生化检验的质量控制.ppt

生物化学检验的质量控制生物化学检验的质量控制 广东药学院附属第一医院 陈少莲1 质量控制质量控制（qualitycontrol，QC）是利用是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。也称为实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保实验室质量保证。证。n定义：定义：21947年年Sundeman首先调查发现不同实验室对同一份标本的首先调查发现不同实验室对同一份标本的实验结果有惊人的误差。实验结果有惊人的误差。1950年年Levey和和Jennings就将工业质控图移植临床生化实就将工业质控图移植临床生化实验室，此后，质控图和数理统计一直成为临床生化检验质量控验室，此后，质控图和数理统计一直成为临床生化检验质量控制（制（QC）的重要手段。）的重要手段。1953年年世界上出现了商品性的控制血清。世界上出现了商品性的控制血清。1954年年发展到国与国之间的质量调查。发展到国与国之间的质量调查。1960年代初年代初已发展为全面质量控制。已发展为全面质量控制。1974年年在日本召开了第一次临床生化检验质量控制国际在日本召开了第一次临床生化检验质量控制国际专专题讨论会。题讨论会。随后随后WHO和国际临床生化学会和国际临床生化学会都设有质控领导机构，向各都设有质控领导机构，向各国提供标准品和控制物，领导和管理国际性的质量控制工作。国提供标准品和控制物，领导和管理国际性的质量控制工作。n专业化发展专业化发展3n本章主要内容本章主要内容 第一节第一节 全过程质量控制全过程质量控制 第二节第二节 室内质量控制室内质量控制 第三节第三节 室间质量评价室间质量评价 第四节第四节 实验室认可实验室认可第五节第五节试剂盒的选择和评价试剂盒的选择和评价4n教学目标和要求教学目标和要求1 1、掌握掌握临床生化检验全过程质量控制的主要内容及室内临床生化检验全过程质量控制的主要内容及室内质量控制的主要方法；室间质量评价的概念和方法，质量控制的主要方法；室间质量评价的概念和方法，VISVIS评分法和评分法和PTPT方案的操作和判断指标。方案的操作和判断指标。2 2、熟悉熟悉室内质量控制的任务及失控后的处理和原因分析；室内质量控制的任务及失控后的处理和原因分析；试剂盒的选择和评价。试剂盒的选择和评价。3 3、了解了解多规则质控技术；实验室认可的定义和组成。多规则质控技术；实验室认可的定义和组成。5 第一节第一节 全过程质量控制全过程质量控制u主要步骤主要步骤u全面质量控制的内容全面质量控制的内容分析前质量控制分析前质量控制分析中质量控分析中质量控分析后质量控制分析后质量控制6 全面质量控制的内容主要包括标本全面质量控制的内容主要包括标本分析前的分析前的质量保证、分析中的质量控制和分析后的质量评质量保证、分析中的质量控制和分析后的质量评估估三个主要过程的质控。它们之间的实验保证体三个主要过程的质控。它们之间的实验保证体系见图系见图4-14-1。二、全面质量控制的内容二、全面质量控制的内容7 内容主要为：内容主要为：人员的素质和稳定性人员的素质和稳定性 实验室的设置和工作环境实验室的设置和工作环境 实验仪器的质量保证实验仪器的质量保证 检测方法的选择和评价检测方法的选择和评价 试剂盒的选择与评价试剂盒的选择与评价 病人准备病人准备 标本的采集、处理和储存标本的采集、处理和储存 实验室用水等实验室用水等（一）分析前质量控制（一）分析前质量控制8 内容主要包括：内容主要包括：标本的正确处理和应用标本的正确处理和应用 项目操作规程的建立项目操作规程的建立 室内质控和结果分析室内质控和结果分析 登记和填发报告等登记和填发报告等 （二）分析中的质量控制（二）分析中的质量控制9 内容主要有：内容主要有：运送实验报告运送实验报告 室内质控的数据管理室内质控的数据管理 参加室间质评参加室间质评 病人投诉调查病人投诉调查 临床信息反馈等临床信息反馈等（三）分析后的质量评估（三）分析后的质量评估10图图4-1全面质量控制实验保证体系全面质量控制实验保证体系分析后质量评估分析后质量评估分析中质量控制分析中质量控制病人病人准备准备检查病人检查病人申请检验申请检验标本标本采集采集标本标本运送运送标本标本处理处理人员素质人员素质工作环境工作环境实验用水实验用水实验室管理实验室管理仪器质量保证仪器质量保证方法选择与评价方法选择与评价试剂选择与评价试剂选择与评价建立操作规程建立操作规程室内质控及分析室内质控及分析标本分析测定标本分析测定临床医师临床医师反馈信息反馈信息室内室内复查复查保留标本保留标本随时复查随时复查运送报告运送报告病人投诉病人投诉室间质评室间质评登记登记填发报告填发报告分析前质量保证分析前质量保证分析中质量控制分析中质量控制11第二节第二节 