胚胎发育与程序性细胞死亡-PPT.pptx

胚胎发育与程序性细胞死亡n n蝌蚪尾得蝌蚪尾得消失消失n n脊椎动物脊椎动物得神经系得神经系统得发育统得发育n n发育过程发育过程中手和足中手和足得成形过得成形过程程 2、简史18851885年年,Flemming,Flemming第一个描述有关细胞凋亡得第一个描述有关细胞凋亡得 特征特征;(;(染色质浓缩形成半月形染色质浓缩形成半月形)19141914年年,Graper,Graper用这种死亡现象解释胚胎发育用这种死亡现象解释胚胎发育 中器官收缩等现象中器官收缩等现象19511951年年,Glucksmann,Glucksmann发现在胚胎发育中存在这发现在胚胎发育中存在这 种死亡种死亡,并详细描述并详细描述;6060年代年代,Lockshin,Lockshin和和WilliamsWilliams首次提出首次提出程序程序 性细胞死亡性细胞死亡这一概念这一概念19861986年年,RobertHorvitz等发现线虫中等发现线虫中ced3 ced3 (caspase),ced4(Apaf-1)(caspase),ced4(Apaf-1)就是促就是促 凋亡基因。凋亡基因。19801980年年,Wyllie,Wyllie等发现细胞凋亡与内源性核酸等发现细胞凋亡与内源性核酸 内切酶激活有关。内切酶激活有关。“DNA ladderDNA ladder”就是细胞凋亡发生得标志就是细胞凋亡发生得标志;19651965年年,John Kerr,John Kerr提出提出“固缩性坏死固缩性坏死”概念概念;19721972年年,Kerr,Wyllie,Currie,Kerr,Wyllie,Currie提出提出“细胞凋细胞凋 亡亡”(apoptosis)”(apoptosis)得概念得概念;Sydney Brenner HSydney Brenner H、Robert Horvitz John Sulston Robert Horvitz John Sulston THE2002NOBELPRIZEWINNER王晓东王晓东:最年轻美国科学院院最年轻美国科学院院士士 从事得就是细胞凋亡机制从事得就是细胞凋亡机制得研究。得研究。1996 1996年年,发现线粒体释放细发现线粒体释放细胞色素胞色素C,C,引起细胞凋亡引起细胞凋亡;20002000年年,发现线粒体释放发现线粒体释放Smac,Smac,可促细胞凋亡、可促细胞凋亡、Smac:Secondmitochondria-derivedactivatorofcaspase袁钧瑛袁钧瑛,美国哈佛大学医学院细胞生物学系终身教授美国哈佛大学医学院细胞生物学系终身教授,美国艺术和科学院院士美国艺术和科学院院士,美国科美国科学促进会会士。第一个细胞凋亡基因得发现者学促进会会士。第一个细胞凋亡基因得发现者,其研究生导师其研究生导师Horvitz。二、二、PCD/PCD/细胞凋亡得形态变化细胞凋亡得形态变化(1)(1)细胞皱缩变圆细胞皱缩变圆,微微绒毛、复合体消失绒毛、复合体消失;出芽出芽(budding)(budding)膜空泡化膜空泡化(blebbing)(blebbing)出芽出芽(budding)(budding)大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点(2)(2)胞质浓缩、胞质浓缩、细胞器结构保留细胞器结构保留(3)核浓缩核浓缩;染色质凝聚染色质凝聚(4)(4)形成凋形成凋亡小体亡小体(4)(4)凋亡小体形成凋亡小体形成 