细菌感染的检查方法与防治原则(12).ppt

第第8 8章章 细菌感染的检查方法与防治原则细菌感染的检查方法与防治原则第第8 8章章 细菌感染的检查方法与防治原则细菌感染的检查方法与防治原则1可编辑版一、病原菌检测一、病原菌检测一、病原菌检测一、病原菌检测 （一）标本采集与运送原则（一）标本采集与运送原则（一）标本采集与运送原则（一）标本采集与运送原则 早期采集、无菌采集早期采集、无菌采集早期采集、无菌采集早期采集、无菌采集 合适标本、尽快送检、做好标记合适标本、尽快送检、做好标记合适标本、尽快送检、做好标记合适标本、尽快送检、做好标记 （二）细菌分离培养与鉴定（二）细菌分离培养与鉴定（二）细菌分离培养与鉴定（二）细菌分离培养与鉴定 1.1.1.1.分离培养（注意选择好培养基、分离培养（注意选择好培养基、分离培养（注意选择好培养基、分离培养（注意选择好培养基、培养条件）培养条件）培养条件）培养条件）2.2.2.2.形态学检查形态学检查形态学检查形态学检查 3.3.3.3.生化试验生化试验生化试验生化试验 4.4.4.4.血清学试验血清学试验血清学试验血清学试验 5.5.5.5.动物试验动物试验动物试验动物试验 6.6.6.6.药物敏感试验药物敏感试验药物敏感试验药物敏感试验:MIC:MIC:MIC:MIC、MBCMBCMBCMBC第一节 细菌感染的检查2可编辑版（三）病原菌抗原的检测（三）病原菌抗原的检测 EIAEIA、IFIF、协同凝集试验、协同凝集试验、CIECIE、Western blot Western blot 3可编辑版Western blot4可编辑版(四）、分子生物学检测四）、分子生物学检测核酸杂交核酸杂交 DNA可可进进行行变变性性、复复性性、杂杂交交。我我们们利利用用这这一一特特性性，制制备备特特定定序序列列DNA片片段段，进进行行标标记记后后用用作作探探针针，在在一一定定条条件件下下，按按照照碱碱基基互互补补配配对对原原则则与与标标本本中中已已变变性性的的细细菌菌DNA进进行行杂杂交交，通通过过检检测测杂杂交交信信号号确确定定是是否否发发生生杂杂交交反反应应，从从而而鉴鉴定定标标本本中中有有无无相相应的病原菌基因。应的病原菌基因。5可编辑版1.1.1.1.探针的种类探针的种类探针的种类探针的种类 （1 1 1 1）全染色体）全染色体）全染色体）全染色体DNADNADNADNA探针探针探针探针（2 2 2 2）染色体克隆片段）染色体克隆片段）染色体克隆片段）染色体克隆片段DNADNADNADNA探针探针探针探针（3 3 3 3）质粒）质粒）质粒）质粒DNADNADNADNA探针探针探针探针（4 4 4 4）rRNArRNArRNArRNA基因探针基因探针基因探针基因探针（5 5 5 5）寡核苷酸探针）寡核苷酸探针）寡核苷酸探针）寡核苷酸探针l l探针的特异性探针的特异性l l探针的标记探针的标记6可编辑版核酸杂交类型：核酸杂交类型：固相杂交：固相杂交：斑点杂交、原位杂交斑点杂交、原位杂交 Southern印迹、印迹、Northern印迹印迹液相杂交液相杂交:7可编辑版核酸杂交在临床细菌检测中的应用核酸杂交在临床细菌检测中的应用（1）细菌分类鉴定）细菌分类鉴定（2）细菌快速鉴定）细菌快速鉴定（3）细菌耐药性的检测）细菌耐药性的检测（4）细菌毒素的检测）细菌毒素的检测（5）细菌流行病学调查）细菌流行病学调查8可编辑版聚合酶链反应聚合酶链反应 （polymerase chainreaction,PCR）1.特异性特异性DNA体外扩增技术体外扩增技术 2.特异、灵敏、快速、操作简便特异、灵敏、快速、操作简便 3.广泛应用于细菌的鉴定广泛应用于细菌的鉴定9可编辑版PCR在临床细菌检测中的应用在临床细菌检测中的应用1.细菌的快速检测细菌的快速检测 2.细菌毒素的检测细菌毒素的检测 3.细菌耐药性的检测细菌耐药性的检测 4.细菌流行病学调查细菌流行病学调查 10可编辑版生物芯片技术生物芯片技术 1.通过微加工技术和微电子技术在通过微加工技术和微电子技术在固体芯片表面构建微型生物化学分析固体芯片表面构建微型生物化学分析系统。系统。2.对细胞、蛋白质、对细胞、蛋白质、DNA以及其他以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的生物组分的准确、快速、大信息量的检测。检测。3.常用的生物芯片分为二大类：即常用的生物芯片分为二大类：即基因芯片和蛋白芯片。基因芯片和蛋白芯片。11可编辑版（五）、血清学诊断（五）、血清学诊断 用用已已知知细细菌菌或或特特异异性性抗抗原原检检测测血血清中的抗体。清中的抗体。若若恢恢复复期期或或一一周周后后血血清清抗抗体体效效价价比比早早期期升升高高4 4倍倍或或4 4倍倍以以上上，有有诊诊断断意意义。义。凝凝集集试试验验、补补体体结结合合试试验验、中中和和试试验、验、ELISAELISA等等12可编辑版第二节 细菌感染的特异性预防一、人工主动免疫一、人工主动免疫 （一）疫苗（一）疫苗 死疫苗死疫苗死疫苗死疫苗 减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗减毒活疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗亚单位疫苗亚单位疫苗 重组载体疫苗重组载体疫苗重组载体疫苗重组载体疫苗 基因工程疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗基因工程疫苗 核酸疫苗核酸疫苗核酸疫苗核酸疫苗 （二）类毒素（二）类毒素 13可编辑版二、人工被动免疫二、人工被动免疫 抗毒素抗毒素抗毒素抗毒素 血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白血清丙种球蛋白 其他免疫制剂：其他免疫制剂：其他免疫制剂：其他免疫制剂：IFN-IFN-，CSFCSF等。等。等。等。第二节 细菌感染的特异性预防14可编辑版思考题1.试述检测病原菌的基本程序和原则？2.对已经分离出的细菌菌落，怎样从微生物学角度去进一步鉴定？3.试述疫苗研制及其发展的主要阶段？15可编辑版