DB23∕T 2922—2021 水曲柳腋芽微繁技术规程(黑龙江省).pdf

1CS 65.020.01CCSB05DB23黑龙江省地方标准DB23/T2922一2021水曲柳腋芽微繁技术规程2021一06一29发布2021一07一28实施黑龙 江省市场监督管理局发布DB23/T2922一2021士一口一Rl J本文件按照GB/T1.1一2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由黑龙江省林业和草原管理局提出。本文件起草单位：东北林业大学、巴彦县双鸭山林场、绥棱县国有林场三吉台林场、黑龙江省山河屯林业局黑龙江省苇河林业局、哈尔滨市林业工作管理总站、黑龙江省庆安国有林场管理局、哈尔滨市呼兰区黄土山林场、黑龙江省应急救援保障中心、黑龙江省林业和草原第二调查规划设计院、五常市森林病虫防治检疫站、五常市林业工作总站、五常市胜利林场。本文件主要起草人：詹亚光、齐凤慧、于磊、车德军、林显峰、曾凡锁、薛文辉、刘林、何利明、谢春风、赵晓军、张连生、李云庆、冯丹、代文栋、王培强、郑宏、王丽娜、李轶男、高群、夏晨、于航、高航、李晓彬。DB23/T2922一2021水曲柳腋芽微繁技术规程范围本文件规定了水曲柳（Fr a x i n u sm a n d s h u r i c aRu Pr.）腋芽微繁的外植体采集与表面消毒、培养基选择及配制、组织培养程序、组培苗移栽、苗期管理和生产档案。本文件适用于水曲柳腋芽微繁。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。LY/T1000容器育苗技术LY/T1671水曲柳林人工培育技术规程LY/T1882林木组织培养育苗技术规程3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4外植体采集与表面消毒4.1外植体采集水曲柳优树当年生穗共上带有顶芽或者腋芽的茎段作为组织培养的外植体。4.2消毒按LY/T1882的规定执行。5培养基选择及配制5.1初代培养基w PM固体培养基，附加20g.L一蔗糖、7g.L一，琼脂和1m g.L一，6一BA仁6一节基映漂吟）,p H一5.8一6.0。5.2继代和分化培养基继代培养基1为WPM液体培养基，附加30继代培养基2为WPM固体培养基，附加30脂（p H一5.8一6.0);g.L一，蔗糖和0.6m g/ LTDZ（曝苯隆）(p H一5.8一6.0);g.L一蔗糖、0.05m gL一TDZ、0.6m g L一，BA和7g.L一，琼DB23/T2922一2021芽分化增殖培养基为WPM固体培养基，附加30g.L一蔗糖、1.0m gL一，ZT（玉米素）和7g.L一，琼脂(p H=6.0一6.5）。5.3生根培养基生根培养为w PM固体培养基，附加20g.L一蔗糖、1.4m gL一，IBA（叫睬丁酸）、0.7m gL一，NAA（茶乙酸）和7g L一，琼脂（p H一5.8一6.0）。5.4培养基母液的配制及保存按LY/T1882的规定执行。5.5培养基的灭菌按LY/T1882的规定执行。6组织培养6.1条件温度25士2OC，湿度60一70%，光照16h无光s h交替培养，光照强度40林m o lm一2s一一80林m o l.m一2S一在无光条件下液体培养时，摇床转速60r p m.m i n一。6.2初代培养取灭菌（121o C灭菌20m i n）的刀具、镊子、培养皿，将消毒的茎段放入培养皿中，切去茎节两端变褐部分露出新鲜组织，接入初代培养基中光照培养20d一3Od，至芽萌发和生长。6.3继代和分化增殖培养萌发芽接种到继代培养基1中液体培养20d一30d，转入继代培养基2中，光照培养20d一30d，再转入芽分化增殖培养基，在光照条件下培养25d一35d，直至新芽分化。6.4壮苗生根培养新芽转接到生根墙养基中，培养ZOd一30d后，待芽长至3c m一5c m长，基部形成不定根时，切下单个芽再转入生根培养基中，培养至很长约1。m。7组培苗移栽7.1基质配置按LY/T1000的规定执行。7.2环境要求温度23o C一27OC、湿度60一90的温室内自然光照。7.3移栽将灭菌的基质，装入口径6c m一s c m带有3个以上根的组培苗栽植于育苗袋，的无纺布育苗袋中，用不含蔗糖和琼脂的生根培养基浇透。将空气湿度80一90%；移栽7d后湿度控制在60一70。DB23/T2922一20218苗期管理按LY/T1671的规定执行。9生产档案应建立生产档案，内容包括：外植体采集与表面消毒、培养基选择及配制、组织培养程序、组培苗移栽和苗期管理等。