DB23∕T 2979—2021 大豆对大豆拟茎点种腐病抗病性鉴定技术规程(黑龙江省).pdf

TCS 65. 020. 20 CCS B 15 DB,23 里龙江省E抽出TJ万标准DB 23/T 2979-2021 大豆对大豆拟茎点种腐病抗病性鉴定技术规程2021-09-08发布2021-10-07实施黑龙江省市场监督管理局发布草。DB23/T 2979-2021 目IJ1=1 本文件按照GB/T1. 1-2020 标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由黑龙江省农业农村厅提出。本文件由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本文件起草单位:中国科学院东北地理与农业生态研究所。本文件主要起草人:许艳丽、陆欣春、韩晓增、i番风娟、邹文秀、李雪光、战丽莉、严君、陈旭。DB23/T 2979-2021 大豆对大豆拟茎点种腐病抗病性鉴定技术规程1 范围本文件规定了大豆对由大豆拟茎点种腐病菌(Phomopsislongicolla Hobbs)引起的种腐病抗病性鉴定术语和定义、病原菌接种体制备、大豆种子要求、大豆种子抗病性鉴定和大豆植株抗病性鉴定。本文件适用于大豆对大豆拟茎点种腐病抗病性的鉴定和评价。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性号|用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件:不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 4404. 2粮食作物种子第2部分:豆类SN!T 4865 大豆拟茎点种腐病菌检疫鉴定方法3 术语和定义菌丝覆盖率是指在大豆种子抗病性鉴定中，大豆拟茎点种腐病菌接种的种子中，菌丝全部覆盖的种子数占供试种子总数的百分率。4 病原菌接种体制备4. 1 培养基准备病原菌菌株纯化及分离所用培养基为酸性PDA培养基(APDA) ，配方为马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂条20g ，待PDA培养基冷却到45oc 50 oc时，用过滤除菌的85%乳酸调节pH至4.5后到平板。4. 2 病原菌接种体制备挑耳又少量活化的大豆拟茎点种腐病菌菌丝到APDA上，25 oc 28 o C 12 h光照12h黑暗交替培养，直到长出典型菌落，井符合SN!T4865的规定。5 大豆种子要求所用品种种于的质量要求按GB4404. 2的规定执行。6 大豆种子抗病性鉴定DB23/T 2979-2021 6. 1 鉴定方法和公式将病原菌接种于APDA培养基平板上，250C暗培养5d后J在耳又健康大豆种子，经75%酒精消毒3 mi日，用无菌水冲洗3遍，放置于灭菌的滤纸上稍风干，匀距摆放在菌落边缘，以APDA培养基上不接种病原菌的大豆种子为对照，继续25oC暗培养目。每皿10粒，重复3次。接种后第4d和第5d分别调查发芽种子数，第5d调查被菌丝覆盖的大豆种子数，计算种子发芽势、发芽率和菌丝覆盖率。计算公式:种于菌丝覆盖率(%)= (被菌丝覆盖种子数/鉴定种子总数)X 100 发芽势(%)=发芽初期(第4d)正常发芽种子数/鉴定种于总数X 100 种于发芽率(% ) =发芽终期(第5d )全部正常发芽总数/鉴定试种子总数x 100 6. 2 抗病评价标准抗病标准以种子菌丝覆盖率、种于发芽势和发芽率降低率综合评定，即如果种子菌丝覆盖率高于80. 0 %时，以种于菌丝覆盖率为主要评价指标，如种于菌丝覆盖率低于80.0 %时，以种子发芽势和发芽率降低为主要指标。标准如下:种于菌丝覆盖率，种于发芽势和发芽率降低低于40.0% 抗病品种:40.0 % 59.9 %: 中抗品种:60.0 % 79.9 %: 中感品种:80.0 % 99.90 %: 感病品种:100. 0 %: 高感品种。记录见附录表Ao7 大豆植株抗病性鉴定7. 1 植株准备采用苗期切顶端接种法。在温室花盆中播种大豆，待大豆植株的第一片三出复叶展平时，在茎节点下面的横切面上将茎轩剪断，下部植株用于接种。7. 2 鉴定方法将病原菌在APDA培养基平板上25o C 8音培养10d ，在菌落边缘用打孔器打取直径为5mm 的菌丝块贴于刚剪断的植株茎轩横切面上，用封口膜包住接种体和植株茎轩横切面，套塑料袋保湿48h ，接种30株;以直径5mm的APDA培养基块贴于大豆植株茎轩横切面作对照。7. 3抗病性评价标准接种后2d取下接种体，接种后7d测量大豆植株茎病斑长度，并计算茎病斑长度占中直株茎长度的百分率。茎病斑长比率(% )二(茎病斑长度/植株茎长度)X 100 茎病斑长度占中直株茎长度的百分率:低于4.0%: 抗病品种:4.0%5.9%: 中抗品种:2 DB23/T 2979-2021 6.0 % 7.9 %: 中感品种:8.0 % 9.9 %: 感病品种:10.0%以上:高感品种。记录见附录表B。7.4调查记录详细记载调查方法和鉴定过程，井记录存档。3 鉴定编号接种日期:调查人:鉴定编号附录A资料性大豆拟茎点种腐病种子抗病性鉴定记载、评价表DB23/T 2979-2021 表A.1大豆拟茎点种腐病种子抗病性鉴定种子菌丝覆盖率调查表鉴定地点:调查日期:记录人:单位:重复鉴定种子数被菌丝覆盖种子数种子菌丝覆盖率( % ) I 11 III I TT TTT I TT III 表A.2 大豆拟茎点种腐病种子抗病性鉴定种子发芽势和种子发芽率调查表接种日期:鉴定地点:调查日期:调查人:记录人:单位:重复鉴定种子发芽数种子发芽势种于发芽率(% ) 种子数( % ) 接种第4d接种第5dTT TTT TT TTT TT TTT 4 DB23/T 2979-2021 表A.3大豆拟茎点种腐病种子抗病性鉴定评价表接种日期:鉴定地点:调查日期:调查人:记录人:单位:鉴定编号. 鉴定品种种子菌I 丝覆盖11 率(% ) III 平均降低种于发I 芽势TT ( % ) TTT 平均降低种子发I 牙率TT ( % ) TTT 平均降低抗病性级别抗病性评价3 附录B(资料性DB23/T 2979-2021 大豆拟茎点种腐病植株抗病性鉴定记载、评价表表B.1大豆拟茎点种腐病植株抗病性鉴定茎病斑长度调查表播种日期:接种日期:调查日期:调查人:记录人:鉴定地点:鉴定重复茎病斑长度植株茎长度茎病斑长占植株茎长编号(mm) (mm) 百分比(0/0)11 III TT TTT TT TTT 表B.2 大豆拟茎点种腐病植株抗病性鉴定评价表鉴定编号鉴定品种茎病斑长占植株茎长比率(0/0)抗病性抗病性级别评价TT TTT 平均6