室内质量控制室内质量控制临床生化实验室常规开展的室内质控（临床生化实验室常规开展的室内质控（Internalqualitycontrol，IQC），），旨在检测和控制常规工作的旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。能及时地、准确地报告检验结果。测的一致性。能及时地、准确地报告检验结果。12n人员培训人员培训 n建立标准化操作规程建立标准化操作规程n仪器的检定与校准仪器的检定与校准n质控品质控品一、室内质量控制的任务一、室内质量控制的任务13 实验室每个工作人员都应对开展质量实验室每个工作人员都应对开展质量控制工作的重要性、基础知识、一般方法控制工作的重要性、基础知识、一般方法有充分的了解，并在实践过程中不断学习、有充分的了解，并在实践过程中不断学习、提高。每个实验室都应培养一批开展质控提高。每个实验室都应培养一批开展质控工作的技术骨干。工作的技术骨干。1人人员员培培训训 14 标准化操作规程标准化操作规程（standardoperationalprocedure，SOP）包括仪器使用及维护的操）包括仪器使用及维护的操作规程，试剂、质控品、标准品等使用的作规程，试剂、质控品、标准品等使用的操操作规程和每个检验项目的操作规程等。作规程和每个检验项目的操作规程等。2建立标准化操作规程建立标准化操作规程 15对对本本实实验验室室的的相相关关仪仪器器如如分分光光光光度度计计、量量具具、自自动动生生化化分分析析仪仪以以及及其其它它测测定定仪仪器器等等要要定定期期按按要要求求进进行行检检定定和和校校准准如如对对自自动动化化分分析析仪仪、分分光光光光度度计计的的摩摩尔尔吸吸收收系系数数的的定定期期校校准准。所所有有校校准准和和检检定定都都应应有有时时间间、结结果果、变更和频度的记录和说明。变更和频度的记录和说明。3仪器的检定与校准仪器的检定与校准 16 为质控为质控目的而制备的标本称为目的而制备的标本称为质控品质控品。质。质控品含有与测定标本同样的基础物质（通常为控品含有与测定标本同样的基础物质（通常为小牛血清）其分析物应具有参考值、病理值和小牛血清）其分析物应具有参考值、病理值和医学决定水平三种水平浓度。医学决定水平三种水平浓度。4质控品质控品 n定义定义17 是指对临床诊治疾病具有决定性作用的被是指对临床诊治疾病具有决定性作用的被分析物的浓度，是临床上按照不同病情给予分析物的浓度，是临床上按照不同病情给予不同治疗方案而确定的不同治疗方案而确定的阈值阈值。n医学决定水平医学决定水平定义：定义：18 某一测定成分可某一测定成分可有多个有多个医学决定水平医学决定水平。如血糖有四个决定水平如血糖有四个决定水平2.5mmol/L表示低表示低于此值出现低血糖症状，于此值出现低血糖症状，6.6mmol/L表示空表示空腹时确定糖尿病的水平，腹时确定糖尿病的水平，10mmol/L表示出现表示出现尿糖，尿糖，16.5mmol/L以上出现高血糖昏迷以上出现高血糖昏迷特点：特点：19 根根据据质质控控品品的的物物理理性性状状不不同同分分为为冻冻干干质质控控品品、液体质控品和混合血清液体质控品和混合血清等等 根根据据有有无无测测定定值值可可分分为为定定值值（蓝蓝色色标标签签）质质控品控品和和非定值（红色标签）质控品。非定值（红色标签）质控品。各各实实验验室室可可根根据据各各自自的的情情况况选选用用以以上上一一种种质质控品作为室内质控品控品作为室内质控品n质控品的种类质控品的种类20 人血清基质，分布均匀。人血清基质，分布均匀。无无传染性。传染性。添加剂和调制物的数量少。添加剂和调制物的数量少。瓶间瓶间CV%酶类应小于酶类应小于2%，其它应小于，其它应小于1%。冻干品复溶后稳定，冻干品复溶后稳定，28时不少于时不少于24小时，小时，20时不时不少于少于20天；某些不稳定成分（如天；某些不稳定成分（如BIL，ALP等）在复溶后等）在复溶后4小时小时的变异应小于的变异应小于2%在实验室的有效期应在一年以上。在实验室的有效期应在一年以上。合理的成本。合理的成本。n质控品应具有的特征是：质控品应具有的特征是：21 严格按质控品说明书操作。