DB13∕T 2754-2018 山楂叶螨检疫鉴定方法(河北省).pdf

ICS 65.020 B 16 DB13 河北省地方标准 DB 13/T 27542018 山楂叶螨检疫鉴定方法 2018 - 07 - 16 发布 2018 - 08 - 16 实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 27542018 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北出入境检验检疫局提出。 本标准起草单位：河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心，河北省森林病虫害防治检疫站，北京市海淀区农业执法大队。 本标准主要起草人：娄巧哲、李静、王建昌、孙晓霞、任卫红、周长青、项佳林、胡连霞、崔佳玉、谷青。 DB13/T 27542018 1 山楂叶螨检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了山楂叶螨Amphitetranychus viennensis (Zacher)的检疫鉴定方法。 本标准适用于植物及其产品中山楂叶螨的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 28069-2011 根螨检疫鉴定方法 SN/T 1148-2002 植物检疫 木薯单爪螨检疫鉴定方法 3 术语和定义 GB/T 28069和SN/T 1148界定的术语和定义适用于本文件。 3.1 双毛 duplex setae 为叶螨科多数种类足I、II跗节具有的特殊结构，由两根基部紧靠在一起的刚毛组成，一般端侧的一根为感毛， 粗而长， 也称为大毛 （macrochaeta） ， 基侧的一根为触毛， 细小， 也称为小毛 （microchaeta） 。足I跗节一般具2对双毛，端侧的一对称为前双毛或端侧双毛，基侧的一对称为后双毛或基侧双毛。 3.2 感毛 sensory seta 分布在须肢跗节或各足的跗节和胫节，为化学物质的受纳器。细长或粗短，或特化成柱形、纺锤形、刺状等，末端圆钝，壁薄，光滑无毛。须肢跗节基部的1根感毛多呈梭形或小枝状，称为背感器，亚端部的2根呈刺状，端部的感毛通常发达，呈柱形、锥形等，称为端感器。 3.3 骶毛 sacral seta 末体前部按横向排列的二对刚毛，外侧的一对称为外骶毛，内侧的称为内骶毛。 3.4 肛侧毛 para-anal seta 肛门两侧着生的肛毛外侧的12对毛。 3.5 DB13/T 27542018 2 生殖盖 genital flap 叶螨科生殖孔四周具有放射状的、深刻的表皮皱褶，其前部呈半圆形的、比较光滑的为生殖盖。 3.6 阳具 aedeagus 为叶螨的雄性外生殖器，一般是比较坚硬的、高度几丁质化的构造，其形状多种多样。当螨体侧面封固时，阳具的形状才可表现完整。结构分为柄部（shaft）和钩部（hook），钩部有时膨大形成端锤（terminal knob）。 4 山楂叶螨的基本信息 学名：Amphitetranychus viennensis (Zacher) 中文名：山楂叶螨，又名山楂双叶螨 英文名：hawthorn spider mite 分类地位：蛛形纲（Arachnida）、蜱螨亚纲（Acari）、真螨目（Acariformes）、叶螨科（Tetranychidae）、双叶螨属（Amphitetranychus）。 山楂叶螨主要危害寄主植物的叶片，在叶片反面吐丝结网，在丝网下取食，发生数量大时也在叶片正面为害，叶片受害部位呈灰黄色斑点，严重时逐渐扩大，致使叶片枯焦，造成早期落叶，严重影响果实的产量和质量。山楂叶螨主要分布在包含中国（东北、西北、华北、华南等地）在内的亚洲、欧洲、北美洲、大洋洲的多个国家和地区，是危害苹果、梨、桃、山楂、海棠、杨树、木槿等多种植物的重要害虫。（参见附录A） 5 方法原理 根据山楂叶螨的分布、寄主及危害状、生物学特性进行寄主检查，依据成螨的形态特征进行种类鉴定。 6 器材和试剂 6.1 器材与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜、测微尺、离心管、自封袋、酒精灯、镊子、滤纸、解剖针、吸管、小毛笔、载玻片、盖玻片、标签、烘箱。 