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生化试剂培训完整.ppt

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资源描述

1、生化试剂培训教材1.一、临床化学自动分析使用术语一、临床化学自动分析使用术语1、双波长、双波长 由主波长和副波长构成,可以消除对实由主波长和副波长构成,可以消除对实 验结果的影响。主波长是生成的产物颜色对光吸收验结果的影响。主波长是生成的产物颜色对光吸收的特有波长。副波长是为消除其他干扰物质在主波的特有波长。副波长是为消除其他干扰物质在主波长造成测定干扰所设定的波长。长造成测定干扰所设定的波长。2、反应杯空白、反应杯空白 在特定波长下,光通过以蒸馏水在特定波长下,光通过以蒸馏水或空气为反应体系所测得的吸光度值。或空气为反应体系所测得的吸光度值。第一部分基本术语2.一基本术语3、试剂空白、试剂空

2、白 在特定波长下光通过以蒸馏水或生在特定波长下光通过以蒸馏水或生理盐水和相应测定项目的试剂所构成的反应体系所理盐水和相应测定项目的试剂所构成的反应体系所测得的吸光度值。测得的吸光度值。4、样品空白、样品空白主要为了消除样品本身混浊或色度主要为了消除样品本身混浊或色度的干扰。常采用空白通道法,测定校正结果的干扰。常采用空白通道法,测定校正结果=显色显色反应通道结果反应通道结果空白通道结果。多数仪器须另外占空白通道结果。多数仪器须另外占用测定通道,分析速度减半。用测定通道,分析速度减半。3.5、延迟时间、延迟时间 指试剂与样品混合后到监测开始之间的时间。指试剂与样品混合后到监测开始之间的时间。一般

3、用于两点法和速率法。一般用于两点法和速率法。注意:在速率法和两点法中,延长延迟时间必然缩注意:在速率法和两点法中,延长延迟时间必然缩短线性监测期,减少测定的线性范围,也易发生底短线性监测期,减少测定的线性范围,也易发生底物耗尽物耗尽.ALT,AST,BUN,HBDH等负反应试剂等负反应试剂,浓度,浓度极高时测值不一定是超线性,还有可能是底物耗尽极高时测值不一定是超线性,还有可能是底物耗尽而导致测值很低,这时要注意看线并且把吸光度界而导致测值很低,这时要注意看线并且把吸光度界限设定在限设定在0.5。当有吸光度界限超出报警进行稀释再。当有吸光度界限超出报警进行稀释再测定。一般进行测定。一般进行10

4、倍稀释再做,如有超出继续稀释。倍稀释再做,如有超出继续稀释。一基本术语4.6、线性范围、线性范围 指该试剂盒按其说明书使用时可准指该试剂盒按其说明书使用时可准确测量的范围,线性是试剂的主要性能指标之一,确测量的范围,线性是试剂的主要性能指标之一,如果试剂线性达不到要求,将直接影响高浓度样本如果试剂线性达不到要求,将直接影响高浓度样本的检测。线性的测量与仪器相关。的检测。线性的测量与仪器相关。7、标、标 准准 差差 标准差是标准差是方差方差的算术平方根。标准的算术平方根。标准差能反映一个数据集的离散程度。平均数相同的,差能反映一个数据集的离散程度。平均数相同的,标准差未必相同标准差未必相同。一基

5、本术语5.8、方差、方差 样本中各数据与样本平均数的差的平方样本中各数据与样本平均数的差的平方和的平均数叫做样本方差。方差越大,样本数据和的平均数叫做样本方差。方差越大,样本数据的波动就越大。的波动就越大。9、变异系数、变异系数 标准差与平均数的比值称变异系数标准差与平均数的比值称变异系数CV,又称离散系数。变异系数可以反映单位均值又称离散系数。变异系数可以反映单位均值上的离散程度。上的离散程度。一基本术语6.1、终点法、终点法经过一定反应时间后,当反应达到平衡(终点)时在指定的1个测光点测定吸光度做到的一点分析法。反应曲线如图2-2所示:图2-21点终点法反应曲线分析项目:如总蛋白(TP)、

6、白蛋白(ALB)等。第二部分测试和校准方法7.图2-21点终点法反应曲线一、测试方法吸光度时间(s)SB B1 B2 B3S+R1R28.(2)2点终点点终点在被测物反应尚未开始时,选择第一个测光点,在反应到达终点或平衡时选择第二个测光点,这2个测光点的吸光度之差用于计算样本浓度,称为2点终点法。一、测试方法9.反应曲线如图2-3所示:一、测试方法吸光度时间(s)SB B1 B2 B3S+R1R2图2-32点法终点分析项目:如酶法的肌酐(CRE)等。10.2点速率点速率 测定测定2个测光点,此两点既不测反应初始吸个测光点,此两点既不测反应初始吸光度也不是终点吸光度,在单位时间内计算光度也不是终