胞膜皱缩内陷胞膜皱缩内陷,分割包裹胞质分割包裹胞质(内含内含DNA物质及细胞器物质及细胞器),),形成得膜包颗粒即凋形成得膜包颗粒即凋亡小体亡小体(apoptosisbody)(5)(5)吞噬吞噬巨噬细胞吞噬凋亡小体巨噬细胞吞噬凋亡小体巨噬细胞巨噬细胞凋亡小体凋亡小体三、三、PCD/PCD/细胞凋亡得生理和生化变化细胞凋亡得生理和生化变化n磷脂酰丝氨酸外翻磷脂酰丝氨酸外翻:annexin Vannexin Vn基因转录和蛋白质合成基因转录和蛋白质合成:与细胞骨架降解有关得酶与细胞骨架降解有关得酶:谷胱甘肽转移酶、组织蛋白酶谷胱甘肽转移酶、组织蛋白酶D D、组织型纤组织型纤维蛋白酶原激活剂等维蛋白酶原激活剂等 与凋亡小体形态维持有关得蛋白质与凋亡小体形态维持有关得蛋白质:簇因子、簇因子、r-r-谷丙转氨酶等谷丙转氨酶等nCaCa2+2+、MgMg2+2+依赖性得核酸内切酶活化依赖性得核酸内切酶活化:降解降解DNADNA,形成形成180-200bp180-200bp或其倍数得或其倍数得DNADNA片段片段PCD/细胞凋亡与坏死得区别细胞凋亡与坏死得区别细胞坏死(necrosis)指指由由于于某某些些外外界界毒毒性性刺刺激激(如如局局部部缺缺血血、高高热热、物物理理和和化化学学损损伤伤或或生生物物得得侵侵袭袭等等),直直接接作作用用于于细细胞胞导导致致得得细细胞胞急急速速死死亡亡,一一般般伴有炎症反应。伴有炎症反应。一般过程一般过程:因补体反应或烈性病毒感染破坏了质因补体反应或烈性病毒感染破坏了质膜膜,或者能量依赖性离子泵被破坏产生得钠钾等离或者能量依赖性离子泵被破坏产生得钠钾等离子沿着各自得浓度梯度进入细胞子沿着各自得浓度梯度进入细胞,从而导致细胞吸从而导致细胞吸水膨胀水膨胀,最终破膜而死。最终破膜而死。细细胞胞凋凋亡亡与与细细胞胞坏坏死死就就是是多多细细胞胞生生物物细细胞胞死死亡亡得得两两种种不不同同形形式式,在在形形态态学学、生生化化代代谢谢、分分子子机机制制、结结局局和和意意义义等等方方面面都都有有本本质质得得区别。区别。细胞坏死特征细胞坏死特征:溶酶体释放酶溶酶体释放酶,细胞器瓦解细胞器瓦解,细胞骨架细胞骨架降解降解,细胞核破裂、降解细胞核破裂、降解,蛋白质合成终止蛋白质合成终止,由于膜破由于膜破裂裂,出现炎症反应出现炎症反应图图图图8 82 2 细胞凋亡与细胞坏死得比较细胞凋亡与细胞坏死得比较细胞凋亡与细胞坏死得比较细胞凋亡与细胞坏死得比较 细胞坏死细胞坏死细胞坏死细胞坏死 细胞凋亡细胞凋亡细胞凋亡细胞凋亡1 1 1 1、性质性质性质性质病理性病理性病理性病理性生理性或病理性生理性或病理性生理性或病理性生理性或病理性2 2 2 2、诱导因诱导因诱导因诱导因素素素素强烈刺激强烈刺激强烈刺激强烈刺激,随机发生随机发生随机发生随机发生较弱刺激较弱刺激较弱刺激较弱刺激,非随机发生非随机发生非随机发生非随机发生3 3 3 3、生化特生化特生化特生化特点点点点被动过程被动过程被动过程被动过程,无新蛋白合成无新蛋白合成无新蛋白合成无新蛋白合成,不耗不耗不耗不耗能能能能主动过程主动过程主动过程主动过程,有新蛋白合成有新蛋白合成有新蛋白合成有新蛋白合成,耗能耗能耗能耗能4 4 4 4、形态变形态变形态变形态变化化化化细胞肿胀、细胞肿胀、细胞肿胀、细胞肿胀、细胞结构全面溶解、破坏细胞结构全面溶解、破坏细胞结构全面溶解、破坏细胞结构全面溶解、破坏胞膜及细胞器相对完整胞膜及细胞器相对完整胞膜及细胞器相对完整胞膜及细胞器相对完整,细胞细胞细胞细胞皱缩皱缩皱缩皱缩,核固缩核固缩核固缩核固缩5 5 5 