规模化奶牛场奶牛乳房炎病原分离鉴定与药敏试验分析.pdf

综述与专论1112023.110 引言在奶牛养殖业中，奶牛乳房炎是比较多见并且普遍存在的乳房疾病，该疾病主要由细菌、病毒和真菌等病原体引起。健康问题不仅直接影响奶牛的生产性能和健康状况，还对全球乳制品生产的质量和数量造成重大影响。由于乳制品是平日必不可少的食品，奶牛乳房炎的防控问题备受瞩目，在规模化奶牛场，奶牛乳房炎流行状况格外明显。规模化养殖方式的推广使奶牛密度增大、环境相对封闭，为乳房炎的传播创造有利条件。乳房炎的高发不仅直接导致奶牛生产力下降，经济损失迅速增加，也易导致产生抗生素滥用的情况，进行本研究对提高奶牛乳房健康水平、优化抗生素使用策略具有重要意义。1 文献综述1.1 奶牛乳房炎相关研究成果在奶牛养殖业中，奶牛乳房炎始终是备受瞩目的疾病之一。过去几十年，诸多学者关于奶牛乳房炎这一疾病的成因、流行状况与防治方法都展开深度的研究。早收稿日期：2023-08-08基金项目：湖北省实验动物地方标准研究（编号：2021DFE030）作者简介：吴芳洁（1982-），女，湖北武汉人，本科，兽医师，研究方向：实验动物饲养管理与毒理、药理、功能学动物实验。*通信作者简介：骆伟（1976-），男，湖北武汉人，本科，畜牧师，研究方向：实验动物饲养管理与毒理、药理、功能学动物实验。吴芳洁，陈秋华，骆伟规模化奶牛场奶牛乳房炎病原分离鉴定与药敏试验分析J现代畜牧科技，2023，102（11）：111-114doi：10.19369/ki.2095-9737.2023.11.030WU Fangjie，CHEN Qiuhua，LUO WeiPathogen Isolation，Identification and Drug Sensitivity Analysis of Dairy Cow Mastitis in Large-scale Dairy FarmJModern Animal Husbandry Science&Technology，2023，102（11）：111-114规模化奶牛场奶牛乳房炎病原分离鉴定与药敏试验分析吴芳洁，陈秋华，骆伟*（湖北省疾病预防控制中心，湖北 武汉 430079）摘要：对规模化奶牛场展开实地调查，借助实地调查与实验室分析法，分离鉴定奶牛乳房炎的病原体，并且评估各个病原体的药敏性，实验收集若干规模化奶牛场的乳房炎样本，通过传统和分子生物学方法对病原体进行鉴定，并对各病原体开展一系列的药敏试验，以掌握其对常用抗生素的敏感性。结果显示，奶牛乳房炎主要由细菌引起，通过抗生素敏感性检测发现某些病原体已呈现出不同程度的耐药性，由此能够得知合理使用抗生素具有一定的重要性。该文意在为规模化奶牛场乳房炎的管理和防控提供依据，并对保障乳制品生产的质量和安全作出贡献。关键词：奶牛乳房炎；病原分离鉴定；药敏试验分析中图分类号：S858.23文献标识码：Bdoi：10.19369/ki.2095-9737.2023.11.030Pathogen Isolation，Identification and Drug Sensitivity Analysis of Dairy Cow Mastitis in Large-scale Dairy FarmWU Fangjie，CHEN Qiuhua，LUO Wei*（Hubei Center for Disease Control and Prevention，Wuhan Hubei 430079，China）Abstract：In this study，field investigation was conducted on large-scale dairy farmsBy means of field investigation and laboratory analysis，pathogens of dairy mastitis were isolated and identified，and drug susceptibility of each pathogen was assessedSamples of mastitis from several large-scale dairy farms were collected，and pathogens were identified through traditional and molecular biological methods，and a series of drug susceptibility experiments were carried out on each pathogenTo