7、点吸光度,在单位时间内计算2点点间的吸光度之差用于样本浓度的计算,称为间的吸光度之差用于样本浓度的计算,称为2点点速率法,反应曲线如图速率法,反应曲线如图2-4所示:所示:一、测试方法11.图2-42点速率一、测试方法吸光度时间(s)SB B1 B2 B3S+R1R2反应界限水平(t)12.一、测试方法一、测试方法速率法速率法A 根据两测光点之间每分钟吸光度的变化率计算浓度或活性值的测定方法,称为速率A法,反应曲线如图2-5示:吸光度时间(s)SB B1 B2 B3S+R1R2Al反应界限水平(t)分析项目:丙氨酸氨基转移酶(ALT)13.二、常见校准方法(1)1点线性法(点线性法(K因数法)

8、因数法)通过测定校准液1(试剂空白)的吸光度和输入的K因数而得出的工作曲线图2-61点线性校准曲线(K因数法)14.二、常见校准方法ALT,AST参数设置时,如果非本公司机器可以将试剂和样本比改为30:1,即试剂1和试剂2和样本比为240:60:10,通过校准确定K值;这样的好处是线性可以提高到1500U/L,抗干扰的能力提高1.5倍,弊端是CV值不够理想,本公司的机器可以将试剂样本比设置为20:1,即试剂1和试剂2和样本比为240:60:15,通过校准确定K值。这样的好处是线性可提高至1000U/L,并且兼顾了CV值。(e)适用的分析方法)适用的分析方法1点终点法、点终点法、2点速率法、点速

9、率法、2点终点法、速率点终点法、速率A法法 15.二、常见校准方法(2)2点线性法点线性法测定校准液1(试剂空白)与校准液2,形成线性工作曲线,校准曲线如图2-7所示:16.二、常见校准方法二、常见校准方法(3)多点线性法多点线性法通过空白(或校准液1)和校准液(第2校准液及第6校准液)的测定用线性回归制成线性工作曲线,校准曲线如图2-8所示:图2-8多点线性校准曲线(线性)17.(4)Logit-log3P(非线性法)(非线性法)适用于随浓度升高而吸光度表现为收敛的工作曲线,Logit-log3P(非线性法)校准曲线如图2-9所示:三、常见校准方法图2-9Logit-log3P校准曲线(非线

10、性法)18.(5)Logit-log4P(非线性法)(非线性法)适用于随浓度升高而吸光度表现为收敛的工作曲线,Logit-log3P(非线性法)校准曲线如图2-10所示:三、常见校准方法图2-10Logit-log4P校准曲线(非线性法)19.(6)Logit-log5P(非线性法)(非线性法)具有与Logit-log4P同样的特征,由于此方法多一个计算参数在某些情况下结果更加精确,校准曲线如图2-11所示:三、常见校准方法图2-11Logit-log5P校准曲线(非线性法)20.三、常见校准方法图2-12指数函数校准曲线(非线性法)(7)指数函数法(非线性法)指数函数法(非线性法)工作曲线随

11、浓度的增加吸光度出现离散趋势,校准曲线如图2-12所示:21.(4)Logit-log3P(非线性法)(非线性法)适用于随浓度升高而吸光度表现为收敛的工作曲线,Logit-log3P(非线性法)校准曲线如图2-9所示:三、常见校准方法图2-9Logit-log3P校准曲线(非线性法)22.(9)折线法(非线性法)折线法(非线性法)从校准液(1)测定到校准液(5)或(6),绘制出工作曲线。该工作曲线是将校准液各点的吸光度值用多条直线连接起来,校准曲线如图2-14所示:图2-14折线法校准曲线(非线性法)23.根据校准液数量的不同,有四种不同的校准类型。1、空白校准、空白校准只对校准液1(试剂空白

12、)进行校准。注意事项:注意事项:当校准液的数量输入“1”时(K因数法),只能进行试剂空白的校准。2、量程校准、量程校准只校准试剂空白液之外的1点校准液的方法。3、2点校准点校准这是一种校准试剂空白液及另1校准液的校准方法。24.这是一种校准试剂空白液及另1校准液的校准方法。4、多点校准、多点校准对在“化学参数”窗体设定的校准液全数进行校准(包括试剂空白液),校准后校准结果被更新。适用校准方法适用校准方法多点线性、Logit-Log3P、Logit-Log4P、Logit-Log5P、指数函数、样条、折线。25.一、分类和比较一、分类和比较1、分类按形态分固体试剂和液体试剂液体试剂又包括液体单试

13、剂和液体双试剂。26.2、比较、比较a 固体试剂固体试剂优点优点储藏运输方便,适合低端基层客户。缺点缺点使用时需要复溶,由于人为原因易造成批间差。b 液体双试剂液体双试剂优点优点稳定性好,测值准确,适合全自动生化分析仪。缺点缺点在全自动分析仪上需要两个试剂位。c 液体单试剂液体单试剂优点优点使用方便,适合半自动、全自动生化分析仪,在全自动分析仪上节省试剂位。缺点缺点稳定性不如液体双试剂。27.(一)酶促反应曲线或化学反应速度时间曲线观察终点法试剂盒(1)试剂空白吸光度值是否符合要求,试剂空白吸光度值大于规定标准,表示试剂质量有变化,会影响测定的精密度、准确度和线性。(2)试剂空白的反应速度时间