5、DNADNADNADNA电泳电泳电泳电泳弥散性降解弥散性降解弥散性降解弥散性降解,电泳呈均一电泳呈均一电泳呈均一电泳呈均一DNADNADNADNA片片片片状状状状DNADNADNADNA片段化片段化片段化片段化(180-200bp),(180-200bp),(180-200bp),(180-200bp),电泳电泳电泳电泳呈梯状条带呈梯状条带呈梯状条带呈梯状条带6 6 6 6、炎症反炎症反炎症反炎症反应应应应溶酶体破裂溶酶体破裂溶酶体破裂溶酶体破裂,局部炎症反应局部炎症反应局部炎症反应局部炎症反应溶酶体相对完整溶酶体相对完整溶酶体相对完整溶酶体相对完整,局部无炎症局部无炎症局部无炎症局部无炎症反应反应反应反应7 7 7 7、凋亡小凋亡小凋亡小凋亡小体体体体无无无无有有有有8 8 8 8、基因调基因调基因调基因调控控控控无无无无有有有有表表81 细胞凋亡与细胞坏死得比较细胞凋亡与细胞坏死得比较三、胚胎发育中得程序性细胞死亡三、胚胎发育中得程序性细胞死亡(PCD)(PCD)(一一)PCD)PCD参与了各器官得形态发生和发育。参与了各器官得形态发生和发育。1 1、肢体得发生、肢体得发生 2 2、中枢神经系统得发生、发育、中枢神经系统得发生、发育3 3、腭得发生、腭得发生 4 4、管、管(腔腔)道得形成道得形成5 5、晶状体得发育、晶状体得发育 6 6、心得发育、心得发育7 7、生殖细胞得发生、生殖细胞得发生 8 8、免疫、造血系统得发生、免疫、造血系统得发生9 9、无用结构得退化消失、无用结构得退化消失(弓动脉、前肾、中肾、尾芽、弓动脉、前肾、中肾、尾芽、鳃膜等鳃膜等)实实 验验n n将17期得鸡胚翅芽后缘得细胞移植到另一不同胚龄鸡胚得体节中,发育至24期时仍发生死亡。n n将17期得鸡胚翅芽后缘以外得细胞移植到另一不同胚龄鸡胚得体节中,发育至24期时不发生死亡。证明鸡胚翅芽后缘细胞得死亡有着预证明鸡胚翅芽后缘细胞得死亡有着预定得时间和空间程序。定得时间和空间程序。(二二)胚胎发育中胚胎发育中PCDPCD得意义得意义1 1、系统匹配、系统匹配 淘汰没有作用或不再起作用得细胞淘汰没有作用或不再起作用得细胞,以确保有以确保有 功能细胞得营养和空间。功能细胞得营养和空间。2 2、除去短暂结构、除去短暂结构:人胚尾芽人胚尾芽3 3、雕刻躯体、雕刻躯体 从而形成正常、精细复杂得生物体。从而形成正常、精细复杂得生物体。4 4、保护机体、保护机体:如胸腺得发育、损伤得胚胎细胞如胸腺得发育、损伤得胚胎细胞四、四、PCD/PCD/细胞凋亡得调节细胞凋亡得调节(一一)激素水平得调节激素水平得调节:甲状腺素甲状腺素(蝌蝌 蚪蚪)、糖皮质激素糖皮质激素(胸腺胸腺cell)cell)、苗勒抑制物质苗勒抑制物质(中肾旁管中肾旁管)等诱导等诱导PCDPCD雌激素雌激素(颗粒细胞颗粒细胞)、FSH/LHFSH/LH(卵泡、生精细胞卵泡、生精细胞)、胰岛素胰岛素(晶状体上皮细胞晶状体上皮细胞)等抑制等抑制PCDPCD(二二)细胞因子调节细胞因子调节主要就是生长因子主要就是生长因子:NGF,FGF,TGF,:NGF,FGF,TGF,G-CSFG-CSF等缺乏导致等缺乏导致PCDPCD(三三)PCD)PCD相关基因相关基因/蛋白得调节蛋白得调节1 1、TNFTNF死亡受体超家族死亡受体超家族(1)(1)死亡受体死亡受体:FasFas、TNFR ITNFR I等等(2)(2)与死亡受体有关得含死亡结构与死亡受体有关得含死亡结构域得信号蛋白域得信号蛋白:FADDFADD(FAS(FAS相关死亡蛋白相关死亡蛋白)、TRADD(TNFR ITRADD(TNFR I相关死亡蛋白相关死亡蛋白)等等(1 1)死亡受体死亡受体:FasFas、TNFR ITNFR I等等 