严格按质控品说明书操作。冻干质控品的复溶要确保溶剂的质量。冻干质控品的复溶要确保溶剂的质量。冻干质控品复溶的加量要准确一致。冻干质控品复溶的加量要准确一致。冻干质控品复溶应轻轻摇匀切忌剧烈震摇。冻干质控品复溶应轻轻摇匀切忌剧烈震摇。质控品应按规定方法保存不用超期质控品应按规定方法保存不用超期质控质控品。品。质控品质控品应应与标本同样测定条件下测定。与标本同样测定条件下测定。n质控品的正确使用和保存质控品的正确使用和保存 22二、室内质量控制的主要方法二、室内质量控制的主要方法 n确定质量目标确定质量目标n设定靶值和控制限设定靶值和控制限nLevey-Jennings质控图质控图n多规则质控技术多规则质控技术23 质质量量目目标标是是实实验验室室选选用用的的质质控控方方法法所所需需达达到到的目标，质量目标可用总允许误差的形式表示的目标，质量目标可用总允许误差的形式表示目目前前中中国国尚尚未未确确立立各各项项目目的的总总允允许许误误差差，可可参考美国（表参考美国（表-）和欧洲（表）和欧洲（表-）一、确定质量目标一、确定质量目标24 最最佳佳变变异异(optimal(optimalconditionsvarianceOCVOCV)表表示示实实验室在最佳条件下测定项目所能达到的最好精密度水平。验室在最佳条件下测定项目所能达到的最好精密度水平。常常规规变变异异(routineconditionsvarianceRCVRCV)表表示示实实验验室在常规条件下测定项目所能达到的精密度水平。室在常规条件下测定项目所能达到的精密度水平。RCV20CV时时，不不可可接接受受二二者者是是反反映映实实验验室室工工作作水水平平的的基础指标，也是开展室内质控工作的基础工作。基础指标，也是开展室内质控工作的基础工作。n最佳变异和常规变异的设定最佳变异和常规变异的设定251 1、稳定性较长的质控品、稳定性较长的质控品 暂暂定定靶靶值值的的设设定定：对对新新批批号号的的质质控控品品进进行行测测定定，根根据据至至少少2020次次质质控控测测定定的的结结果果，计计算算出出平平均均值值和和标标准准差差，作作为为暂暂定定靶靶值和暂定标准差。值和暂定标准差。常常用用靶靶值值的的设设立立：以以最最初初2020个个数数据据和和三三至至五五个个月月在在控控数数据据汇汇集集的的所所有有数数据据的的累累积积平平均均数数作作为为质质控控品品有有效效期期内内的的常常用用靶靶值和常用标准差。值和常用标准差。2 2、稳定性较短的质控品、稳定性较短的质控品3 3、特殊情况的处理、特殊情况的处理二、设定靶值和控制限二、设定靶值和控制限26 对对新新批批号号的的质质控控品品应应确确定定控控制制限限，控控制制限限通通常常是是以以多多个个标标准准差差表表示示，即即以以标标准准差差的的倍倍数数表表示示。不不同同项项目目（定定量量测测定定）的的控制限要根据其采用的质控规则来决定。控制限要根据其采用的质控规则来决定。4、设定控制限、设定控制限27 1.1.均数标准差（均数标准差（-s-s）质控图）质控图是是临临床床最最常常用用的的质质控控图图，以以监监测测分分析析的的精精密密度度。均数均数标标准差（准差（-S-S）质质控控图图三、三、evey-ennings质控图质控图根据前面确定的靶值（根据前面确定的靶值（）和标准差绘制）和标准差绘制-s质质控图，得到控图，得到均值线（均值线（）、警告线（）、警告线（2s）和失控）和失控线（线（3s）。与质控图制作相同批号的控制血清，。与质控图制作相同批号的控制血清，每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。（1）方法）方法:28d d均数+2S-2S+3S-3S正常分布正常分布29正常分布规律：正常分布规律：95%数据落在数据落在2s内内不能有连续不能有连续5次结果在同一侧次结果在同一侧不能有不能有5次结果渐升或渐降次结果渐升或渐降不能连续不能连续2个点落在个点落在2s以外以外不应该有落在不应该有落在3s以外的点以外的点（2）结果分析：）结果分析：30d d均数+2S-2S+3S-3S正常分布正常分布31趋势变化漂移精度变化均均 数标数标 准准 差差 质质 控控 图图-3S+3S+2S-2Sd d均数32 漂移，提示存在系统误差漂移，提示存在系统误差 趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发生变化生变化 精度变化，提示测定的偶然误差较大，如精度变化，提示测定的偶然误差较大，如仪器、试剂不稳定等仪器、试剂不稳定等异常表现异常表现:33（1)1)方法：方法：要要求求在在常常规规条条件件下下，同同时时测测定定2 2份份定定值值质质控控血血清清，并并要要求求质质控控血血清清所所含含测测定定物物浓浓度度最最好好分分别别为为医医学学决决定定水水平平的的上上限限（高高值值）或或下下限限（低低值值），或或者者是是分分析析方方法法测测定定范范围围的的上上限限和和下下限限。