14、曲线平坦,吸光度值在整个反应期间变动不大,否则说明试剂本身不稳定,会导致测定偏差。(3)反应能否在规定时间内达到平衡。(4)反应稳定期观察:反应达到平衡后,吸光度值最大并维持不变,这一期间为反应稳定期。28.(二)抗干扰作用观察双试剂型试剂盒抗干扰作用强。(三)测定线性范围指该试剂盒按其说明书使用时可准确测量的范围。29.三、失控情况的处理三、失控情况的处理重开一瓶质控品。更换同一批号的另一批质控品。更换另一批号的质控品。更换另一厂家的质控品。30.原因:1、试剂中含有下一个测试所要测定的底物,或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而直接干扰下一反应的测定结果;2、该试剂所引

15、导的反应对下一个项目的反应进程带来了间接的干扰,因为在有试剂污染的情况下,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。31.一、肝功能测试项目一、肝功能测试项目 ALB,TP,ALT/GPT,AST/GOT,-GGT,SCHE,ALP,ADA,ICDH,GLDH,AMY,TBIL,DBIL,TBA,NH332.肝胆疾病的生物化学检测肝胆疾病的生物化学检测33.肝功能实验的内容肝功能实验的内容蛋白质代谢功能检查蛋白质代谢功能检查胆红素代谢检查胆红素代谢检查胆汁酸代谢检查胆汁酸代谢检查血清肝酶谱的检查血清肝酶谱的检查34.1.肝脏的生理功能肝脏的生理功能1、代谢功能:三大物质(糖、蛋白质和脂

16、类)的同、代谢功能:三大物质(糖、蛋白质和脂类)的同化、储存和异化;核酸代谢、维生素的活化和储化、储存和异化;核酸代谢、维生素的活化和储藏;激素的灭活及排泄;胆红素、胆酸的生成;藏;激素的灭活及排泄;胆红素、胆酸的生成;铁、铜等金属的代谢铁、铜等金属的代谢2、排泄功能:对胆红素和某些染料的排泄、排泄功能:对胆红素和某些染料的排泄3、解毒功能:生物转化功能(同化、异化)、解毒功能:生物转化功能(同化、异化)4、物质合成功能:凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子、物质合成功能:凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的灭活清除的生成及对活性凝血因子的灭活清除35.白蛋白白蛋白 albumin(A

17、LB)测定值受体位影响;躺卧位时较直立时低。1、血清白蛋白浓度降低见于:(1)营养不良。如摄入不足或消化吸收不良。(2)消耗增加。如多种慢性消耗性疾病(严重结核,甲亢或恶性肿瘤等)。(3)合成障碍。主要是肝功能障碍。若持续低于30g/L,则提示可能为慢性肝炎或肝硬化。(4)蛋白丢失过多。如急性大出血,严重烧伤以及慢性肾脏病变等。(5)较罕见的先天性白蛋白缺乏症病例。2、血清白蛋白增高主要见于严重失水导致的血浆浓缩。36.总蛋白总蛋白 total protein(TP)血清蛋白主要反映肝脏合成功能和肾脏病变造成蛋白丢失的情况。血清蛋白主要反映肝脏合成功能和肾脏病变造成蛋白丢失的情况。1、血清总蛋

18、白增高可见于:、血清总蛋白增高可见于:(1)血清水分减少,使总蛋白浓度相对增加。)血清水分减少,使总蛋白浓度相对增加。(2)血清蛋白合成增加。如多发性骨髓瘤(主要是球蛋白增加)。)血清蛋白合成增加。如多发性骨髓瘤(主要是球蛋白增加)。2、血清总蛋白减少可见于:、血清总蛋白减少可见于:(1)血清水分增加,使总蛋白浓度相对减少。)血清水分增加,使总蛋白浓度相对减少。(2)营养不良。如摄入不足或消化吸收不良。)营养不良。如摄入不足或消化吸收不良。(3)消耗增加。如多种慢性消耗性疾病。)消耗增加。如多种慢性消耗性疾病。(4)合成障碍。主要是肝功能障碍。)合成障碍。主要是肝功能障碍。(5)蛋白丢失。如急

19、性大出血,严重烧伤以及慢性肾脏病变等。)蛋白丢失。如急性大出血,严重烧伤以及慢性肾脏病变等。37.丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶 (ALT/GPT)ALT活力升高见于:活力升高见于:(1)肝胆疾病。)肝胆疾病。(2)心血管疾病。)心血管疾病。(3)其它疾病:胰腺炎、外伤、严重烧伤、休克等。)其它疾病:胰腺炎、外伤、严重烧伤、休克等。(4)药物和毒物,如氯丙嗪、四氯化碳、有机磷等亦可)药物和毒物,如氯丙嗪、四氯化碳、有机磷等亦可导致导致ALT活力上升。活力上升。(5)溶血可导致)溶血可导致ALT活力升高,严重黄疸及浑浊血清应活力升高,严重黄疸及浑浊血清应稀释后再进行测定。稀释后再进行测定。38

