鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定.ppt

蛋黄中卵磷脂的提取、纯蛋黄中卵磷脂的提取、纯化和鉴定化和鉴定一、卵磷脂的概述：卵磷脂被誉为与蛋卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的白质、维生素并列的“第三营养素第三营养素”，卵磷脂是生命的卵磷脂是生命的基础物质，人类生命自基础物质，人类生命自始至终都离不开它的滋始至终都离不开它的滋养和保护。卵磷脂存在养和保护。卵磷脂存在于每个细胞之中，更多于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾疫系统以及肝、心、肾等重要器官。等重要器官。1844 1844年法国人年法国人GohleyGohley从蛋黄中发现卵从蛋黄中发现卵磷脂（蛋黄素），并以磷脂（蛋黄素），并以希腊文命名为希腊文命名为LecithosLecithos（卵磷脂）。（卵磷脂）。二、卵磷脂的理化性质化学名称：磷脂酰胆碱化学名称：磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine）简称：简称：PC纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同被氧化而呈现淡黄色至棕色。白色蜡不同被氧化而呈现淡黄色至棕色。白色蜡状物质，状物质，无熔点无熔点，有旋光性，在空气中因，有旋光性，在空气中因不饱和脂肪酸烃链氧化而变色。不饱和脂肪酸烃链氧化而变色。极易溶于极易溶于乙醚及乙醇，不溶于水和丙酮乙醚及乙醇，不溶于水和丙酮 磷脂酰胆碱（磷脂酰胆碱（PC）在醇中的溶解度比磷脂）在醇中的溶解度比磷脂酰乙醇胺（酰乙醇胺（PE)及磷脂酰肌醇（及磷脂酰肌醇（PI）高，故）高，故根据溶解性能的不同使之分离提纯。根据溶解性能的不同使之分离提纯。R1-COO-CH2R2-COO-CH CH2 OPOR OHO12 *3R1 常为饱和脂肪常为饱和脂肪酸如酸如C16，C18R2 常为不饱和脂常为不饱和脂肪酸如花生四烯肪酸如花生四烯酸酸R=CH2CH2-N(CH3)3 OH 卵磷脂卵磷脂+-卵磷脂卵磷脂的化学结构的化学结构CO2-CH2CO2-CH CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3 OO+非极性端非极性端疏水端，亲油端疏水端，亲油端 磷脂分子中同时具有磷脂分子中同时具有疏水基疏水基和和亲水基亲水基。正是由于这种特点，。正是由于这种特点，使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。使得磷脂类化合物在细胞中起着重要的生理作用。-极性端极性端疏油端，亲水端疏油端，亲水端H-OH三、卵磷脂的作用三、卵磷脂的作用1 1、肝脏的保护神、肝脏的保护神 磷脂中的胆碱对脂肪有亲和力，若体内胆碱不磷脂中的胆碱对脂肪有亲和力，若体内胆碱不足，则会影响脂肪代谢，造成脂肪在肝内积聚，足，则会影响脂肪代谢，造成脂肪在肝内积聚，形成脂肪肝甚至会发炎肿胀。卵磷脂不但可以形成脂肪肝甚至会发炎肿胀。卵磷脂不但可以预防预防脂肪肝脂肪肝，还能促进肝细胞再生，同时，磷，还能促进肝细胞再生，同时，磷脂可降低血清胆固醇含量，防止脂可降低血清胆固醇含量，防止肝硬化肝硬化并有助并有助于肝功能的恢复于肝功能的恢复。2 2、对心脏健康的积极作用、对心脏健康的积极作用 在在2020世纪世纪6060年代，科年代，科学家们就发现卵磷脂学家们就发现卵磷脂可能具有保护心脏的可能具有保护心脏的作用，在进一步的研作用，在进一步的研究中，终于证实卵磷究中，终于证实卵磷脂对心脏健康有积极脂对心脏健康有积极作用。这是因为它能作用。这是因为它能调节胆固醇在人体内调节胆固醇在人体内的含量、有效降低胆的含量、有效降低胆固醇、固醇、高血脂高血脂及及冠心冠心病病的发病率。的发病率。3 3、促进大脑发育，增强记忆力、促进大脑发育，增强记忆力 美国北卡罗来纳州美国北卡罗来纳州DUKEDUKE大学心理学教授药学博大学心理学教授药学博士沃伦来克在报告中提到：用卵磷脂饲育怀士沃伦来克在报告中提到：用卵磷脂饲育怀孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后代。北卡罗来纳大学营养学部教授及主任，后代。北卡罗来纳大学营养学部教授及主任，会议的首席专家，医学博士、药学博士史蒂会议的首席专家，医学博士、药学博士史蒂文文泽瑟尔在大会贺词中说：泽瑟尔在大会贺词中说：“总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于她们的婴儿的对于她们的婴儿的智力发育智力发育是很重要的。是很重要的。”美国食品与药物管理委员会（美国食品与药物管理委员会（FDAFDA）规定，所）规定，所有婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。有婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。