将将测测定定结结果果分分别别绘绘成成2 2份份不不同同浓浓度度的的 s s质质控控图图，当当有有一一份份质质控控血血清清测测定定值值处处于于质质控控图图上上2s2s3s3s界界限限内内，发发出出“警警报报”信信号号时时，即即应应采采用用其其余余各各条条规规则则对对质质控控图图进进行行全全面面检检查查，若若符符合合其其中中一一条条，就应把该批分析测定的结果判为就应把该批分析测定的结果判为“失控失控”。2.Westgard多规则质控法多规则质控法34 12S警告规则：警告规则：当当2份质控血清中的任意份质控血清中的任意1份测定值处于份测定值处于2s3s界限内，为界限内，为“警报警报”信号。信号。12.5S规则规则：若有一个质控结果超过若有一个质控结果超过2.5s提示存在随机提示存在随机误差。误差。13S规则：规则：当当2份质控血清中的任意份质控血清中的任意1份测定值超过份测定值超过3s界限，为界限，为“失控失控”。提示存在随机误差。提示存在随机误差。R4S规则：规则：同一批中二个质控结果之差超出同一批中二个质控结果之差超出4s范围，范围，其中一个超出其中一个超出2s限值，另一个超出限值，另一个超出2s限值，为限值，为“失控失控”，属随机误差过大。，属随机误差过大。（2）判断规则：）判断规则：35 22S规则：规则：同批两个质控品结果同方向超出同批两个质控品结果同方向超出2s限限值，值，或同一质控品连续两次质控结果超出或同一质控品连续两次质控结果超出2s限值为限值为“失控失控”，多由系统误差造成。多由系统误差造成。41S规规则则：当当1份份质质控控血血清清的的测测定定结结果果连连续续4次次超超过过1s或或1s界界限限，或或2份份质质控控血血清清的的测测定定结结果果同同时时连连续续2次次超超过过1s或或1s界限时，为界限时，为“失控失控”，一般由系统误差所至。，一般由系统误差所至。7T规规则则：当当7个个连连续续的的质质控控结结果果呈呈现现向向上上或或向向下下的的趋趋势势，提示存在系统误差。提示存在系统误差。10规规则则：当当1份份质质控控血血清清测测定定结结果果连连续续10次次偏偏于于均均值值一一侧侧时时，或或2份份质质控控血血清清的的测测定定结结果果同同时时连连续续5次次偏偏于于一一侧侧时，为时，为“失控失控”，是系统误差所致。，是系统误差所致。36 操操作作者者在在测测定定质质控控时时，如如发发现现质质控控数数据据违违背背了了质质控控规规则则，应应填填写写失失控控报报告告单单，对对失失控控结结果果要要进进行行回回顾顾、检检查查、重重复复测测定定，或或另另取取质质控控品品分分析析，或或检检查查仪仪器器、试试剂剂和和操操作作等，以纠正失控。等，以纠正失控。（三）失控后处理（三）失控后处理37第三节第三节 室间质量评价室间质量评价 室间质量评价室间质量评价（externalqualityassessment，EQA）是指多家实验室分析同是指多家实验室分析同一标本，由外部独立机构收集、分析和反馈一标本，由外部独立机构收集、分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质实验室检测结果，评定实验室常规工作的质量，观察实验的准确性，建立起各实验室分量，观察实验的准确性，建立起各实验室分析结果之间的可比性。析结果之间的可比性。38 鉴定实验室的工作缺陷（操作程序、制度）鉴定实验室的工作缺陷（操作程序、制度）建立方法的可接受限建立方法的可接受限鉴定方法的可信性鉴定方法的可信性为实验室执照评定或认可提供客观依据为实验室执照评定或认可提供客观依据评价实验室工作人员的能力评价实验室工作人员的能力评价实验室结果的可比性评价实验室结果的可比性 目目的的是是通通过过实实验验室室间间的的比比对对，观观察察各各实实验验室室结结果果的的准准确确性性、一一致致性性，并并采采取取一一定定措措施施，使使各各实实验验室结果渐趋一致。室结果渐趋一致。