抗核抗体基本概念及对应临床疾病概述.ppt

抗核抗体基本概念及抗核抗体基本概念及临床床检测1.传统定定义 针对细胞核成分的自身抗体的胞核成分的自身抗体的总称。称。广广义定定义 针对细胞内所有抗原成分的自身抗体的胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。称。对ANA的理的理解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的解不再局限于核成分，而是指核酸和核蛋白抗体的总称称 靶靶抗抗原原存存在在于于包包括括细胞胞核核、细胞胞浆、细胞胞骨骨架架、细胞胞分分裂裂结构等部位构等部位抗核抗体的定抗核抗体的定义2.ANA可可见于多种疾病，特于多种疾病，特别是是结缔组织疾病，常作疾病，常作为结缔组织病的病的诊断、病情判断和断、病情判断和疗效效观察的指察的指标在非在非结缔组织病中也可出病中也可出现阳性。阳性。正常人中（特正常人中（特别是老年人）也可出是老年人）也可出现阳性，但滴度低，并且阳性，但滴度低，并且常表常表现为IgM型型高滴度高滴度ANA则高度提示自身免疫性疾病高度提示自身免疫性疾病 目前，目前，ANA检测已成已成为临床上的一个极重要的自身免疫病的床上的一个极重要的自身免疫病的筛查实验。ANA检测的的临床意床意义3.系系统性性红斑狼斑狼疮活活动期期非活非活动期期药物物诱导的的红斑狼斑狼疮混合性混合性结缔组织病（病（MCTD、Sharp综合征）合征）类风湿性关湿性关节炎炎进行性系行性系统性硬化症性硬化症多多发性肌炎及皮肌炎性肌炎及皮肌炎干燥干燥综合征合征慢性活慢性活动性肝炎性肝炎溃疡性性结肠炎炎其它其它风湿病湿病正常人正常人 9510080100100100204020508595305070803040265-10ANA检测的临床意义4.ANA实验室室检测策略推荐策略推荐5.ANA间接免疫接免疫荧光法光法筛查实验6.间接免疫接免疫荧光法光法检测ANA基本原理基本原理间接免疫接免疫荧光法光法 包被包被HEp-2细胞的基胞的基质玻片玻片样本中本中ANA-IgGFITC标记的抗人的抗人IgG抗体抗体7.l抗原抗原谱完整完整(细胞核、胞核、细胞胞浆中近百种自身抗原中近百种自身抗原)l人源人源细胞，无种属非特异胞，无种属非特异荧光干光干扰l肿瘤瘤细胞，易于培养及商品化生胞，易于培养及商品化生产l核核质比大，可比大，可观察到多种不同察到多种不同荧光核型光核型ANA筛查的的经典和典和标准基准基质:HEp-28.均质型核点型着丝点型核仁型Scl-70粗颗粒型细颗粒型核膜型.核糖体P蛋白线粒体型高尔基体溶酶体肌动蛋白波形蛋白基于基于Hep-2细胞胞为基基质的的ANA初初筛实验9.ANA间接免疫接免疫荧光法光法筛查试验的的实际价价值l初步甄初步甄别自身免疫性疾病患者（阴阳性自身免疫性疾病患者（阴阳性结果）果）l尽可能判断尽可能判断荧光核型（光核型（缩小靶抗原确小靶抗原确认实验范范围）l获取抗体滴度信息（判断病情取抗体滴度信息（判断病情进展、展、预后等）后等）考考虑到到荧光法光法筛查试验存在主存在主观性性强的特点，因此的特点，因此应以一种客以一种客观和和现实的的态度去面度去面对筛查试验结果果10.几个相几个相对常常见且重要的且重要的荧光核型光核型均质型核点型着丝点型核仁型粗颗粒型核膜型.核糖体P蛋白线粒体型肌动蛋白常见且重要核型的标准l核型表现相对典型l阳性率相对较高l靶抗原相对明确11.应重重视ANA滴度的滴度的检测抗体滴度的临床意义1、明确界定自身免疫性疾病患者；2、作为疾病进程、临床疗效和病情预后及转归等的判断指标当前国际主流ANA间接免疫荧光法检测系统广泛采用的起始稀释度为1:40。即该检测系统的正常参考范围为1:40。梯度稀释时的稀释因子为1:2。HOB公司产品推荐按照1:80开展稀释。12.荧光光强弱及血清稀弱及血清稀释度度荧光光强弱判弱判读 观察标本的特异性荧光强度一般用“+”号表示。“”为无或仅见极微弱荧光；“+”为荧光较弱但清楚可见；“+”为荧光明亮；“+”为耀眼的强荧光。临床上根据特异性床上根据特异性荧光光强度达度达“+”以上判定以上判定为阳性阳性抗体梯度稀抗体梯度稀释起始稀起始稀释：1:801:80梯度稀梯度稀释（稀（稀释因子因子2 2）1:1601:1601:3201:3201:6401:6401:12801:12801:25601:2560直至抗体直至抗体转阴阴13.各稀各稀释度的反度的反应性性抗体滴度抗体滴度临床意床意义1:801:640阳性阳性+1:80阳性，需阳性，需结合合临床表床表现综合判断合判断阳性阳性+1:160阳性，提示可能存在相关疾病阳性，提示可能存在相关疾病阳性阳性+弱弱+1:320明确阳性，提示可能存在相关疾病明确阳性，提示可能存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:640中等阳性，提示可能存在相关疾病中等阳性，提示可能存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:1280强阳性，高度提示存在相关疾病阳性，高度提示存在相关疾病阳性阳性+阳性阳性+1:2560极极强的阳性，高度提示存在相关疾病。的阳性，高度提示存在相关疾病。