结构特点结构特点:胞内胞内C-C-端端:胞内功能区由胞内功能区由8080个氨个氨基酸构成得死亡结构域基酸构成得死亡结构域 (death domaindeath domain,DDDD)跨膜区跨膜区 胞外胞外N-N-端端:胞外功能区内含数胞外功能区内含数个半胱氨酸个半胱氨酸(2)(2)含有死亡结构域得信号蛋白含有死亡结构域得信号蛋白TRADD(TNFRTRADD(TNFR相关死亡蛋白相关死亡蛋白):34kD,C:34kD,C端端 得得DDDD与与TNFR I,FADDTNFR I,FADD得得DDDD结合结合FADD(FasFADD(Fas相关死亡蛋白相关死亡蛋白)(MORT-1):(MORT-1):23kD,C-23kD,C-端含有一个端含有一个DD(DD(death death domain),domain),可与可与FasFas结合结合;N-;N-端含有端含有 MORTMORT结构域或死亡效应结构域结构域或死亡效应结构域(DED(DED:death effector domain),death effector domain),可与可与 proCaspase-8(FLICE)proCaspase-8(FLICE)得得DEDDED结合结合n nFas(Apo-1,CD95):43kDFas(Apo-1,CD95):43kD (三聚体三聚体三聚体三聚体FasL-Fas-FADDFasL-Fas-FADDFasL-Fas-FADDFasL-Fas-FADD(Fas Fas Fas Fas 相关死相关死相关死相关死 亡蛋白亡蛋白亡蛋白亡蛋白)-proCaspase-8-proCaspase-8-proCaspase-8-proCaspase-8)(DISC/(DISC/(DISC/(DISC/死亡死亡死亡死亡 诱导信号复合物诱导信号复合物诱导信号复合物诱导信号复合物):):):):活化活化活化活化BidBidBidBid、caspase-3caspase-3caspase-3caspase-3 DED:death effector domainDED:death effector domainn nTNFR ITNFR ITNFR ITNFR I(TNFR55TNFR55TNFR55TNFR55):):):):55-60kD55-60kD55-60kD55-60kD,TNFR I-TNFR I-TNFR I-TNFR I-TRADD -TRADD -TRADD -TRADD(TNFRTNFRTNFRTNFR相关死亡蛋白相关死亡蛋白相关死亡蛋白相关死亡蛋白)-FADD-proCaspase-8 FADD-proCaspase-8 FADD-proCaspase-8 FADD-proCaspase-8 DDDDDEDDEDDDDDDDDDDEDDEDFas/FasLFas/FasLDD:deathdomain凋亡诱导因素凋亡诱导因素死亡受体死亡受体(Fas)(Fas)配配体体(FasL)(FasL)得表达、得表达、结合结合Caspase-8活化活化Caspase-3活化活化apoptosisFADDFADD2 2、凋亡蛋白酶凋亡蛋白酶Caspase:cysteine-containingaspartate-specificprotease(含半胱氨酸得天冬氨酸特异蛋白水解酶含半胱氨酸得天冬氨酸特异蛋白水解酶)一组对底物得天冬氨酸部位有特异水一组对底物得天冬氨酸部位有特异水解作用解作用,其活性中心富含半胱氨酸得蛋白酶。其活性中心富含半胱氨酸得蛋白酶。