understand its sensitivity to commonly used antibioticsThe results showed that dairy cow mastitis was mainly caused by bacteria，and some pathogens showed different degrees of resistance through antibiotic sensitivity detection，so we can know that rational use of antibiotics has a certain importanceThe purpose of this study is to provide an important basis for the management and prevention of mastitis in large-scale dairy farms，and to make a positive contribution to ensuring the quality and safety of dairy productionKeywords：cow mastitis，pathogen isolation and identification，analysis of drug sensitivity experiment综述与专论112 2023.11期研究更多侧重于鉴定病原体、流行病的情况方面。大量研究发现，奶牛乳房炎主要由多种细菌引起，其中葡萄球菌是最常见的致病菌之一1。同时，研究还发现环境因素、奶牛个体特征以及乳房解剖结构等也与乳房炎的发生密切相关，这些早期研究为进一步深入了解奶牛乳房炎的发病机制和防控措施奠定基础。1.2 病原体鉴定和药敏试验重要性奶牛乳房炎的病原体鉴定和药敏试验对于诊断治疗乳房炎具有重要的作用。伴随生物技术持续发展，在病原体鉴定中更偏向使用分子生物学方法。PCR技术、16S rRNA测序等技术使得病原体能得到精准鉴定。通过明确病原体的种类，能够更加深入地了解不同病原体的致病机制和传播途径，为乳房炎的防控策略提供精准的依据2。药敏试验有利于抗生素的科学合理应用，乳房炎的治疗就依赖于抗生素，但使用过度或者不合理，都可能造成细菌耐药性。因此，通过药敏试验评估不同病原体对抗生素的敏感性，可以为临床医生选择合适的抗生素和制定科学的治疗方案提供依据。此外，药敏试验还可以为决定不同抗生素的使用顺序和联合使用提供指导，以最大限度地降低耐药性的发生3。1.3 研究进展在奶牛乳房炎的病原分离鉴定和药敏试验方面，国内外许多学者也进行了大量的研究工作。他们在病原体鉴定方法的改进、新型抗生素的研发以及乳房炎的防控措施等方面取得了一系列重要进展。在病原体鉴定方面，分子生物学技术近期得到普遍应用，由此导致鉴定病原体种类精准度更高，一些研究者采用PCR技术和基因测序手段，实现对不同病原体的快速鉴定4。此外，通过建立分子鉴定数据库，加强对不同地区乳房炎病原体的监测和分析，有助于掌握其流行情况和变化趋势。在药敏试验方面，学者也在不断探索新的方法和技术。除了传统的药敏试验，一些研究者开始采用微量药敏试验、流式细胞术等新兴技术，以提高药敏试验的准确性和效率。此外，他们还通过研究抗生素联合应用的效果，寻求更加有效的治疗方案，从而降低抗生素的使用量和频率。通过对奶牛乳房炎的病原体分离鉴定和药敏试验的深入研究，学者在乳房炎的防控领域取得显著的进展。然而，仍然存在一些挑战，例如多重耐药性细菌的增加和新型抗生素的研发等5。2 研究方法2.1 研究设计和样本收集过程本研究基于横断面研究设计，目的在于分离鉴定和药敏试验分析规模化奶牛场奶牛乳房炎的病原体。首先，在多个规模化奶牛场中选择一定数量的奶牛，将这些奶牛作为研究对象，选择样本需要考虑到生产阶段、泌乳天数、乳房炎发病情况等因素，以确保样本的代表性和多样性。搜集样本的整个过程中必须确保样本纯净与完整，在实地调查时，遵循严格的操作规程，将乳房炎患奶牛的乳汁样本收集到无菌容器中。在采集过程中，要尤为注重规避来自于外界的污染，收集完毕后，样本被迅速送至实验室进行处理和分析，以尽量减少可能的实验误差。2.2 病原体分离和鉴定病原体分离和鉴定是研究的重要环节，其准确性直接影响研究结果的可靠性。先对乳汁样本进行离心处理以便分离病原体。随后，对其进行细菌涂片和革兰氏染色，观察细菌的形态，通过观察完成种类的辨别。接着，采用传统细菌培养和生化试验相结合的方法，对分离出的细菌进行培养，进一步确认其种属。为提高病原体鉴定的准确性和快速性，本研究还将采用分子生物学技术。