免疫分型.ppt

小组成员：石河子大学（M M）细胞形态学）细胞形态学(包括细胞组化包括细胞组化)为基础，为基础，（I I）细胞免疫学）细胞免疫学(免疫表型免疫表型)为主体，为主体，（C C）细胞遗传学为辅助，）细胞遗传学为辅助，（M M）分子生物学为补充的原则。）分子生物学为补充的原则。免疫学分型对免疫学分型对ALLALL更重要。更重要。免疫学与免疫学与FABFAB分型可不一致。分型可不一致。一、为什么要做免疫分型二、免疫分型的作用三、免疫分型的原理四、免疫分型的分类五、免疫分型的优点六、免疫分型的应用及意义 急性白血病是由于白血病细胞生成紊急性白血病是由于白血病细胞生成紊乱而导致，白血病细胞在癌变过程中，乱而导致，白血病细胞在癌变过程中，丧失了正常细胞的系列专一性和分化丧失了正常细胞的系列专一性和分化阶段规律性，在本质上有别于正常骨阶段规律性，在本质上有别于正常骨髓细胞。髓细胞。故白血病细胞往往停滞在细胞分化故白血病细胞往往停滞在细胞分化的某一抗原表达阶段的某一抗原表达阶段 应用此特点可进行免疫表型分析，以鉴应用此特点可进行免疫表型分析，以鉴别各种白血病和淋巴瘤，辅助临床诊断、别各种白血病和淋巴瘤，辅助临床诊断、评估疗效和预后。评估疗效和预后。免疫分型的作用免疫分型的作用 1.1.区分区分ALLALL、AMLAML：形态、组化难以诊断的病例：形态、组化难以诊断的病例 （不典型、治疗后）（不典型、治疗后）2.2.将将ALLALL分为分为B B、T T细胞及根据细胞发育阶段分细胞及根据细胞发育阶段分为为 几种亚型几种亚型 3.3.对对M0M0、M6 M6、M7M7具有诊断意义：具有诊断意义：M0 M0：形态似：形态似ALLALL、组化（、组化（-),MPO(+),-),MPO(+),髓标髓标志志+,+,T,B-T,B-M6 M6：GlyA+GlyA+，CD71+CD71+M7 M7：CD41+CD41+，CD61+CD61+（Iib/IIIaIib/IIIa）白血病免疫分型原理白血病免疫分型原理白血病细胞表面有大量的抗原白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发现特异的白血病抗原尚未发现特异的白血病抗原。白血病细胞可能具有白血病细胞可能具有:1.1.特异性的联合抗原特异性的联合抗原;2.2.某某些些抗抗原原表表达达于于某某个个特特定定系系列列的的发发育育阶阶段段上上,而而正正常常造造血血细细胞胞不不存存在在这这种种现现象象或或极极为罕见。为罕见。这这些些抗抗原原称称为为白白细细胞胞分分化化抗抗原原或或分分化化群群CDCD（cluster designationscluster designations）.细胞系列抗原的表达-B细胞系抗原B B细胞细胞根据发育阶段可分为：根据发育阶段可分为：B B祖细胞祖细胞 TdT TdT、CD34CD34、HLA-HLA-DRDR 前前B B细胞（可再分为前前细胞（可再分为前前B B、前、前B B）TdTTdT、CD34CD34、CD10CD10、CD19CD19、CD24CD24 未成熟未成熟B B细胞细胞 CD19 CD19、CD24CD24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 成熟成熟B B细胞细胞 CD19 CD19、CD24CD24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 活化活化B B细胞细胞 CD19 CD19、CD24CD24、CD20CD20、CyCD22CyCD22 浆细胞浆细胞 CD38CD38 细胞系列抗原的表达-T细胞系抗原T T细胞发育的路径为：细胞发育的路径为：骨髓（骨髓（骨髓祖细胞骨髓祖细胞前胸腺细胞，亦称前胸腺细胞，亦称T T祖细胞祖细胞）-胸腺（早胸腺（早中中晚）晚）-外周血（成熟）外周血（成熟）骨髓骨髓T T祖细胞祖细胞CD34+CD34+、TdT+TdT+、CD10+CD10+、CD7+CD7+CD7 CD7出现最早并贯穿于出现最早并贯穿于T T细胞发育全程细胞发育全程T细胞系抗原 T T 细胞进入胸腺后：细胞进入胸腺后：（早）（早）CD7+CD7+、CD2-CD2-、CD3-CD3-、CD4-CD4-、CD8-CD8-、TCR-TCR-（中）（中）CD7+CD7+、CD2+CD2+、CD3+CD3+、CD4-CD4-、CD8-CD8-、TCR-TCR-（晚）（晚）CD7+CD7+、CD2+CD2+、CD3+CD3+、CD4+CD4+、CD8+CD8+、TCR+TCR+，CD7+CD2+CD3 CD7+CD2+CD3+CD4-+CD4-CD8+TCR+CD7+CD2+CD3+CD4+CD8+TCR+CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-CD8-TCR+TCR+进入血液及淋巴结进入血液及淋巴结 T细胞系抗原-外周血T细胞血血液中液中T T细胞主要有以下亚型：细胞主要有以下亚型：1.CD3+1.CD3+、CD4+CD4+、CD8-CD8-辅助性辅助性T T细胞细胞/诱导性诱导性T T细胞，细胞，TH/TITH/TI 占占T