(1)(1)定义定义(2)Caspase Caspase 得得分类及功能分类及功能凋亡启动亚类凋亡启动亚类(DED(DED、CARD)CARD)凋亡效应亚类凋亡效应亚类细胞因子加工细胞因子加工亚类亚类(ICE(ICE亚类亚类)Caspases Caspases 激活得瀑布学说激活得瀑布学说(级联反应级联反应)(3)结构特征结构特征以无活性得以无活性得 酶原形式存在酶原形式存在;NN端均含有一端均含有一 段前区域段前区域(内含内含 DED DED、CARD);CARD);CARD:CaspaseActivationandRecruitmentDomain在大亚基得在大亚基得C C端含有端含有一一活性中心活性中心,其中半其中半胱氨酸就是必需氨胱氨酸就是必需氨基酸。基酸。活性形式由活性形式由2 2个大亚个大亚 基和基和2 2个小亚基组成个小亚基组成 得杂四聚体得杂四聚体;Active enzymeCatalytic sites(4)(4)CaspaseCaspase得作用底物得作用底物 凋亡蛋白酶激活得凋亡蛋白酶激活得DNADNA酶抑制物酶抑制物(ICAD)CAD:Caspase Activated DNaseCAD:Caspase Activated DNase由由CaspaseCaspase激活得核酸酶激活得核酸酶(具有内切酶活性具有内切酶活性)ICADCADDNACaspase 核纤层核纤层(lamina)蛋白蛋白细胞核细胞核lamina染色体染色体 细胞骨架蛋白细胞骨架蛋白:导致细胞解体导致细胞解体,形成形成凋亡小体凋亡小体 其她得其她得caspases 灭活细胞凋亡得抑制物灭活细胞凋亡得抑制物3 3、凋亡蛋白酶活化因子凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)-1(Apaf-1)130kD,N-130kD,N-端含有一半胱氨酸蛋白酶募集域端含有一半胱氨酸蛋白酶募集域(CARD),C-(CARD),C-端由端由1212个个WD-40WD-40重复片段组成。重复片段组成。凋亡体凋亡体/死亡复合体死亡复合体:Cytc Cytc Apaf1-dATPApaf1-dATP (闭合得单体聚合成开放得七聚体闭合得单体聚合成开放得七聚体)Cytc-Apaf1-dATP-proCaspase-9Cytc-Apaf1-dATP-proCaspase-9凋亡复合体凋亡复合体CARD:CaspaseActivationandRecruitmentDomain4 4、线粒体膜间隙蛋白线粒体膜间隙蛋白(线粒体释放得凋亡相关因线粒体释放得凋亡相关因子子)细胞色素细胞色素C,C,凋亡诱导因子凋亡诱导因子,Apaf-1,Ca,Apaf-1,Ca2+2+,Smac/DIABLOSmac/DIABLO等等5 5、自由基、自由基活性氧自由基活性氧自由基(超氧阴离子自由基、羟自由基及单线态氧,H2O2等):):诱导诱导PCDPCD得发生。得发生。活性氮自由基活性氮自由基:NO:NO高浓度促高浓度促PCD,PCD,低浓度抑制低浓度抑制PCDPCD6 6、P53基因基因阻滞细胞阻滞细胞G G1 1期期,修复受损得修复受损得DNA,如修复失败则如修复失败则通过多种途径诱导细胞凋亡。通过多种途径诱导细胞凋亡。