肠道杆菌和厌氧菌实验.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。,一、肠道杆菌形态、培养特性及生化反应,1.形态:,大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌,2.培养（中国兰平板）,大肠杆菌、变形杆菌、,伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌,3.生化反应：（示）,双糖铁基培养基,尿素培养基,双糖铁基培养基,半固体培养基,固体斜面培养基,成分：,硫酸亚铁铵,硫代硫酸钠,乳糖,酚红,H,2,S试验,乳糖发酵试验,成分：,琼脂(0.35%)(动力观察),蛋白胨水,葡萄糖,酚红,葡萄糖发酵试验,A.接种大肠杆菌,B.接种痢疾杆菌,C.未接种的对照管,3.生化反应：（示）,双糖铁基培养基,尿素培养基,尿素培养基,成份：20%尿素水溶液,0.6%酚红溶液,原理：尿素酶分解尿素产氨气,二、肠道杆菌分离鉴定步骤,1.粪便中国兰平板,兰色、较大、不透明菌落-大肠杆菌,无色、较小，半透明菌落-致 病 菌,2.生化试验：双糖铁基、尿素、吲哚,3.血清诊断,操作：生化反应,接 种,：,1,、双糖铁基,葡萄糖发酵管,2,、蛋白胨水培养基,硫酸亚铁半固体培养基,菌 株,：,中国兰平板,(1-8),：单号；双号,致 病 菌,操作：生化反应,接 种,：,双糖铁基,菌 株,：,中国兰平板,(1-8),：单号；双号,致 病 菌,接 种,：,1,、双糖铁基,葡萄糖发酵管,2,蛋白胨水培养基,硫酸亚铁半固体培养基,菌 株,：,中国兰平板,(1-8),：单号；双号,致 病 菌,示教,1.,厌氧培养,2.,双糖铁基,3.,尿素培养基,4.,R质粒接合传递,操作,实验结果观察,药敏试验,上次试验结果观察,双糖铁基培养基结果观察,乳糖 H,2,S 葡萄糖 动力,乙副伤寒杆菌,+,+,痢疾杆菌,+,大肠杆菌,+,+,R质粒接合传递试验,供体菌：福氏痢疾杆菌,耐链霉素、氯霉素、四环素和磺胺药物,受体菌：大肠杆菌,耐利福平,培养基：中国兰平板,100,g/ml,利福平；,20g/ml,氯霉素,厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法,1、形态观察,破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌,破伤风梭菌,鞭毛,芽胞,产气荚膜梭菌,肉毒梭菌,2、厌氧培养法,用于专性厌氧菌的培养,方法：,1)将普通培养基置于无氧环境中培养,如:焦性没食子酸吸氧法,2)厌氧培养基:在培养基中加氧化还原剂,如:疱肉培养基,a.原理：焦性没食子酸在,碱性溶液,中能迅速吸收氧气，生成深棕色,焦性没食子橙,，利用此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。,（1）焦性没食子酸法,焦性没食子酸培养基,焦性没食子酸培养基示意图,血平板,纱布,石蜡,b.培养结果观察,产气荚膜梭菌血平板厌氧培养,（2）疱肉培养基,a.原理,动物组织耗氧法,还原型氨基酸,谷胱甘肽,凡士林,不饱和脂肪酸,破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,正常对照,梅毒螺旋体,（,暗视野映光法）,1、,形态:,单细胞酵母菌,如白假丝酵母菌,新生隐球菌,多细胞丝状菌,真菌的形态与培养,白假丝酵母菌,新生隐球菌,（墨汁染色）,2、培养特性:,沙保弱培养基,成份：,蛋白胨 1g,琼脂 2g,葡萄糖 4g,蒸馏水 100ml,pH 45左右,菌落特征:,酵母型菌落,类酵母型菌落,丝状型菌落,单细胞,多细胞,白假丝酵母菌,新生隐球菌,酵母型菌落,类酵母型菌落,酵母型菌落,类酵母型菌落,狂犬病病毒包涵体,（内基小体）,巨细胞病毒包涵体,药 敏 试 验,（抗生素敏感试验）,目的要求:,1、了解抗生素敏感试验的操作方法,2、初步作为抗生素敏感试验结果的,判断,3、了解常用抗生素的抗菌谱,纸片法,材料：,1、菌种：葡萄球菌、大肠杆菌,2、培养基：普通琼脂平板,3、抗生素滤纸片：每片含药量：青霉,素1单位，其它抗生素为10微克,绿脓杆菌,葡萄球菌,大肠杆菌,抑制菌圈直径（mm）,敏感情况,青霉素,20,抗药,中度敏感,高度敏感,其它抗生素,15,抗药,中度敏感,高度敏感,判断：,分枝杆菌与抗酸染色,1、形态,2、结构特点,3、抗酸染色,结核杆菌,（抗酸染色）,结核杆菌,（抗酸染色）,抗酸染色,（1）,温染,：石炭酸复红溶液 5 min,（2）,脱色,：3%盐酸酒精溶液 0.5-1 min,（3）,复染,：碱性美兰 溶液 0.5 min,