（一）室间质评的目的（一）室间质评的目的39 （二）室间质评应具备的条件（二）室间质评应具备的条件 要有一支素质较高的质控技术队伍要有一支素质较高的质控技术队伍 室间质评要有室内质控的基础室间质评要有室内质控的基础 要有良好质控血清作为调查样本要有良好质控血清作为调查样本 样本定值方法可靠，有参考实验室作后盾样本定值方法可靠，有参考实验室作后盾 统一测定方法及校准品统一测定方法及校准品40 1 1方法方法 组组织织若若干干实实验验室室，共共同同在在规规定定时时间间内内测测定定同同一一批批样样品品、收收集集测测定定结结果果，作作统统计计分分析析并并按按规规定定评分。评分。（二）室间质评的方法（二）室间质评的方法41 能能力力比比对对分分析析（proficiency proficiency testing,PTtesting,PT）是是室室间间质质量量评评价价技技术术方方案案之之一一，现现已已成成为为全全球球性性室室间间质质量量保保证证系系统统的的主主要内容，以保护病人的利益和公众的福利。要内容，以保护病人的利益和公众的福利。PTPT方方案案是是通通过过实实验验室室之之间间的的比比对对判判断断实实验验室室的的检检测测能能力力的活动。的活动。美美 国国 国国 会会 19881988年年 临临 床床 实实 验验 室室 修修 正正 案案（Clinical Clinical laboratory laboratory improvement improvement amendment,CLLA88amendment,CLLA88）强强制制性性地地将将PTPT作为实验室认可的主要内容之一。作为实验室认可的主要内容之一。n能力比对分析能力比对分析42表表4-3 4-3 美国美国CLIA88CLIA88能力比对检验对临床化学的分析质量要求能力比对检验对临床化学的分析质量要求项目项目可接受范围可接受范围丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶靶值靶值20%清蛋白清蛋白靶值靶值10%总蛋白总蛋白靶值靶值10%碱性磷酸酶碱性磷酸酶靶值靶值30%淀粉酶淀粉酶靶值靶值30%天冬氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶靶值靶值20%胆红素胆红素靶值靶值6.84mmol/L或或20%（取大者）（取大者）总钙总钙靶值靶值0.25mmol/L氯氯靶值靶值5%胆固醇胆固醇靶值靶值10%高密度脂蛋白胆固醇高密度脂蛋白胆固醇靶值靶值30%43肌酸激酶肌酸激酶靶值靶值30%肌酐肌酐靶值靶值0.265mol/Lmol/L或或15%(取大者取大者)葡萄糖葡萄糖靶值靶值0.33mmol/Lmol/L或或10%(取大者取大者)甘油三酯甘油三酯靶值靶值25%尿素尿素靶值靶值0.71或或9%(取大者取大者)尿酸尿酸靶值靶值17%铁铁靶值靶值20%乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶靶值靶值20%镁镁靶值靶值25%钾钾靶值靶值0.5mmol/L钠钠靶值靶值4mmol/L血气血气PCO2靶值靶值5mmHg或或8%(取大者取大者)血气血气PO2靶值靶值3S血气血气pH靶值靶值0.0444 国国际际CLIA8888的的PTPT方方案案规规定定，临临床床生生物物化化学学项项目目每每年年至至少少进进行行3 3次次PTPT调调查查，每每次次调调查查至至少少包包括括5 5个个不不同同的的质质控控样样本本，在在一一年年内内，对对于于任任一一项项至至少少可可得得1515个个测测定定结结果果。通通过过各各实验室间持续的比较，作出结果判断。实验室间持续的比较，作出结果判断。（一）方法（一）方法 45 针对某一项目的得分（针对某一项目的得分（ScoreScore）：）：S S1 1=对调查的全部项目的得分：对调查的全部项目的得分：S S2 2=（二）计算（二）计算46 国际国际CLIA88技术细则规定，技术细则规定，S1、S2均应大均应大于于80，否则判为不满意，否则判为不满意。且如果且如果S1或或S2连续两次或两次以上不满意，连续两次或两次以上不满意，即为失败，即为失败，对于某一个接受结果，不再进行优对于某一个接受结果，不再进行优劣分级。劣分级。（三）判断（三）判断47 PTPT是是对对实实验验室室常常规规工工作作进进行行评评价价的的活活动动，目目的的是为了全面提高检验的质量。是为了全面提高检验的质量。