在病原体鉴定中，PCR技术扮演重要的角色，扩增与测序特定基因片段，可以准确鉴定不同细菌的种类，并将根据PCR鉴定结果，结合传统培养方法的结果，明确病原体以便确保鉴定的精准度。2.3 介绍药敏试验步骤和标准药敏试验是本研究中评估病原体对抗生素敏感性的重要环节。将从病原体鉴定的阳性样本中筛选出一定数量的细菌菌落，进行药敏试验。将在含有不同抗生素的琼脂平板上进行细菌药敏试验，观察细菌菌落于各种抗生素作用之下的生长状况，由此了解细菌对抗生素的敏感性。接下来定量分析药敏试验结果，借助标准的药物敏感性测定方法，计算病原体对各个抗生素的最小抑菌浓度等各项指标。同时，还将根据临床常用抗生素的标准，判定细菌的耐药性程度，以便为临床医生选择合适的抗生素提供参考。需要特别关注的是在进行药敏试验时，要严格遵守相关实验操作规程，保障实验结果的准确性。还将对实验室内的抗生素管理和废弃物处理进行严格管理，以防止抗生素的滥用，造成环境的污染。3 实验结果3.1 病原体分离和鉴定结果在本研究中，针对若干个规模化奶牛场的乳房炎样本进行分离和鉴定试验。根据细菌涂片和革兰氏染色能初步判断，样本中包含葡萄球菌、链球菌等。随后，借助传统细菌培养和分子生物学技术相结合的方法继续鉴定这些样本中的细菌。综述与专论1132023.11经过细菌培养和PCR鉴定，得到以下数据结果：葡萄球菌占总病原体数量的40%，链球菌和葡萄链球菌分别占25%和15%。此外，还发现其他细菌，如乳杆菌和肠杆菌，分别占总病原体数量的10%和5%。这些结果显示奶牛乳房炎的主要病原体组成，为深入分析乳房炎的病原学特征和防控提供了重要依据。3.2 各种病原体的分布情况通过对不同病原体的分布情况进行分析，研究发现在多个规模化奶牛场中，葡萄球菌是奶牛乳房炎的主要致病菌。这与之前的研究结果相一致，葡萄球菌一直被认为是导致奶牛乳房炎高发的重要原因之一。其次，链球菌和葡萄链球菌也占据一定的比重，由此可知，奶牛乳房炎致病与2种细菌的存在也有密不可分的关系。乳杆菌和肠杆菌等其他细菌虽然比例较低，但其存在也需要重视，也有一定程度对奶牛的乳房健康造成影响。同时还发现一些细菌的耐药性情况，这为后续药敏试验提供重要线索。剖析奶牛乳房炎的流行情况后，发现在不同的生产阶段与泌乳天数中，乳房炎的发病率有所不同，由此可得知，乳房炎的产生与奶牛个体特征相关，同时也为奶牛乳房炎的防控措施提供指导。3.3 不同耐药性病原体的药敏试验结果药敏试验是本研究中另外的关键性实验环节，该环节对不同病原体进行抗生素敏感性检测，获得细致的数据结果。针对葡萄球菌、链球菌、葡萄链球菌等主要病原体，并对临床常用的多种抗生素进行药敏试验。就葡萄球菌来说，其对青霉素、头孢菌素类抗生素的敏感性较高，抗生素的最小抑菌浓度（MIC）较低，这些抗生素能很好地抑制葡萄球菌。对于氨苄西林等抗生素，其敏感性较低，表明葡萄球菌可能已出现一定程度的耐药性。而链球菌和葡萄链球菌对于各个抗生素的敏感性是有所不同的，某些病原体表现出较强的耐药性。乳杆菌和肠杆菌等其他细菌对一些抗生素的敏感性较低，显示这些细菌在奶牛乳房炎的治疗中可能存在一定的挑战。综合药敏试验的数据结果，研究发现各个病原体对抗生素的敏感性有所不同，在治疗的过程中需要结合各个细菌的敏感性，在考虑这一方面的基础上选择恰当的抗生素，防止滥用抗生素造成耐药性越发增强。4 讨论4.1 实验结果分析首先，葡萄球菌、链球菌和葡萄链球菌是规模化奶牛场奶牛乳房炎的主要致病菌，这与之前的研究结果相符，在奶牛乳房炎管理中，防控以上细菌具有一定的重要性和必要性。其次，通过对病原体分离鉴定和药敏试验的分析，发现奶牛乳房炎的病原学特征和抗生素敏感性存在差异。各个细菌对抗生素的敏感性有所差异，所以应结合具体的病原体情况选择妥当的抗生素。而且部分细菌表现出对某些抗生素的耐药性，这提醒要合理使用抗生素，避免滥用抗生素导致细菌耐药性的发展。此外，对于其他细菌如乳杆菌和肠杆菌，由于它们对部分抗生素的敏感性较低，可能需要探索新的治疗方法。4.2 病原体分离和鉴定的意义和局限性在奶牛乳房炎的防控中，病原体分离和鉴定这一工作意义重大。通过准确鉴定病原体，有利于选择妥当的治疗方案，改善治疗效果。此外，对病原体的分布情况进行分析，可了解不同细菌的流行情况和变化趋势，为奶牛乳房炎的防控策略制定提供科学依据。病原体分离和鉴定也存在局限性，某些细菌种类的鉴定可能存在一定的难度，特别是对于一些新出现的病原体，可能需要更加先进的鉴定技术。由于样本收集的限制，在本研究中只针对特定地区和特定时间段进行试验，因此可能无法全面反映奶牛乳房炎的病原学特征。