6.2 试剂及配置 6.2.1 乙醇-甘油保存液 70 %乙醇和甘油以50：1的体积比配置而成。 6.2.2 霍氏封固液 30 g 阿拉伯胶，200g 水合三氯乙醛，20g 甘油，50m l蒸馏水；配制时，按上述比例使阿拉伯胶溶于蒸馏水中，至完全溶解后，置4050的水浴加热，加入水合三氯乙醛，搅拌至溶解，加人甘油，最后用抽气漏斗过滤。 DB13/T 27542018 3 6.2.3 埃蔡氏封固液 在 10 g聚乙烯醇中加入40 mL60 mL蒸馏水， 置100水浴上加热， 搅拌至完全溶解。 再加入85%92%的乳酸35 mL和10 mL甘油，搅拌均匀。冷却至微温后，加入1.5%的苯酚水溶液25 mL和20 g水合三氯乙醛，最后过滤。 7 寄主检查 对可能感染山楂叶螨的植物及其产品进行检查，重点检查茎干粗翘皮下、芽、幼茎、幼叶、老叶、果洼等处，在现场用放大镜仔细查找，特别检查结有丝网造成卷曲、有黄色斑点、褪绿、变形、变黑等症状的植物器官，如发现疑似虫体，用小毛笔挑起放入装有乙醇-甘油保存液的离心管中，或连同寄主植物或部分器官、组织一起置于自封袋中，贴好信息标签，带回实验室镜检。 8 标本制作 先在洁净的载玻片中央滴一滴霍氏封固液或埃蔡氏封固液（二者可任选一种），用吸管从乙醇-甘油保存液中吸取成螨至滤纸上，用蘸有封固液的解剖针从滤纸上迅速粘取螨虫标本至封固液中，也可直接取活螨于封固液中，盖上盖玻片；用镊子夹取载玻片放于酒精灯外焰上加热，至胶液沸腾后立刻离开，让螨虫虫体完全伸展，玻片置4050烘箱干燥，玻片制成后置生物显微镜观察鉴定，并在盖玻片左侧粘贴记录标签，注明标本号、寄主植物、采集（截获）时间、采集地点（原产地）、采集人等信息。 9 形态鉴定 9.1 鉴定方法 使用生物显微镜观察玻片标本的形态特征，使用目镜测微尺或摄像软件中的测量工具测量长、宽等。 9.2 双叶螨属形态鉴定特征 双叶螨属具有以下形态特征（参见附录B）： 背毛细长，共26根，不着生于突起上，其长度超过横列间距； 气门沟末端呈网状； 足I跗节具2对双毛，彼此远离。爪间突缺少背中毛； 生殖盖表皮纹横向，生殖盖前区表皮纹纵向； 末体具肛侧毛1对； 雄螨阳具弯向背面。 9.3 山楂叶螨形态鉴定特征 9.3.1 雌螨 山楂叶螨雌螨具有以下形态特征（参见附录B和附录C）： 体长（含喙）0.540.59 mm，体宽0.280.36mm，椭圆形，深红色，足及颚体部分桔黄色，越冬雌螨桔红色； DB13/T 27542018 4 须肢端感器短锥形，其长度与基部宽度略等，背感器小枝状，其长略短于端感器； 气门沟末端呈网状； 后半体背表皮纹均为横向，不构成菱形图形。背毛正常； 足I跗节爪间突裂开为3对针状毛。足I跗节双毛近基侧有4根触毛和1根感毛，其中1根感毛位于基侧双毛的同一水平线，端侧双毛的腹面有2根触毛；胫节有9根触毛和1根感毛。足II跗节双毛近基侧有2根触毛和1根感毛，另1触毛在双毛近旁，双毛腹面有2根触毛；胫节有6根触毛。足III、IV跗节各有9根触毛和1根感毛；胫节各有6根和7根触毛。 9.3.2 雄螨 山楂叶螨雄螨具有以下形态特征（参见附录B和附录C）： 体长（含喙）约0.43 mm，体宽约0.20 mm。体色桔黄； 须肢端感器短锥形，但较雌螨细小，背感器略长于端感器； 足I跗节爪间突呈1对粗壮的刺毛，其背腹面各具1对纤细的针状毛。足IIIV爪间突同雌螨。足I跗节双毛近基侧有4根触毛和3根感毛， 其中1根感毛与基侧双毛位于同一水平， 端侧双毛的腹面有2根触毛；胫节有9根触毛和4根感毛。足II跗节双毛近基侧有3根触毛和1根感毛，双毛腹面有2根触毛；胫节有6根触毛。足III、IV跗节和胫节毛数同雌螨； 阳具末端与柄部呈直角弯向背面，形成与柄部垂直的端锤，其近侧突起短小，尖利，远侧突起向背面延伸，其端部逐渐尖细。 9.3.3 卵 直径0.16 mm。圆球形，春季产卵呈橙黄色，夏季产的卵呈黄白色。 9.3.4 幼螨 3对足。初孵幼螨体长0.16 mm，体圆形、黄白色，取食后卵圆形浅绿色，体背两侧出现深绿长斑。 9.3.5 若螨 4对足。前期若螨体背开始出现刚毛，两侧有明显墨绿色斑，后期若螨体较大，体形似成螨，但无生殖孔可与成螨区别。 10 结果判定 以成螨鉴定特征为依据，其他特征作参考，符合9.3.1或9.3.2的描述即可鉴定为山楂叶螨。 11 标本保存 玻片右侧粘贴定名标签，注明鉴定结果（学名、中文名、鉴定人和鉴定日期），移入标本柜中保存，以备复检。 