(射线、毒素射线、毒素)分子警察分子警察P53P53得促凋亡机制得促凋亡机制:(1)(1)DNA结合蛋白结合蛋白,调控基因调控基因(BAX(BAX等等)转录转录(细胞核途径细胞核途径)(2)(2)激活线粒体途径激活线粒体途径(3)(3)诱导诱导FasFas增加增加 (4)(4)诱导溶酶体得不稳定性诱导溶酶体得不稳定性7 7、BcL-2BcL-2家族家族3 3个亚家族个亚家族抗凋亡蛋白亚家族抗凋亡蛋白亚家族(BcL-2(BcL-2亚家族亚家族)含多区域得促凋亡蛋白亚家族含多区域得促凋亡蛋白亚家族(Bax(Bax亚家族亚家族)仅含仅含BH3BH3区域得促凋亡蛋白亚家族区域得促凋亡蛋白亚家族(BH3(BH3亚家族亚家族)基本结构特征基本结构特征:跨膜结构域跨膜结构域 BcL-2BcL-2同源结构域同源结构域(BHBH)BcL-2BcL-2基因家族成员自身或彼此之基因家族成员自身或彼此之间有形成二聚体或多聚体得能力间有形成二聚体或多聚体得能力,BcL-BcL-2 2家族通过蛋白与蛋白相互作用调节家族通过蛋白与蛋白相互作用调节着细胞得存活与凋亡。着细胞得存活与凋亡。Bcl-2(Bcl-2(Bcelllymphoma/leukemia-2):Bcl-2 就是第一个被确认有抗凋亡作用就是第一个被确认有抗凋亡作用,由由 229aa229aa构成构成(鼠鼠236)236)分布在线粒体膜分布在线粒体膜,内质网内质网,核核膜等处。膜等处。Bcl-2 和和C、elegans 中得中得ced-9 有很高得同源有很高得同源性性,具有促进细胞存活得功能。具有促进细胞存活得功能。BcL-2BcL-2抗凋亡机制抗凋亡机制:直接抗氧化直接抗氧化;调节调节PTP(PTP(线粒体通透性转换孔线粒体通透性转换孔)开放开放;抑制抑制Bax,Bak得促凋亡作用得促凋亡作用;抑制抑制Caspases激活激活;维持细胞钙稳态。维持细胞钙稳态。8 8、凋亡抑制蛋白家族、凋亡抑制蛋白家族(IAP家族家族)IAP家族就是一组抑制凋亡得蛋白。家族就是一组抑制凋亡得蛋白。IAP家家族蛋白得主要结构域族蛋白得主要结构域:BIR(baculoviralIAPrepeat),锌指结构域、锌指结构域、CARDCARD。BIR2 BIR2就是就是IAP 抑抑制凋亡得结构基础。制凋亡得结构基础。作用机制作用机制:抑制抑制caspase-3,7-3,7等得活性等得活性。Figure 1 Schematic diagram of domain structure in representative IAPs凋亡细凋亡细胞胞DNADNA得断裂得断裂形成高分子量得形成高分子量得DNADNA大片断大片断(50kb)(50kb)形成形成180180200bp200bp整整数倍得数倍得DNADNA小片断小片断非非CaspaseCaspase依赖依赖得内源性核酸内得内源性核酸内切酶得激活切酶得激活CaspaseCaspase依赖依赖得内源性核酸得内源性核酸酶激活酶激活(CAD)(CAD)9 9、核酸内切酶核酸内切酶Caspase8Caspase3Caspase9CleavageofsubstratesNucleusDegradationofDNACAD激活方式细胞细胞膜膜DNADNA断裂与断裂与“梯状条带梯状条带”RDNA“梯梯”状条带状条带(二二)、PCDPCD得主要途径得主要途径1 1、膜受体通路膜受体通路(死亡受体通路死亡受体通路/外源性通路外源性通路)肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子死亡死亡受体受体(TNFR)(TNFR)家族中得家族中得死亡受体死亡受体:FasFasCD95,TNFRCD95,TNFRFas/FasLFas/FasLDD:deathdomain死亡受体通路死亡受体通路凋亡诱导因素凋亡诱导因素死亡受体死亡受体(Fas)(Fas)配配体体(FasL)(FasL)得表达、得表达、结合结合Caspase-8活化活化Caspase-3活化活化apoptosisFADDFADD2 2、线粒体通路线粒体通路(内源性途径内源性途径)线粒体通透性转换孔线粒体通透性转换孔(MPTP):(MPTP):由内膜得由内膜得腺苷转位因子和外膜得电压依赖性阴腺苷转位因子和外膜得电压依赖性阴离子通道离子通道)构成得蛋白复合体。