20、.天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶 AST/GOTAST主要存在于心肌、肝、。血清AST活性升高。1、AST在心肌细胞内含量最高,心肌梗死时(MI)血清AST活力升高,18-24小时达高峰,AST峰值与梗死灶大小大致成比例。如果达参考值上限的10-15倍,往往有致死性的梗死发生。2、肝病。3、AST水平升高还见于进行性肌营养不良、皮肌炎、肺栓塞、急性胰腺炎、等。39.-谷氨酰转移酶谷氨酰转移酶 -GGT许多疾病可导致血清-GGT水平升高,但以肝胆疾病最为常见。1、肝胆疾病:(1)肝内或肝后胆道梗阻患者血清-GGT上升最高。(2)原发性和继发性肝病者-GGT水平也较高。(3)酒精性肝硬化

21、、大多数重度酗酒者-GGT常升高。2、胰腺疾病:急慢性胰腺炎,胰腺肿瘤。40.胆碱酯酶胆碱酯酶 (SCHE)1、有机磷中毒时,有机磷中毒时,SCHE活性显著降,活性显著降,可用于有机磷中毒的诊断及预后估计。可用于有机磷中毒的诊断及预后估计。2、肝功能评价。、肝功能评价。41.碱性磷酸酶碱性磷酸酶(ALP)ALP主要存在于肝脏及骨骼。血清ALP活力升高常见于肝胆及骨骼疾病:42.腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶 (ADA)1、获得性免疫缺陷综合症(AIDS)红细胞ADA活性特别高,血清中ADA活性也较高。2、肿瘤患者血清及组织中ADA活性均升高。43.亮氨酸氨基肽酶亮氨酸氨基肽酶(LAP)LAP测定主要用于

22、辅助诊断各种类型的肝内外胆汁淤积性疾病:(1)肝胆胰恶性疾病。(2)肝胆胰良性疾病常妊娠时血清lAP活力增高。异柠檬酸脱氢酶(异柠檬酸脱氢酶(ICDH)ICDH活力是实质性肝脏疾病的敏感指标。44.谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶 (GLDH)只要有肝细胞损害的存在,血清GLDH活力即增加。淀粉酶淀粉酶 (AMY)血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊断。45.胆红素胆红素 Bilirubin1、血清总胆红素测定反映了黄疸的程度。2、血清结合胆红素的测定对诊断轻度肝细胞损害也有一定帮助。46.胆汁酸胆汁酸 TBA代谢异常涉及多种消化系统疾病。代谢异常涉及多种消化系统疾病。与肝功能试验联合应用,可提高诊断

23、价值。血氨血氨(NH3)1、生理性血氨增高见于进食高蛋白或运动后。2、理性血氨增高可见于重症肝炎,肝肿瘤,肝昏迷,肝性脑病以及某种神经系统损害的疾病等。3、血氨在标本中极不稳定,因此采集血样后应及时测定,并应避免溶血。47.肾脏功能及其生物化学检查肾脏功能及其生物化学检查排泄水分、代谢产物、排泄水分、代谢产物、废物,保留有用物质废物,保留有用物质调节水分和渗透压调节水分和渗透压调节电解质及酸碱平调节电解质及酸碱平衡衡制造某些重要的生理制造某些重要的生理活性物质活性物质48.肾功能测试项目肾功能测试项目 CRE、BUN、UA、CYS-C、RBP 尿尿 酸酸 (UA)尿酸是机体嘌呤代谢的最终产物。

24、1、肾脏病变早期,血中尿酸浓度首先增加。2、痛风是由于长期高尿酸血症,尿酸盐沉积于关节腔及周围软组织,引起剧烈的炎症反应。血尿素血尿素 (BUN)许多肾外因素可以影响血尿素水平:泌尿系结石、肿瘤、前列腺疾病使尿流受阻,会引起肾后性氮质血症。49.肌酐肌酐 (CRE)血肌酐浓度取决于机体产生和摄入与肾脏的排泄能力。肌酐苦味酸法测试方法采用两点法该方法对仪器管路系统影响较大。肌酐酶法测试方法采用终点法该方法测值准确,对仪器管路系统没有影响。50.视黄醇结合蛋白(视黄醇结合蛋白(RBP)透射免疫比浊法,35-70mg/L。1、生理特性生理特性 由肝细胞合成,受视黄醇刺激并与之结合。由肝细胞合成,受视

25、黄醇刺激并与之结合。2、功、功 能能 将视黄醇(将视黄醇(VitA)从肝细胞转运到上皮细)从肝细胞转运到上皮细 胞,血浆中胞,血浆中90 与甲状腺素结合前蛋白结与甲状腺素结合前蛋白结 合,形成高分子的蛋白复合物。合,形成高分子的蛋白复合物。51.3、临床意义临床意义(1)升高)升高 急性肾小球肾炎、糖尿病肾病、慢性肾衰伴急性肾小球肾炎、糖尿病肾病、慢性肾衰伴 近曲小管功能障碍。近曲小管功能障碍。(2)降低)降低 视网膜病变、病毒性肝炎、肝硬化、肺囊性视网膜病变、病毒性肝炎、肝硬化、肺囊性 纤维化、营养不良、甲状腺功能亢进等。纤维化、营养不良、甲状腺功能亢进等。52.血清胱抑素血清胱抑素C(CY