DB13/T 27542018 5 A A 附 录 A （资料性附录） 山楂叶螨的地理分布、寄主和生物学特性 A.1 地理分布 黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、西藏、北京、山东、山西、河北、河南、江苏、安徽、浙江、福建、湖北、湖南、江西、广东、广西、四川、云南、香港、台湾；日本，朝鲜，韩国，乌兹别克斯坦，巴基斯坦，伊朗，土耳其，阿塞拜疆，格鲁吉亚，奥地利，保加利亚，波兰，德国，罗马尼亚，葡萄牙，瑞典，乌克兰，西班牙，英国，俄罗斯，美国，澳大利亚。 A.2 寄主 科 属或种 蔷薇科Rosaceae 加拿大唐棣Amelanchier canadensis， 山桃Amygdalus davidiana， 木瓜属Chaenomeles sp.，Crataegus azarolus，Crataegus monogyna， 山楂Crataegus pinnatifida， 草莓属Fragaria sp.，草莓Fragaria ananassa，Malus fomestica，楸子Malus prunifolia，苹果Malus pumila，变叶海棠Malus toringo，欧揸属Mespilus sp.，杏Prunus armeniaca，欧洲甜樱桃Prunus avium，钟花樱桃Prunus campanulata，樱桃李Prunus cerasifera，欧洲酸樱桃Prunus cerasus，Prunus divaricata，欧洲李Prunus domestica，欧洲酸樱桃Prunus cerasus，Prunus divaricata，欧洲李Prunus domestica，扁桃Prunus dulcis，梅Prunus mume， 桃Prunus persica，樱桃Prunus pseudocerasus，李Prunus salicina，黑刺李Prunus spinosa， 东京樱花Prunus yedoensis，梨属Pyrus sp.，西洋梨Pyrus communis，沙梨Pyrus pyrifolia，Rubus allegheniensis，复盆子Rubus idaeus，花楸属Sorbus sp.，欧洲花楸Sorbus aucuparia 壳斗科Fagaceae 栗属Castanea sp.， 栎属Quercus sp.，Quercus mongolica subsp. mongolica， 橡树Quercus rubra 杨柳科Salicaceae 加杨Populus canadensis，毛白杨Populus tomentosa，柳Salix gymrolepis 桦木科Betulaceae 榛属Corylus sp.，欧榛Corylus avellana，榛子Corylus heterophylla 豆科Leguminosae 落花生Arachis hypogaea，洋槐Robinia pseudoacacia 锦葵科Malvaceae 棉属Gossypium sp.，木槿Hibiscus syriacus 茄科Solanaceae 番茄Lycopersicon esculentum，茄Solanum melongena 椴树科Tiliaceae 椴树属Tilia sp.，椴树Tilia tuan 紫葳科Bignoniaceae 榅桲Cydonia oblonga 虎耳草科Saxifragaceae 溲疏属Deutzia sp. 桑科Moraceae 无花果Ficus carica 胡桃科Juglandaceae 山核桃Carya cathayensis 玄参科Scrophulariaceae 白花泡桐Paulownia fortunei 悬铃木科Platanaceae 三球悬铃木Platanus orientalis 夹竹桃科Apocynaceae 鸡蛋花属Plumeria sp. 禾本科Gramineae 玉米Zea mays 槭树科Aceraceae 槭属Acer sp. DB13/T 27542018 6 A.3 生物学特性 山楂叶螨在北方果区一年发生613代，以受精雌成螨在主干、主枝和侧枝的翘皮、裂缝、根颈周围土缝、落叶及杂草根部越冬。第二年4月上旬开始出蛰危害，到花芽开放时，大部分转移到花柄、花萼等幼嫩组织处为害，常使嫩芽枯黄，不能开花展叶。出蛰后一般多集中于树冠内膛局部危害，以后逐渐向外堂扩散。