所所以以对对PTPT调调查查的的标标本本应应完完全全按按照照病病人人标标本本一一样样对对待待，与与病病人人标标本本同同时时进进行行分分析析，切切忌忌互互相相核核对对结结果，这样才能反映实验室真正的日常工作水平。果，这样才能反映实验室真正的日常工作水平。各各实实验验室室应应该该与与PTPT组组织织者者密密切切合合作作，解解决决实实验验中出现的各种问题，不断提高检验质量。中出现的各种问题，不断提高检验质量。（四）（四）目的意义目的意义1目的目的48 通通过过能能力力比比对对分分析析可可获获得得本本实实验验室室与与使使用用同同一一方方法法的的其其他他实实验验室室结结果果的的差差异异，以以及及与与做做同同一一试试验但使用不同方法的实验室结果比较的情况。验但使用不同方法的实验室结果比较的情况。能能力力比比对对分分析析还还可可评评价价实实验验室室的的分分析析能能力力，监监控控实实验验室室可可能能出出现现的的技技术术问问题题，可可作作为为实实验验室室质质量保证的外部监督工具。量保证的外部监督工具。2意义意义49 变异指数得分法变异指数得分法1985年年全全国国临临床床检检验验质质量量控控制制会会议议上上通通过的提案，建议变异指数得分计算公式如下：过的提案，建议变异指数得分计算公式如下：V=VI=其其中中，为为各各实实验验室室某某项项目目的的测测定定值值，T为为靶靶值值，V为为变变异异百百分分数数，VI为为变变异异指指数数，CCV为已选定的变异系数。为已选定的变异系数。补 充50CCV（%）测定项目测定项目测定项目测定项目CCV（%）表表4-5WHO推荐的推荐的CCV值值K+Na+Cl-Ca2+P3+Glu2.91.62.24.07.87.75.77.78.93.97.59.6BUNUACrTPAlbTBI51 n判判断断标标准准（一）（一）在计算时，在计算时，VIS只计整数位，不带正只计整数位，不带正负符号。负符号。当当VI400时时,VIS=VI;当当VI400时，时，VIS=400。WHO的标准为：的标准为：VIS50为优秀；为优秀；VIS100为良好；为良好；VIS150为及格。为及格。52 （二）我国的标准为：（二）我国的标准为：VIS80为优良；为优良；80VIS150为及格。为及格。VIS200，表明结果中有临床上不允许的表明结果中有临床上不允许的误差误差。VIS=400的测定结果会造成临床的严重失的测定结果会造成临床的严重失误，是绝对不许可的。误，是绝对不许可的。53VIS方方案案过过去去运运用用的的相相当当广广泛泛，但但随随着着科科学学的的发发展展，已已暴暴露露出出自自身身的的不不足足，比比如如说说酶酶、HDL、胆胆固固醇醇等等指指标标已已成成为为当当今今实实验验室室的的常常规规项项目目，但但由由于于VIS方方案案还还没没有有给给出出它它们们的的CCV值值，所所以以无无法法计计算算VIS。而而CCV值值的的确确定定是是一一个个复复杂杂而而漫漫长长的的过过程程，并并需需要要随随着着仪仪器器的的更更新新随随时时进进行行调调整整，从从而而使使VIS的的计计算算值值无无法法真真正正代代表表当当前前的的实实际际水水平。平。nVIS方案的评价方案的评价54一、定义一、定义 实实验验室室认认可可（laboratory laboratory accreditationaccreditation）是是由由权权威威性性专专业业组组织织按按照照一一定定的的标标准准对对实实验验室室或或实实验验室室工工作作人人员员进进行行检检查查、考考核核，认认可可能能够够开开展展或或胜胜任任某某些些工工作作，并并授授予予资格的过程。资格的过程。第四节第四节实验室认可实验室认可55认可委员会认可委员会一系列标准及档案一系列标准及档案经选拔和培训并取得资格的评审员经选拔和培训并取得资格的评审员 二、基本组成二、基本组成56第五节第五节试剂盒的选择和评价试剂盒的选择和评价本节主要内容本节主要内容生化检验试剂的发生化检验试剂的发展展 试剂盒的选择和评试剂盒的选择和评价价 57n临床生化试剂盒临床生化试剂盒 临床生化商品试剂与标准液按检测项目组合临床生化商品试剂与标准液按检测项目组合成一套放在一个包装盒内叫试剂盒（成一套放在一个包装盒内叫试剂盒（reagentkit），或叫试剂组合（），或叫试剂组合（reagentset）。）。与自动化分析仪匹配的试剂盒的研制、生产与自动化分析仪匹配的试剂盒的研制、生产和供应走向产业化的道路，它无疑是临床生化发和供应走向产业化的道路，它无疑是临床生化发展史上一个巨大的技术进步。展史上一个巨大的技术进步。