构成得蛋白复合体。R R1 1、线粒体跨膜电位、线粒体跨膜电位(m)(m)得破坏与细得破坏与细 胞胞凋亡得一致性凋亡得一致性;m m 下降时下降时PTPPTP开放导致细胞凋亡开放导致细胞凋亡 m m 正常时无细胞凋亡正常时无细胞凋亡2 2、线粒体跨膜电位、线粒体跨膜电位(m)(m)得破坏早于核得破坏早于核DNADNA得断裂。得断裂。?线粒体信号通路线粒体信号通路smacSmac:second mitochondria-derived activator of caspaseIAPs(-)Apoptosis Apoptosis inducing inducing factorfactorInhibitors Inhibitors of apoptosis of apoptosis proteinproteinapoptotic apoptotic protease protease activiation activiation factorfactor凋亡诱导因素凋亡诱导因素死亡受体死亡受体/配体得表达、结合配体得表达、结合Caspase-8活化活化Caspase-3活化活化apoptosisBid活化活化线粒体通路线粒体通路 活化活化死亡受体通路与线粒体通路得联系死亡受体通路与线粒体通路得联系Caspase-3活化活化3 3、内质网应激反应性途径、内质网应激反应性途径n n损伤因素损伤因素-内质网钙离子稳态改变、非内质网钙离子稳态改变、非正确蛋白质堆积正确蛋白质堆积-caspase12-caspase12活化活化-活化活化Bcl2Bcl2促凋亡亚家族成员促凋亡亚家族成员-线粒体通线粒体通透性增加透性增加-caspase9-caspase9活化活化-凋亡发凋亡发生生n n活化活化caspase12caspase12与其她得内质网应激分子协与其她得内质网应激分子协同同,直接活化直接活化caspase9-caspase9-凋亡发生凋亡发生4 4、MAPKMAPK、JAK-STATJAK-STAT信号转导途径信号转导途径MAPKKKMAPKKK(MEKK1MEKK1、2 2、3 3、4 4)MAPKKMAPKK(MEK1-7MEK1-7)MAPKMAPK(丝裂原活化蛋白激酶丝裂原活化蛋白激酶,包括包括ERKERK、JNKJNK、P38MAPKP38MAPK、ERK5/BMK1)ERK5/BMK1)转录因子转录因子(c-mycc-myc、c-fosc-fos、c-junc-jun等等)n nJAKJAK(两面神激酶两面神激酶)-活化活化STATSTAT(信号转导子信号转导子和转录激活子和转录激活子),),形成形成STATSTAT二聚体二聚体,结合核定结合核定位分子入核位分子入核,结合结合GASGAS得得DNADNA序列序列-调控调控基因表达基因表达n nJAKJAK活化活化MAPKKKMAPKKK上游分子而激活上游分子而激活MAPKMAPKn nMAPKMAPK可活化可活化STAT STAT 家族成员家族成员5 5、G G蛋白信号转导途径蛋白信号转导途径nG G蛋白蛋白(鸟嘌呤核苷酸结合蛋白鸟嘌呤核苷酸结合蛋白,GBPGBP)n信号转导途径包括信号转导途径包括GBPGBP、G G蛋白偶蛋白偶联受体和腺苷酸环化酶联受体和腺苷酸环化酶(AC)-AC)-cAMP-cAMP和钙离子浓度和钙离子浓度-调控凋亡得发生调控凋亡得发生