T细胞总数的细胞总数的60-70%60-70%2.CD3+2.CD3+、CD4-CD4-、CD8+CD8+抑制性抑制性T T细胞细胞/细胞毒性细胞毒性T T细胞，细胞，TS/TCTS/TC，占占T T细胞总数的细胞总数的20-30%20-30%3.CD3+3.CD3+、CD4+CD4+、CD8+CD8+占占T T细胞总数的细胞总数的1-3%1-3%4.CD3+4.CD3+、CD4-CD4-、CD8-CD8-占占T T细胞总数的细胞总数的1-10%1-10%急性白血病AML免疫分型ALL免疫分型T细胞系ALL免疫B细胞系ALL免疫免疫分型的分类免疫分型的分类T细胞系ALL(20%)早T前体-ALLT细胞ALLI型II型III型幼稚胸腺细胞型 中间胸腺细胞型 成熟胸腺细胞型免疫分型的分类免疫分型的分类B细胞系ALL(80%)早B前体-ALL普通型-ALL前B-ALLB细胞ALL免疫分型的分类免疫分型的分类免疫分型的优缺点免疫分型的优缺点优点：客观、准确、重复性好，可鉴别白血 病细胞的起源、分化阶段及基因克隆的 特点，提高了白血病的诊断，可将99%的ALL和AML鉴别开，可明确对ALL进行 免疫分型。补充了形态学的不足，提高了 分型的正确性，故已成为白血病诊断、治 疗及基础研究的重要手段。缺点：由于白血病细胞具有“异质性”和“非同 步性”且常伴有抗原表达紊乱现象，有 时免疫分型的分化抗原在单抗表达上 会出现一些差异，故免疫标记诊断需 要综合分析。免疫分型的优缺点免疫分型的优缺点T-ALLT-ALL的分型的分型分型分型 CD7 CD2 TdT CD3c/m急性早期急性早期T前体细胞白血病前体细胞白血病 +-+急性急性T细胞白血病细胞白血病 +-+T-ALLT-ALL特点：特点：1.1.幼稚幼稚T T细胞数量增多：细胞数量增多：CD34+CD34+，TdT+TdT+2.2.泛泛T T标志丢失标志丢失 3.CD4/8 3.CD4/8双双+或或CD4/CD8CD4/CD8单阳单阳 意义：儿童：意义：儿童：ALLALL发病率占肿瘤的发病率占肿瘤的25%25%，B-ALL B-ALL 预后比预后比T-ALLT-ALL相相 对好对好 成人：成人：ALL ALL 发病率发病率20%20%，T-ALL T-ALL 预后比预后比B-ALL B-ALL 好。好。B-ALLB-ALL的分型的分型亚型亚型 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg急性早期急性早期B前体细胞白血病前体细胞白血病 +-普通型普通型B 细胞白血病细胞白血病 +/-+-急性前急性前B细胞白血病细胞白血病+-/+-急性急性B细胞白血病细胞白血病 +-/+意义：意义：Common B-ALL Common B-ALL 预后相对较好，预后相对较好，CD34+B-ALL CD34+B-ALL比比CD34-CD34-预后好，预后好，但但CD34+CD34+患者伴患者伴Ph1+Ph1+预后差。预后差。B-B-ALL ALL预后相对差，但随化疗方案预后相对差，但随化疗方案 改进，预后有所改善。改进，预后有所改善。B-ALLB-ALL的分型的分型免疫学分型免疫学分型与与FAB AMLFAB AML分型的相关性分型的相关性M1M1：CD34+CD34+、MPO+MPO+、DR+DR+、TdT+TdT+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、CD15-CD15-、CD11b-CD11b-、无无 淋、红、巨核系抗原淋、红、巨核系抗原M2M2：CD34+CD34+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、DR+DR+、CD15+CD15+M3M3：CD33+CD33+、CD13+CD13+、DR-DR-、CD34-CD34-M4M4：CD34+CD34+、CD33+CD33+、CD13+CD13+、CD14+CD14+、CD15+CD15+M5M5：CD34+CD33+CD34+CD33+、CD13+CD13+、CD14+CD14+、CD15+CD15+M6M6：血型糖蛋白：血型糖蛋白+、CD34-CD34-，DR-DR-、CD33-CD33-、CD13-CD13-、CD15-CD15-M7M7：CD34+CD34+、CD33+CD33+、DR+DR+、CD41+CD41+、CD42+CD42+、CD61+CD61+M0M0：FABFAB：形态学为：形态学为L2L2型，型，MPOMPO、SBBSBB组化阴性，淋系抗原阴性组化阴性，淋系抗原阴性 CD33 CD33、CD11CD11、CD15 CD15 及及antiMPOantiMPO单抗阳性。单抗阳性。MDS的免疫表型 1.CD34+7%(正常人为2.5%)RA2.8%，RAEB8.5%，RAEBT11.3%CD34+易转为白血病,预后差.2.CD13+20%(正常人11.7%)RA1.8%，RAEB24%，RAEBT253%3.CD33+20.9%(正常人16.5%)RA18%，RAEB21%，RAEBT23%4.CD15+30%(正常人45.5%)5.CD3+27%,19%,11%(正常人35.5%)注：RA：难治性贫血 RAEB：难治性贫血伴原始细胞增多 RAEBT:难治性贫血伴原始细胞增多转变型