26、S-C)CYS-C是评价肾小球滤过功能的敏感指标。是评价肾小球滤过功能的敏感指标。因其敏感度较低,故其测定方法需较高的分析灵敏度和因其敏感度较低,故其测定方法需较高的分析灵敏度和 较高特异性。较高特异性。53.三、心肌酶测试项目三、心肌酶测试项目LDH,-HBDH,AST/GOT,CK,CKMB54.LDH LDH水平升高常见于血管疾病:心肌梗死。-羟丁酸脱氢酶羟丁酸脱氢酶-hydrooxybutyrate dehydrogenase(-HBDH)-HBDH主要来源于心肌、肾。-羟丁酸脱氢酶(-HBDH)在心肌受损时释放入血。(1)急性心肌梗死时血清-HBDH活力增高。(2)可用作肝和心脏疾病

27、的鉴别诊断指标,心脏疾病时血清-HBDH升高较肝病明显。55.天门冬氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶 (AST/GOT)1、急性肝炎(各类病毒性肝炎)显著增高,AST/mAST比值越小说明肝细胞损伤易转发暴性肝炎。2、急性心肌梗死,心肌坏死时AST明显增高。56.肌酸激酶肌酸激酶 CK/肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶CK-MB1、血清CK活性升高见于心脏疾病:心肌梗死。2、影响结果的一些因素:(1)剧烈运动可使血清CK显著上升。(2)严重溶血影响测定结果。(3)某些药物如两性霉素B环丙烷、可导致CK升高。57.四、血脂测试项目四、血脂测试项目 HDL-C,LDL-D,TG,TCHO,脂蛋白脂蛋

28、白a,载脂蛋白A1,载脂蛋白B58.高密度脂蛋白胆固醇高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C)1、HDL-C的含量与心血管疾病的发病率以及病变程度呈显著负相关。HDL在动脉粥样硬化或糖尿病时明显降低。2、测定时注意事项:(1)采集前不宜改变饮食习惯和生活习惯。(2)卧位采血者其血脂测定值较坐位时低。(3)服用某些药物(如避孕药,甲状腺激素,甾体激素等)可影响血脂水平。59.低密度脂蛋白胆固醇低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)1、LDL-C的含量与心血管疾病的发病率以及病变程度相关。2、常与血清甘油三酯、总胆固醇以及其它脂蛋白(如高密度脂蛋白等)同时测定分析,以提高诊断价值。60.甘油三酯甘油三酯 (

29、TG)1、血清甘油三酯增高常见于动脉粥样硬化,糖尿病,肾病综合征。2、血清甘油三酯减少见于甲状腺功能亢进,肾上腺皮质功能减退以及肝功能严重障碍等。总胆固醇总胆固醇 (T-CHO)1、血清高胆固醇与动脉9-粥样硬化有关。2、血清胆固醇增高还可见于肾病综合症,糖尿病等。3、血清胆固醇减低可见于甲状腺功能亢进,严重肝功能衰竭,溶血性贫血,感染和营养不良等。61.脂蛋白脂蛋白a 10140mmolL(0300毫克L)脂蛋白a是血液中脂蛋白的成分之一,与血纤维蛋白溶解酶原有相同性质的糖蛋白。临床意义临床意义 增高:见于动脉粥样硬化性心脑血管病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、糖尿病、大动脉瘤及某些癌症

30、等。减低:见于肝脏疾病、酗酒、摄入新霉素等药物后。62.载脂蛋白A1apoA11.001.60gL主要用于脑血管病风险度的估计。当apoA1降低时,脑血管病的风险加大。临床意义1生理性增高:妊娠、雌激素疗法、锻炼、饮酒。2病理性降低:I、A型高脂血症、冠心病、脑血管病、apoA1缺乏症、感染、血液透析、慢性肾炎、糖尿病、慢性肝炎、肝硬变。63.载脂蛋白载脂蛋白B ApoB 男男0.43-1.28克克L;女;女0.42-1.12克克L介绍介绍:载脂蛋白B主要在肝脏合成,可转运脂类到肝外组织临床意义临床意义:(1)apoB增高见于冠心病、糖尿病、肾病、营养不良、活动性肝炎或肝功能低下、高脂血症、甲

31、状腺机能低下等。(2)apoB降低见于急性肝炎、肝硬化、低脂蛋白血症、甲状腺机能亢进等。(3)apoB增高是心、脑血管病的危险因素,与甘油三酯、胆固醇及载脂蛋白A测定同时进行分析,结果更有意义。64.血糖测试项目血糖测试项目GLU正常人血糖正常人血糖3.896.11mmol/L1、是糖尿病、低血糖症诊断的重要依据,也是是糖尿病、低血糖症诊断的重要依据,也是 治疗糖尿病过程中观测疗效的指标之一。治疗糖尿病过程中观测疗效的指标之一。2、测定时注意事项:测定时注意事项:(1)对血糖测定值的影响因素很多,如禁食时)对血糖测定值的影响因素很多,如禁食时间过短、各种应激因素等。间过短、各种应激因素等。(2