山楂叶螨喜高温干旱，6月下旬至7月中旬雨季到来之前一般为每年的发生高峰期。山楂叶螨喜在叶背面隐蔽处吐丝结网，在丝网下取食为害，发生数量大时也可在叶片正面为害，叶片受害部位呈灰黄色斑点，严重时逐渐扩大，致使叶片枯焦，造成早期落叶。910月开始出现受精雌成螨越冬。高温干旱条件下发生并危害重。 DB13/T 27542018 7 附 录 B （资料性附录） 山楂叶螨成螨形态特征图 图 B.1 山楂叶螨Amphitetranychus viennensis (Zacher)雌螨背面观 （仿王慧芙， 1981） 图 B.2 山楂叶螨Amphitetranychus viennensis (Zacher)局部特征图（仿王慧芙，1981） a.雌螨须肢跗节； b.雄螨须肢跗节； c. 气门沟； d.足 I 跗节爪和爪间突； e.阳具； f.雌螨足 I 跗节和胫节；g.雌螨足 II 跗节和胫节； h.雄螨足 I 跗节和胫节； i.雄螨足 II 跗节和胫节。 DB13/T 27542018 8 附 录 C （资料性附录） 山楂叶螨及其常见近似种成螨检索表 1 气门沟末端呈网状； 足爪间突缺少背中毛山楂叶螨Amphitetranychus viennensis (Zacher) 气门沟末端弯曲； 足爪间突具有背中毛叶螨属Tetranychus 2 2 爪间突裂开为2对针状毛；阳具不形成端锤3 爪间突裂开为3对针状毛；阳具形成端锤4 3 阳具弯向背面的部分尖细，呈针状斐济叶螨Tetranychus fijiensis Hirst 阳具宽阔，弯向背面的部分几乎等宽台湾叶螨Tetranychus taiwanicus Ehara 4 足I跗节基侧双毛和近基侧的触毛在同一水平线上5 足I跗节基侧双毛和近基侧的触毛不在同一水平线上6 5 阳具端锤宽于颈部；具远侧突起野生叶螨Tetranychus desertorum Banks 阳具端锤几乎不宽于颈部；不具远侧突起卢氏叶螨Tetranychus ludeni Zacher 6 夏型雌螨洋红、锈红或褐红色7 夏型雌螨绿色或黄绿色14 7 足 I 跗节基侧双毛的基侧毛为端侧毛长的1/21/3牡荆叶螨Tetranychus viticis Ma et Yuan 足 I 跗节基侧双毛的基侧毛不长于端侧毛长的1/38 8 爪间突具微小的背刺毛9 爪间突无背刺毛10 9 阳具端锤近侧突起圆钝， 远侧突起尖利绣球叶螨Tetranychus hydrangeae Pritchard et Baker 阳具端锤近侧突起尖利，远侧突起向背面延伸豆叶螨Tetranychus phaselus Ehara 10 阳具端锤卵圆形，两侧无突起菜叶螨Tetranychus neocaledonicus Andr 阳具端锤不呈卵圆形，其两侧具突起11 11 阳具端锤极小，不易观察；远侧突起尖细皮氏叶螨Tetranychus piercei McGregor 阳具端锤较大，明显可见12 12 阳 具 端 锤 的 宽 度 约 为 柄 部 背 缘 的1/5 ； 呈 截 形 ， 其 背 缘 近 端 部1/3 处 有 一 浅凹截形叶螨 Tetranychus truncatus Ehara 阳具端锤宽于柄部背缘的1/5， 其背缘无浅凹13 13 阳具端锤较大， 近侧突起圆钝， 远侧突起尖利神泽氏叶螨Tetranychus kanzawai Kishida 阳具端锤较小， 两侧突起尖利， 长度约等朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus (Boisduval) 14 后半体背表皮纹均为横向， 不构成菱形图形冰草叶螨Tetranychus agropyronus Wang 后半体第3对背中毛之间和内骶毛之间的表皮纹纵向， 构成菱形图形15 15 阳具端锤与柄部呈一定角度；远侧突起较长敦煌叶螨Tetranychus dunhuangensis Wang 阳具端锤与柄部平行；两侧突起近于等长16 16 阳 具 端 锤 大 型 ； 近 侧 突 起 圆 钝 ， 远 侧 突 起 尖 利 ； 其 背 缘 近 端 侧 1/3 处 有 一 角度土耳其斯坦叶螨Tetranychus turkestani (Ugarov et Nikolski) 阳具端锤较小；两侧突起尖利，近于等长二斑叶螨Tetranychus urticae Koch _