种子在溶液处理下无明显变化，但是浓度过高会抑制种子萌发。你会发现用母液浇灌的植株种子，无论是大蒜 还是大葱都没有成活的。我们先说万寿菊，整体平均来说十六分之一的大葱溶液发芽数，叶长度，胚轴长度，胚根长度，都比其他同期的要强要多。反过来我们再来讨论一下大蒜的情况。前期大蒜溶液不如对照组的水，但你会发现在后期时候，八分之一的大蒜的溶液比对照组水的各个方面强。那我是否可以作出假设，菊类的适合在八分之一左右大蒜浓度的环境生长，而在大葱溶液的却是十六分之一的浓度更适合生长。你会发现七天的时候是一个临界点，先说大蒜溶液的。第七天时候大蒜原汁波斯菊是不发芽的；二分之一蒜汁母液中有6个发芽 最高的芽长为3.5cm，最短的也有2cm；四分之一的大蒜母液有8个发芽的，最高的芽长为3.8cm，最低的也有0.8cm；八分之一的大蒜母液中有24个发芽的，其中最高的有4.6cm，最低的也有3cm；十六分之一的大蒜母液中有9个发芽的，其中最高的2.6cm，最低的也有0.5cm。对照组中有23个发芽的植株，最高的有6cm，最低的有4.2cm4.2温度对化感作用的影响你会发现用母液浇灌的植株种子，无论是大蒜 还是大葱都没有成活的。我们来看四叶草来说二之一的大葱溶液发芽数，叶长度，胚轴长度，胚根长度，都比其他同期的要强要多。反过来我们再来讨论一下大蒜的情况。前期大蒜溶液不如对照组的水，但你会发现在后期时候，二之一的大蒜的溶液比对照组水的各个方面强。那我是否可以作出假设，菊类的适合在八分之一左右大蒜浓度的环境生长，而在大葱溶液的却是二之一的浓度更适合生长。4.3 种子大小对实验效果化感作用的影响 通过实验可以看出波斯菊的发芽速度明显比雏菊快，而且波斯菊的种子比雏菊的种子要大很多，但是后期的发芽率， 发芽势，以及长度大约都相同。所以发芽速度有一定的影响，但对于其他的影响不大 结论在十分之一的大葱溶液发芽数，叶长度，胚轴长度，胚根长度，都比其他同期的要强要多适合生长，效果显著。八分之一的大蒜的溶液对万寿菊发芽影响显著。雏菊无论是大葱还是大蒜溶液都是二分之一的效果明显丙二醛在532和450下的吸光度 首先是分蘖葱头植株的；四分之一分蘖葱头母液在532nm下是0.091，在450下是0.227；八分之一葱头在532下是0.112，在450下0.331；十六分之一葱头在532下是0.122，在450下面是0.360.其次是大蒜母液植株的，二分之一的大蒜母液在532下是0.088，在450下时候是0.269；四分之一大蒜在532下时0.072，在450下面是0.216；八分之一在532下面是0.103，在450下面是0.345；十六分之一在532下面是0.107，在450下面的是0.311 。再有一个就是我们的对照组 水 在532下面是0.046，在450下面时候是0.067 当溶液浓度为4mg/L的溶液浸种可提高波斯菊可提高他们种子的发芽率，发芽 势，发芽指数和活力指数，提高幼苗的根长芽长和鲜重，而且根系活力较强，16mg/L溶液处理下的种子的各项生理指标均为最低.结果表明：大蒜溶液浓度较低的时候，波斯菊和雏菊种子在溶液处理下无明显变化，但是浓度过高会抑制种子萌发。致谢历时将近两个月的时间终于将这篇论文写完，在论文的写作过程中遇到了无数的困难和障碍，都在同学和老师的帮助下度过了。尤其要强烈感谢我的论文指老师，她对我进行了无私的指导和帮助，不厌其烦的帮助进行论文的修改和改进。另外，在校图书馆查找资料的时候，图书馆的老师也给我提供了很多方面的支持与帮助。在此向帮助和指导过我的各位老师表示最中心的感谢！感谢这篇论文所涉及到的各位学者。本文引用了数位学者的研究文献，如果没有各位学者的研究成果的帮助和启发，我将很难完成本篇论文的写作。感谢我的同学和朋友，在我写论文的过程中给予我了很多你问素材，还在论文的撰写和排版灯过程中提供热情的帮助。由于我的学术水平有限，所写论文难免有不足之处，恳请各位老师和学友批评和指正！参考文献 1周艳丽,程智慧,孟焕文.大蒜根系分泌物对不同受体蔬菜的化感作用J. 应用生态学报. 2007(01) 2 -刘紫全,黄群莲,何光风.大蒜的药用研究J. 食品与药品. 2006(08) 3 郝志龙,林郑和.化感物质对植物生长的影响及其在茶叶生产中的应用J. 福建茶叶. 2004(01) 4 郭修武,李坤,孙英妮,张立恒,胡禧熙,谢洪刚.葡萄根系分泌物的化感效应及化感物质的分离鉴定J. 园艺学报. 2010(06) 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