58n试剂盒的分类和发展试剂盒的分类和发展临床生化诊断试剂种类繁多，有液临床生化诊断试剂种类繁多，有液体型、粉剂型、片剂型，有单一试剂、体型、粉剂型、片剂型，有单一试剂、双试剂、干试剂、多试剂等。双试剂、干试剂、多试剂等。纵观近纵观近20多年来的发展，临床生化多年来的发展，临床生化体外诊断试剂盒的分类和发展历史可表体外诊断试剂盒的分类和发展历史可表示如下：示如下：59化学分析法化学分析法 方法学方法学物理性状物理性状组合形式组合形式操作方式操作方式 液体型自配试剂液体型自配试剂液体多剂型试剂液体多剂型试剂手工法多步操作手工法多步操作 酶法分析酶法分析 干粉片型试剂干粉片型试剂 液体单剂型试剂液体单剂型试剂流动离心式分析仪流动离心式分析仪 免疫学法免疫学法 液体型商品试剂液体型商品试剂液体双剂型试剂液体双剂型试剂任选分立式分析仪任选分立式分析仪 干化学法干化学法 干式多层胶片型试剂干式多层胶片型试剂单剂型干片式试剂单剂型干片式试剂 干片式分析仪干片式分析仪60 （一）液体型试剂（一）液体型试剂 优优点点是是液液体体型型试试剂剂的的试试剂剂组组分分高高度度均均一一，瓶瓶间间差差异异小小，测测定定重重复复性性好好和和使使用用方方便便；它它也也无无需需加加入入任任何何辅辅助助试试剂剂及及蒸蒸馏馏水水，避避免免了了外外源源性性水水质质对对试剂的影响，性能较稳定，测定结果较为准确。试剂的影响，性能较稳定，测定结果较为准确。缺缺点点是是液液体体型型试试剂剂（尤尤其其是是酶酶试试剂剂）保保存存时时间间较短，不便于运输。较短，不便于运输。一、液体型试剂和粉（片）剂型试剂一、液体型试剂和粉（片）剂型试剂61 所所谓谓液液体体单单试试剂剂就就是是将将某某种种生生化化检检验验项项目目所所用用到到的的试试剂剂科科学学地地混混合合在在一一起起，组组成成为为一一种种试试剂剂。应应用用时时，只只须须将将标标本本和和试试剂剂按按一一定定比比例例混混合合，即即可可进进行行相相应应的的生生化化反反应应，然然后后用用适适当当的的方方法法检检测测结果。结果。1液体单试剂液体单试剂62 内源性甘油给甘油三酯测定的干扰。内源性甘油给甘油三酯测定的干扰。内外源性内外源性NHNH4 4+对尿素酶法测定的干扰。对尿素酶法测定的干扰。内源性丙酮酸对内源性丙酮酸对ALTALT、ASTAST测定的干扰等。测定的干扰等。维生素维生素C C和胆红素对和胆红素对TrinderTrinder反应的干扰。反应的干扰。n单试剂存在抗干扰能力差的缺点，给测定结果单试剂存在抗干扰能力差的缺点，给测定结果带来相当大的分析误差。例如：带来相当大的分析误差。例如：63 所所谓谓液液体体双双试试剂剂就就是是将将某某些些生生化化检检测测项项目目所所用用到到的的试试剂剂，按按用用途途科科学学地地分分成成两两类类，分分别别配配成成两两种种试试剂剂，通通常常第第一一试试剂剂加加入入后后可可起起到到全全部部或或部部分分消消除除某某些些内内源源性性干干扰扰的的作作用用，第第二二试试剂剂为为启启动动被被检检测测物物质质反反应应的的试试剂剂，两两种种试试剂剂混混合合后后才才共共同同完完成成被被检检项项目的生化反应。然后用适当的方法检测结果。目的生化反应。然后用适当的方法检测结果。2液体双试剂液体双试剂 64 所所谓谓粉粉剂剂型型及及片片剂剂型型试试剂剂，即即是是将将试试剂剂的的各各组组分分用用球球磨磨技技术术粉粉碎碎成成粉粉剂剂或或混混合合后后压压成成片片剂剂，使使用用前前再再加加入入指指定定的的溶溶液液复复溶成液体试剂。溶成液体试剂。（二）粉（片）剂型试剂（二）粉（片）剂型试剂 65 用固体原料研磨后制成粉剂或片剂，则用固体原料研磨后制成粉剂或片剂，则存在许多问题：存在许多问题：要使试剂各组分混合得非常均匀，技术要使试剂各组分混合得非常均匀，技术难度很大；难度很大；分装过程中的称量误差及复溶时加水量分装过程中的称量误差及复溶时加水量的准确性影响试剂的瓶间差；的准确性影响试剂的瓶间差；水质优劣对试剂的稳定性和测定的可靠水质优劣对试剂的稳定性和测定的可靠性有相当大的影响。性有相当大的影响。66 （一）检查包装是否完整（一）检查包装是否完整（二）试剂质量初评（二）试剂质量初评 （三）试剂性能特征的评估（三）试剂性能特征的评估二、试剂盒的选择和评价二、试剂盒的选择和评价67（一）检查包装是否完整（一）检查包装是否完整商品试剂盒不仅应具有优质的试剂内容，而商品试剂盒不仅应具有优质的试剂内容，而且应有完整牢固的且应有完整牢固的包装包装和详尽明确的和详尽明确的说明书。说明书。