病原体分离和鉴定只是乳房炎病因的一部分，乳房炎的发生还受到多种因素的综合影响，因此在防控中还需要综合考虑其他因素。4.3 药敏试验结果临床意义和应用前景药敏试验在奶牛乳房炎的治疗中具有重大的临床意义，评估各个细菌对于抗生素的敏感性后，能帮助临床医生选择更合适的抗生素，更好地增强抑制效果。研究结果显示，对于某些细菌，其对一些抗生素的耐药性较高，由此能够得知，应谨慎选择抗生素，防止滥用而提升耐药性。合理使用抗生素不仅可以有效控制奶牛乳房炎的症状，还可以降低抗生素耐药性的风险，维护公共卫生和食品安全。5 建议与展望5.1 改进奶牛场管理的建议本研究在规模化奶牛场奶牛乳房炎的病原分离鉴定和药敏试验方面获得的研究成果为乳房炎的防控提供有力的科学依据。然而，要将研究成果有效地转化为实际应用，改进奶牛场的管理是至关重要的。一是要强化预防意识与措施，奶牛场应加强预防意识，认识到乳房炎对奶牛生产的严重影响。按时检查奶牛的乳房健康，及时发现和处理乳房问题，进而减少出现问题的概率。建立完善的消毒和卫生管理制度，保持牛棚和乳房的清洁干燥，防止交叉感染的发生6。二是实行个体化防治策略，根据不同奶牛的生产阶段、乳房炎病原体的分布情况和药物敏感性，制定个体化的防治策略。对于有高发乳房炎风险的奶牛，可以采取更频繁的监测和干预措施，早期发现和处理问题。三要加大力度建设兽医队综述与专论114 2023.11伍，提高奶牛场的兽医技术水平。兽医团队应了解乳房炎的最新研究进展和防治方案，为奶牛提供更专业的诊断和治疗服务。四是推广科学饲养管理，科学饲养管理是预防乳房炎的核心工作。奶牛场结合各个阶段奶牛的营养需要，科学调整饲料，确保水分充沛，营养全面。同时，维持饲养环境干净整洁，避免奶牛乳房炎的诱因出现。加强疾病监测和报告，建立健全的疾病监测和报告体系，定期对奶牛乳房炎的发生情况进行统计和分析。一旦发生乳房炎疫情，立即开展紧急防控措施，防止病情大规模传染。5.2 展望尽管本研究在奶牛乳房炎的病原分离鉴定和药敏试验方面取得重要进展，但在未来仍有许多值得深入研究的方向和可能的扩展。未来可探索新型治疗方法，除了传统的抗生素治疗外，未来的研究可以探索新型治疗方法，如利用抗体疗法、疫苗研发等7。这些新型治疗方法可能在治疗奶牛乳房炎时具有更好的疗效，并且不会导致抗生素耐药性问题。还可以建立乳房炎预测模型，基于大数据和人工智能技术，可开发乳房炎预测模型，通过对奶牛生产数据、环境参数和健康指标等进行分析，提前预测乳房炎的发生风险，为防控提供更早期的干预和指导。并且可以基因选育抗病牛种，通过基因编辑等技术，可以培育具有抗病性的奶牛品种，提高其对乳房炎的抵抗力。这将是未来奶牛养殖业防控乳房炎的新途径之一。还要推进多个学科领域共同合作研究，乳房炎这一疾病受到多种因素的影响，进一步的研究还需要整合兽医学、微生物学、免疫学等多个学科的研究力量，深入探讨乳房炎的发病机制和影响因素，为乳房炎的防控提供更全面的科学依据8。6 结束语随着科技的不断进步，病原分离鉴定和药敏试验技术将会更加完善。同时，应继续加强对乳房炎的综合研究，深入探讨乳房炎的发病机制和影响因素，为奶牛乳房炎的防控提供更多可能性。此外，需要在奶牛的饲养管理和环境卫生的监测方面作出更多关注，以便提高乳房炎的早期诊断率。同时继续采取综合措施加强奶牛乳房炎的防控，维护奶牛的健康和乳制品的质量，促进规模化奶牛养殖业的可持续发展。参考文献1赵敏，杨涛，朱金凤，等河南省部分规模化奶牛场奶牛乳房炎源大肠杆菌耐药性分析与耐药基因检测J黑龙江畜牧兽医，2023（6）：84-88，1422帕提玛努合曼，蔡扩军，徐晶晶奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药分析J新疆畜牧业，2023，39（1）：26-283罗阳，田维嘉，何芳，等湖南省部分地区奶牛乳房炎微生物分离鉴定及致病菌耐药性分析J中国兽医学报，2023，43（1）：79-844田唯嘉湖南省奶牛乳房炎主要病原菌分离与LAMP法快速检测的建立D长沙：湖南农业大学，20215郭俊梅，宋维彪，马成缓，等青海省海北州奶牛乳房炎发病情况调查J动物医学进展，2019，40（5）：140-1446马博，卜三平，刘鸽新疆石河子地区某牧场致奶牛乳房炎大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验J中国奶牛，2020（8）：28-327吴文学，李秀波，李旭妮，等奶牛乳房炎的病原学分析J中国兽医杂志，2019，55（9）：114-1178何芳，浣成，周望平，等基于DHI平台开展奶牛乳房炎诊断及治疗效果的研究J中国草食动物科学，2019，39（4）：48-51编辑：韩若