32、)全血样品中的葡萄糖在室温下能以每小时)全血样品中的葡萄糖在室温下能以每小时5%的速率进行酵解,如测定不及时,测定值的速率进行酵解,如测定不及时,测定值往往低于实际值。因此,在血液标本采集后,往往低于实际值。因此,在血液标本采集后,应尽快离心,分离出血浆进行测定。应尽快离心,分离出血浆进行测定。65.糖化血红蛋白糖化血红蛋白 GHb反映取血前23月血糖的平均水平。为国际公认的糖尿病监测金标准,且应6.5。(1)是糖尿病患者血糖总体控制情况的指标糖化血红蛋白正常值为46,9为控制差。66.(2)有助于糖尿病慢性并发症的认识(3)指导对血糖的调整(4)对判断糖尿病的不同阶段有一定的意义(5)区别应

33、激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的检测意义脑血管急症等应激状态下血糖增高,但糖化血红蛋白却不增高。67.离子测试项目离子测试项目 K,Na,CL,Ca,PHOS,Mg,Fe钾钾(K)1、低钾原因:(1)由细胞外移至细胞内,见于碱中毒。(2)体内潴留下降:呕吐、腹泻或肠瘘致使液体从胃肠道丢失。2、高钾原因:(1)K+从细胞内移至细胞外:脱水,烧伤等。(2)排钾减少:急、慢性肾功能衰竭,肾上腺功能不全,使用保钾利尿剂。(3)输入过多。68.钠钠 (Na)临床上细胞外液Na+150mmol/L称为高钠血症。低钠血症:低钠血症可由钠减少或水增多引起,常见原因有:肾性因素:肾功能损害引起急、慢性肾功

34、能衰竭等。非肾性因素:如呕吐、腹泻、肠瘘、大量出汗和烧伤等。2、高钠血症:(1)低渗性液体丧失:发生在渗透性利尿,多尿,大量出汗。(2)仅水分丧失。69.氯氯 (Cl)1、低氯常见于:(1)丢失过多:胃肠持续性分泌或呕吐,酮症酸中毒,肾衰,肾皮质激素过多,失盐性肾病(台慢性肾盂肾炎)。(2)高HCO3-血症:见于代偿性呼吸性酸中毒,代谢性碱中毒。2、高氯血症(1)代谢性酸中毒:见于下消化道腹泻。(2)食盐摄入过多,或盐水过度输入。70.磷(无机磷)磷(无机磷)PHOS1、血清无机磷的增高见于甲状旁腺功能减速退、多发性骨髓瘤及骨折愈合期。2、血磷的降低见于甲状旁腺功能亢进、磷吸收不良、骨质软化症

35、、重症糖尿病等。71.血清镁血清镁(Mg)1、血清镁增高见于:(1)肾脏疾病:(2)内分泌疾病,如甲状腺功能减退(3)治疗措施不当,如用镁制剂治疗不当引起中毒,血镁增高。2、经肌肉与中枢神经系统功能扰乱。3、血清镁降低见于:长期禁食,吸收不良或是长期丢失胃肠液者。72.钙钙 (Ca)1、血清钙的增高可见于甲状旁腺功能亢进、骨肿瘤、。2、血清钙的降低更多见,如婴儿手足搐溺症、维生素D缺乏症、骨软化症。73.血清铁血清铁 (Fe)血清铁增高见于:血清铁增高见于:(1)红细胞增多时,如溶血性贫血。)红细胞增多时,如溶血性贫血。(2)红细胞再生或是成熟障碍,如再生障碍性贫血、巨幼红细胞性)红细胞再生或

36、是成熟障碍,如再生障碍性贫血、巨幼红细胞性贫血。贫血。(3)铁吸收增加,利用减少或组织铁释放增加时。)铁吸收增加,利用减少或组织铁释放增加时。2、血清铁降低见于:、血清铁降低见于:(1)铁内总铁不足,如泌尿道)铁内总铁不足,如泌尿道,铁摄入不足或胃肠道病变,缺铁性,铁摄入不足或胃肠道病变,缺铁性贫血。贫血。(2)铁丢失增加,如泌尿道,胃肠道,生殖道的慢性长期失血。)铁丢失增加,如泌尿道,胃肠道,生殖道的慢性长期失血。(3)铁的需要量增加,如妊娠及婴儿生长发育期。)铁的需要量增加,如妊娠及婴儿生长发育期。74.一、免疫比浊一、免疫比浊根据抗原体结合形成的抗原抗体复合物能引起液体介根据抗原体结合形

37、成的抗原抗体复合物能引起液体介 质出现浊度改变的原理,依据过量抗体存在时抗原量与质出现浊度改变的原理,依据过量抗体存在时抗原量与 复合物形成成正相关的实验动力学过程,建立起一种复合物形成成正相关的实验动力学过程,建立起一种 液相化学免疫分析方法,称透射比浊法。液相化学免疫分析方法,称透射比浊法。75.二、免疫浊度法的分类二、免疫浊度法的分类a、透射比浊、透射比浊 在光源的光路方向0测量透射光的强度和被检溶液微粒浓度关系的方法称透射比浊测定法。b、散射比浊、散射比浊 在光源的光路方向596角的方向上测量散射光的强度和被检溶液微粒浓度关系的方法称散射比浊测定法。c、按形成复合物的速度测定可分终点浊