1、外包装、外包装外包装外包装应完整牢固，封口严密。应完整牢固，封口严密。2、内包装、内包装内包装内包装应有清晰完整的标签，牢固贴于容器表面。应有清晰完整的标签，牢固贴于容器表面。3、说明书、说明书内容包括内容包括试剂名称、用途、测定原理和技术要求、试剂名称、用途、测定原理和技术要求、标本要求、卫生部批准的文号标本要求、卫生部批准的文号等。等。68一、说明书审查一、说明书审查 说明书是用户了解和正确使用试剂盒的指南。说明书是用户了解和正确使用试剂盒的指南。审查内容包括：审查内容包括：试剂名称；试剂名称；用途；用途；测定原理和技术要求；测定原理和技术要求；试剂盒内的包装内容；试剂盒内的包装内容；适用仪器；适用仪器；69一、说明书审查一、说明书审查标本要求；标本要求；测定步骤及注意事项；测定步骤及注意事项；贮存的条件及有效期；贮存的条件及有效期；性能特征，包括准确度、精确度、特异性、性能特征，包括准确度、精确度、特异性、受干扰的程度、线性范围、参考范围；受干扰的程度、线性范围、参考范围；生产单位名称、地址、邮编及电话。生产单位名称、地址、邮编及电话。70（二）试剂质量初评二）试剂质量初评n通过观察试剂的通过观察试剂的颜色、性状及溶解度颜色、性状及溶解度等等对试剂质量进行初步评价。对试剂质量进行初步评价。n粉剂型粉剂型应均匀无凝块，不粘附瓶壁；应均匀无凝块，不粘附瓶壁；n液体型液体型试剂应无沉淀，无混浊，无渗漏。试剂应无沉淀，无混浊，无渗漏。71 （三）试剂性能特征的评估（三）试剂性能特征的评估（一）准确度（一）准确度（二）精密度（二）精密度（三）干扰物试验（三）干扰物试验（四）线性范围（四）线性范围（五）稳定性（五）稳定性72（一）测定准确度（一）测定准确度1、通常用、通常用回收试验回收试验来衡量试剂盒的准确度。回收率越接近来衡量试剂盒的准确度。回收率越接近100%，准确率越高，一般以，准确率越高，一般以100%5%为合格。为合格。2、也可以用、也可以用对比试验对比试验来衡量来衡量：将被检试剂盒与公认的参考：将被检试剂盒与公认的参考方法同时测定若干样本，计算两组结果的相关系数和直线回方法同时测定若干样本，计算两组结果的相关系数和直线回归方程。归方程。相关系数相关系数在在0.91.0之间，斜率之间，斜率b越接近越接近1.0，截距，截距a越接越接近近0，则准确度越高（，则准确度越高（y=a+bx）。）。b表示比例系统误差，表示比例系统误差，a表示恒定系统误差。表示恒定系统误差。73 （二）检验精密度（二）检验精密度试剂批内精密度和批间精密度均以变异系数来表示，试剂批内精密度和批间精密度均以变异系数来表示，一般批间一般批间CV值应大于批内，但二者应无显著差异，否则，值应大于批内，但二者应无显著差异，否则，试剂盒的均一性不符合要求。试剂盒的均一性不符合要求。1批内精密度批内精密度同一样品用同一瓶试剂测定同一样品用同一瓶试剂测定10次，求平次，求平均值、标准差、变异系数。均值、标准差、变异系数。2批间精密度批间精密度同一样品，用不同批号的同一样品，用不同批号的10瓶试剂测定，瓶试剂测定，求平均值、标准差、变异系数。求平均值、标准差、变异系数。74（三）干扰物试验（三）干扰物试验通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。通过试验观察试剂对干扰物影响的耐受程度。方法方法取一混合标本，从中分出几份，分取一混合标本，从中分出几份，分别加入不同以知量的干扰物，然后测定出不同别加入不同以知量的干扰物，然后测定出不同干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，干扰物浓度下的待测物量，比较其测定结果，从各自的偏差程度即可了解试剂对干扰物的耐从各自的偏差程度即可了解试剂对干扰物的耐受程度。受程度。75 （四）测定线性范围（四）测定线性范围n线性范围线性范围指该试剂盒按其说明使用时可准确测指该试剂盒按其说明使用时可准确测量的范围。量的范围。试剂盒的线性范围应能覆盖临床上的试剂盒的线性范围应能覆盖临床上的参考值范参考值范围围和常见疾病的和常见疾病的医学决定水平医学决定水平，以减少样品稀释重，以减少样品稀释重测的机会。一旦线性范围变窄即应废弃。测的机会。一旦线性范围变窄即应废弃。n造成线性范围变窄的造成线性范围变窄的原因原因常见的有：常见的有：生产中组份投料量不足；生产中组份投料量不足；生产后组分稳定性差；生产后组分稳定性差；运输和贮存不当等。运输和贮存不当等