4 4、血管的、血管的“清道夫清道夫”卵磷脂具有乳化、分解油脂的作用，可增进卵磷脂具有乳化、分解油脂的作用，可增进血液循环，改善血清脂质，清除过氧化物，血液循环，改善血清脂质，清除过氧化物，使血液中胆固醇及中性脂肪含量降低，减少使血液中胆固醇及中性脂肪含量降低，减少脂肪在血管内壁的滞留时间，促进粥样硬化脂肪在血管内壁的滞留时间，促进粥样硬化斑的消散，防止由胆固醇引起的血管内膜损斑的消散，防止由胆固醇引起的血管内膜损伤。服用卵磷脂对伤。服用卵磷脂对高血脂高血脂和和高胆固醇高胆固醇具有显具有显著的功效，因而可预防和治疗动著的功效，因而可预防和治疗动脉硬化症脉硬化症（高血压、心肌梗塞、脑溢血）。（高血压、心肌梗塞、脑溢血）。5 5、糠尿病患者的营养品、糠尿病患者的营养品 卵磷脂不足会使胰脏机能下降，无法分泌充分的胰岛素，不能卵磷脂不足会使胰脏机能下降，无法分泌充分的胰岛素，不能有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中，这是导致糖尿病的基有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中，这是导致糖尿病的基本原因之一。如每天食用本原因之一。如每天食用2020克以上的卵磷脂，则糖尿病的恢复克以上的卵磷脂，则糖尿病的恢复是相当显著的。很多病人甚至可不必再注射胰岛素。特别是对是相当显著的。很多病人甚至可不必再注射胰岛素。特别是对糖尿坏疽糖尿坏疽及及动脉硬化动脉硬化等并发症患者更为有效。等并发症患者更为有效。6 6、有效地化解胆结石、有效地化解胆结石 体内过多的胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石，胆结石体内过多的胆固醇会发生沉淀，从而形成胆结石，胆结石90%90%是是由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂，此外还有水份、由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂，此外还有水份、胆固醇、矿物质及色素等，卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、胆固醇、矿物质及色素等，卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、消化及吸收，从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄消化及吸收，从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄取一定量的卵磷脂可以有效地防止取一定量的卵磷脂可以有效地防止胆结石胆结石的形成，并对已形成的形成，并对已形成的胆结石也能起到化解的作用。的胆结石也能起到化解的作用。7 7、胎、婴儿神经发育的必需品胎、婴儿神经发育的必需品 正常情况下，孕妇体内的羊水中含有大量的卵磷脂。人体脑细正常情况下，孕妇体内的羊水中含有大量的卵磷脂。人体脑细胞约有胞约有150150亿个，其中亿个，其中70%70%早在母体中就已经形成。为了促进胎早在母体中就已经形成。为了促进胎儿脑细胞能健康发育，孕妇补充足够的卵磷脂是很重要的。婴儿脑细胞能健康发育，孕妇补充足够的卵磷脂是很重要的。婴幼儿时期是大脑形成发育最关键时期，卵磷脂可以促进大脑神幼儿时期是大脑形成发育最关键时期，卵磷脂可以促进大脑神经系统与脑容积的经系统与脑容积的增长、发育增长、发育。因此美国食品和药物管理局。因此美国食品和药物管理局（FDAFDA）规定在婴儿奶粉中必需添加卵磷脂。）规定在婴儿奶粉中必需添加卵磷脂。8 8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤消除青春痘、雀斑并滋润皮肤 正常人体内含有许多毒素，特别是在肠道内，当这些毒素含量正常人体内含有许多毒素，特别是在肠道内，当这些毒素含量过高时，便会随着血液循环沉积在皮肤上，从而形成色斑或青过高时，便会随着血液循环沉积在皮肤上，从而形成色斑或青春痘。卵磷脂正好是一种天然的春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂解毒剂，它能分解体内过多的，它能分解体内过多的毒素，并经肝脏和肾脏的处理排出体外，当体内的毒素降低到毒素，并经肝脏和肾脏的处理排出体外，当体内的毒素降低到一定的浓度时，脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还一定的浓度时，脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还具有一定的亲水性，并有增加血红素的功能，如果每天服用一具有一定的亲水性，并有增加血红素的功能，如果每天服用一定量的卵磷脂，就能为皮肤提供充分的水分和氧气，使皮肤变定量的卵磷脂，就能为皮肤提供充分的水分和氧气，使皮肤变得得光滑柔润光滑柔润。9 9、预防老年痴呆症的发生预防老年痴呆症的发生 人随着年龄增长，记忆力会减退，其原因人随着年龄增长，记忆力会减退，其原因与乙酰胆碱含量不足有一定关系。脑部的与乙酰胆碱含量不足有一定关系。