38、度法和速率浊度、按形成复合物的速度测定可分终点浊度法和速率浊度法。法。76.三、乳胶比浊三、乳胶比浊将待测物质相对应的抗体包被在直径为将待测物质相对应的抗体包被在直径为15-60nm的乳的乳 胶胶 颗粒上,使抗原抗体结合物的体积增大;光通过颗粒上,使抗原抗体结合物的体积增大;光通过 后,透射光和散射光的强度变化更为显著,从而提高后,透射光和散射光的强度变化更为显著,从而提高 实验的敏感性。实验的敏感性。77.五、常见测试项目五、常见测试项目1、PA 血清前白蛋白血清前白蛋白2538mg/dl生理功能:生理功能:PA除了作为组织修补的材料外,还可视为一种运载蛋白,它结合T4与T3,而对T3亲和力

39、更大,PA与视黄醇结合蛋白形成复合物,具有运载维生素A的作用。临床意义:临床意义:(1)肝病急性、亚急性重症肝炎起病后一周内,PA的变化(降低)远较血清ALB敏感。(2)恶性肿瘤用于恶性肿瘤的筛查。(3)营养不良的评估评价蛋白质和(或)热卡缺乏的敏感指标。感染或组织损伤时降低;在无感染情况下,是儿童营养不良的敏感生化指标。78.CRP C反应蛋白反应蛋白 06.1 mg/L。作用:作用:识别、启动并把效应细胞及其产物从组织中清除,如可能有毒性的或引起自身过敏的DNA。临床意义临床意义:(1)器质性疾病的筛选急性或慢性炎症;自身免疫或免疫复合病;组织坏死、恶性肿瘤。(2)并发感染的识别病毒感染小

40、于50mg/L,极少超于100mg/L;革兰阴性感染有时高达500mg/L;在脑膜炎和呼吸道感染中,CRP100mg/L就有力地证明是细菌性原发感染。(3)评估疾病活动性和疗效监控。(4)预后价值恶性感染性疾病、心梗等。79.3、抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素0(ASO)0200U/mL作用:ASO可为链球菌感染、诊断和监控下列疾病提供有用的信息扁桃体炎、耳炎、丹毒、猩红热及相关疾病,如风湿热、肾小球肾炎。公司培训教材80.4、类风湿因子、类风湿因子RF 020IU/mLa、生理作用、生理作用(1)调节机体免疫反应;)调节机体免疫反应;(2)激活补体,加快清除微生物感染。)激活补体,加快清除微生

41、物感染。(3)清除免疫复合物,使机体免受循环复合物的损伤。只有)清除免疫复合物,使机体免受循环复合物的损伤。只有其超过一定滴度时才称阳性。其超过一定滴度时才称阳性。b、分类:分四类、分类:分四类 IgM、IgG、IgA、IgE型。其中型。其中IgA、IgM类湿因子易于检测,而类湿因子易于检测,而IgG类风湿因子难以检测。类风湿因子难以检测。c、细菌、病毒感染引起体内产生的以变性、细菌、病毒感染引起体内产生的以变性IgG为抗原的一种为抗原的一种自身抗体。自身抗体。d、其他疾病:对类风湿性关节炎有一定价值,但无特异性。、其他疾病:对类风湿性关节炎有一定价值,但无特异性。如:风湿性疾病、蛋白代谢异常

42、,以及有慢性抗原刺激的其他如:风湿性疾病、蛋白代谢异常,以及有慢性抗原刺激的其他疾病,如系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症等。疾病,如系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症等。81.5、补体、补体C3、C4生理作用生理作用 补体作为机体自然防御抗感染的一部分,有溶菌和防止免疫复合物沉积的生理效应。由于蛋白的消耗,补体系统的激活可使C3/C4浓度降低。激活途径:激活途径:(1)经典途径)经典途径以免疫复合物或抗体与细菌或病毒结合作为刺激物。(2)旁路途径)旁路途径为替代途径,它的激活不依赖于抗体,而是以微生物。旁路途径的激活不需要C4分子的参与。两条途径都需要C3分子,所以C3浓度降低一般提示补体系

43、统的激活,由于激活途径不同,C4可偏低或正常。82.临床意义:临床意义:C3 0.57-1.67mg/L降低降低肾小球肾炎、系统性红斑狼疮、感染、皮疹、肝炎、肝硬化、关节疼痛。升高升高各种传染病、组织损伤和急性炎症、肝癌。C4 0.44-0.66mg/L 降低降低肾小球肾炎、系统性红斑狼疮病毒感染、肝炎、肝硬化、类风湿性关节炎。升高升高各种传染病、急性炎症、组织损伤、多发性骨髓瘤、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心梗。83.免疫球蛋白免疫球蛋白a.IgG:主要活性主要活性:IgG是抗感染中最主要的抗体,多数抗菌、抗病毒、抗毒素抗体都是IgG类。(1)唯一通过胎盘,自然被动免疫,对新生儿抗感染有重要意

