高效液相色谱法测定食品中丙酸钠、丙酸钙的含量.pdf

Analysis and Testing145XIANDAISHIPIN现代食品分析检测doi:10.16736/41-1434/ts.2023.18.0451实验部分1.1 主要仪器与试剂1.1.1 仪器高 效 液 相 色 谱 仪、电 子 天 平（AR224CN、XS205）。1.1.2 试剂甲醇、硅油、磷酸、磷酸溶液（1 molL-1）、磷酸氢二铵、磷酸氢二铵溶液(1.5 gL-1）、酱油（义丰祥生产）、面包（亿满香生产）、标准品丙酸，实验室用水为符合一级水（GB/T 6682）的要求。1.2 色谱条件色谱柱：Purospher RP-18 endcapped 2504.6 mm 5 m；检测波长：214 nm；柱温：25；进样量：20 L。流动相：含有 1.5 gL-1磷酸氢作者简介：刘群（1990），女，硕士，工程师，研究方向为槟榔安全性及产业技术研究与应用。高效液相色谱法测定食品中丙酸钠、丙酸钙的含量Determination of Sodium Propionate and Calcium Propionate in Food by High Performance Liquid Chromatography刘 群1，曹倩蕾2，冯彦勇2，康宗华1（1.湖南口味王集团有限责任公司，湖南 益阳 413000；2.湖南中益食品化工检测院，湖南 益阳 413000）LIU Qun1,CAO Qianlei2,FENG Yanyong2,KANG Zonghua1(1.Hunan Flavor Wang Group Co.,Ltd.,Yiyang 413000,China；2.Hunan Zhongyi Food and Chemical Testing Institute,Yiyang 413000,China)摘 要：本文采用高效液相色谱法（HPLC）对食品中丙酸钠和丙酸钙的含量进行测定。通过优化实验条件和建立标准曲线，实现了对面包、酱油样品中丙酸钠和丙酸钙的定量分析。结果表明，该方法具有高灵敏度、准确性和重复性，适用于食品中丙酸钠和丙酸钙的含量测定。关键词：高效液相色谱法；食品；丙酸钠；丙酸钙；含量测定Abstract：This article uses high-performance liquid chromatography(HPLC)to determine the content of sodium propionate and calcium propionate in food.By optimizing experimental conditions and establishing standard curves,quantitative analysis of sodium propionate and calcium propionate in bread and soy sauce samples was achieved.The results indicate that this method has high sensitivity,accuracy,and repeatability,and is suitable for the determination of sodium propionate and calcium propionate in food.Keywords：high performance liquid chromatography;food;sodium propionate;calcium propionate;content determination中图分类号：TS207.3146现代食品XIANDAISHIPIN分析检测 Analysis and Testing二铵的溶液，该溶液通过将 1 molL-1磷酸溶液逐渐加入并调节 pH 值在 2.73.5 范围内来配制。在使用前，流动相需经过 0.45 m 微孔滤膜过滤，以去除杂质；流速：1.0 mLmin-1。1.3 试验步骤1.3.1 样品预处理为配制流动相，首先将 1 molL-1磷酸溶液逐渐加入并调节 pH 值在 2.73.5 范围内。配制完成后，流动相需经过 0.45 m 微孔滤膜过滤，以去除杂质。对于固体样品，需要先将其捣碎混匀后备用。对于面包样品，需要在鼓风干燥箱中进行风干。液体样品需要摇匀后备用。1.3.2 标准溶液配制标准溶液配制。丙酸标准储备液（10 mgmL-1）：准确称取 250 mg 丙酸标准品于 25 mL 容量瓶中，加水至刻度，4 冰箱中保存，有效期为 6 个月。标准系列工作液。用蒸馏法和直接浸提法提取样品制备丙酸标准液。在制备丙酸标准液的过程中，应注意使用高纯度的溶剂和试剂，并确保所有使用的仪器、容器和试剂都是清洁和干燥的1。另外，应遵循安全操作规范，避免接触有害物质或引发火灾或爆炸的情况。1.3.3 标准曲线绘制面包的线性回归方程为Y=561 992x-552.423，相关系数（r2）0.999 89；酱油的线性回归方程为Y=561 906x-741.991，相关系数（r2）0.999 92。其中，两者的线性范围均为 0.050.5，检出限均为 0.006。分别称取酱油、面包样品各 11 份，按照以上方式处理，结果见表 1。