脑部的神经传导物质（乙酰胆碱）减少是引起老神经传导物质（乙酰胆碱）减少是引起老年痴呆的主要原因，年痴呆的主要原因，乙酰胆碱乙酰胆碱是神经系统是神经系统信息传递时必需的化合物。而且信息传递时必需的化合物。而且“胆碱胆碱”是卵磷脂的基本成分，卵磷脂的充分供应是卵磷脂的基本成分，卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的乙将保证机体内有足够的胆碱与人体内的乙酰结合为酰结合为“乙酰胆碱乙酰胆碱”，从而成为大脑提，从而成为大脑提供充分的信息传导物质，大脑能直接从血供充分的信息传导物质，大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱，并很快转化为乙液中摄取卵磷脂及胆碱，并很快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退的进程，预防或推迟衰退的进程，预防或推迟老年痴呆老年痴呆的发生。的发生。1010、良好的心理调和剂、良好的心理调和剂 社会竞争日趋激烈，人们长期处在紧张的环境社会竞争日趋激烈，人们长期处在紧张的环境和种种压力下，常患有和种种压力下，常患有焦虑焦虑、急躁急躁、易怒易怒、失失眠眠、耳鸣耳鸣等症，即植物神经紊乱，通常被称为等症，即植物神经紊乱，通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂，可使大脑神经及神经衰弱。经常补充卵磷脂，可使大脑神经及时得到营养补充，保持健康的工作状态，利于时得到营养补充，保持健康的工作状态，利于消除疲劳，激化脑细胞，改善因神经紧张而引消除疲劳，激化脑细胞，改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等症。起的急躁、易怒、失眠等症。四、卵磷脂的提取蛋黄中含有丰富的卵磷脂，牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在体内多与蛋白质结合，以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着，所以卵磷脂是以丰富的姿态存在于自然界当中，所以建议人们尽量摄取足够多种类的食物。卵磷脂实验原理卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中，尤其在蛋黄中含量较多（10%左右）；卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。以蛋黄为原料的制备工艺以蛋黄为原料的制备工艺(一一)卵磷脂粗品的提取卵磷脂粗品的提取将滤液置于蒸发皿内，水浴将滤液置于蒸发皿内，水浴锅中蒸干，所得干物即为卵锅中蒸干，所得干物即为卵磷脂粗品。磷脂粗品。取约取约10 g（两吸管）蛋黄于（两吸管）蛋黄于50 mL小烧杯中小烧杯中搅拌加入搅拌加入95%乙醇乙醇30 mL滤纸过滤滤纸过滤2 g粗卵磷脂粗卵磷脂溶解溶解于于20 mL无水乙醇中无水乙醇中（二）、二）、卵磷脂的纯化卵磷脂的纯化室温下搅拌室温下搅拌0.5 h，过滤。，过滤。10%ZnCl2的水溶液的水溶液2 mL收集沉淀物收集沉淀物冷丙酮冷丙酮50 mL搅拌搅拌1 h，过滤。，过滤。收集沉淀，收集沉淀，40真空干燥真空干燥药勺刮取取粗提物少许，置干燥试管底部药勺刮取取粗提物少许，置干燥试管底部五、卵磷脂的溶解性观察五、卵磷脂的溶解性观察加入2mL丙酮加入1mL 乙醚，用玻棒搅动现象？现象？1.1.三甲胺的检验三甲胺的检验 取干燥试管一支，加入少量提取物和取干燥试管一支，加入少量提取物和3mL 10%NaOH3mL 10%NaOH溶液，溶液，水浴加热水浴加热15min15min，在管口放一片蒸馏水润湿过的红色石蕊试，在管口放一片蒸馏水润湿过的红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味，记录。纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味，记录。将上述加热过的溶液过滤。将上述加热过的溶液过滤。滤液性状：滤液性状：2.2.磷酸的检验磷酸的检验 取干净试管一支，加入取干净试管一支，加入1010滴上述滤液，加入滴上述滤液，加入1010滴滴95%95%乙乙醇，摇匀，再加入醇，摇匀，再加入1010滴钼酸铵试剂，滴钼酸铵试剂，观察现象观察现象；最后将试管；最后将试管放入热水浴中加热放入热水浴中加热5 510min10min，观察有何变化观察有何变化。六、卵磷脂的鉴定六、卵磷脂的鉴定1.卵磷酯的用途？卵磷酯的用途？2.医药工业中制备卵磷酯的方法？医药工业中制备卵磷酯的方法？3.本实验有哪些步骤可以改进？本实验有哪些步骤可以改进？4.文字与照片记录实验过程的重要性？文字与照片记录实验过程的重要性？5.通风橱的重要性？通风橱的重要性？七、思考题七、思考题1.注意安全：本实验中的乙醚、丙酮及乙醇注意安全：本实验中的乙醚、丙酮及乙醇均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。2.实验过程要细致，培养耐心。实验过程要细致，培养耐心。注意事项注意事项