44、义。(2)激活补体经典途径:IgG1,2,3,需两分子。(3)与自身免疫病有关:某些自身抗体(如抗核抗体)为IgG,导致免疫损伤。84.IgM:主要活性和临床意义:主要活性和临床意义(1)是个体发育中最早出现的Ig,胚胎后期的胎儿即可合成。故脐血中IgM增高提示胎儿有宫内感染。(2)是抗原刺激后最早出现的抗体;抗原消失后其水平首先下降。血清中IgM增高,提示有近期感染和急性期感染。(3)主要存在于血流内,不易透过血管。有强大的杀菌、激活补体、免疫调理作用(比IgG强5001000倍)。故对早期防止菌血症、败血症有重要作用。85.IgA:血清型血清型IgA:多以单体形式存在于血清:多以单体形式存

45、在于血清 中,有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用。中,有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用。86.脂蛋白脂蛋白a 10140mmolL(0300毫克L)脂蛋白a是血液中脂蛋白的成分之一,与血纤维蛋白溶解酶原有相同性质的糖蛋白。临床意义临床意义 增高:见于动脉粥样硬化性心脑血管病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、糖尿病、大动脉瘤及某些癌症等。减低:见于肝脏疾病、酗酒、摄入新霉素等药物后。87.载脂蛋白A1apoA11.001.60gL主要用于脑血管病风险度的估计。当apoA1降低时,脑血管病的风险加大。临床意义1生理性增高:妊娠、雌激素疗法、锻炼、饮酒。2病理性降低:I、A型高脂血症、冠心病、脑血管病、ap

46、oA1缺乏症、感染、血液透析、慢性肾炎、糖尿病、慢性肝炎、肝硬变。88.载脂蛋白载脂蛋白B ApoB 男男0.43-1.28克克L;女;女0.42-1.12克克L介绍介绍:载脂蛋白B主要在肝脏合成,可转运脂类到肝外组织临床意义临床意义:(1)apoB增高见于冠心病、糖尿病、肾病、营养不良、活动性肝炎或肝功能低下、高脂血症、甲状腺机能低下等。(2)apoB降低见于急性肝炎、肝硬化、低脂蛋白血症、甲状腺机能亢进等。(3)apoB增高是心、脑血管病的危险因素,与甘油三酯、胆固醇及载脂蛋白A测定同时进行分析,结果更有意义。89.转铁蛋白转铁蛋白 TRF 20.834.7mmolL(1.873.12gL

47、)转铁蛋白转铁蛋白转铁蛋白浓度可以反映血清铁的缺乏。临床意义临床意义(1)生理性增高:怀孕后期和口服避孕药的妇女。(2)生理性降低:男性服用睾丸酮,使用D-氨苄青素。(3)病理性增高:血清铁缺乏时。如缺铁性贫血,此时铁饱和度很低。(4)病理性降低:a.贫血是由于红细胞对铁的利用障碍(如再生障碍性贫血),则血浆中TRF正常或低下,但铁的饱和度增高。b.严重肝病显著下降;c.任何感染状态和严重疾病时。要求空腹12小时取静脉血。90.迪瑞液体生化试剂特点1均为液体双试剂,适用于各类型全自动及半自动生化分析仪。2稳定性好,有效期一般为12个月。3方法学先进,采用国际上通常推荐方法(IFCC).4品种齐

48、全。5准确度高6精密度高,批间差及皮内差小。91.92.1.试剂间可能发生的干扰情况(1)ALT,AST试剂中含有高活力LDH成分,有可能会对LDH的测定带来干扰。2)ALP,CK,CK-MB,CO2,AMY等试剂中使用磷酸缓冲液,可能会对其后的Mg离子测定带来干扰。3)CHO,TG,GLU,UA,a-HBDH等试剂使用磷酸盐缓冲液,可能会对无机磷的测定带来干扰。4)CK,CK-MB试剂中含有GLU成分,可能对GLU测定带来干扰,尤其对GLU的HK法测定带来干扰。5)Mg离子试剂中含Ca离子络合剂,可能对Ca离子的测定带来干扰。6)个别试剂以甘油做酶的保护剂,因此可能对TG的测定带来干扰。2干

49、扰的避免两个项目间至少要有一个非干扰项目,而最彻底的做法是将被干扰项目置于干扰项目之前3排序。ALT,AST,ALP,GGT,CHE,TP,ALB,TBIL,DBIL,BUN,UA,CRE,CK,CK-MB,HBDH,LDH,GLU,TG,TC,HDL-C,LDL-C,aPOA1,Apob,AMY.CO2,P,Fe,Ca,Mg.93.一点终点和两点终点设定的区别在单试剂分析加入试剂的初期,或双试剂分析中第二试剂加入之初,如指示反应吸光度尚未明显变化,则可在此时选择第一个吸光度,在指示反应终点时选择第二个吸光度,从而设置成两点终点法,但指示反应初期吸光度无明显变化的花学反应较少,如单试剂方式测定TP,ALB,CA,MG.,P.等终点法分析项目,及双试剂方式测定GLU,CHO,TG,等的终点法分析项目,因反应初期吸光度已有明显变化,因而均难用设置两点终点法,但在双试剂分析中,如果将第一吸光度选择在第二试剂加入前,此时指示反应一般尚未开始,则能容易设置两点终点法。两点终点法能有效地消除溶血,黄疸,和脂血等样品本身光吸收造成的干扰。94.

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