表 1 回收率和重复性结果表样品名称项目m（g）添加浓度/（mg）测得浓度/（mg）回收率/%RSD/%酱油丙酸5.012 9/未检出/5.022 3/未检出/5.067 99.4999.43099.3/5.063 89.4999.43099.35.042 19.4999.44099.45.019 614.2514.2514.27100.0100.10.15.025 614.2514.2714.25100.1100.05.033 214.2514.2614.24100.199.95.084 919.0019.03100.1/5.076 519.0019.03100.15.069 419.0019.03100.1面包丙酸4.960 2/14.72/4.993 1/14.40/5.032 510.4525.41103.8/5.026 510.4525.38103.55.030 210.4525.48104.55.172 215.2029.5929.5898.998.80.25.150 215.2029.5729.5798.798.75.123 115.2029.5029.6198.399.05.042 920.9035.76101.4/5.036 220.9035.80101.65.029 820.9035.84101.8Analysis and Testing147XIANDAISHIPIN现代食品分析检测逐级稀释标准溶液，采用信噪比法来测定样品中组分的检出限，当信噪比为 31 即为检出限。0.569 9 gmL-1浓度标准溶液连续进样 2 次，计算信噪比。逐级稀释标准溶液，采用信噪比法来测定样品中组分的定量限，当信噪比为 101 即为定量限。1.900 gmL-1浓度标准溶液连续进样 2 次，计算信噪比。2 结果与讨论2.1线性评价根据GB/T 274172017合格评定化学分析方法确认和验证指南的规定，对于准确定量的方法，线性回归方程的相关系数R应大于等于0.99。从实验结果来看，直接浸提法和蒸馏法的相关系数分别为0.999 89和0.999 92，都远远高于 0.99 的要求，说明这两种方法的线性关系非常好。线性关系的好坏可以通过相关系数R来评价，R的取值范围为-11，R越接近1，表示线性关系越好；R越接近-1，表示线性关系越差；R接近 0，表示线性关系非常弱甚至不存在2。本实验中，直接浸提法和蒸馏法的相关系数都非常接近 1，分别为 0.999 89 和 0.999 92，说明它们的线性关系非常好。这意味着在一定浓度范围内，样品的浓度与测定值之间存在着线性关系，可以通过线性回归方程进行准确的定量分析3。因此，根据线性回归方程的相关系数R的高值，可以认为直接浸提法和蒸馏法都符合 GB/T 274172017 的要求，是准确的化学分析方法。2.2精密度评价根据 GB 5009.1202016食品安全国家标准 食品中丙酸钠、丙酸钙的测定第一法的规定，精密度的要求为 10%。在本实验中，测定酱油中丙酸的精密度为 0.1%，测定面包中丙酸的精密度为 0.2%。这两个结果都满足精密度 10%的要求。精密度是评价方法的重复性和稳定性的指标，它反映了同一实验条件下，重复进行多次测定所得结果的离散程度。精密度越低，说明测定结果的离散程度越小，说明方法的重复性和稳定性越好4。在本实验中，酱油和面包中丙酸的精密度分别为 0.1%和 0.2%，远远低于 10%的要求，说明测定结果的离散程度非常小，方法的重复性和稳定性非常好。因此，根据精密度的结果分析可以认为，该方法在测定酱油和面包中丙酸的含量时，具有较好的重复性和稳定性，结果是可靠的。2.3检出限评价在本实验中，测得丙酸的检出限为 0.006 gkg-1，远远低于 0.03 gkg-1的要求，符合标准的要求。检出限是指在分析方法的测定条件下，能够被测定方法可靠地检出的最低浓度5。检出限的低值说明方法的敏感性高，能够准确地检测到低浓度的物质。在本实验中，测得丙酸的检出限为0.006 g kg-1，远远低于0.03 g kg-1的要求，说明该方法对丙酸的检测具有较高的敏感性，能够可靠地检测到低浓度的丙酸。2.4定量限评价在本实验中，测得的定量限为 0.019 gkg-1，远远低于标准规定的限值，说明该方法对丙酸的测定具有较高的准确性和精确性。定量限的低值，说明方法的准确性高，能够精确地测定低浓度的物质。在本实验中，测得的定量限为0.019 gkg-1，远远低于0.10 gkg-1的要求，说明该方法能够准确地测定低浓度的丙酸，结果是可靠的。3结论本研究通过高效液相色谱法成功测定了食品中丙酸钠和丙酸钙的含量。结果显示，该方法操作简便、灵敏度高、准确性和重复性良好，适用于食品中丙酸钠和丙酸钙含量的测定。因此，本研究结果对于保障食品安全、合理使用食品添加剂具有一定的指导意义。参考文献1 赵旭峰.食品中丙酸钠、丙酸钙测定方法的改进 J.现代食品，2016（24）：105-106.2 唐利，廖雪，冉力源，等.食品中丙酸盐测定方法研究进展 J.食品工业，2019，40（7）：230-234.3 张硕，唐丽君，闵思.高效液相色谱法同时测定糕点中双乙酸钠、丙酸钠(钙)含量 J.质量探索，2011，8（Z1）：39.4 郝媛媛.高效液相色谱法同时测定食品中丙酸钙(钠)和双乙酸钠 J.化学分析计量，2016，25（6）：59-61.5 吴佳佳.高效液相色谱法测定糕点中丙酸钠、丙酸钙的不确定度评定 J.食品安全导刊，2016（21）：55-56.