ANA荧光滴度判光滴度判读举例例14.HOB公司公司间接免疫接免疫荧光法光法产品系列品系列产品系列品系列基基质检测项目目ANA筛查HEp-2细胞胞ANA各种不同核型各种不同核型dsDNA绿蝇短膜虫短膜虫抗抗dsDNA抗体抗体AKA大鼠食管大鼠食管抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体ANCA中性粒中性粒细胞胞乙醇和甲乙醇和甲醛固定固定抗中性粒抗中性粒细胞胞胞胞浆抗体抗体组织器官器官大鼠肝大鼠肝/肾/胃胃ASMAPCAAMALKM-1LC-1HEp-2细胞胞产品系列品系列（举例）例）166孔孔1010孔孔812孔孔15.ANA靶抗原确靶抗原确认实验16.条条带酶免分析法免分析法检测ANA基本原理基本原理LIA检测方法原理方法原理底物底物颜色反色反应硝酸硝酸纤维膜膜IgG抗体抗体碱性磷酸碱性磷酸酶标记的抗人的抗人IgG抗体抗体17.ANAANA谱系列系列18.U1-nRNP U1-nRNP 和和 SmSm抗原抗原SLE:5-30%SLE:5-30%SLE:15-40%SLE:15-40%MCTD:95-100%MCTD:95-100%功能功能:参与参与mRNAmRNA前体的剪切前体的剪切19.SS-A(Ro-60),Ro-52 和和SS-BAnti-SS-A(60 kDa)干燥综合征.:40-95%SLE:20-60%新生儿狼疮:96%Anti-SS-B干燥综合征.:40-95%SLE:10-20%新生儿狼疮:78%Anti-Ro-52(52 kDa)非特异功能:调控RNA翻译功能:RNA聚合酶III辅助蛋白X20.Scl-70(DNA-拓扑异构拓扑异构酶I)功能:在DNA复制和转录过程中完成双链解螺旋疾病疾病:硬化症硬化症:50%-75%21.Anti-Scl-70 特点特点局限型和弥散型硬化症病中的阳性率分局限型和弥散型硬化症病中的阳性率分别为10%和和48%。抗抗Scl-70抗体阳性的患者通常病情抗体阳性的患者通常病情发展快、展快、预后差、多器官累及。后差、多器官累及。22.PM-Scl抗原抗原:几种多几种多肽复合物复合物(分子量分子量间于于20-100kDa)，主要的靶抗原主要的靶抗原为100 kDa 相关疾病相关疾病:硬化症硬化症:2%-5%肌炎肌炎:8%重叠重叠综合征合征:24%23.Jo-1抗原:组氨酰tRNA合成酶(50 kDa),细胞浆中的磷蛋白相关疾病:多肌炎/皮肌炎的血清学标志，阳性率为25-35%，当伴有肺间质纤维化的多肌炎，阳性率可高达70%。24.着着丝点点抗原：动粒中的4种蛋白：A(17 kDa),B(80 kDa),C(140 kDa),D蛋白(50 kDa)。着丝点蛋白 B为主要的靶抗原(与IIF：100%)功能:分裂期纺垂体的附着点 相关疾病:硬化症:18%局限型:80%-95%(CREST综合征)25.PCNA:细胞增殖相关核抗原胞增殖相关核抗原I型型抗原抗原:DNA聚合聚合酶的的辅助蛋白助蛋白 发挥控制控制细胞周期的作用胞周期的作用相关疾病相关疾病:系系统性性红斑狼斑狼疮的特异性抗体，但其的特异性抗体，但其发生率生率仅为3%。26.染色体染色体结构示意构示意图DNA核小体染色体染色质组蛋白27.dsDNA抗原：双链DNA，天然DNA(脱氧核糖核酸骨架)相关疾病：dsDNA:为SLE的诊断标准之一，阳性率为60-90%，不同的检测方法诊断特异性差别较大。抗体滴度与疾病的活动性、狼疮肾炎的发病风险具有相关性。28.组蛋白蛋白抗原:H1,H2A,H2B,H3,H4，H2A-H2B，H3-H4(主要的靶抗原为H1和H2B)相关疾病:药物诱导性 LE:100%(抗组蛋白抗体是该病唯一的标志性抗体)各种结缔组织病：SLE:30-80%SSc:30%SS:10%29.核小体核小体抗原:组蛋白和DNA形成的复合物 相关疾病:SLE：高特异性指标，阳性率为50-95%，特异性几乎100%，抗核小体抗体可独立于抗dsDNA抗体单独出现，因而抗核小体抗体与抗dsDNA抗体联合检测，可提高SLE的血清学检出率。30.40 S亚基60 S亚基基P0P1 P1P2 P2抗原抗原:核糖体核糖体60S 亚基中的基中的3种蛋白种蛋白质:P0,P1,P2.具具备相同的碳端抗原位点相同的碳端抗原位点核糖体核糖体 P蛋白蛋白相关疾病相关疾病:SLE:为SLE的高特异性指的高特异性指标，阳性率，阳性率为5-15%，常常见于神于神经狼狼疮。31.AMA与与AMA-M2靶抗原:线粒体亚结构上几种生化性质明确的物质，可分为九种类型。其中最常见临床意义比较明确的为AMA M2，由AMA不同亚型的临床相关疾病，因而对AMA阳性结果做进一步的分型实验非常重要。主要相关疾病:PBC:（高滴度AMA M2）85%-95%。在其他慢性肝脏疾病（30%）和进行性系统性硬化症（7-25%）中也可检出AMA M2，但滴度较低。32.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料仅供参考，实际情况实际分析33.主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、图文设计制作、发布广告等秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求34.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field35.